發(fā)光說明書肝炎hbsag elecsys

1、Hepatitis B surface antigen Elecsys Systems 1010/2010/E170| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l0123HBsAg用途：用免疫學(xué)方法定性測定人血清或血漿中的乙肝表面抗原(HBsAg)。電化學(xué)發(fā)光免疫測定試劑，適用于羅氏Elecsys1010、2010免疫測定分析儀。概述:HBsAg是乙肝病毒顆粒（HBV）的外殼成份，為一條大小不一的多肽。HBV感染者的血液中除存在完整的HBV病毒顆粒外，還含有較小的非傳染性空殼顆粒，其數(shù)量極多并含有乙肝表面抗原。HBsAg決定簇a是引起免疫反應(yīng)的主要成份

2、，普遍存在于HBsAg顆粒上。另外，還有d、y、w、r等主要決定簇。檢測人血清或血漿中的HBsAg可以查明HBV感染。HBsAg是首選的免疫學(xué)標(biāo)志物。在臨床癥狀出現(xiàn)前的數(shù)天或數(shù)周，HBsAg就已存在。急、慢性乙肝患者體內(nèi)均含有HBsAg，但也有極少數(shù)HBV感染者體內(nèi)測不到HBsAg。HBsAg檢測用于診斷HBV感染和預(yù)防HBV通過血制品傳播。也可用于急、慢性乙肝患者的病程監(jiān)測，有時(shí)也可用于抗病毒療效觀察。此外，也可用作產(chǎn)前檢查的實(shí)驗(yàn)室檢測項(xiàng)目之一，以盡早預(yù)防HBV的母嬰傳播。Elecsys HBsAg試驗(yàn)采用單克隆抗HBsAg抗體。原理：采用雙抗體夾心法原理，整個(gè)過程18分鐘完成。 第1步：5

3、0l標(biāo)本、生物素化的抗HBsAg單克隆抗體和釕（Ru）標(biāo)記的抗HBsAg單克隆抗體混勻，形成夾心復(fù)合物。 第2步：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復(fù)合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。 第3步：反應(yīng)混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管進(jìn)行測定。Elecsys自動(dòng)將標(biāo)本產(chǎn)生的光電信號與從HBsAg定標(biāo)液得出的Cutoff值相比較。試劑：M： 鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml。粒子濃度0.72mg/ml，生物素結(jié)合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐劑。R1：生物素化的抗HBsAg

4、單克隆抗體（灰蓋），1瓶，10ml，濃度高于0.5mg/l，磷酸緩沖液0.1mol/l，pH7.4含防腐劑。R2：Ru(bpy)32+標(biāo)記的抗HBsAg單克隆抗體（黑蓋），1瓶，10ml。濃度高于0.8mg/l，磷酸緩沖液0.1mol/l，pH 8.0含防腐劑。Cal 1 陰性定標(biāo)液（白蓋），2瓶，1.3ml/瓶人血清, 含防腐劑Cal 2 陽性定標(biāo)液（黑蓋），2瓶，1.3ml/瓶，HBsAg濃度約為0.5IU/ml,人血清，含防腐劑儲存和穩(wěn)定性：存放在28 度，切莫倒置。未開封，可穩(wěn)定至標(biāo)明的保質(zhì)期。M，R1 ，R2試劑開封后，28 度12周；在儀器2010上，4周。在儀器1010上，3周（

5、使用后放回28 度；開瓶使用時(shí)間累計(jì)約20小時(shí)）。Cal 1，Cal 2開封后， 28 度12周；在儀器上， 5小時(shí)。注意：保證定標(biāo)液不污染瓶蓋。標(biāo)本采集和準(zhǔn)備：血清：按標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)方法采集。血漿：肝素鈉、EDTA-K3或枸櫞酸鈉抗凝。不要使用肝素鋰抗凝血漿。標(biāo)本在28度可穩(wěn)定5 Hepatitis B surface antigen Elecsys Systems 1010/2010/E170| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l0123HBsAg天，-20oC可穩(wěn)定3個(gè)月。標(biāo)本可凍融6次。有沉淀的標(biāo)本使用前需離心。加熱滅活的標(biāo)本可使用。標(biāo)本和質(zhì)

6、控品禁用疊氮鈉防腐。標(biāo)本、定標(biāo)液和質(zhì)控品在測定前應(yīng)預(yù)溫到室溫。檢測步驟方法：按儀器操作說明進(jìn)行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前需混勻微粒。儀器通過掃描試劑盒條形碼自動(dòng)輸入測試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無法閱讀條形碼，可以手工輸入15位數(shù)字。Elecsys2010：將冷藏試劑預(yù)溫到20度后放置于儀器的試劑盤上，避免產(chǎn)生泡沫。系統(tǒng)自動(dòng)控制試劑溫度和開/關(guān)試劑瓶蓋。將HBsAg Cal 1和Cal 2放在分析儀的標(biāo)本測試區(qū)。只在標(biāo)定時(shí)打開瓶蓋。條形碼自動(dòng)提供定標(biāo)所需的數(shù)據(jù)資料。定標(biāo)完成后，將Cal 1和Cal 2放回28度保存。定標(biāo)：每批HBsAg試劑盒必須用新鮮試劑和

7、HBsAg Cal 1,Cal 2定標(biāo)一次。另外，以下情況需要再次定標(biāo)：Elecsys2010： 一個(gè)月（同一批號試劑） 7天（放置儀器上的同一試劑盒）Elecsys1010： 每一試劑盒做一次 7天（室溫2025 度） 3天（室溫2532 度）各種分析儀均適用的情況：根據(jù)要求進(jìn)行標(biāo)定：如質(zhì)控結(jié)果超出范圍時(shí)；根據(jù)規(guī)定進(jìn)行多次標(biāo)定。定標(biāo)液范圍：(電化學(xué)發(fā)光信號計(jì)數(shù)) 陰性（Cal 1） 600-1200 陽性（Cal 2） 3000-8000質(zhì)控：用Elecsys HBsAg質(zhì)控品1和2 （PreciControl）。質(zhì)控品1和質(zhì)控品2至少每24小時(shí)或每一次定標(biāo)后測定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適用于各實(shí)

8、驗(yàn)室的具體要求。檢測值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應(yīng)采取校正措施。計(jì)算：儀器會自動(dòng)根據(jù)Cal 1和Cal 2的測定值計(jì)算Cut-off值。每一個(gè)標(biāo)本的結(jié)果以有反應(yīng)性或無反應(yīng)性以及Cutoff指數(shù)形式（標(biāo)本信號/ Cutoff）報(bào)告。結(jié)果解釋：標(biāo)本的Cutoff指數(shù)1.0判斷為HBsAg無反應(yīng)性，可判定該標(biāo)本HBsAg陰性，不需進(jìn)一步的試驗(yàn)。標(biāo)本的Cutoff指數(shù)1.0判斷為HBsAg有反應(yīng)性。所有呈現(xiàn)有反應(yīng)性的標(biāo)本必須重新測定一次，并且每份標(biāo)本做二次測定。如果二次均為無反應(yīng)性，標(biāo)本可確認(rèn)為HBsAg陰性。如果二次重復(fù)測定中有一次為有反應(yīng)性，則該標(biāo)本確認(rèn)為重復(fù)有反應(yīng)性。重復(fù)有反

9、應(yīng)性的標(biāo)本必須用中和試驗(yàn)(ElecsysHBsAg證實(shí)試驗(yàn))進(jìn)行測定。如中和試驗(yàn)陽性,標(biāo)本判定為HBsAg陽性。干擾因素：該方法不受黃疸（膽紅素30mg/dl）、溶血（血紅蛋白1.4g/dl）、脂血（脂質(zhì)2800mg/dl）和生物素5mg/天）治療的病人，至少要等最后一次攝入生物素8小時(shí)后才能采血。不受類風(fēng)濕因子干擾（2000U/ml）。HBsAg濃度高達(dá)1.5百萬Hepatitis B surface antigen Elecsys Systems 1010/2010/E170| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l0123HBsAgIU/ml也不出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。21種常用藥物經(jīng)試驗(yàn)對本測定無干擾。根據(jù)目前所知，所有HBsAg測定方法均不能夠檢測出全部被感染的標(biāo)本和病人。因此，陰性結(jié)果不能絕對排除HBV接觸或感染的可能性。有HBV接觸史的人，HBsAg陰性可能是因其體內(nèi)HBsAg含量低于檢測下限或抗原對所用抗體無反應(yīng)性的緣故。接受過小鼠單抗治療或診斷的病人可能會出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。偶爾會遇到抗鏈酶親和素抗體和抗釕抗體的干擾。Elecsys HBsAg測定結(jié)果應(yīng)結(jié)合病人病史、臨床其他檢查結(jié)果綜合