臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)培訓(xùn)課件

1、臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)方法選擇常規(guī)分析前準(zhǔn)備常規(guī)分析樣品統(tǒng)計(jì)質(zhì)控報(bào)告結(jié)果預(yù)防措施方法發(fā)展臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)2方法評(píng)價(jià)方法選擇常規(guī)分析前準(zhǔn)備常規(guī)分析樣品統(tǒng)計(jì)質(zhì)控報(bào)告結(jié)果預(yù)分析方法分級(jí)決定性方法（definitive method）：經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性原因的方法。參考方法（reference method）：經(jīng)詳盡研究證實(shí)其不準(zhǔn)確度與不精密度可以忽略的方法。常規(guī)方法（routing method）：可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)3分析方法分級(jí)決定性方法（definitive method）臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)4臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)4

2、臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)5臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)5常規(guī)方法參考方法決定性 方法準(zhǔn)確度增加應(yīng)用范圍增加不同方法的關(guān)系臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)6常規(guī)方法參考方法決定性準(zhǔn)確度增加應(yīng)用范圍增加不同方法的關(guān)系臨標(biāo)準(zhǔn)品（reference material）：充分均勻并具有一個(gè)或多個(gè)良好確定的特性值的材料或物質(zhì)，用來校準(zhǔn)儀器設(shè)備、評(píng)估測(cè)定方法或給其它物質(zhì)賦值。一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品（原級(jí)參考物）：穩(wěn)定、均一，由高度準(zhǔn)確的若干方法定值，可用于校準(zhǔn)決定性方法及為二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品定值。二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品：用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，參考方法定值。校準(zhǔn)品：用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，擬被用于校準(zhǔn)的常規(guī)方法定值。用于對(duì)常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí)臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)7標(biāo)準(zhǔn)品

3、（reference material）：充分均勻并具 參考方法 決定性方法 廠家方法 常規(guī)分析 一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校 準(zhǔn) 品準(zhǔn)確度的傳遞溯源校準(zhǔn)儀器參數(shù)試劑臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)8 參考方法 決定性方法 廠家方法 常規(guī)分析 一人血清無機(jī)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09135血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09138一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)紅細(xì)胞微粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090001膽紅素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090002氰化高鐵血紅蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090004純化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090011臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)9人血清無機(jī)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09135一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)二級(jí)評(píng)價(jià)內(nèi)容： 初步評(píng)價(jià)

4、（NCCLS EP10） 精密度（ NCCLS EP5） 對(duì)比及偏差（ NCCLS EP9） 線性（ NCCLS EP6） 抗干擾能力（ NCCLS EP7） 基質(zhì)效應(yīng)（ NCCLS EP14） 臨床準(zhǔn)確度（敏感性和特異性） （ NCCLS GP10，ROC曲線）方法的評(píng)價(jià)臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)10評(píng)價(jià)內(nèi)容：方法的評(píng)價(jià)臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)10NCCLS文件EP9-A用患者樣本進(jìn)行方法對(duì)比及偏差評(píng)估批準(zhǔn)指南1995年12月臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)11NCCLS文件EP9-A用患者樣本進(jìn)行方法對(duì)比批準(zhǔn)指南199評(píng)價(jià)兩種分析方法（同一分析項(xiàng)目）的偏差。評(píng)價(jià)要求：熟悉儀器操作熟悉評(píng)價(jià)方案質(zhì)控足夠的數(shù)據(jù)（最少5個(gè)工

5、作日，40個(gè)樣本）用途：目的： 引進(jìn)新方法前或用一種方法替代另一種方 法時(shí)進(jìn)行偏差分析。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)12評(píng)價(jià)兩種分析方法（同一分析項(xiàng)目）評(píng)價(jià)要求：熟悉儀器操作用途：實(shí)驗(yàn)樣本： 來源于健康人或患者，無干擾，盡量避免貯存。對(duì)比方法： 廠家要求的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法或公認(rèn)的參考方法。 具有好的精密度 沒有已知的干擾物 相同單位 相對(duì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或參考方法的偏差是已知的臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)13實(shí)驗(yàn)樣本：對(duì)比方法：臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)13測(cè)定范圍：醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)（均勻分布） 樣本數(shù)：至少40例，增加可提高可信性。測(cè)定方法：兩種方法分別做雙份測(cè)定。測(cè)定順序： 每天 ：1、2、3、4、5、6、7、8 8、7、6

6、、5、4、3、2、1臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)14測(cè)定范圍：醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)（均勻分布）臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)1測(cè)定次數(shù)： 每天分別用兩種方法進(jìn)行測(cè)定， 至少測(cè)定5天，共40個(gè)樣本數(shù)據(jù)監(jiān)督：系統(tǒng)誤差、人為誤差質(zhì)控：常規(guī)質(zhì)控臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)15測(cè)定次數(shù)：臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)15熟悉儀器及方法收集數(shù)據(jù)檢查方法內(nèi)的離群點(diǎn) 界限： （雙份測(cè)定）相對(duì)差值均值的4倍實(shí)驗(yàn)步驟臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)16熟悉儀器及方法實(shí)驗(yàn)步驟臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)16繪圖 均值散點(diǎn)圖（X，Y） 所有值散點(diǎn)圖（Yij，Xi） 偏差圖 散點(diǎn)圖（ Yij -Xij），Xi）臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)17繪圖 均值散點(diǎn)圖（X，Y）臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)17臨床檢驗(yàn)

7、方法的評(píng)價(jià)18臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)18臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)19臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)19均值散點(diǎn)圖（X，Y）臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)20均值散點(diǎn)圖（X，Y）臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)20偏差圖：每次測(cè)定的Y均值與X均值 之差-相應(yīng)X均值圖臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)21偏差圖：每次測(cè)定的Y均值與X均值臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)21線性相關(guān)目測(cè)檢查兩種方法間離群值目測(cè)檢查 界限：4倍兩種方法間絕對(duì)偏差的均值 絕對(duì)差值允許范圍: 相對(duì)差值允許范圍:臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)22線性相關(guān)目測(cè)檢查臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)22適合范圍 計(jì)算 r，r2 = 0.95 范圍適合 r2 0.95 擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍線性回歸 計(jì)算 均勻離散度的直觀檢查臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)

8、23適合范圍臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)23臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)24臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)24臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)25臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)25預(yù)期偏差及可信范圍 線性回歸方程 計(jì)算偏差（高、中、低3組）解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果并與內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)比較臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)26預(yù)期偏差及可信范圍臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)26臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)27臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)27定量分析方法的線性評(píng)價(jià)Evaluation of The Linearity of Quantitative Analytical MethodsEP6-P臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)28定量分析方法的線性評(píng)價(jià)Evaluation of The L目的為實(shí)驗(yàn)室中采用定量分析方法的用戶提供評(píng)價(jià)儀

9、器或方法是否滿足廠家線性指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法。用戶可為分析方法設(shè)定線性范圍。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)29目的為實(shí)驗(yàn)室中采用定量分析方法的用戶提供評(píng)價(jià)儀器或方法是否滿定義Assay Range（Linear Range) The range of concentration or activity in which the final output value of a system is proportional to the analyte concentration or activity within a stated tolerance. 臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)30定義Assay Range（Line

10、ar Range)臨床檢定義Linearity:The measure of the degree to which a curve approximates a straight line.It refers to overall system response (i.e., the final analytical answer rather than the instrument output)臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)31定義Linearity:臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)31Scope and Limitations線性是分析方法的一個(gè)特征，不同于準(zhǔn)確性和精密度。線性實(shí)驗(yàn)應(yīng)該使用與待分析物基質(zhì)相似的樣

11、本。線性檢驗(yàn)系統(tǒng)反應(yīng)，包括校準(zhǔn)、線性化技術(shù)、系數(shù)和儀器反應(yīng)。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)32Scope and Limitations線性是分析方法的一使用者的需求用簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)廠家標(biāo)示的線性范圍及定量分析方法的分析范圍。在實(shí)驗(yàn)室中作為方法學(xué)的信息（方法線性）。進(jìn)行線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)33使用者的需求用簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)廠家標(biāo)示的線性范圍及定量分析方儀器的熟悉過程執(zhí)行分析過程的實(shí)驗(yàn)室人員必須掌握儀器操作和維護(hù)程序、樣本準(zhǔn)備方法和校準(zhǔn)。對(duì)較簡(jiǎn)單的設(shè)備需要5天或更少時(shí)間。對(duì)較復(fù)雜的多通道設(shè)備需要5天或更長(zhǎng)時(shí)間。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)34儀器的熟悉過程執(zhí)行分析過程的實(shí)驗(yàn)室人員必須掌握儀器操作和維護(hù)實(shí)

12、驗(yàn)周期在完成儀器熟悉過程后開始實(shí)驗(yàn)并收集數(shù)據(jù)。全部實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi)完成。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)35實(shí)驗(yàn)周期在完成儀器熟悉過程后開始實(shí)驗(yàn)并收集數(shù)據(jù)。臨床檢驗(yàn)方法線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)樣本要求： 最少4個(gè)濃度水平，推薦5個(gè)水平?；|(zhì)效應(yīng)： 應(yīng)使用與病人樣本相似的樣本或注明基質(zhì)類型。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)36線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)樣本要求：臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)36可以使用的樣本病人混合血清 理想的樣本基質(zhì) 高值樣本：高于上限30% 低值樣本：線性低限或更低。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)37可以使用的樣本病人混合血清臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)37可以使用的樣本Patient-Sample Pool Spiked with Analyt

13、e 加入品在沒有干擾物存在時(shí)不需高純度。Pool Diluted with Treated Pool Material 用于降低分析物濃度，如：透析、熱處理、層析。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)38可以使用的樣本Patient-Sample Pool Spi可以使用的樣本Pool Diluted with Saline。 在線性實(shí)驗(yàn)中使用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng)。Commercial Control/Calibrator Material 此類樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實(shí)際的線性結(jié)果。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)39可以使用的樣本Pool Diluted with Salin可以使用的樣本Underdi

14、luted/Overdiluted Commercial Control MaterialAqueous Solutions （一般無基質(zhì)效應(yīng)）Solution in Other Solvents （基質(zhì)效應(yīng)與有機(jī)溶劑相似）臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)40可以使用的樣本Underdiluted/Overdilute推薦的樣本添加材料ALB：白蛋白干粉、human fraction V.乙醇：無水乙醇ALP：純酶AMS：腮腺或胰腺提取物BIL： 膽紅素純品Ca: CaCO3Cl: NaCl臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)41推薦的樣本添加材料ALB：白蛋白干粉、human fract推薦的樣本添加材料CHOL：膽固醇純

15、品或稀釋質(zhì)控品CO2： CaCO3CREA：標(biāo)準(zhǔn)液或高值血清-ALT： 純酶GLU： 右旋糖AST： 純酶ALT： 純酶臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)42推薦的樣本添加材料CHOL：膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品臨床檢驗(yàn)方推薦的樣本添加材料HBD： 純酶LDH： 純酶Lipase： 胰腺提取物Mg： MgCl2P: K(H)2PO4或Na(H)PO4TP： 白蛋白干粉、人或牛的成份VUA： 在得不到高值病人樣本時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或干燥尿酸 。BUN：在得不到高值病人樣本時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或干燥尿素 。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)43推薦的樣本添加材料HBD： 純酶臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)樣本分析順序分析序列應(yīng)為隨機(jī)排列。有顯著攜

16、帶污染時(shí)，應(yīng)用空白隔開樣本。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)應(yīng)至少分析4個(gè)（最好是5個(gè)）不同濃度水平的樣本。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)44樣本分析順序分析序列應(yīng)為隨機(jī)排列。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)44臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)培訓(xùn)課件樣本的準(zhǔn)備足量的混合血清。低濃度混合血清（No1）；高濃度混合血清（No5）血清（No2）：3份“No1” + 1份“No5”血清（No3）：2份“No1” + 2份“No5”血清（No4）：1份“No1” + 3份“No5”臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)46樣本的準(zhǔn)備足量的混合血清。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)46樣本濃度計(jì)算 C1V1 + C5 V5濃度 = - V1 + V5臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)47樣本濃度計(jì)算臨床檢驗(yàn)方法

17、的評(píng)價(jià)47數(shù)據(jù)收集x1 y1-1 y1-2 y1-3 y1-4x2 y2-1 y2-2 y2-3 y2-4x3 y3-1 y3-2 y3-3 y3-4 x4 y4-1 y4-2 y4-3 y4-4x5 y5-1 y5-2 y5-3 y5-4臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)48數(shù)據(jù)收集x1 y1-1 數(shù)據(jù)評(píng)價(jià)觀察有無明顯的數(shù)據(jù)錯(cuò)誤。若有明顯異常時(shí)應(yīng)判斷是否為離群點(diǎn)。如離群點(diǎn)超出2點(diǎn)，則保留全部數(shù)據(jù)或重做全部實(shí)驗(yàn)。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)49數(shù)據(jù)評(píng)價(jià)觀察有無明顯的數(shù)據(jù)錯(cuò)誤。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)49離群點(diǎn)檢查用于特定濃度Y值離群點(diǎn)的檢驗(yàn)。將4個(gè)重復(fù)值從大到小排列（Y1到Y(jié)4）。計(jì)算：D = Y1 - Y4若Y1可能是離群

18、點(diǎn)，計(jì)算： D1 = （Y1 - Y2）/ D若Y4可能是離群點(diǎn)，計(jì)算： D4 = （Y3 - Y4）/ D臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)50離群點(diǎn)檢查用于特定濃度Y值離群點(diǎn)的檢驗(yàn)。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)5離群點(diǎn)判斷判斷值（Critical value)(0.05) 0.765(0.01) 0.889臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)51離群點(diǎn)判斷判斷值（Critical value)臨床檢驗(yàn)方法繪圖和評(píng)價(jià)線性X-Y圖，X軸為分析物濃度。反應(yīng)值或儀器輸出值為Y軸。目測(cè)離群值。 ( Y= aX + b )目測(cè)線性判斷是否符合要求。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)判斷和評(píng)價(jià)。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)52繪圖和評(píng)價(jià)線性X-Y圖，X軸為分析物濃度。臨床檢驗(yàn)方法

19、的評(píng)價(jià)注意：統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和臨床可接受限不同。慎用方法學(xué)線性范圍從0開始。有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評(píng)價(jià)中：最小的線性濃度醫(yī)學(xué)決定水平最大的線性濃度臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)53注意：統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和臨床可接受限不同。臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)53參考文獻(xiàn)Dixon W.J. and Massey F.J. introduction to statistical analysis, 3rd edition, McGraw-Hill Book Co., New York, 1969, pp308-310, 500, 536-537.Weissberg A. and Beatty G.H. Tables of tolerance-limit factors for normal distributions