泌尿外科解剖和生理培訓(xùn)課件

1、泌尿外科解剖和生理泌尿外科解剖和生理泌尿系統(tǒng)的解剖腎上腺腎輸尿管膀胱尿道前列腺陰囊內(nèi)容物泌尿外科解剖和生理2泌尿系統(tǒng)的解剖腎上腺泌尿外科解剖和生理2腎上腺的解剖腎上腺（suprarenal gland）位于腹膜后隙，腎臟的上方,左側(cè)為半月形，右側(cè)似三角形。腎上腺的動(dòng)脈有三支： 膈下動(dòng)脈腎上腺上動(dòng)脈腹主動(dòng)脈腎上腺中動(dòng)脈 腎動(dòng)脈腎上腺下動(dòng)脈一、腎上腺的解剖泌尿外科解剖和生理3腎上腺的解剖腎上腺（suprarenal gland）位于腹左腎上腺靜脈左腎靜脈右腎上腺靜脈下腔靜脈少數(shù)匯入右膈下靜脈右腎靜脈泌尿外科解剖和生理4左腎上腺靜脈左腎靜脈泌尿外科解剖和生理4二、腎上腺的生理 腎上腺皮質(zhì)由外向內(nèi)可分

2、為層即球狀帶、束狀帶和網(wǎng)狀帶。球狀帶主要分泌醛固酮，又稱為鹽皮質(zhì)激素，其主要功能是促進(jìn)腎臟對(duì)鈉離子的主動(dòng)重吸收和對(duì)鉀離子的排泄，維持體內(nèi)水的恒定，增加組織液和血量，這對(duì)生命至關(guān)重要。束狀帶及網(wǎng)狀帶分泌糖皮質(zhì)激素，主要為皮質(zhì)醇。皮質(zhì)醇主要作用是促進(jìn)糖異生和升高血糖。促使蛋白質(zhì)分解，使脂肪組織中脂肪分解并在體內(nèi)重新分布。皮質(zhì)醇在機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)可提高其耐受能力。皮質(zhì)醇還具有抗炎抗過敏和抑制免疫功能的作用。腎上腺髓質(zhì)由嗜鉻細(xì)胞構(gòu)成，主要分泌腎上腺素，也可分泌少量去甲腎上腺素。腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心血管、內(nèi)臟平滑肌的活動(dòng)有調(diào)節(jié)作用。腎上腺髓質(zhì)是人體極重要的內(nèi)分泌腺，髓質(zhì)分泌功能障礙將引起人體失去

3、有效的應(yīng)急能力泌尿外科解剖和生理5二、腎上腺的生理 腎上腺皮質(zhì)由外向內(nèi)可分為層即球狀帶、束狀腎臟的解剖與生理一、腎臟的解剖： 腎的位置腎（kidney）位于脊柱兩側(cè)，貼附于腹后壁 泌尿外科解剖和生理6腎臟的解剖與生理一、腎臟的解剖： 泌尿外科解剖和生理6腎的毗鄰（前面觀）泌尿外科解剖和生理7腎的毗鄰（前面觀）泌尿外科解剖和生理7腎的毗鄰（后面觀）泌尿外科解剖和生理8腎的毗鄰（后面觀）泌尿外科解剖和生理8腎蒂的結(jié)構(gòu)和排列腎蒂（renal pedicle）由出入腎門的腎血管、腎盂、神經(jīng)和淋巴管組成。由前向后為：靜、動(dòng)、盂；由上向下為：動(dòng)、靜、盂。泌尿外科解剖和生理9腎蒂的結(jié)構(gòu)和排列腎蒂（renal

4、 pedicle）由出入腎門腎血管與腎段泌尿外科解剖和生理10腎血管與腎段泌尿外科解剖和生理10腎靜脈泌尿外科解剖和生理11腎靜脈泌尿外科解剖和生理11腎的被膜腎的被膜有三層：由外向內(nèi)依次為腎筋膜、脂肪囊和纖維囊。泌尿外科解剖和生理12腎的被膜腎的被膜有三層：由外向內(nèi)依次為腎筋膜、脂肪囊和纖維囊腎的被膜（縱面觀）泌尿外科解剖和生理13腎的被膜（縱面觀）泌尿外科解剖和生理13輸尿管的解剖輸尿管(ureters)：全長(zhǎng)2530cm?？煞秩浚焊共浚ㄑ危?，從腎盂與輸尿管交界處至跨越髂血管處； 盆部（盆段），從跨越髂血管處至膀胱壁；壁內(nèi)部（膀胱壁段），斜行穿膀胱壁。泌尿外科解剖和生理14輸尿管的解剖

5、輸尿管(ureters)：全長(zhǎng)2530cm?？奢斈蚬軇?dòng)脈泌尿外科解剖和生理15輸尿管動(dòng)脈泌尿外科解剖和生理15腹膜后大血管泌尿外科解剖和生理16腹膜后大血管泌尿外科解剖和生理16膀胱的位置與毗鄰膀胱(urinary bladder)位于盆腔前部，空虛時(shí)上界約與骨盆上口相當(dāng)，膀胱體上面有腹膜覆蓋，下外側(cè)面緊貼恥骨后隙的疏松結(jié)締組織、肛提肌和閉孔內(nèi)肌。男性膀胱底上部借直腸膀胱陷凹與直腸相鄰，下部與精囊和輸精管壺腹相鄰；膀胱頸與前列腺相接。女性的膀胱底與子宮頸和陰道前壁相貼，膀胱頸與尿生殖膈相鄰。泌尿外科解剖和生理17膀胱的位置與毗鄰膀胱(urinary bladder)位于盆膀胱的血供髂內(nèi)動(dòng)脈前干

6、膀胱上動(dòng)脈膀胱下動(dòng)脈膀胱上中部膀胱下部髂內(nèi)靜脈泌尿外科解剖和生理18膀胱的血供髂內(nèi)動(dòng)脈前干膀胱上動(dòng)脈膀胱下動(dòng)脈膀胱上中部膀胱下部前列腺的位置泌尿外科解剖和生理19前列腺的位置泌尿外科解剖和生理19陰囊的層次泌尿外科解剖和生理20陰囊的層次泌尿外科解剖和生理20腎上腺的解剖1. 選題背景 2.研究現(xiàn)狀3.研究目標(biāo)和研究?jī)?nèi)容4. 技術(shù)路線5. 本課題特點(diǎn)6. 部分預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果7. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)展安排泌尿外科解剖和生理21腎上腺的解剖1. 選題背景 2.研究現(xiàn)狀3.研究目標(biāo)和研究?jī)?nèi)泌尿外科解剖和生理22泌尿外科解剖和生理222 HIF-1結(jié)構(gòu)功能及其靶基因 1 胃癌化療及多藥耐藥研究概況3 HIF-1腫瘤中

7、表達(dá)及與生物行為關(guān)系4 HIF-1與化療耐藥的關(guān)系5 p53基因與HIF-1表達(dá)的關(guān)系泌尿外科解剖和生理232 HIF-1結(jié)構(gòu)功能及其靶基因 1 胃癌化療及多藥耐藥 1 胃癌化療及多藥耐藥研究概況胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，化療仍是治療中晚期胃癌的主要手段，但由于腫瘤的多藥耐藥（MDR），化療的效果并不理想。目前認(rèn)為mdr-1基因與MDR有關(guān)，其編碼p-糖蛋白(p-gp)，能把結(jié)構(gòu)功能不同的藥物泵出細(xì)胞外而降低藥物濃度, 從而引發(fā)腫瘤耐藥但是對(duì)于癌癥中p-gp過表達(dá)的調(diào)節(jié)機(jī)制目前尚不清楚。泌尿外科解剖和生理24 1 胃癌化療及多藥耐藥研究概況胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，MDR的基本概念 MDR

8、是指抗某種細(xì)胞毒藥物的耐藥細(xì)胞系對(duì)許多結(jié)構(gòu)上無關(guān)的和作用機(jī)制不同的其它抗癌藥物產(chǎn)生的交叉抗藥性,是一種獨(dú)特的廣譜耐藥現(xiàn)象泌尿外科解剖和生理25MDR的基本概念 MDR是指抗某種細(xì)胞毒耐藥分類: 原藥耐藥PDR 多藥耐藥MDR 腫瘤耐藥機(jī)制 藥理耐藥 . 生化耐藥 凋亡耐藥 細(xì)胞動(dòng)力學(xué)耐藥 泌尿外科解剖和生理26耐藥分類:腫瘤耐藥機(jī)制 藥理耐藥 . 生化耐藥 凋亡耐藥 經(jīng) 典 M D RMDR1的基因產(chǎn)物一種細(xì)胞膜糖蛋白稱為P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)分子量為170KD(P170) P-gp具有能量依賴性“藥泵”功能 表達(dá)水平與耐藥程度成正比泌尿外科解剖和生理27經(jīng) 典

9、 M D RMDR1的基因產(chǎn)物泌尿外科解剖和生理27P-gp介導(dǎo)的抗癌藥物阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素米托蒽醌長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春新堿乙托泊苷（Etoposide）紫杉醇、泰素帝Actinomycin D泌尿外科解剖和生理28P-gp介導(dǎo)的抗癌藥物阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素泌尿外科解剖惡性腫瘤生長(zhǎng)迅速 ,當(dāng)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)超過血管生成的速度時(shí),極易發(fā)生缺氧.因此腫瘤缺氧是腫瘤惡性進(jìn)展的重要特征.腫瘤細(xì)胞可通過多種途徑對(duì)缺氧進(jìn)行適應(yīng)性調(diào)節(jié).缺氧誘導(dǎo)因子1（Hypoxia inducible factor 1, HIF-1）是調(diào)節(jié)細(xì)胞缺氧反應(yīng)的主要轉(zhuǎn)錄因子 .泌尿外科解剖和生理29惡性腫瘤生長(zhǎng)迅速 ,當(dāng)腫瘤細(xì)

10、胞生長(zhǎng)超過血管生成的速度時(shí),極易泌尿外科解剖和生理30泌尿外科解剖和生理30Till Acker ，et al. A role for hypoxia and hypoxia-inducible transcription factors in tumor physiology。 J Mol Med , 2002, 80:562575.泌尿外科解剖和生理31Till Acker ，et al. A role for 缺氧誘導(dǎo)因子1（Hypoxia inducible factor 1, HIF-1）HIF-1 活性調(diào)節(jié)亞單位HIF-1 可能與穩(wěn)定HIF-1及二聚化有關(guān) 2. HIF-1結(jié)構(gòu)功能

11、代謝及其靶基因 泌尿外科解剖和生理32缺氧誘導(dǎo)因子1（Hypoxia inducible fac泌尿外科解剖和生理33泌尿外科解剖和生理33泌尿外科解剖和生理34泌尿外科解剖和生理34泌尿外科解剖和生理35泌尿外科解剖和生理35缺氧誘導(dǎo)因子1的代謝泌尿外科解剖和生理36缺氧誘導(dǎo)因子1的代謝泌尿外科解剖和生理36 缺氧 癌基因激活 HER2 FRAP HRAS CSRC 抑癌基因失活 VHL PTEN p53 生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子 IGR、Insulin、EGF、IL-1 HIF-1的表達(dá)調(diào)節(jié)因素泌尿外科解剖和生理37 缺氧 HIF-1的表達(dá)調(diào)節(jié)因素泌尿外科解剖和生理37二. 研 究 現(xiàn) 狀1.

12、HIF-1在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)位于細(xì)胞核內(nèi). 2.HIF-1在多種腫瘤中的表達(dá) ,在腫瘤 附近正常組織中不能測(cè)及 . 3.在結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，HIF-1蛋白表達(dá)隨乳腺癌惡性度升高而增加，且與浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān) 泌尿外科解剖和生理38二. 研 究 現(xiàn) 狀1. HIF-1在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)位于4. 發(fā)現(xiàn)HIF-1-/-組劑量反應(yīng)曲線較HIF-1+/+組明顯左移,IC50也顯著減少. 5.對(duì)腫瘤細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn)HIF-1-/-腫瘤細(xì)胞對(duì)放療和化療藥物的敏感度都有所增加。 6.多藥耐藥基因MDR1是 HIF-1的靶基因。 泌尿外科解剖和生理394. 發(fā)現(xiàn)HIF-1-/-組劑量反應(yīng)曲

13、線較HIF-1+/7.利用乏氧誘導(dǎo)肺腺癌細(xì)胞459表達(dá)HIF-1，發(fā)現(xiàn)p-gp和MRP隨著HIF-1表達(dá)而增加，并且對(duì)表阿霉素和順鉑的耐藥性增強(qiáng)。 8.國(guó)外的研究也發(fā)現(xiàn)，缺氧能導(dǎo)致p-gp和HIF-1過表達(dá)，從而產(chǎn)生對(duì)VP-16、博萊霉素和蒽環(huán)類耐藥。 9.國(guó)外對(duì)卵巢癌的研究已表明突變型P53過表達(dá)會(huì)引起HIF-1表達(dá)升高. 泌尿外科解剖和生理407.利用乏氧誘導(dǎo)肺腺癌細(xì)胞459表達(dá)HIF-1，發(fā)現(xiàn)p-g待解決問題目前關(guān)于HIF-1與胃癌生物行為及多藥耐藥機(jī)制關(guān)系的研究報(bào)道甚少。 目前對(duì)于HIF-1與的研究多用基因轉(zhuǎn)染方法，應(yīng)用原代胃癌體外細(xì)胞藥物敏感性進(jìn)行研究的報(bào)道甚少泌尿外科解剖和生理41

14、待解決問題目前關(guān)于HIF-1與胃癌生物行為及多藥耐藥機(jī)制關(guān) 三.研究目標(biāo)和研究?jī)?nèi)容1. 研究目標(biāo)研究HIF-1蛋白表達(dá)與p-gp表達(dá)的相關(guān)性，探討其與胃癌細(xì)胞多藥耐藥的關(guān)系。探討HIF-1表達(dá)與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系 .探討HIF-1蛋白表達(dá)與突變P53過表達(dá)的相關(guān)性 . 泌尿外科解剖和生理42 三.研究目標(biāo)和研究?jī)?nèi)容1. 研究目標(biāo)研究HIF-1蛋白表2. 研究?jī)?nèi)容 對(duì)例新鮮胃癌標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞純化，短期原代培養(yǎng)，應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)和MTT法檢測(cè)其對(duì)常用化療藥物的敏感性應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)60例胃癌石蠟標(biāo)本P53、P-gp、HIF-1蛋白表達(dá)，并收集臨床病理資料。泌尿外科解剖和生理432. 研究?jī)?nèi)容

15、對(duì)例新鮮胃癌標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞純化，短期應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)相同60例新鮮胃癌細(xì)胞HIF-1mRNA的表達(dá)水平。 應(yīng)用TUNEL、熒光顯微鏡等方法檢測(cè)化療藥誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡后的形態(tài)學(xué)改變。泌尿外科解剖和生理44應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)相同60例新鮮胃癌細(xì)胞HIF-1四. 技術(shù)路線HIF-1RT-PCR 免疫組化胃癌手術(shù)標(biāo)本細(xì)胞分離、短期培養(yǎng)及流式技術(shù)檢測(cè)化療藥物體外敏感性HIF-1、p-gp 、P53 免疫組化化療藥誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡后形態(tài)學(xué)改變對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析泌尿外科解剖和生理45四. 技術(shù)路線HIF-1RT-PCR 免疫組化胃癌手術(shù)標(biāo)本泌尿外科解剖和生理培訓(xùn)課件 實(shí)用性探討HIF-1蛋白表達(dá)

16、與p-gp表達(dá)的相關(guān)性，可望從一新角度闡述耐藥發(fā)生機(jī)制。 研究HIF-1表達(dá)與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系，探討其作為一種新的獨(dú)立預(yù)后參數(shù)的可能性。 探討HIF-1蛋白表達(dá)與P53過表達(dá)關(guān)系有助于更好理解胃癌病理生物學(xué)特征。泌尿外科解剖和生理47 實(shí)用性探討HIF-1蛋白表達(dá)與p-gp表達(dá)的相關(guān)性， 國(guó)外已有類似的文獻(xiàn)報(bào)道?？尚行允中g(shù)標(biāo)本充足 ，設(shè)備齊全，預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 科學(xué)性泌尿外科解剖和生理48 國(guó)外已有類似的文獻(xiàn)報(bào)道?？尚行允中g(shù)標(biāo)本充足 ，設(shè)備齊全免疫組化判斷標(biāo)準(zhǔn)：P53:無陽性細(xì)胞或陽性細(xì)胞 5 %為陰性, ( + ) , ( ) ， 強(qiáng)陽性( ) ，為（）。P-gp 為胞質(zhì)和(或) 胞膜陽性,陽

17、性細(xì)胞 5 %為陰性,5 %15 %為+ , 16 %為 。HIF-1判斷標(biāo)準(zhǔn)：為陰性，為（），為（），為（）泌尿外科解剖和生理49免疫組化判斷標(biāo)準(zhǔn)：P53:無陽性細(xì)胞或陽性細(xì)胞 5 %為陰藥物敏感性判斷：高度敏感:抑制率 50 %;中度敏感:抑制率30 %50 %;不敏感:抑制率 30 %。 泌尿外科解剖和生理50藥物敏感性判斷：高度敏感:抑制率 50 %;中度敏感:抑制HIF-1陽性 HIF-1陰性p-gp 陽性p-gp 陰性HIF-1陽性 HIF-1陰性藥物敏感性與HIF-1的關(guān)系泌尿外科解剖和生理51HIF-1陽性 HIF-1陰性p-gp 陽性p-gp 陰HIF-1表達(dá)與胃癌生物學(xué)行為

18、的研究 按臨床病理分期、組織類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否分組泌尿外科解剖和生理52HIF-1表達(dá)與胃癌生物學(xué)行為的研究 按臨床病理分期、組織HIF-1蛋白表達(dá)與P53過表達(dá)關(guān)系 HIF-1陽性 HIF-1陰性P53 陽性p53陰性泌尿外科解剖和生理53HIF-1蛋白表達(dá)與P53過表達(dá)關(guān)系 HIF-1陽性 H 部分預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果泌尿外科解剖和生理54 部分預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果泌尿外科解剖和生理5胃癌中突變p53蛋白的表達(dá) （10*20倍） 細(xì)胞核內(nèi)表達(dá) 泌尿外科解剖和生理55胃癌中突變p53蛋白的表達(dá) （10*20倍） 細(xì)胞核內(nèi)表胃癌中p-gp的表達(dá) （10*20倍） 細(xì)胞膜/漿表達(dá)泌尿外科解剖和生理56胃癌中p-gp的表達(dá) （10*20倍） 細(xì)胞膜/漿預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果小結(jié)基本掌握胃癌細(xì)胞分離和短期原代培養(yǎng)的方法原代胃癌細(xì)胞法體外藥物敏感實(shí)驗(yàn)基本掌握免疫組織化學(xué)的實(shí)驗(yàn)流程泌尿外科解剖和生理57預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果小結(jié)基本掌握胃癌細(xì)胞分離和短期原代培養(yǎng)的方法原凋亡細(xì)胞DNA片斷電泳分析 1.未加化療藥組 2.順鉑1ppc 24小時(shí)3.順鉑 10ppc24小