實驗室常用洗液配制方法實驗室洗液的配制方法

1、實驗室常用洗液配制方法實驗室洗液的配制方法一：鉻酸洗液:配制濃度各有不同，從 512%的各種濃度都有。配制方法大致相 同：取一定量的K2Cr207 （工業(yè)品即可），先用約12倍的水加熱 溶解，稍冷后，將工業(yè)品濃 H2SO4 所需體積數(shù)徐徐加入 K2Cr2O7 不溶液中（千萬不能將水或溶液加入 H2SO4 中），邊倒邊用玻璃棒攪拌，并注意不要濺出，混合均勻，俟冷卻 后，裝入洗液瓶備用。新配制的洗液為紅褐色，氧化能力很強。當 洗液用久后變?yōu)楹诰G色，即說明洗液無氧化洗滌力。例如，配制12%的洗液500mL。取60克工業(yè)品K2Cr2O7置于 100mL 水中（加水量不是固定不變的，以能溶解為度），加熱

2、溶解， 冷卻，徐徐加入濃硫酸：340mL，邊加邊攪拌，冷后裝瓶備用。二：堿性高錳酸鉀洗液用堿性高錳酸鉀作洗液，作用緩慢，適合用于洗滌有油污的器皿。配法：取高錳酸鉀（KMnO4）4克加少量水 溶解后，再加入10%氫氧化鈉（NaOH）100mL。三：純酸純堿洗液根據(jù)器皿污垢的性質(zhì)，直接用濃硫酸（HCL） 或濃硫酸（H2S04）、濃硝酸（HNO3）浸泡或浸煮器皿（溫度不宜太高，否者濃酸揮發(fā)刺激人）。純堿洗液 多采用10%以上的濃燒堿（NaOH）、氫氧化鉀（KOH）或碳酸鈉 （Na2CO3）液浸泡或浸煮器皿（可以煮沸）。四：堿性乙醇洗液溶解 120 克氫氧化鈉固體于 120ml 水中，用 95%乙醇稀

3、釋至1L。在鉻酸洗液洗滌無效時，用于清洗各種油污；由于堿對玻璃的腐 蝕，玻璃磨口不能長期在該洗液中浸泡；須存放于膠塞瓶中，防止 揮發(fā)、防火，久注易失效五：堿性高錳酸鉀洗液4 克高錳酸鉀固體溶于少量水中，再加入100mll0%氫氧化鈉溶液清洗玻璃器皿內(nèi)的有無或其他有機物質(zhì)；浸泡后器壁上會析出一層二氧化錳，需用鹽酸或鹽酸加過氧化氫除去六：磷酸鈉洗液57克磷酸鈉、28克油酸鈉溶于470ml水中清洗玻璃器皿上的殘留物；浸泡數(shù)分鐘后用刷子刷洗七：酸性硫酸亞鐵洗液含有少量硫酸亞鐵溶液清洗由于貯存高錳酸及洗液而殘留在玻璃器皿上的棕色污斑；浸泡后洗刷八：硝酸過氧化氫洗液 15%20的硝酸加等體積的 5%過氧化

4、氫清除特殊難洗的化學污物久存易分解，應存放于棕色瓶九：有機溶劑如三氯乙烯、二氯乙烯、苯、二甲苯、丙酮、乙醇乙醚、三氯甲烷、四氯化碳、汽油等清除玻璃器皿上的油脂類、單體原液、聚合體等有機污物，應根據(jù)污物性質(zhì)選者使用注意毒性、可燃性，用過的廢液溶劑應回收十：硫代硫酸鈉洗液 10%的硫代硫酸鈉溶液?？汕逑匆挛锷系牡獍?，浸泡后洗刷。玻璃砂芯器皿清洗劑過濾沉淀物有效清洗劑脂肪、脂膏四氯化碳有機物質(zhì)混有中鉻酸鉀的溫熱濃硫酸浸泡一晝夜 氯化亞銅、鐵斑混有氯酸鉀的熱濃鹽酸 硫酸鋇熱濃鹽酸汞渣熱濃硝酸硫化汞熱王水氯化銀氨水或硫代硫酸鈉鋁質(zhì)和硅質(zhì)殘渣用 2%氫氟酸、濃硫酸、蒸餾水、丙酮依次漂洗重復至無酸痕為止細菌

5、5.72ml濃硫酸、2克硝酸鈉、94ml、蒸餾水混合液水垢鹽酸一、玻璃儀器的洗滌方法潔凈劑及其使用范圍最常用的潔凈劑有肥皂、合成洗滌劑（如洗衣粉）、洗液（清潔 液）、有機溶劑等。肥皂、合成洗滌劑等一般用于可以用毛刷直接刷洗的儀器，如燒 瓶、燒杯、試劑瓶等非計量及非光學要求的玻璃儀器。肥皂、合成洗滌劑也可用于滴定管、移液管、量瓶等計量玻璃儀 器的洗滌，但不能用毛刷刷洗。洗液多用于不能用毛刷刷洗的玻璃儀器，如滴定管、移液管、量 瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗、凱氏燒瓶等特殊要求與形狀的玻璃儀 器；也用于洗滌長久不用的玻璃儀器和毛刷刷不下的污垢。洗液的配制及說明鉻酸清潔液的配制：處方 1 處方 2重鉻酸鉀

6、（鈉）10g200g純化水10mll00ml （或適量）濃硫酸 100ml1500ml制法：稱取處方量之重鉻酸鉀，于干燥研缽中研細，將此細粉加 入盛有適量水的玻璃容器內(nèi)，加熱，攪拌使溶解，待冷后，將此玻 璃容器放在冷水浴中，緩慢將濃硫酸斷續(xù)加入，不斷攪拌，勿使溫 度過高，容器內(nèi)容物顏色漸變深，并注意冷卻，直至加完混勻，即 得。說明：(1)硫酸遇水能產(chǎn)生強烈放熱反應，故須等重鉻酸鉀溶 液冷卻后，再將硫酸緩緩加入，邊加邊攪拌，不能相反操作，以防 發(fā)生爆炸。清潔液專供清潔玻璃器皿之用，它能去污去熱原的作用的 原因為本品具有強烈的氧化作用。重鉻酸鉀與濃硫酸相遇時產(chǎn)生具 有強氧化作用的鉻酐：K2CrO7

7、+H2SO4H2CrO7+K2SO4I2CrO3+H2O-Cr2O3 + 30濃硫酸是一個含氧酸，在高濃度時具有氧化作用，加熱時作用更 為顯著：H2S04-H20+S02+0AK2CrO7 + 3SO2+H2SO4-Cr2(SO4) 3+K2SO4+H2O鉻酸的清潔效力之大小，決定于反應中產(chǎn)生鉻酐(CrO3) 的多少及硫酸濃度之大小。鉻酐越多，酸越濃，清潔效力越好。用清潔液清潔玻璃儀器之前，最好先用水沖洗儀器，洗取 大部分有機物，盡可能儀器空干，這樣可減少清潔液消耗和避免稀 釋而降效。本品可重復使用，但溶液呈綠色時已失去氧化效力，不可 再用，但能更新再用。更新方法：取廢液濾出雜質(zhì)，不斷攪拌緩慢

8、加入高錳酸鉀粉末， 每升約68g，至反應完畢，溶液呈棕色為止。靜置使沉淀，傾取 上清液，在160C以下加熱，使水分蒸發(fā)，得濃稠狀棕黑色液，放 冷，再加入適量濃硫酸，混勻，使析出的重鉻酸鉀溶解，備用。（6）硫酸具有腐蝕性，配制時宜小心。（7）用鉻酸清潔液洗滌儀器，是利用其與污物起化學反應的作 用，將污物洗去，故要浸泡一定時間，一般放置過夜（根據(jù)情況）； 有時可加熱一下，使有充分作用的機會。洗滌玻璃儀器的方法與要求（1）一般的玻璃儀器（如燒瓶、燒杯等）：先用自來水沖洗一 下，然后用肥皂、洗衣粉用毛刷刷洗，再用自來水清洗，最后用純 化水沖洗3 次（應順壁沖洗并充分震蕩，以提高沖洗效果）。計量玻璃儀器

9、（如滴定管、移液管、量瓶等）：也可用肥皂、洗 衣粉的洗滌，但不能用毛刷刷洗。（2）精密或難洗的玻璃儀器（滴定管、移液管、量瓶、比色管 玻璃垂熔漏斗等）：先用自來水沖洗后，瀝干，再用鉻酸清潔液處 理一段時間（一般放置過夜），然后用自來水清洗，最后用純化水 沖洗 3 次。（3）洗刷儀器時，應首先將手用肥皂洗凈，免得手上的油污物 沾附在儀器壁上，增加洗刷的困難。（4）一個洗凈的玻璃儀器應該不掛水珠（洗凈的儀器倒置時， 水流出后器壁不掛水珠）。實驗室各種洗液鉻酸洗滌液鉻有致癌作用，因此配制和使用洗液時要極為小心，常用兩種配 制方法如下：取 100mL 工業(yè)濃硫酸置于燒杯內(nèi)，小心加熱，然后慢慢加入 5g

10、 重鉻酸鉀粉末，邊加邊攪拌，待全部溶解并緩慢冷卻后，貯存在 磨口玻璃塞的細口瓶內(nèi)。(2)稱取5g重鉻酸鉀粉末，置于250mL燒杯中，力口 5mL水使其溶 解，然后慢慢加入100mL濃硫酸，溶液溫度將達80C，待其冷卻后 貯存于磨口玻璃瓶內(nèi)。其他洗滌液工業(yè)濃鹽酸：可洗去水垢或某些無機鹽沉淀。25草酸溶液：用數(shù)滴硫酸酸化，可洗去高錳酸鉀的痕跡。5%10%磷酸三鈉(Na3P0412H20)溶液：可洗滌油污物。30%硝酸溶液：洗滌二氧化碳測定儀及微量滴管。5%10%乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)溶液：加熱煮沸可 洗脫玻璃儀器內(nèi)壁的白色沉淀物。尿素洗滌液：為蛋白質(zhì)的良好溶劑，適用于洗滌盛過蛋白質(zhì)制

11、 劑及血樣的容器。有機溶劑：如丙酮、乙醚、乙醇等可用于洗脫油脂、脂溶性染 料污痕等，二甲苯可洗脫油漆的污垢。氫氧化鉀的乙醇溶液和含有高錳酸鉀的氫氧化鈉溶液：這是兩 種強堿性的洗滌液，對玻璃儀器的侵蝕性很強，可清除容器內(nèi)壁污 垢，洗滌時間不宜過長，使用時應小心慎重。實驗室常用溶液配制一.常用貯液與溶液1mol/L亞精胺(Spermidine):溶解2.55g亞精胺于足量的水中, 使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20C。10mol/L乙酸胺(ammoniumacetate):將77.1g乙酸胺溶解于 水中，加水定容至1L后，用0.22um孔徑的濾膜過濾除菌。10mg/ml牛血清蛋白（BSA）

12、:加100mg的牛血清蛋白（組分V或 分子生物學試劑級，無DNA酶）于9.5ml水中（為減少變性，須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖 動，直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到 10ml，然后分裝成小份貯存于-20C。lmol/L二硫蘇糖醇（DTT）:在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加 32.4ml水，分成小份貯存于-20C?；蜣D(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇至微量離心管，加0.65ml的水配制成lmol/L二硫蘇糖醇溶液。8mol/L乙酸鉀（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸鉀于足 量的水中，加水定容到100ml。lmol/L氯化鉀（KCl）:溶解

13、7.46g 氯化鉀于足量的水中，加水定容到100ml。3mol/L乙酸鈉（sodiumace tate）：溶解40.8g的三水乙酸鈉于 約90ml水中，用冰乙酸調(diào)溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。0.5mol/LEDTA:配制等摩爾的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液（0.5mol/L）， 混合后形成EDTA的三鈉鹽?；蚍Q取186.1g的Na2EDTA2H2O和20g 的NaOH，并溶于水中，定容至1L。1mol/LHEPES：將23.8gHEPES溶 于約90ml的水中，用NaOH調(diào)pH C6.8-8.2），然后用水定容至 100ml。1mol/LHCl：加8.6ml的濃鹽酸至9

14、1.4ml的水中。25mg/mlIPGT:溶解250mg的IPGT （異丙基硫代-B-D-半乳糖苷） 于10ml水中，分成小份貯存于-20C。1mol/LMgCl2 :溶解20.3gMgCl26H2O于足量的水中，定容到 100ml。100mmol/LPMSF：溶解174mg的PMSF （苯甲基磺酰氟）于足量的 異丙醇中，定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹或貯存于-20C。20mg/ml蛋白酶K （proteinaseK）:將200mg的蛋白酶L加入到 9.5ml水中，輕輕搖動，直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。 加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20C。10mg/mlRn

15、ase（無 DNase）（DNase freeRNase）:溶解 10mg 的胰蛋白 RNA 酶于 1ml的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中（pH5.0）。溶解后于水浴中煮 沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的TrisHCl調(diào)pH至7.5,于 -20C貯存。（配制過程中要戴手套）5mol/L氯化鈉（NaCl）:溶解29.2g氯化鈉于足量的水中，定 容至 100ml。10N氫氧化鈉（NaOH）:溶解400g氫氧化鈉顆粒于約0.9L水的 燒杯中（磁力攪拌器攪拌），氫氧化鈉完全溶解后用水定容至1L。10%SDS （十二烷基硫酸鈉）：稱取100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約含 0.9L 的水的燒杯中，

16、用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至 1L。2mol/L 山梨（糖）醇（Sorbitol）:溶解36.4g山梨（糖）醇 于足量水中使終體積為100ml。100%三氯乙酸（TCA）:在裝有 500gTCA的試劑瓶中加入100ml水，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶 解。（稀釋液應在臨用前配制）2.5%Xgal （5-溴-4-氯-3-吲哚一B-半乳糖苷）：溶解25mg 的Xgal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用鋁箔包裹裝液管，貯存 于-20C。100XDenhardt 試劑（Denhardtsregent）成分及終濃度配制 100ml 溶液各成分的用量2%聚蔗糖（Ficoll，400型）2%聚乙

17、烯吡咯烷酮（PVP-40） 2%BSA （組分 V）水 2g2g2g加水至總體積為100ml,依照上表稱取各組分，溶于水中定容。 過濾除菌及雜質(zhì)，分裝成小份于-20C貯存。10X標準 DNA 連接酶緩沖液（standardDNAligasebuffer）（粘 端、平端連接）成分及終濃度配制 10ml 溶液各成分的用量0.5mol/LTris-HCl:5mllmol/L 貯液，100mmol/LMgCl2:lmllmol/L 貯液，100mmol/LDTT:lmllmol/L 貯液，2mmol/LATP:200ull00mmol/L 貯液，5mmol/L 鹽酸亞精胺（可選）:50ul1mmol/

18、L 貯液,0.5mg/mlBSA （組分V）（可選）：0.5mll0mg/mL貯液，水:2.25ml將配制好的緩 沖液分裝成小份，貯存于-20C。100mmol/LdNTP 溶液（dNTPsolutions）可以購買到100mmol/L純dNTPs貯液，-80C可貯存至少6個月。10mmol/LdNTP 混合液成分及終濃度配制 20ul 溶液各成分的用量10mmol/LdATP10mmol/LdCTP10mmol/LdGTP10mmol/LdTTP水 2ul100mmol/LdATP 貯液2ul100mmol/LdCTP 貯液2ul100mmol/LdGTP 貯液2ul100mmol/LdTT

19、P 貯液12ul20PEG8000/2.5MNaCl成分及終濃度配制 10ml 溶液各成分的用量質(zhì)量濃度為 20聚乙二醇2.5mol/L 氯化鈉水 20g50ml5mol/L 氯化鈉或 14.6g 固體氯化鈉補足 100ml加聚乙二醇于含有氯化鈉的燒杯中，加水至終體積100ml,用磁 力攪拌器攪拌溶解20XSSC成分及終濃度配制1L溶液各成分的用量300mmol/L檸檬酸三鈉（二水）3mol/L 氯化鈉水 88.2g175.3g補足1L溶解檸檬酸三鈉（二水）和氯化鈉于約0.9L水中，加幾滴 10NNaOH溶液調(diào)pH為7.0,用水補足體積至1L。DEPC （焦碳酸二乙酯）處理水力加 100ulD

20、EPC于100ml水中，使DEPC的體積分數(shù)為0.1%。在 37C溫浴至少12h，然后在15psi條件下高壓滅菌20min,以使殘余 的DEPC失活。DEPC會與胺起反應，不可用DEPC處理Tris緩沖液。甲酰胺（deionizedformamide）直接購買或加DowexXG8混合樹脂于裝有甲酰胺的玻璃燒杯中， 用磁力攪拌器輕輕攪拌1h，可去除甲酰胺中的離子。經(jīng)Wha tman1 號濾紙過濾除去樹脂后分成小份，充氮氣于-80C貯存（防止氧化）。磷酸緩沖液（phospha tebuffer）按照下表所給定的體積，混合1mol/L的磷酸二氫鈉（單堿）和 1mol/L磷酸氫二鈉（雙堿）貯液，獲得所

21、需pH的磷酸緩沖液。配 制lmol/L的磷酸二氫鈉（NaH2P04H20）貯液：溶解138g于足量水 中，使終體積為lL;lmol/L磷酸氫二鈉（Na2HP04）貯液:溶解142g 于足量水中使終體積為 1L。lmol/L磷酸二氫鈉（ml） lmol/L磷酸氫二鈉（ml）最終pH值8778508l57757356856255655l0450390330280l23l50l852253l5490 5506106707206.06.16.26.36.46.56.66.76.86.97.07.17.2TE (用于懸浮和貯存DNA)成分及終濃度配制 100ml 溶液各成分的用量10mmol/LTris

22、HCl1mmol/LEDTA水 lmllmol/LTris-HCl (pH7.4-8.0,25C)200ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)98.8mlTris 緩沖液（Tris-HClbuffer）將121g的Tris堿溶解于約0.9L水中，再根據(jù)所要求的pH （25C 下）加一定量的濃鹽酸（11.6N），用水調(diào)整終體積至1L。濃鹽酸的體積（ml） pH8.6142128.53846566671.3769.08.88.48.28.07.87.67.47.2電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液電泳緩沖液50XTris-乙酸（TAE）緩沖液成分及終濃度配制1L溶液各成分的用量2mol/LTris

23、堿1mol/L 乙酸100mmol/LEDTA水 242g57.1ml 的冰乙酸（17.4moL/L）200ml 的 0.5mol/LEDTA（pH8.0）補足1L5XTris-硼酸（TBE）緩沖液成分及終濃度配制1L溶液各成分的用量445mmol/LTris 堿445mmol/L硼酸鹽10mmol/LEDTA水 54g27.5g 硼酸20ml 的 0.5mol/LEDTA（pH8.0）補足 1L染料1%漠酚藍（pomophenolblue）加 1g 水溶性鈉型溴酚藍于 100ml 水中，攪拌或渦旋混合直到完 全溶解。1二甲苯青 FF（xylenecyanoleFF）溶解lg二甲苯青FF于足量

24、水中，定容到100ml。10mg/ml 的溴化乙錠（ethidiumpomide）小心稱取1g溴化乙錠，轉(zhuǎn)移到廣口瓶中，力加 100ml水，用磁力 攪拌器攪拌直到完全溶解。用鋁箔包裹裝液管，于4C貯存。凝膠上樣液（gelloadingsolutions）6X堿性凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度配制 10ml 溶液各成分用量0.3N 氫氧化鈉6mmol/LEDTA18聚蔗糖（400 型）0.15溴甲酚綠0.25二甲苯青 FF水 300ul10N 氫氧化鈉120ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）1.8g15mg25mg補足到 10ml6X聚蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度配制10m

25、l溶液各成分用量0.15%溴酚藍0.15二甲苯青 FF5mmol/LEDTA15聚蔗糖（400 型）水1.5mll%溴酚藍1.5mll%二甲苯青 FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）1.5g補足到 10ml6X溴酚藍/二甲苯青/聚蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終 濃度配制10ml溶液各成分用量0.25%溴酚藍0.25%二甲苯青FF15%聚蔗糖（400型）水2.5ml1%溴酚藍2.5ml1%二甲苯青 FF1.5g補足到 10ml6X甘油凝膠上樣液（4C貯存）成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚藍0.15%二甲苯青FF5mmol/LEDTA50%甘油水1.5ml1

26、%溴酚藍1.5ml1%二甲苯青 FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）3ml3.9ml6X蔗糖凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量0.15溴酚藍0.15二甲苯青 FF5mmol/LEDTA40聚蔗糖水1.5mll%溴酚藍1.5mll%二甲苯青 FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）4g補足到 10ml10X十二烷基硫酸鈉/甘油凝膠上樣液（室溫貯存）成分及終濃度配制 10ml 溶液各成分用量0.2%溴酚藍0.2%二甲苯青 FF200mmol/LEDTA0.1%SDS50%甘油水 20mg20mg4ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)100

27、ul10SDS5ml補足到 10ml常用培養(yǎng)基LB 培養(yǎng)基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化鈉 10g如果需要用1 NNaOH （lml）調(diào)整pH至7.0,再補足水至1L。 注：瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。SOB 培養(yǎng)基將下列組分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物 5g氯化鈉0.5g1mol/L 氯化鉀 2.5ml用水補足體積到1L。分成100ml的小份，高壓滅菌。培養(yǎng)基冷 卻到室溫后,再在每 100ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂。SOC培養(yǎng)基成分、方法同 SOB 培養(yǎng)基的配制，只是在培養(yǎng)基冷卻到室溫后，

28、 除了在每 100ml 的小份中加 1ml 滅過菌的 1mol/L 氯化鎂外，再加 2ml滅菌的lmol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足夠水中，再用水補足 到100ml,用0.22um的濾膜過濾除菌）。TB 培養(yǎng)基將下列組分溶解在 0.9L 水中：蛋白胨12g酵母提取物 24g甘油 4ml各組分溶解后高壓滅菌。冷卻到60C，再加100ml滅菌的 170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HP04 的溶液（2.31g 的 KH2P04 和 12.54gK2HP04溶在足量的水中，使終體積為100ml。高壓滅菌或用 0.22um 的濾膜過濾除菌）。2XYT培養(yǎng)基將下列組分溶解在 0.9L

29、 水中：蛋白胨 16g酵母提取物10g氯化鈉 4ml如果需要用1 NNaOH （1ml）調(diào)整pH至7.0,再補足水至1L。 注：瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。YPD培養(yǎng)基將下列組分溶解在 0.9L 水中：蛋白胨 20g酵母提取物 10g葡萄糖 20g用水補足體積為 1L 后，高壓滅菌。建議在高壓滅菌之前，對色 氨酸營養(yǎng)缺陷型每升培養(yǎng)基添加 1.6g 色氨酸，因為 YPD 培養(yǎng)基是色 氨酸限制型培養(yǎng)基。為了配制平板，需要在高壓滅菌前加入20g瓊 脂粉。常用抗生素氨芐青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解lg氨芐青霉素鈉鹽于足量的水中，最后定容至1

30、0ml。分裝 成小份于-20C貯存。常以25ug/ml50ug/ml的終濃度添加于生長 培養(yǎng)基。羧芐青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g羧芐青霉素二鈉鹽于足量的水中，最后定容至10ml。 分裝成小份于-20C貯存。常以25ug/ml50ug/ml的終濃度添加于 生長培養(yǎng)基。甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解lg甲氧西林鈉于足量的水中，最后定容至10ml。分裝成小 份于-20C貯存。常以37.5ug/ml終濃度與100ug/ml氨芐青霉素一 起添加于生長培養(yǎng)基?？敲顾?kanamycin)(10mg/ml)溶解100mg卡那霉素于足量的水中

31、，最后定容至10ml。分裝成 小份于-20C貯存。常以10ug/ml50ug/ml 的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解250mg氯霉素足量的無水乙醇中，最后定容至10ml。分裝 成小份于-20C貯存。常以12.5ug/ml25ug/ml的終濃度添加于生鏈霉素(st rep to mycin)(50mg/ml)溶解 0.5g 鏈霉素硫酸鹽于足量的無水乙醇中，最后定容至 10ml。 分裝成小份于-20C貯存。常以10ug/ml50ug/ml的終濃度添加于 生長培養(yǎng)基。萘啶酮酸(nalidixicacid)(5mg/ml)溶解50mg萘啶酮酸鈉鹽

32、于足量的水中，最后定容至10ml。分裝 成小份于-20C貯存。常以15ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。四環(huán)素(tet racyyline )(10mg/ml)溶解100mg四環(huán)素鹽酸鹽于足量的水中，或者將無堿的四環(huán)素溶 于無水乙醇，定容至10ml。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液 見光，于-20C貯存。常以10ug/ml50ug/ml的終濃度添加于生長 培養(yǎng)基。幾種溶液的配制方法1、PBS:取ZLI-9061PBS溶于1000ml的蒸餾水中，混勻，測pH值應在 7.27.4之間，若偏離此范圍，請用0.1N的HCL或NaOH調(diào)整。2、TBS：2.1Tris 緩沖液配方：(0.5MpH7.6

33、)Tris (三羥甲基氨基甲烷)60.57g1NHCL 約 420ml雙蒸水加至 1000mlTris 緩沖液配制方法：先以少量雙蒸水(300500ml)溶解Tris，加入HCl后，用HCl (1N)或NaOH (1N)將卩只調(diào)至7.6，最后雙蒸水加至1000ml。此 液為儲備液，4C冰箱中保存。2.2TBS 配方：Tris-HCI 緩沖液(0.5MpH7.6) 100mlNaCI8.59g(0.15mol/L)雙蒸水加至 1000mlTBS 配制方法：先以少量雙蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl緩沖液，最后加雙 蒸水至1000ml，充分搖勻。3、枸櫞酸鹽緩沖液(Cit ra tebuf

34、fer)：儲存液：0.1M枸櫞酸溶液：稱取21.01g枸櫞酸(C6H8O7H20)溶于 1000ml 蒸餾水中。0.1M枸櫞酸鈉溶液：稱取29.41g枸櫞酸鈉(C6H5Na3O72H20) 溶于 1000ml 蒸餾水中。取9mlA液和41mlB液加入450ml蒸餾水中，溶液pH值應為6.00.14、胰酶(Trypsin)：4.1ZLI-9011 胰蛋白酶消化液：常用濃度為 0.125%，即使用前將一滴試劑 1 胰酶溶液和三滴試 劑2 胰酶稀釋液均勻混合(1:3 稀釋)，則可直接滴加使用。胰酶的最終濃度可以根據(jù) 使用者的要求進行調(diào)整，濃度范圍可以從0. 05% ( 1:1 0 稀釋)至 0.25

35、%(1:1 稀釋)。4.2ZLI-9010 胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml0.05%或0.1%pH7.8的無 水氯化鈣水溶液中，溶解即可。5、胃酶(Pepsin)：4%胃蛋白酶，用0.1mol/LHCL配制。（我公司備有ZLI-9013胃蛋白酶消化工作液，不需稀釋直接滴 加使用，歡迎選購）6、DAB：6.1ZLI-9032/9033DABKit：使用前只需將試劑盒提供的A、B、C三種試劑各一滴加至1ml雙 蒸水中，即可獲得1mlDAB工作液，簡單易用。6.1ZLI-9030DAB：6mgDAB 溶于 10mlTBS （0.05MpH7.6），再加入 0.1ml 濃度為

36、 3% 的H202,過濾掉沉淀物，即可。7、AEC：4mgAEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml濃度為0.1M的醋 酸緩沖液（pH5.2），然后加入0.15ml3%H2O2,過濾掉沉淀物。8、RIPA：1XPBS，1%NP40， 0.5sodiumdeoxycholate，0.1%SDS （此液體可 長期保存）。以下抑制劑以儲存液方式保存，臨用前加入RIPA中。8.110mg/mlPMSF異丙醇溶液（用量為10ul/ml）8.31000mMsodiumorthovanadate 冷凍液（用量為10ul/ml）9、BlottoA：常規(guī)使用 1XPBS，5%milk，0.05%Tween20

37、。10、BlottoB：與 Phospho tyrosine 抗體共用，1XPBS，1%m ilk， 0.05%Tween20。 部分實驗中 milk 可完全去除，但可能引起背景增高。玻璃儀器的洗滌 SOP玻璃儀器的洗滌 SOP范圍本規(guī)程適用于本公司分析測試室，也適用于本公司其他實驗室。引用標準yyt01886 1995藥品檢驗操作規(guī)程潔凈劑分類常用的潔凈劑有肥皂、洗衣粉、去污粉、洗液（清潔液），有機 溶劑等。使用范圍洗衣粉、去污粉等一般用于：可用刷子直接刷洗的儀器，如燒瓶、燒杯、量杯、試劑瓶等。洗液可用于以下儀器的洗滌：不便于用刷子清洗的儀器，如滴定管、移液管、容量瓶 比色管、玻璃垂熔漏斗、凱氏燒瓶等特殊要求與形狀的儀器。長久不用的玻璃儀器新購回的玻璃儀器刷子刷不下的污垢洗液的配制法及注意事項重鉻酸鉀洗液（清潔液）取500ml燒杯置天平上，稱取已經(jīng)研細重鉻酸鉀（k2cr2o3） 10g, 加水16ml，加熱，攪拌使溶解，等冷后，在不斷攪拌下緩慢地加入 工業(yè)硫酸200ml，冷卻后，置細口瓶中密閉保存。如