2021-農(nóng)科院作科所-96個玉米iselect定制芯片數(shù)據(jù)分析報告kps infinium hd assay super manual

1、)試劑：NaOH,MA1MA2MSM, 樣品配置1MNaOH-20凍存待用。每次使用前解凍，10倍稀釋為0.1MNaOH取出MA1)試劑：NaOH,MA1MA2MSM, 樣品配置1MNaOH-20凍存待用。每次使用前解凍，10倍稀釋為0.1MNaOH取出MA1MA2,MSM解凍，融為液體后280 xg DNA(50ng/l，4l200 將新MIDIplate粘貼MSA120lMA1 加入MSA1plate4 l DNA sle加入MSA1platewellslabtrackingform上4l0.1MNaOH加入MSA1platewells，蓋上96孔板cap振蕩器上1600 rpm，混勻1m

2、in；離心機(jī)中280 xg 離心1min室溫孵育，靜置10 min68 l MA2 加入MSA1 plate MSA1platewellsM 加入MSA1plate 75 重新蓋上cap振蕩器上1600rpm，混勻1min；離心機(jī)中280 xg 離心1雜交爐中孵育，3722(20-24t)試劑：FMS,PM1100% 異丙醇RA1PB2100% 乙醇，HybChambers雜交盒，HybChambergaskets雜交盒襯墊，HybChamber 取出MSA1，50 xg離心150lFMS取出MSA1，50 xg離心150lFMS 加入MSA1platewells，重新蓋上cap振蕩器上160

3、0rpm，混勻1min；離心機(jī)中50 xg 離心137heatblock1(1) (2) MSA1凍存待用，-15 取出PM1置于室溫-280 xg 100% 異丙醇若是凍存的MSA1，則取出解凍，50 xg 離心掀開MSA1的capmat，100lPM1 加入MSA1platewells，重新蓋上振蕩器上1600 rpm，混勻1 min37heatblock中孵育，5離心機(jī)中50 xg 離心1300l100%異丙醇加入MSA1platewells，重新蓋上新的干燥cap將蓋好的MSA1 上下顛倒翻轉(zhuǎn)至少10 4離心機(jī)中3,000 xg 離心20 min；然后立即將MSA1取出離心機(jī)，棄除ca

4、p mat，立即翻 需要重新離心20 min)(1) (2) MSA1凍存待用，-15 46lRA1 加入MSA1platewells，RA1 用5 秒，然后將MSA1上下順序改變后再作用5振蕩器上1800rpm，混勻1min；離心機(jī)中280 xg 離心30封閉的 46lRA1 加入MSA1platewells，RA1 用5 秒，然后將MSA1上下順序改變后再作用5振蕩器上1800rpm，混勻1min；離心機(jī)中280 xg 離心30封閉的 - 的MSA1，放入95heat block中變性20 min 變性后的MSA1室溫冷卻30min，然后離心機(jī)中280 xg 離心30將放于HybChamb

5、erinserts：43lDNA (1)4x3 4x18x1雜交爐中孵育，4818(16-24330ml100% 乙醇加入XC4中，劇烈混勻15t)PB1,RA1XC1XC2TEM,XC3,STM,ATM,XC495%甲酰胺/1mMderDetergent, 乙醇eadChipAlignmentFixture，Te-Flow，F(xiàn)low-ThroughChambers(withframes,spacers,glassbackplates,ands)，WashDish，Wash 200mlPB1 加入1個WashDish共2個150mlPB1 充滿BeadChipAlignment準(zhǔn)備clearp

6、lasticspacers和glassbackplates，安裝好Wash 200mlPB1 加入1個WashDish共2個150mlPB1 充滿BeadChipAlignment準(zhǔn)備clearplasticspacers和glassbackplates，安裝好Wash取出RA1XC1XC2TEM,STM,ATM解凍，3000 xg 離心1min待用配置 95%甲酰胺/1 mM EDTA：1 ml/1張 放置于WashRack的Wash Rack放置于第二個Wash Dish中，同上步上下提拉1 min裝配Flow-ThroughChamber：將blackframe放置于BeadChipAl

7、ignmentFixture放置于blackframe中(完全被PB1浸沒)，然后正確放置clearplasticspacer s正確放置于兩端，和上下邊緣相差5 (1150lRA1, 孵育30 秒，重復(fù)5(2450lXC1, 孵育10(3450lXC2, 孵育10(4200lTEM, 孵育15(5450l95%甲酰胺/1mMEDTA, 孵育1min,重復(fù)1(6) 再孵育5 ) (8450lXC3, 孵育1min,重復(fù)1(9) 等待Te-Flow溫度穩(wěn)定在 (1250lSEM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重復(fù)1次，再孵育5(1250lATM, 孵育10(2450lXC3, 孵

8、育1min,重復(fù)1次，再孵育5(1250lSEM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重復(fù)1次，再孵育5(1250(2450lXC3, 孵育1min,重復(fù)1次，再孵育5(1250lSEM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重復(fù)1次，再孵育5(1250lATM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重復(fù)1次，再孵育5(1250lSEM, 孵育10(2450lXC3, 孵育1min,重復(fù)1次，再孵育5 310mlPB1 加入第1個washdish，將stainingrack 驗(yàn)員，stainingrack的lockingarm面向?qū)嶒?yàn)員泡5的stainingrack上下提拉10 劇烈振搖XC4后，310mlXC4 加入第2個washdish，將stainingrack在第1個washdish中取出再置于第2個wash dish的stainingrack上下提拉10 后浸泡5 將在stainingrackbarcode正面