注射用通栓欣粉針對(duì)大鼠腦缺血損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制

1、注射用通栓欣粉針對(duì)大鼠腦缺血損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制【摘要】目的觀察注射用通栓欣粉針對(duì)腦缺血保護(hù)作用及其作用機(jī)制。方法通過不完全性腦缺血模型觀察注射用通栓欣粉針對(duì)大鼠腦血管通透性、腦組織形態(tài)學(xué)、超氧化物岐化酶(SD)活性及丙二醛(DA)含量的影響;通過血小板黏附、ADP誘導(dǎo)血小板聚集試驗(yàn)觀察注射用通栓欣粉針對(duì)大鼠血小板功能的影響。結(jié)果注射用通栓欣粉針可明顯降低不完全性腦缺血大鼠腦血管通透性，使缺血腦組織病變程度減輕，腦組織發(fā)生病變的動(dòng)物數(shù)減少，DA含量明顯降低、SD活性明顯升高;可明顯降低血小板黏附百分率，抑制血小板聚集。結(jié)論注射用通栓欣粉針可抑制血栓的形成，對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠腦缺血損傷具有保護(hù)作用。

2、【關(guān)鍵詞】注射用通栓欣粉針;腦缺血;作用機(jī)制三七panaxntglnseng(Burk)F.H.hen為五加科人參屬植物，由其根提取的總皂苷制成的血塞通注射液廣泛應(yīng)用于臨床，為了充分利用三七的地上資源，降低原料本錢，本研究對(duì)三七葉中總皂苷進(jìn)展別離純化，制成通栓欣粉針劑，并觀察了通栓欣粉針對(duì)腦缺血保護(hù)作用。1材料與方法1.1材料1.2方法1.2.1對(duì)大鼠不完全性腦缺血模型的影響1.2.1.2腦組織形態(tài)學(xué)檢測動(dòng)物分組給藥同前。末次給藥后15in同前述方法結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈，造成動(dòng)物不完全性腦缺血。4h后將動(dòng)物斷頭處死，取腦組織同一部位，于10%福爾馬林中固定，做病理檢查。1.2.1.3腦組織超氧化物

3、岐化酶(SD)活性及丙二醛(DA)含量檢測動(dòng)物分組、給藥、造模方法同上。4h后將動(dòng)物斷頭處死，立即取腦，在4下勻漿、離心，提取SD，并測定其活性;同時(shí)測定DA含量2。1.2.2血小板功能測定1.2.2.1血小板黏附性檢測取50只大鼠，隨機(jī)分為5組：空白對(duì)照組，血塞通注射液(57.0g/kg)組，通栓欣粉針31.0、15.5、7.8g/kg三個(gè)劑量給藥組。每天1次，連續(xù)給藥3d。末次給藥后15in，于動(dòng)物腹腔注射戊巴比妥鈉(35g/kg)麻醉，在腹靜脈采血1.5l/只，按玻球瓶法計(jì)算血小板黏附率3。1.2.2.2ADP誘導(dǎo)血小板聚集實(shí)驗(yàn)取45只大鼠，動(dòng)物分組給藥同上。末次給藥后15in，腹腔注射

4、水合氯醛300g/kg麻醉，主動(dòng)脈采血2.7l/只，緩緩注入裝有0.3l3.8%枸椽酸鈉溶液的試管中，混勻，離心，別離PRP和PPP，按文獻(xiàn)方法測定ADP誘導(dǎo)血小板最大聚集率，計(jì)算聚集抑制百分率3。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)用xs表示，采用t檢驗(yàn)。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2結(jié)果2.1對(duì)大鼠不完全性腦缺血模型的影響2.1.1對(duì)腦血管通透性的影響各組伊文思藍(lán)含量為：空白對(duì)照組(27.910.87)g，缺血模型組(29.94.93)g，血塞通注射液組(25.38.01)g，注射用通栓欣粉針31.0g/kg組(20.65.82)g，15.5g/kg組(20.55.76)g，7.8g/kg組(20.98.11)

5、g。注射用通栓欣粉針可明顯降低不完全性腦缺血大鼠腦中伊文思藍(lán)含量，與缺血模型組比擬有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05，P0.01)。血塞通注射液給藥組伊文思藍(lán)含量亦有降低趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.1.2對(duì)腦組織形態(tài)學(xué)的影響見表1?？瞻讓?duì)照組動(dòng)物腦組織神經(jīng)細(xì)胞正常，血管周圍腔隙狹窄;缺血模型組動(dòng)物腦組織發(fā)生病理性改變，神經(jīng)細(xì)胞及血管周圍的腔隙增寬;而血塞通注射液和注射用通栓欣粉針三個(gè)劑量給藥組均可使大鼠缺血性腦組織病變程度減輕，發(fā)生組織病變的動(dòng)物數(shù)減少，尤以注射用通栓欣粉針高劑量給藥組作用明顯。表1注射用通栓欣粉針對(duì)各組大鼠腦組織形態(tài)學(xué)的影響2.1.3對(duì)腦組織SD活性及DA含量的影響見表2。大鼠腦缺血后，

6、腦組織中DA含量明顯升高，SD活性顯著降低，與空白對(duì)照組比擬差異顯著(P0.01);而注射血塞通和通栓欣粉針的動(dòng)物腦組織中DA含量明顯較模型組降低，同時(shí)SD活性明顯升高。表2注射用通栓欣粉針對(duì)各組大鼠腦組織中DA含量及SD活性的影響與空白對(duì)照組比擬：1)P0.01;與模型組比擬：2)P0.0012.2對(duì)血小板功能的影響2.2.1對(duì)血小板黏附性的影響各組血小板黏附率分別為：空白對(duì)照組(36.20.15)%，血塞通注射液組(20.90.12)%，通栓欣粉針31.0g/kg組(16.20.10)%，15.5g/kg組(19.60.12)%，7.8g/kg組(31.50.17)%。血塞通注射液和通栓欣

7、粉針高、中劑量組均可明顯降低血小板黏附率，與對(duì)照組比擬有明顯差異(P0.05，P0.01)。2.2.2對(duì)ADP誘導(dǎo)血小板聚集率的影響見表3。注射用通栓欣粉針高劑量組可明顯抑制血小板聚集，其聚集率與對(duì)照組比擬明顯降低;陽性藥血塞通注射液也使動(dòng)物血小板聚集百分率有降低的趨勢(shì)。表3注射用通栓欣粉針對(duì)大鼠血小板聚集的影響3討論血塞通注射液即為三七總皂苷制成的注射劑，目前在臨床上廣泛用于治療腦血栓，療效確切。以往的三七總皂苷都是從三七根中提獲得到的，莖葉常作為廢棄物扔掉。本課題組經(jīng)多年研究認(rèn)為三七葉地上局部含有與根中一樣的有效成分。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，注射用通栓欣粉針對(duì)結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈造成的不完全性腦缺血有明顯的緩解作用，抑制腦水腫的發(fā)生，拮抗腦組織神經(jīng)細(xì)胞損傷。在腦缺血時(shí)，自由基去除酶活性降低，自由基產(chǎn)生急劇增多。SD能去除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，DA?？梢苑从硻C(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度4。因此測定SD的活性及DA的含量可反映機(jī)體內(nèi)自由基引發(fā)的脂質(zhì)過氧化反響的程度。本研究發(fā)現(xiàn)，大鼠腦缺血后，腦組織SD活性降低，DA含量升高，給予通栓欣粉針后能明顯降低缺血區(qū)腦組織DA含量，升高SD活性，顯示出其去除過多自由基的才能，減輕由氧自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反響，從而可使大鼠缺血性腦組織病變程度減輕，發(fā)生組織病變的動(dòng)物數(shù)減少，對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠腦缺血損傷具有保護(hù)作用。腦缺血時(shí)無氧糖酵解增加，導(dǎo)