崗梅水提取物抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

1、崗梅水提取物抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究【摘要】目的研究崗梅水提取物的抗炎作用。方法采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹法、大鼠棉球肉芽腫法和醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高法觀察崗梅水提取物的抗炎作用。結(jié)果崗梅水提取物能明顯抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠所致的大鼠足跖腫脹及炎性組織中PGE2的生成，減少大鼠棉球肉芽腫的形成，同時對醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性增高具有顯著抑制作用。結(jié)論崗梅水提取物具有明顯抗炎作用。【關(guān)鍵詞】崗梅；水提取物；抗炎；大鼠Abstrat:bjetiveTstudytheanti-inflaatryativityftheaterextratfrRadixetau

2、lisIliisAsprellae.ethdsThedelsfxylene-induedearedeainie,hindpaedeaindueditharrageeninrats,granulainduedithttnballinrats,andapillarypereabilityinreaseinduedithaetiaidinieereusedtbservetheanti-inflaatryeffets.ResultsTheaterextratfrRadixetaulisIliisAsprellaeuldinhibitxylene-induedearedeaandapillarypere

3、abilityinreaseinie,hindpaedeaandPGE2inreaseindueditharrageenandgranulainduedithttnballinrats.nlusinTheaterextratfrRadixetaulisIliisAsprellaehassignifiantanti-inflaatryeffets.崗梅是冬青科植物梅葉冬青Ilexasprella(Hk.etAr.)hap.exBenth.的枯燥根及莖。其味苦、微甘、性涼。有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功,常用于感冒發(fā)熱、肺熱咳嗽、熱病津傷口渴等1。崗梅主產(chǎn)于兩廣地區(qū)廣東、廣西，是多種

4、涼茶中的主要藥味，應(yīng)用較廣。但目前尚未見有關(guān)崗梅水提取物抗炎作用的系統(tǒng)報道，筆者對崗梅水提取物進(jìn)展抗炎作用的動物實(shí)驗(yàn)研究，報告如下。1材料與方法1.1藥物及試劑崗梅水提取物采用水煎法自制，方法為：取適量崗梅，每次用8倍量水煎煮1h，共2次，合并2次水煎煮液，濃縮，備用；阿司匹林片：河北石家莊制藥集團(tuán)消費(fèi)，批號：041114；烏拉坦：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑消費(fèi)，批號：E60521；二甲苯：廣東光華化學(xué)廠消費(fèi)，批號：20220218；角叉菜膠購自美國Siga公司,批號：59-0328；青霉素和鏈霉素混合液每毫升含800U青霉素和650U鏈霉素。1.2動物昆明種小鼠，雄性，體質(zhì)量2024g，SPF級，由第

5、一軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物合格證號：2022A063號；SD大鼠，雄性，體質(zhì)量150180g，清潔級標(biāo)準(zhǔn)，由中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物合格證號：粵檢證字2022A070。1.3儀器大鼠足跖容積測定裝置，參照文獻(xiàn)2方法定制。1.4方法1.4.1對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響2取昆明種小鼠60只，隨機(jī)分為正常對照組、模型對照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽性對照藥物阿司匹林組，共6組，每組10只，實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水12h，然后各組小鼠按0.1L/10g體質(zhì)量灌胃給藥，1次/d，共7d，其中正常對照組和模型對照組給等體積蒸餾水。末次給藥后30in，除正常對照組外，其余各組小鼠于右耳正反

6、兩面涂上二甲苯50L致炎，致炎1h后脫頸椎處死動物，用直徑9打孔器沖下左耳和右耳同一部位的圓片，于分析天平上稱重，以兩耳片重差值為炎癥腫脹度。1.4.2對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹及炎癥組織中PGE2前列腺素E2的影響2取SD大鼠50只，隨機(jī)分為空白對照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽性對照藥物阿司匹林組，共5組，每組10只。實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食不禁水12h，然后各組大鼠按1L/100g體質(zhì)量灌胃給藥，1次/d，共7d，其中空白對照組給等體積蒸餾水。末次給藥后1h，先按容積測定方法測量各鼠右踝關(guān)節(jié)以下容積，然后于各鼠右后足跖皮下注射=1%角叉菜膠0.1L致炎，分別于致炎后1h、2h、3h、4h時，按

7、原法測量右踝關(guān)節(jié)以下容積。測完后，頸椎脫臼處死大鼠,于踝關(guān)節(jié)上0.5處剪下炎性腫脹足稱重,將以上剪下的致炎足剝皮,剪碎放入5L生理鹽水中浸泡1h后,離心足浸出液,取上清液0.1L,加0.5lL-1KH-甲醇液2L,在50下異構(gòu)化20in,用甲醇稀釋至5L,于波長278n處測定吸光度(A)值,A值的大小反響PGE2的含量。1.4.3對大鼠棉球肉芽腫的影響3取SD大鼠50只，每只大鼠按1g/kg體質(zhì)量腹腔注射烏拉坦進(jìn)展麻醉，在各鼠的左右蹊部用碘酒消毒，75%乙醇脫碘后，各切開1長小口，用眼科鑷子將已稱重為30g的滅菌脫脂棉球直徑6.58.5一個植入皮下，每個棉球加青霉素和鏈霉素混合液0.3L，以防

8、感染，隨即縫合皮膚。將所有大鼠隨機(jī)分為空白對照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽性對照藥物阿司匹林組，共5組，每組10只，實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食不禁水12h，術(shù)后2h開場按1L/100g體質(zhì)量灌胃給藥，其中空白對照組給等體積蒸餾水，1次/d，共7d。在第8天殺死動物，翻開原切口，將棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出，剝出周圍已包裹肉芽組織的棉球，剔除脂肪組織，在60烘箱放置12h后稱重，減去原棉球重量即為肉芽腫凈重。1.4.4對醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高的影響3取昆明種小鼠50只，隨機(jī)分為空白對照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽性對照藥物阿司匹林組，共5組，每組10只，實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水12h，然

9、后各組小鼠按0.1L/10g體質(zhì)量灌胃給藥，1次/d，共7d，其中空白對照組給等體積蒸餾水。末次給藥后1h，各組小鼠尾靜脈注射0.5%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.1L/10g體質(zhì)量，隨即ip0.6%醋酸0.1L/10g體質(zhì)量，20in后,斷頭放血處死小鼠，腹腔注射6L生理鹽水，輕揉腹部,搜集腹腔洗出液，1000r/in離心5in,取上清液用紫外可見分光光度計于590n處測吸光度值(A值)。1.5統(tǒng)計學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以s表示，采用SPSS統(tǒng)計軟件進(jìn)展統(tǒng)計學(xué)處理,以P0.05為差異有顯著性。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2結(jié)果2.1崗梅水提取物對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響崗梅水提取物中、高劑量組的耳重差與模型組

10、比擬，差異具有顯著性P0.01，說明崗梅水提取物能抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹，提示崗梅水提取物對急性炎性腫脹具有抑制作用。見表1。2.2崗梅水提取物對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹及炎癥組織中PGE2含量的影響低、中、高劑量崗梅水提取物對角叉菜膠致炎后1h、2h、3h、4h時大鼠的足跖腫脹及炎癥組織中PGE2含量增加均具有明顯的抑制作用P0.05或0.01，提示崗梅水提取物對急性炎性腫脹具有顯著抑制作用。見表2。2.3崗梅水提取物對大鼠棉球肉芽腫的影響崗梅水提取物低、中、高劑量組的棉球肉芽腫凈重與空白對照組比擬，差異具有顯著性P0.05或0.01，說明崗梅水提取物組能明顯抑制大鼠棉球肉芽腫的形成，提

11、示崗梅水提取物具有一定的抗炎作用。見表3。表1崗梅水提取物對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響略Tab.1TheeffetsftheaterextratfrRadixetaulisIliisAsprellaenxylene-induedearedeainie與模型對照組比擬：*P0.01；與正常對照組比擬：P0.01(t檢驗(yàn)表2崗梅水提取物對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹及炎癥組織中PGE2含量的影響略Tab.2TheeffetsftheaterextratfrRadixetaulisIliisAsprellaenhindpaedeaandPGE2inreaseindueditharrageeninrats與

12、空白對照組比擬：*P0.05；*P0.01(t檢驗(yàn)表3崗梅水提取物對大鼠棉球肉芽腫的影響略Tab.3TheeffetsftheaterextratfrRadixetaulisIliisAsprellaengranulainduedithttnballinrats與空白對照組比擬：*P0.05；*P0.01(t檢驗(yàn)表4崗梅水提取物對醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高的影響略Tab.4TheeffetsftheaterextratfrRadixetaulisIliisAsprellaenapillarypereabilityinreaseinduedithaetiaidinie與空白對照組比擬：*P0.

13、05；*P0.01(t檢驗(yàn)3討論炎癥是機(jī)體活組織在各種損傷刺激下所表現(xiàn)的以防御為主的反響，炎癥滲出、組織腫脹是炎癥早期的重要指標(biāo)，在炎癥晚期和慢性炎癥期，表現(xiàn)為巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞增生，形成肉芽組織5。本研究采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹法、大鼠棉球肉芽腫法和醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高法等經(jīng)典動物實(shí)驗(yàn)方法，考察崗梅水提取物對炎癥發(fā)生的早期和晚期的影響。結(jié)果說明：崗梅水提取物既可抑制炎癥早期的水腫和滲出,又可抑制炎癥晚期的組織增生和肉芽組織的生成，且能降低部分炎癥組織中PGE2含量,提示崗梅水提取物具有顯著的抗炎作用，且其抗炎機(jī)制之一可能與減少炎癥組織中PGE2合成有關(guān)。本研究對崗梅清熱解毒的成效進(jìn)展了有益的探究，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果為崗梅及相關(guān)涼茶的應(yīng)用提供了一定的實(shí)驗(yàn)根據(jù)，但崗梅水提取物抗炎的作用機(jī)制及水提取物中發(fā)揮抗炎的物質(zhì)根底尚需進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1廣東省食品藥品監(jiān)視管理局.廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)第一冊.