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1、1.2.1 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù) 考點1:培養(yǎng)基的配制精講1.微生物。微生物是難以用肉眼觀察的微小生物的統(tǒng)稱,包括細(xì)菌、真菌、病毒及一些原生生物等。本章中提及的微生物主要指用于發(fā)酵的細(xì)菌和真菌。2.培養(yǎng)基。人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。3.培養(yǎng)基的種類微生物在瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長,可以形成肉眼可見的菌落。4.培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成。雖然各種培養(yǎng)基的配方不同,但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物質(zhì))、氮源(提供氮元素的物質(zhì))和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如,在培養(yǎng)乳酸桿
2、菌時,需要在培養(yǎng)基中添加維生素;在培養(yǎng)霉菌時,一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性;在培養(yǎng)細(xì)菌時,一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性;在培養(yǎng)厭氧微生物時,需要提供無氧的條件。精練【例1】下列有關(guān)微生物培養(yǎng)基種類及配制原則的表述,正確的是( )A培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的 pH 調(diào)節(jié)到中性或微堿性B液體培養(yǎng)基可用于觀察菌落,固體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)C任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、水、無機鹽及生長因子D微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外,還受到 pH、O2、滲透壓等的影響【答案】D【詳解】A、培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)到中性或微酸性,A錯誤;B、固定培養(yǎng)基可用于觀察菌落,液體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn),B錯誤;C、培養(yǎng)
3、基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽,有些微生物的培養(yǎng)除了上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)外,還需要添加生長因子,有的微生物培養(yǎng)基中可以不加碳源,如自養(yǎng)型的;C錯誤;D、培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。微生物的生長除了受到以上營養(yǎng)因素的影響外,還受到pH、O2、滲透壓等的影響,D正確。故選D。考點2:無菌技術(shù)精講1.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵:防止雜菌污染。2.消毒和滅菌的比較條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手,用氯氣消毒水源紫外線消毒接種室、接種箱、超凈工作臺等滅菌強烈
4、的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具等干熱滅菌法玻璃器皿、金屬工具等高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基、容器等3.消毒和滅菌工作主要包括兩個方面:對操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒;將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種工具和培養(yǎng)基等進行滅菌。精練【例2】下列對滅菌和消毒的理解不正確的是( )A滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物C消毒和滅菌都是采用物理方法殺滅微生物D常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等【答案】C【詳解】A、滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程,A正確;B、消毒
5、是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包芽孢和孢子),B正確;C、消毒和滅菌都是采用物理或化學(xué)的方法殺滅微生物,不僅有物理方法,C錯誤;D、滅菌的方法比較強烈,一般是高溫或高壓,常用滅菌方法有灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法,D正確。故選C?!纠?】培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次是( )化學(xué)消毒 灼燒滅菌 干熱滅菌 紫外線滅菌 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法ABCD【答案】A【詳解】培養(yǎng)基需用濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌);培養(yǎng)皿能耐高溫,需用干熱滅菌;接種環(huán)可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果;實驗操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進
6、行消毒,如用酒精擦拭雙手;空氣可用紫外線消毒;為不破壞其營養(yǎng)成分,對牛奶可采用巴氏消毒法。A符合題意。故選A。考點3:微生物的純培養(yǎng)精講1培養(yǎng)物。在微生物學(xué)中,將接種于培養(yǎng)基內(nèi),在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。2.純培養(yǎng)。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物,獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。3.微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。4.菌落。分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。5.采用平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上,之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成
7、的純培養(yǎng)物。6.在馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基上進行酵母菌的純培養(yǎng)。精練【例4】下列關(guān)于微生物純培養(yǎng)的敘述,正確的是( )A消毒和滅菌的殺菌程度存在差異,消毒可以殺死物體內(nèi)外所有的微生物B培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高,對微生物的生長越有利C固體培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的D在實驗室中,可以在非實驗區(qū)域進食和喝水【答案】C【詳解】A、消毒只能殺滅物體體表或內(nèi)部的一部分微生物,不能殺死孢子和芽孢,而滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子,A錯誤;B、培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)要協(xié)調(diào),注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例,若濃度過高,微生物會通過滲透作用失水,對微生物的增殖不利,B
8、錯誤;C、菌落是指細(xì)菌或真菌在固體培養(yǎng)基上由一個細(xì)胞生長繁殖而形成的能被肉眼識別的子細(xì)胞群體,固體培養(yǎng)基表面生長的一個菌落一般是由單個微生物繁殖形成的,C正確;D、為保證實驗者的安全并避免雜菌污染,不能在實驗室中進食和喝水,D錯誤。故選C。【例5】下列有關(guān)酵母菌純培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A操作者要對操做的空間、自己的衣服和手進行清潔和消毒B培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高,對酵母菌的生長越有利C培養(yǎng)基上的單個菌落一般是由單個酵母菌繁殖形成的D每次劃線后接種環(huán)要在酒精燈火焰上灼燒滅菌【答案】B【詳解】A、對實驗操作的空間、操作者的手進行清潔和消毒,包括操作者的衣服,A正確;B、培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高,影響細(xì)胞滲透壓,使微生物會通過滲透作用失水,對微生物的生長不
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