《液態(tài)活檢技術(shù)及其臨床應(yīng)用》課件

1、【Applicable to lecture training work report】液態(tài)活檢技術(shù)及其臨床應(yīng)用液態(tài)活檢技術(shù)及其臨床應(yīng)用液態(tài)活檢技術(shù)及其臨床應(yīng)用液態(tài)活檢技術(shù)及其臨床應(yīng)用傳統(tǒng)的腫瘤診斷技術(shù)傳統(tǒng)腫瘤診斷技術(shù) 病理檢驗(yàn)診斷影像學(xué)檢測(cè)病理組織檢查 （HE，IHC）血清標(biāo)志物檢測(cè) （CEA,PSA)核磁共振成像（MRI）正電子成像術(shù)（PET-CT）X射線斷層掃描術(shù)（XRAY,CT）超聲波檢測(cè)（B超）內(nèi)窺鏡（Endoscope）分子病理檢測(cè) （FISH, RT-PCR, NGS）傳統(tǒng)的腫瘤診斷技術(shù)傳統(tǒng)腫瘤病理檢驗(yàn)診斷影像學(xué)檢測(cè)病理組織檢查傳統(tǒng)的腫瘤診斷存在的問題早期篩查：標(biāo)記物不統(tǒng)一, 方

2、法不夠靈敏或是特異性不足。臨床診斷: 影像學(xué)：較靈敏，特異性不足，對(duì)病灶大小有要求。病理學(xué)：金標(biāo)準(zhǔn)，但是需要組織樣本，取樣會(huì)帶來(lái)創(chuàng)傷和擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)，很多晚期患者無(wú)法取樣或取樣不足。治療/復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)：影像學(xué)：結(jié)果普遍存在滯后性。血清標(biāo)志物：較靈敏，但是特異性不足；有些類型癌癥沒有合適的血清標(biāo)志物。傳統(tǒng)的腫瘤診斷存在的問題早期篩查：2015年十大突破技術(shù)-液態(tài)活檢技術(shù)MIT Technology Review雜志發(fā)布了2015年度十大突破技術(shù)(10 Breakthrough Technologies 2015)的榜單。液態(tài)活檢技術(shù)光榮上榜。液態(tài)活檢：快速、簡(jiǎn)便、無(wú)痛苦、無(wú)創(chuàng)傷的癌癥血液檢測(cè)方法201

3、5年十大突破技術(shù)-液態(tài)活檢技術(shù)MIT Technol傳統(tǒng)而又嶄新的檢測(cè)技術(shù)-“液態(tài)活檢”“液態(tài)活檢”的定義： A liquid biopsy is a liquid biomarker that can be easily isolated from many body fluids blood, saliva, urine, ascites, pleural effusion, etc.) and, as well as a tissue biopsy, a representative of the tissue from which it is spread.液體活檢是一種液體生物標(biāo)志物

4、，可以容易地從許多體液中分離血液，唾液，尿液，腹水，胸腔積液等），以及組織活組織檢查法，其是從其傳播的組織的代表。 - Christian Rolfo, Biochimica et Biophysica Acta, 2013.傳統(tǒng)而又嶄新的檢測(cè)技術(shù)-“液態(tài)活檢”“液態(tài)活檢”的定義：“液態(tài)活檢”的標(biāo)記物CTCsctDNA(cfDNA)主要指來(lái)自于抗凝的外周血全血，完整的腫瘤細(xì)胞主要指來(lái)自于抗凝血外周血的血漿，片段化的DNA片段一般認(rèn)為來(lái)源于腫瘤原發(fā)灶/轉(zhuǎn)移灶腫瘤瘤細(xì)胞凋亡/壞死釋放的DNA片段活細(xì)胞，一般不宜長(zhǎng)期保存提取純化后的核酸，可以保存可以用于細(xì)胞學(xué)形態(tài)、結(jié)構(gòu)分析；也可以分析細(xì)胞DNA、R

5、NA、蛋白質(zhì)等各類標(biāo)志物一般用于DNA突變監(jiān)測(cè)、甲基化等DNA修飾相關(guān)分析用于病情評(píng)價(jià)、預(yù)后判斷，腫瘤早期診斷潛力不明確用于個(gè)體化治療，腫瘤早期診斷潛力相對(duì)明確還有miRNAs，Peptides， Exosomes（外泌體），Secretomes（分泌物質(zhì)組）等?！耙簯B(tài)活檢”的標(biāo)記物CTCsctDNA(cfDNA)主要指來(lái) ctDNA（circulating tumor DNA），即循環(huán)腫瘤DNA，從字面意思來(lái)講，指的是由腫瘤細(xì)胞釋放到血液循環(huán)系統(tǒng)中的DNA。但是在了解ctDNA之前，我們要知道另一個(gè)與之相關(guān)的概念cfDNA。 cfDNA（cell-free DNA），或者叫血漿游離DNA，是

6、血漿中游離存在的DNA，它們有的來(lái)自于正常細(xì)胞，有的來(lái)自于異常細(xì)胞（如腫瘤細(xì)胞），還有部分來(lái)自于我們外部（如病毒DNA）。 來(lái)源：1、來(lái)自于壞死的腫瘤細(xì)胞2、來(lái)自于凋亡的腫瘤細(xì)胞3、來(lái)自于腫瘤細(xì)胞分泌的外排物什么是ctDNA ? ctDNA（circulating tumo人們逐漸明白，cfDNA中 攜帶腫瘤特有突變的那一小部分DNA，確確實(shí)實(shí)是由腫瘤細(xì)胞釋放出來(lái)的，ctDNA的研究終于與腫瘤關(guān)聯(lián)起來(lái)。ctDNA的發(fā)現(xiàn)人們逐漸明白，cfDNA中 攜帶腫瘤特有突變的那一小部分DN在幾乎所有種類的癌癥中，都檢測(cè)到了ctDNA所帶有的標(biāo)志性突變，并且腫瘤越晚期，病情越嚴(yán)重，腫瘤的惡性程度越高， ct

7、DNA特有突變的頻率就越高。一項(xiàng)針對(duì)15種癌癥進(jìn)行的ctDNA測(cè)序研究顯示，分別有47%，55%，69%，82%的I-IV期癌癥病人中能檢測(cè)到高于一定頻率的ctDNA突變；而另一項(xiàng)使用更高靈敏度測(cè)序技術(shù)的研究則表示，對(duì)于II期以上的病人，均能100%檢測(cè)到突變。不同分期癌癥的ctDNA檢出情況不同癌癥種類的ctDNA檢出情況在幾乎所有種類的癌癥中，都檢測(cè)到了ctDNA所帶有的標(biāo)志性突CtDNA臨床應(yīng)用領(lǐng)域 CtDNA作為一種新的腫瘤標(biāo)志物，將在腫瘤的診斷、治療及預(yù)后檢測(cè)等方面發(fā)揮重要的作用，尤其是對(duì)于一些不具有典型臨床癥狀、檢查無(wú)特異性和診斷困難的腫瘤可避免復(fù)雜的、具有創(chuàng)傷性的活檢。ctDNA

8、來(lái)自腫瘤細(xì)胞的體細(xì)胞突變，不同于遺傳突變的是，遺傳突變存在于體內(nèi)每個(gè)細(xì)胞。因此，ctDNA是一種特征性的腫瘤生物標(biāo)記物，并且還可以被定性、定量和追蹤。CtDNA臨床應(yīng)用領(lǐng)域 CtDNA作為一種新的腫檢測(cè)9名接受特羅凱一線治療的NSCLC患者血漿中ctDNA的EGFR突變情況，一直到患者進(jìn)展至PD。在接受治療后，所有患者血漿中的含有EGFR突變的ctDNA濃度出現(xiàn)下降，其中8人的EGFR突變完全消失。有6名患者的血漿中重新檢測(cè)到EGFR突變的時(shí)間要比進(jìn)展至PD的時(shí)間早4個(gè)月以上！隨著治療，所有9名患者的血漿中均檢出一定量T790M突變。血漿中沒有檢測(cè)到EGFR的3名患者，進(jìn)展至PD期時(shí)，其腫瘤僅

9、在胸腔內(nèi)有緩慢進(jìn)展。利用NSCLC癌患者血漿中的ctDNA檢測(cè)EGFR突變現(xiàn)有技術(shù)用石蠟組織切片樣本只能檢測(cè)60copies以上的突變含量，但是用液態(tài)活檢通過數(shù)字PCR平臺(tái)卻可以檢測(cè)0-60copies之間的突變含量，更早的發(fā)現(xiàn)病情及耐藥性，對(duì)于癌癥患者如果能提前4個(gè)月發(fā)現(xiàn)病情的變化，生存率會(huì)大大提高。- Clin Cancer Res, 2014, march檢測(cè)9名接受特羅凱一線治療的NSCLC患者血漿中ctDNA的著名的JohnsHopkins大學(xué)最近的一項(xiàng)研究揭示了ctDNA的真面目，它其實(shí)是一種具備廣泛應(yīng)用前景、高敏感性、高特異性的腫瘤標(biāo)志物，- Nature Medicine, 2

10、014, May著名的JohnsHopkins大學(xué)最近的一項(xiàng)研究揭示了ctD研究者還在不同級(jí)別的肺癌患者中對(duì)CAPP-Seq進(jìn)行了驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)II-IV期的NSCLC中檢測(cè)敏感性100%，I期的NSCLC中敏感性為50%，而且在各期的肺癌中的特異性均在96%。在II-IV期和所有分期的肺癌中，根據(jù)ROC曲線計(jì)算出的AUC分別為0.99和0.95，所以CAPP-Seq具有強(qiáng)大的檢測(cè)能力。臨床資料表明，ctDNA比例低至0.019%的時(shí)候也還能夠被CAPP-Seq檢測(cè)到。研究者還在不同級(jí)別的肺癌患者中對(duì)CAPP-Seq進(jìn)行了驗(yàn)證，研究者用CAPP-Seq測(cè)定的ctDNA的水平和腫瘤體積（腫瘤體積用C

11、T和PET評(píng)估測(cè)定）之間存在顯著相關(guān)性（p=0.0002，R2=0.89），除了幾例I期肺癌患者的腫瘤體積明顯高于其ctDNA相對(duì)應(yīng)的大小。隨訪研究發(fā)現(xiàn)ctDNA水平隨著疾病進(jìn)展和相應(yīng)的治療，也在不斷變化。對(duì)10例樣本（7例陽(yáng)性和3例陰性）進(jìn)行了腫瘤標(biāo)本（侵入性的活檢）和血液標(biāo)本（非侵入性的CAPP-Seq檢測(cè)）在篩查和基因型（EGFR和KRAS）檢測(cè)中的對(duì)比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CAPP-Seq并不比金標(biāo)準(zhǔn)腫瘤活檢的檢測(cè)效能差，能夠準(zhǔn)確測(cè)定肺癌的基因型。研究者用CAPP-Seq測(cè)定的ctDNA的水平和腫瘤體積（腫ctDNA中PI3KCA的檢測(cè)可用于預(yù)測(cè)原發(fā)性乳腺癌患者的預(yù)后1. ctDNA有PI3KCA

12、檢出的乳腺癌患者，其預(yù)后要比沒有檢出的患者差。- Breast Cancer Res Treat， 2015， March2. ctDNA中PI3KCA拷貝數(shù)高的乳腺癌患者，其預(yù)后要比拷貝數(shù)低的患者差。ctDNA中PI3KCA的檢測(cè)可用于預(yù)測(cè)1. ctDNA有 循環(huán)腫瘤細(xì)胞指從實(shí)體瘤中脫離出來(lái)并進(jìn)入外周血液循環(huán)的腫瘤細(xì)胞。CTC形成、播散及轉(zhuǎn)移的模式圖原發(fā)腫瘤血管生成侵潤(rùn)侵入血管內(nèi)侵入血管外(CTC)血管內(nèi)增殖(CTM)轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移播散腫瘤細(xì)胞（DTC）微轉(zhuǎn)移休眠灶循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）循環(huán)腫瘤微栓（CTM）凋亡的CTC侵潤(rùn)腫瘤細(xì)胞擴(kuò)增血管生成上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)化（MET）轉(zhuǎn)移到骨髓

13、和其他器官 循環(huán)腫瘤細(xì)胞指從實(shí)體瘤中脫離出來(lái)并進(jìn)入外周血液循環(huán)的腫瘤 CTC的稀有性和異質(zhì)性Cancers, 2013；Nature Review of Clinical Oncology, 2010 CTC的稀有性和異質(zhì)性Cancers, 2013；NatCTC的臨床應(yīng)用方向CTC檢測(cè)6、指導(dǎo)用藥3、術(shù)后監(jiān)控1、預(yù)后評(píng)估2、療效監(jiān)測(cè)5、早期篩查4、輔助診斷CTC的臨床應(yīng)用方向CTC檢測(cè)6、指導(dǎo)3、術(shù)后1、預(yù)后2、療用兩種不同的方法檢測(cè)CTC以評(píng)估非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后1. ISET法檢出率為 104/210(50%)，CellSearch法檢出率為82/210(39%)，兩種方法檢出CTC的

14、患者的DFS均明顯劣于無(wú)CTC檢出的患者。2. ISET法檢出 23/210（11%）的患者外周血中含有間質(zhì)化的CTC細(xì)胞，這種細(xì)胞通常意味著更強(qiáng)的侵襲性。ISET法和CellSearch法可以作為CTC檢測(cè)的互補(bǔ)的方法，兩種方法單獨(dú)或者聯(lián)合使用都可以用于檢測(cè)CTC，以評(píng)估肺癌手術(shù)的預(yù)后。 - Int. J. Cancer，2011，Vol129用兩種不同的方法檢測(cè)CTC以評(píng)估非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后1.放療前，65%患者檢出CTC， 平均檢出率9.1CTCs/ml ，明顯高于放療后的CTC平均數(shù)（0.6個(gè)）。有1名在放療后CTC明顯未降低的患者，出現(xiàn)遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。- Cancer J， 2015，

15、 121(1)通過檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者的外周血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞評(píng)價(jià)放療療效放療前，65%患者檢出CTC， 平均檢出率9.1CTCs/mCTC可作為慢性阻塞性肺炎（COPD）患者肺癌早期診斷的新的標(biāo)志物Hofman P.， PLoS One， 2014， Vol9（10）分類COPD患者吸煙者健康人檢測(cè)結(jié)果CTC+CTC-CTC-CTC-人數(shù)51634235當(dāng)時(shí)是否檢測(cè)出癌癥NoNoNoNo5年內(nèi)檢測(cè)出癌癥Yes (5/5)NoNoNoCTC可作為慢性阻塞性肺炎（COPD）患者肺癌早期診斷的新CTC v.s. ctDNA互相排斥還是互為補(bǔ)充？1.可能來(lái)源于非腫瘤組織，特異性低；2. 血漿中含量較豐

16、富，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便；3. 來(lái)自多個(gè)細(xì)胞的更全面的遺傳信息，但一般來(lái)自于凋亡的腫瘤細(xì)胞；4. ctDNA用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)乳腺癌等疾病的進(jìn)展和療效時(shí)，靈敏度更高； 5. 因?yàn)椴缓禺愋酝蛔儯琧tDNA不適用于某些癌癥的檢測(cè)，比如腎癌。V.S.1. 細(xì)胞形態(tài)結(jié)合分子標(biāo)記，特異性高；2. 血液中數(shù)量稀少，檢測(cè)難度大；3. 只能代表腫瘤細(xì)胞的部分亞群，但是是最有侵襲性的一部分細(xì)胞；4. 反向選擇的CTCs檢測(cè)適用于大多數(shù)癌癥種類，但有些癌癥檢出率太低。5. 完整的有活性的腫瘤細(xì)胞個(gè)體，能檢測(cè)對(duì)藥物的反應(yīng)；可以提供新的腫瘤治療靶點(diǎn)，可以幫助理解腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制。CTCsCtDNACTCs與ctDNA檢測(cè)的有機(jī)結(jié)合

17、才是未來(lái)的方向！CTC v.s. ctDNA互相排斥還是互為補(bǔ)充？1.可ctDNA及CTC檢測(cè)與NSCLC的靶向治療療效的相關(guān)性檢測(cè)EGFR突變時(shí)，ctDNA比CTCs更為靈敏，而且與原位腫瘤的一致性更高。- Clin Cancer Res ，2012，April2. CTC數(shù)量的減少更適宜用于作為快速評(píng)價(jià)療效反應(yīng)的標(biāo)記物。ctDNA及CTC檢測(cè)與NSCLC的靶向治療療效的相關(guān)性檢測(cè)文章主要通過數(shù)字PCR比較CtDNA、腫瘤標(biāo)記物及循環(huán)腫瘤細(xì)胞三個(gè)方法的比較，其中CtDNA靈敏度為97%，循環(huán)腫瘤細(xì)胞87%，腫瘤標(biāo)記物靈敏度為78%， 。- NEJM，2013，March文章主要通過數(shù)字PCR

18、比較CtDNA、腫瘤標(biāo)記物及循環(huán)腫瘤細(xì)與腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)相比，CTC及ctDNA檢測(cè)更能反映病情的進(jìn)展。 通過ctDNA及CTC檢測(cè)監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)移性乳腺癌病情進(jìn)展某些病例里，ctDNA檢測(cè)與病情更一致；某些病例里，CTC檢測(cè)與病情進(jìn)展更一致；與腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)相比，CTC及ctDNA檢測(cè)更能反映病情的進(jìn)“液態(tài)活檢” 的檢測(cè)技術(shù)越來(lái)越豐富，“液態(tài)活檢”研究將會(huì)給臨床診斷帶來(lái)革命性的突破；“液態(tài)活檢”是現(xiàn)有病理檢測(cè)技術(shù)的必要和有效的補(bǔ)充；“液態(tài)活檢”的準(zhǔn)確性有待更多的臨床數(shù)據(jù)進(jìn)一步確認(rèn)； 病理科室理應(yīng)成為“液態(tài)活檢”的領(lǐng)軍科室。總結(jié)與展望“液態(tài)活檢” 的檢測(cè)技術(shù)越來(lái)越豐富，“液態(tài)活檢”研究將會(huì)給臨THANK

19、 YOU課程結(jié)束課程結(jié)束SWOT分析模板SWOT分析模板SWOT分析是市場(chǎng)營(yíng)銷管理中經(jīng)常使用的功能強(qiáng)大的分析工具，最早是由美國(guó)舊金山大學(xué)的管理學(xué)教授在80年代初提出來(lái)的：S代表strength(優(yōu)勢(shì))，W代表weakness(弱勢(shì))，O代表opportunity (機(jī)會(huì))，T代表threat(威脅)。市場(chǎng)分析人員經(jīng)常使用這一工具來(lái)掃描、分析整個(gè)行業(yè)和市場(chǎng)，獲取相關(guān)的市場(chǎng)資訊，為高層提供決策依據(jù)，其中，S、W是內(nèi)部因素，O、T是外部因素。它在制定公司發(fā)展戰(zhàn)略和進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手分析中也經(jīng)常被使用。 SWOT的分析技巧類似于波士頓咨詢（BCG）公司的增長(zhǎng)/份額矩陣（The Growth/Share Ma

20、trix）， 什么是SWOT分析SWOT分析是市場(chǎng)營(yíng)銷管理中經(jīng)常使用的功能強(qiáng)大的分析工具，最內(nèi)部環(huán)境優(yōu)勢(shì)Strengths劣勢(shì)Weakness機(jī)會(huì)Opportunities威脅ThreatsSWOT分析傳統(tǒng)矩陣示意圖外部環(huán)境內(nèi)部環(huán)境優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)機(jī)會(huì)威脅SWOT分析傳統(tǒng)矩陣示意圖外部環(huán)境SWOT行業(yè)分析適用范圍業(yè)務(wù)單元及產(chǎn)品線分析競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手分析SWOT企業(yè)自身SBU SWOT分析SWOTSWOT企業(yè)自身SBU SWOT分析主要競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手SBU SWOT分析企業(yè)的內(nèi)外部環(huán)境與行業(yè)平均水平進(jìn)行比較當(dāng)選擇行業(yè)領(lǐng)域中只有少數(shù)競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手時(shí)，可以考慮做SWOT組圖進(jìn)行比較SWOT行業(yè)分析適用范圍業(yè)務(wù)單元及產(chǎn)品線分析競(jìng)

21、爭(zhēng)對(duì)手分析SWSWOT分析步驟分析環(huán)境因素構(gòu)造SWOT矩陣制定行動(dòng)計(jì)劃運(yùn)用各種調(diào)查研究方法，分析出公司所處的各種環(huán)境因素，即外部環(huán)境因素和內(nèi)部能力因素。 將調(diào)查得出的各種因素根據(jù)輕重緩急或影響程度等排序方式，構(gòu)造SWOT矩陣。 在完成環(huán)境因素分析和SWOT矩陣的構(gòu)造后，便可以制定出相應(yīng)的行動(dòng)計(jì)劃。 SWOT分析步驟分析環(huán)境因素構(gòu)造SWOT矩陣制定行動(dòng)計(jì)劃運(yùn)用SW優(yōu)勢(shì)與劣勢(shì)分析（內(nèi)部環(huán)境分析）提高公司盈利性產(chǎn)品線的寬度產(chǎn)品的質(zhì)量產(chǎn)品價(jià)格產(chǎn)品的可靠性產(chǎn)品的適用性服務(wù)的及時(shí)性服務(wù)態(tài)度競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)可以指消費(fèi)者眼中一個(gè)企業(yè)或它的產(chǎn)品有別于其競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的任何優(yōu)越的東西。需要注意的是一定要從消費(fèi)者的角度出發(fā)，尋找

22、與競(jìng)爭(zhēng)者或行業(yè)平均水平比較，公司的產(chǎn)品與服務(wù)有什么優(yōu)勢(shì)/劣勢(shì)；而不是從公司的角度出發(fā)，衡量企業(yè)的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。SW優(yōu)勢(shì)與劣勢(shì)分析（內(nèi)部環(huán)境分析）提高公司盈利性產(chǎn)品線的寬度通過一定努力，建立自身競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)引起競(jìng)爭(zhēng)者注意，開始作出反應(yīng)直接進(jìn)攻企業(yè)優(yōu)勢(shì)所在，或采取更為有力的策略競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)受到削弱，尋找新的策略增強(qiáng)自身競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)根據(jù)SW分析，公司建立并維持自身的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)企業(yè)在維持競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)過程中，必須深刻認(rèn)識(shí)自身的資源和能力，采取適當(dāng)?shù)拇胧?。因?yàn)橐粋€(gè)企業(yè)一旦在某一方面具有了競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)，勢(shì)必會(huì)吸引到競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的注意。而影響企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的持續(xù)時(shí)間，主要的是三個(gè)關(guān)鍵因素：（1）建立這種優(yōu)勢(shì)要多長(zhǎng)時(shí)間? （2）能夠獲得的優(yōu)勢(shì)

23、有多大？（3）競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手作出有力反應(yīng)需要多長(zhǎng)時(shí)間？如果企業(yè)分析清楚了這三個(gè)因素，就會(huì)明確自己在建立和維持競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)中的地位了。通過一定努力，建立自身競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)引起競(jìng)爭(zhēng)者注意，開始作出反應(yīng)直O(jiān)T機(jī)會(huì)與威脅分析（外部環(huán)境分析）環(huán)境發(fā)展趨勢(shì)分為兩大類：環(huán)境威脅環(huán)境機(jī)會(huì)環(huán)境威脅指的是環(huán)境中一種不利的發(fā)展趨勢(shì)所形成的挑戰(zhàn)，如果不采取果斷的戰(zhàn)略行為，這種不利趨勢(shì)將導(dǎo)致公司的競(jìng)爭(zhēng)地位受到削弱。環(huán)境機(jī)會(huì)就是對(duì)公司行為富有吸引力的領(lǐng)域，在這一領(lǐng)域中，該公司將擁有競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。OT機(jī)會(huì)與威脅分析（外部環(huán)境分析）環(huán)境發(fā)展趨勢(shì)分為兩大類：環(huán)OT機(jī)會(huì)與威脅分析方法一：PEST法PEST法政治法律:經(jīng)濟(jì)社會(huì)文化技術(shù)壟斷法律環(huán)境保護(hù)

24、法稅法對(duì)外貿(mào)易規(guī)定勞動(dòng)法政府穩(wěn)定性經(jīng)濟(jì)周期GNP趨勢(shì)利率貨幣供給通貨膨脹失業(yè)率可支配收入能源供給成本人口統(tǒng)比收入分配社會(huì)穩(wěn)定生活方式的變化教育水平消費(fèi)政府對(duì)研究的投入政府和行業(yè)對(duì)技術(shù)的重視新技術(shù)的發(fā)明和進(jìn)展技術(shù)傳播的速度折舊和報(bào)廢速度OT機(jī)會(huì)與威脅分析方法一：PEST法PEST法政治法律:經(jīng)OT機(jī)會(huì)與威脅分析方法一：波特五力模型競(jìng)爭(zhēng)者供應(yīng)商客戶替代者新進(jìn)入者進(jìn)入本行業(yè)有哪些壁壘？它們阻礙新進(jìn)入者的作用有多大？本企業(yè)怎樣確定自己的地位（自己進(jìn)入或者阻止對(duì)手進(jìn)入）？購(gòu)買者轉(zhuǎn)而購(gòu)買替代品的轉(zhuǎn)移成本；公司可以采取什么措施來(lái)降低成本或增加附加值來(lái)降低消費(fèi)者購(gòu)買替代品的風(fēng)險(xiǎn)？供貨商的品牌或價(jià)格特色；供貨商的戰(zhàn)略中本企業(yè)的地位；供貨商之間的關(guān)系；從供貨商之間轉(zhuǎn)移的成本本企業(yè)的部