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1、培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期 lag phase (12-24H) exponential phase (3-5D) plateau phase細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中的重要現(xiàn)象接觸抑制:由于細(xì)胞的相互接觸而抑制細(xì)胞運(yùn)動(dòng)密度抑制:細(xì)胞因營(yíng)養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響而停止生長(zhǎng) 實(shí)驗(yàn)室保存的部分細(xì)胞系HeLa (cervical cancer) HEK 293 (human embryonic kidney) CHO (Chinese hamster ovary)NIH 3T3 (mouse embryonic fibroblast) COS-7 (African Green Monkey Kidney
2、 Cells)DC 2.4 (mouse dendritic cells)Tca8113 (human tongue squamous carcinoma cells )Cal-27 (human tongue squamous carcinoma cells )CCTCC培養(yǎng)細(xì)胞的體外生長(zhǎng)環(huán)境無(wú)污染環(huán)境基質(zhì)氣體環(huán)境和氫離子濃度液相環(huán)境溫度滲透壓 無(wú)污染環(huán)境:高壓蒸汽消毒器電熱干燥箱濾器超凈工作臺(tái)紫外燈 基質(zhì):玻璃基質(zhì)塑料飼養(yǎng)細(xì)胞,又稱滋養(yǎng)細(xì)胞生物性基質(zhì)處理培養(yǎng)表面金屬 氣體環(huán)境和氫離子濃度 :5%二氧化碳 95%空氣 pH為7.27.4 溫度維持(36.50.5) 液相環(huán)境:水:新鮮配置的三蒸水或去離子水平衡鹽液 :Hanks液、PBS、Earle液等天然培養(yǎng)基 合成培養(yǎng)基 無(wú)血清培養(yǎng)基 DMEMFBSPBS二、細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法Fundamental methods of cell culture注意無(wú)菌操作 (Sterile)對(duì)實(shí)驗(yàn)中可能用到的器具及培養(yǎng)用液進(jìn)行嚴(yán)格消毒滅菌 培養(yǎng)室的消毒 :培養(yǎng)室和超凈臺(tái)要用紫外燈和酒精嚴(yán)格消毒培養(yǎng)過(guò)程中要注意無(wú)菌操作ABA 超凈工作臺(tái)中的實(shí)驗(yàn)用品要擺放整齊B 實(shí)驗(yàn)前75%酒精噴洗雙手無(wú)菌操作
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