尿路惡性腫瘤尿液中的標記物

1、尿路惡性腫瘤尿液中的標記物第1頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三FDP：膀胱癌細胞產(chǎn)生血管內(nèi)皮生長因子，增加外周血管的通透性，外滲的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，在纖維蛋白酶作用下分解為FDP（纖維蛋白降解產(chǎn)物）。敏感性和特異性分別為68%、78%。端粒酶：在生殖細胞和腫瘤細胞中出現(xiàn)，體細胞中不表達，敏感性和特異性分別為74%、79%。第2頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三透明質(zhì)酸和透明質(zhì)酸酶：二者合用敏感性、特異性達92%、85%。FCM：敏感性、特異性分別為58%、83%（非整倍體細胞）。第3頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三B

2、LCA-4：為核基蛋白的一種，對膀胱癌診斷的敏感性、特異性達96%、100%。其它標記物：細胞角蛋白、Lewis X抗原、微衛(wèi)星及表面分子，如M344抗原、19A211、DD23、CD44等。第4頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三膀胱癌新的腫瘤標記物-NMP22 膀胱鏡檢+組織活檢：膀胱癌診斷的金標準 缺點：侵入性，不適合大量人口普查，主觀影響因素大。尿細胞學(xué)檢查：診斷膀胱癌及術(shù)后監(jiān)測復(fù)發(fā)常用非侵入性檢查。缺點：假陰性高、敏感性差。第5頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三 目前，迫切需要侵入性小，更敏感、更客觀的診斷技術(shù)。 NMPs(nuclear m

3、atrix protein, 核基蛋白）是細胞核的動態(tài)骨架，決定細胞核的形態(tài)，維持DNA的三維結(jié)構(gòu)，是細胞核的結(jié)構(gòu)單位。 NMP22（NMPs的一種）是尿路上皮特異性腫瘤相關(guān)標記物。在BTCC中NMP22因腫瘤細胞凋亡由細胞核釋放進入尿中。第6頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三NMPs的生物學(xué)特性1974年Berezney和Caffy首次提出NMPs的概念。研究證明：NMPs主要由核纖層蛋白、核孔復(fù)合體、核糖蛋白網(wǎng)架結(jié)構(gòu)構(gòu)成，是細胞核內(nèi)部框架結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵部分。決定胞核的形態(tài)，調(diào)控有絲分裂過程。在DNA復(fù)制，RNA合成，激素的連接，基因表達的調(diào)控中起重要作用。第7頁，共27頁

4、，2022年，5月20日，2點56分，星期三NMPs與腫瘤的關(guān)系 NMPs在許多重要的生理活動中起關(guān)鍵作用，許多細胞癌變都伴隨著NMP的改變。 許多腫瘤特異性NMPs被發(fā)現(xiàn)：Robert(1996)對癌變和正常膀胱組織進行比較后發(fā)現(xiàn)了6種存在于癌變組織中的蛋白，而正常組織中無表達，它們是NMPs, BLCA-1 BLCA6。第8頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三Mark(1996）對膀胱癌病人的尿液進行檢測后發(fā)現(xiàn)一種核基質(zhì)蛋白NMP22的含量特別高，用NMP22值預(yù)測膀胱癌病人術(shù)后復(fù)發(fā)的危險性，有較高的敏感性和特異性。第9頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，

5、星期三NMP22的檢測 單抗的制備：膀胱癌細胞核-提純NMP22-免疫小鼠-獲取單抗（mAB302-22, Mab302-18)-制備酶聯(lián)免疫反應(yīng)試劑盒（ELLIS）。第10頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三檢測：試劑盒（標準品、參照品、檢驗樣品）-與NMP22結(jié)合-洗滌后與標有地高辛的單抗反應(yīng)-與抗地高辛酶聯(lián)抗體反應(yīng)-鄰苯二胺顯色-與標準品吸收光度曲線比較。（抗原在尿液中的濃度直接反映于呈色強度）第11頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三臨界值的確定 David等用尿NMP22值診斷膀胱癌的研究中用6.4u/ml和10.0u/ml作臨界值，結(jié)果與膀胱

6、鏡檢和活檢對比： 敏感性 特異性6.4u/ml 68.2% 79.8%10.0u/ml 48.5% 91.8%第12頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三Sinan等報道： 敏感性 特異性6.4u/ml 88% 69%10.0u/ml 73% 81% 美國FDA進行大量數(shù)據(jù)統(tǒng)計后，在兼顧敏感性和特異性的基礎(chǔ)上確定臨界值為10.0u/ml。第13頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三NMP22與其它方法的比較Craig 對330名可疑病人進行尿NMP22測定、尿脫落細胞檢查與組織活檢對比： 敏感性 特異性 P值NMP22 100% 85%（臨界值10u/ml)

7、 0.001 尿脫落細胞 33% 100%第14頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三Albert 按分期分級進行了比較： 敏感性（%) NMP22測定 尿脫落細胞檢查Ta 83.3 20.0T1 97.7 64.4G1 86.2 37.9G2 97.2 44.4G3 90.0 80.0 第15頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三Landman 等對47例證實為膀胱癌的病人，分別用NMP22、端粒酶、BTA、尿細胞學(xué)檢查進行比較（敏感性%）。NMP22和端粒酶比BTA、尿細胞學(xué)檢查具有更高的靈敏度。第16頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星

8、期三 分期 分級 Ta T1或更高 Cis G1 G2 G3NMP22 81 82 67 69 86 93端粒酶 80 91 100 65 72 93BTA 40 64 33 13 36 79尿細胞學(xué) 40 26 67 6 63 79 第17頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三NMP22與膀胱癌分期分級的關(guān)系David 等對臨床分期不同病人的尿NMP22值比較： 例數(shù) 平均值u/ml 中位數(shù)u/ml P值Ta 44 31.1 8.42T1 61 69.3 59.3 0.02第18頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三Miyanga 等將病人分為表淺組（Ti

9、s,Ta,T1),浸潤組（T2、T3、T4）進行比較，陽性率前者為70%，后者為100%，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)。第19頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三NMP22與膀胱癌分級的關(guān)系David 等對分級不同病人的尿NMP22進行比較: 例數(shù) 平均值u/ml 中位數(shù)u/ml P值G1 13 12.4 3.02 0.001 (G1 vs G2)G2 27 24.2 9.14 無顯著差異G3 26 34.5 39.5 0.001 (G1 vs G3)第20頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三影響NMP22的因素年齡、性別、種族、吸煙等 Genna

10、ro 等報道：健康組樣本中50歲比50歲值要低，女性高于男性。與種族、吸煙無明顯相關(guān)性。不受非泌尿系良性疾病的影響：如糖尿病、心臟病、自身免疫病等。第21頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三泌尿系疾病對NMP22的影響： Miyanaga 等對面280位住院和門診病人、20位健康者進行比較：第22頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三 NMP22 u/ml 陽性比 陽性率 中位數(shù) 范圍有TCC史 其它尿路癌 尿結(jié)石 尿路感染 其它疾病 腎臟疾病 健康者 第23頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三不同時段的尿液影響: Miyanaga 等

11、分別取6,12,18時,三個不同時段的尿液標本檢測, 結(jié)果顯示不同時段的尿液標本值,無統(tǒng)計學(xué)差異.血尿的影響: Schacfer研究報道,尿標本中含有3.0X106 /ml 紅細胞時,相當于10個/HP, NMP22值很少超過10u/ml.第24頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三血清NMP22與尿NMP22的關(guān)系: Miyanaga, Akaza等對血清,尿NMP22分別測定,結(jié)果兩者之間無顯著差異.第25頁，共27頁，2022年，5月20日，2點56分，星期三尿NMP22檢測的優(yōu)點敏感性強:比脫細胞檢查更敏感,尤其在 Ta期和高分化腫瘤時,準確性強.不受血尿影響:BTA等方法因含有