重組白細胞介素2課件

1、重組人白細胞介素-2 Recombinant Human Interleukin-2主要內(nèi)容一、基本信息二、生產(chǎn)制備三、藥物信息四、注意事項五、發(fā)展前景一、基本信息為多肽類免疫增強劑，是一種淋巴因子。刺激B細胞增殖分化和分泌抗體。誘導干擾素和多種細胞因子的分泌用于腫瘤輔助治療和癌性胸、腹水的治療。也可各種自身免疫病的治療。對乙型肝炎、麻風病、肺結核、白色念珠菌感染等具有一定的治療作用。二、生產(chǎn)制備生產(chǎn)制備的方式主要有兩種：1、傳統(tǒng)工藝制備2、基因工程制備其中以第二種方法為主傳統(tǒng)工藝流程雞瘟病毒，PHA,培養(yǎng)液啟動誘生 37人白細胞粉 誘生白細胞培養(yǎng)液滅活病毒，分離,HCl,NaOHpH = 2

2、2.5,pH = 7.27.4,離心上清液35%硫酸銨4 ，24h，離心上清液85%硫酸銨4 ，24h，離心沉淀10mmol/LPBS透析pH = 6.5，24h透析內(nèi)液親和層析上Sepharose柱pH = 6.5親和載體I洗滌0.4mol/LNaCl，PBSpH = 6.5親和載體吸收1.0mol/LNaCl,PBS透析pH = 6.5IL-2組分凝膠層析上Utrogel柱pH = 6.5凝膠載體0.2mol/Ltris-HCl含0.1%PEG2%正丁醇，0.2mol/L甘氨酸pH = 7.6IL-2cDNA文庫的構建IL-2mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄成單鏈cDNA末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶cDNA

3、末端連接dCMP殘基，寡聚（dG）1218為引物DNA聚合酶I雙鏈cDNA蔗糖密度梯度離心cDNA片段G-C加尾法插入到pBR322質(zhì)粒的PstI位點重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌得到IL-2 cDNA文庫三、藥物信息 藥典中有以下三種藥物含有重組人白細胞素介素-2：注射用重組人白細胞介素-2重組人白細胞介素-2注射液注射用重組人白細胞介素-2（ ）重組人白細胞介素-2注射液高效表達人白細胞介素-2的大腸桿菌，經(jīng)過發(fā)酵、分離和高度純化后獲得的重組人白細胞介素-2制成，含有適宜穩(wěn)定劑，不含添加劑和抗生素。外觀為無色或者微黃色澄明液體。注射用重組人白細胞介素-2（ ）高效表達人白細胞介素-2 （ ）基因的大

4、腸桿菌，經(jīng)過發(fā)酵、分離和高度純化后獲得的重組人白細胞介素-2 （ ）凍干制成，含有適宜穩(wěn)定劑，不含添加劑和抗生素。外觀為白色或者微黃色疏松體，加滅菌注射水后迅速溶解為澄明液體。人白細胞介素-2 （ ）基因是人白細胞介素-2基因序列中原125位編碼半胱氨酸的序列突變?yōu)榫幋a絲氨酸的序列后的突變基因用法用量靜脈滴注：10萬一80萬國際單位；皮下注射：50萬100萬國際單位；胸腹腔注射：30萬l00萬國際單位；介入動脈灌注：40萬l00萬國際單位；腫瘤灶局部給藥：根據(jù)瘤體大小決定用藥劑量。一般劑量為一次20萬國際單位(IU)。注：藥物采用氯化鈉溶解。四、注意事項禁忌：1、對本品成份有過敏史的病人。 2、高熱、嚴重心臟病、低血壓者 嚴重心腎功能不全者、肺功能異?；蜻M行過器官移植者。 3、重組人白細胞介素-2既往用藥史中出現(xiàn)過與之相關的毒性反應。五、發(fā)展前景目前研究是對其在用藥前進行化學修飾，主要采用PEG修飾：具體有三聚氯氰活MPEG修飾MPEG 硝基苯基碳酸鹽修飾。修飾物和rhlu-2的投入比、反應環(huán)境的PH、修飾反應的時間、1%PEG4000的加入都會影響到修飾產(chǎn)物的活性。參考文獻1、中國藥典2010版第三部；2、重組人白細胞介素-2 的化學修飾，吉林大學，鄒顯峰；3、重組人白細胞介素-2對人胃癌細胞SG