電針對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷腦組織SOD MDA代謝的影響

1、電針對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷腦組織SOD MDA代謝的影響【摘要】目的觀察電針對(duì)大鼠缺血再灌注損傷腦組織超氧化物歧化酶(sd)、丙二醛(da)含量的影響。方法54只成年sd雄性大鼠按完全隨機(jī)法分為正常組，假手術(shù)組每組各12只，模型組、電針組每組各15只。采用線栓法復(fù)制局灶性腦缺血大鼠模型,于腦缺血再灌注3h、15h、27h動(dòng)態(tài)觀察各組腦缺血大鼠再灌注損傷腦組織sd活性和da含量。結(jié)果各造模組大鼠血漿sd活性比正常組均有所降低,模型組與各組比擬有顯著性差異(p0.05)；各造模組大鼠血漿da的含量比正常組均有所升高,模型組與各組比擬有顯著性差異(p0.01)；電針組與正常組比擬有顯著性差異(p0.

2、05)。結(jié)論電針在某種程度上可以抑制自由基的產(chǎn)生及連鎖反響的發(fā)生，進(jìn)步sd活性，降低da的含量，從而起到去除氧自由基、減輕再灌注損傷、保護(hù)腦細(xì)胞的作用?！娟P(guān)鍵詞】電針大鼠缺血再灌注sdda在缺血再灌注過程中，鈣離子超載，氧自由基的大量形成和脂質(zhì)過氧化的增加是加重腦細(xì)胞損傷的主要病理過程，鈣離子超載與氧自由基的生成和釋放親密相關(guān)，兩者互相促進(jìn)。超氧化物歧化酶superxidedisutase，sd是生物體內(nèi)主要的超氧自由基去除劑，丙二醛alnyl-diadehyde，da是脂質(zhì)過氧化反響的最終產(chǎn)物。腦缺血后脂質(zhì)過氧化反響活潑，da產(chǎn)生增多，sd那么因消耗增多而減少。1文獻(xiàn)曾報(bào)道，電針對(duì)家兔心肌缺

3、血再灌注損傷心功能具有保護(hù)作用，2本實(shí)驗(yàn)通過觀察電針療法對(duì)大鼠缺血再灌注缺血的側(cè)腦組織中超氧化物歧化酶(sd)活性及丙二醛(da)含量的影響，以討論電針對(duì)腦組織缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果報(bào)道如下。1材料1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：選用成年sd大鼠54只，雄性，體重35040克。清潔級(jí)，由上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2主要實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備：g-6805-h電針治療儀上海金山匯豐電子器材廠制造，d-500型半導(dǎo)體激光治療儀上海曼迪森科貿(mào)，722-光柵分光光度儀上海精細(xì)科學(xué)儀器，hita-hi冷凍離心機(jī)hitahikkiled，fj-200高速分散勻質(zhì)機(jī)上海標(biāo)本模型機(jī)廠，x-80a型vr

4、tex上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠。1.3主要試劑：sd、da試劑盒，購(gòu)自南京建成生物工程研究所2方法2.1動(dòng)物分組：動(dòng)物常規(guī)飼養(yǎng)1周后，采用完全隨機(jī)法分為4組，即正常組、假手術(shù)組、模型組、電針組。正常組，假手術(shù)組每組各12只，模型組、電針組每組各15只。2.2模型制備：1線栓制備：取進(jìn)口4-0號(hào)單股尼龍線3.0,一端加熱使之成為光滑的圓球形，圓球直徑0.244-0.249，生理鹽水沖洗，置于1%的肝素鈉溶液，備用。2模型制備：參照zea-lnga的方法制備大鼠大腦中動(dòng)脈缺血/再灌注模型a，在原方法的根底上有所改良。缺血1.5h后再次麻醉，拔出栓線，使缺血區(qū)血流再灌。(3)步驟：麻醉：10%的水合氯醛0

5、.3l/100g腹腔注射麻醉。固定：仰臥手術(shù)臺(tái)，充分暴露大鼠頸部皮膚。手術(shù)：頸部正中切口，從兩側(cè)頜下腺之間剪開淺筋膜，游離甲狀腺右葉，顯露右側(cè)胸鎖乳突肌，鈍性別離胸鎖乳突肌與胸骨舌骨肌間的肌間隙，別離右側(cè)頸總動(dòng)脈a，頸外動(dòng)脈ea，頸內(nèi)動(dòng)脈ia，用電凝器電凝ea的分支，游離ea主干一段，在ea深面穿二條細(xì)線，近心端打一活結(jié)，并推向ea根部，遠(yuǎn)心端結(jié)扎ea，沿ia向下別離翼額動(dòng)脈ppa。用小動(dòng)脈夾夾閉a、ia，在ea游離主干段兩線結(jié)之間用弧形剪剪斷，滴0.03l濃度為2.4106u/l的肝素鈉溶液，然后將制備好的栓線插入ea，經(jīng)a分叉處通過ia，入顱腦至大腦前動(dòng)脈aa，深度為18.50.5,再灌注

6、時(shí)再次麻醉，拔出線栓即可。大腦中動(dòng)脈栓塞后1.5h恢復(fù)血供，再灌注3h。2.3處理及治療方法：正常組、假手術(shù)組、模型組同樣抓取，不進(jìn)展治療。電針組：選百會(huì)、內(nèi)關(guān)、環(huán)跳、足三里，g-6805-h電針儀，采用疏密波，頻率為4-20hz，強(qiáng)度以引起穴位周圍組織細(xì)微顫抖為度，在示波器監(jiān)視控制下的電流強(qiáng)度為3a，每次治療25分鐘，栓線拔出后再灌注3h，開場(chǎng)第一次治療，12h治療1次，共治療3次。2.4取材與樣品根底處理：治療完成24h后，斷頭取腦，冰浴環(huán)境下將大腦從視穿插后1.5處切開，取缺血側(cè)前半腦稱重，放入10150的玻璃試管中，按重量/體積1：10的比例參加生理鹽水，-20保存，標(biāo)測(cè)時(shí)制成10%的

7、腦勻漿。sd活力、da分別采用黃嘌呤氧化酶發(fā)光法、硫代巴比妥酸t(yī)ba法，采用721可見分光光度計(jì)測(cè)定，用考馬斯亮藍(lán)測(cè)定蛋白含量。2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用spss10.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)展分析處理,計(jì)量數(shù)據(jù)以平均值標(biāo)準(zhǔn)差表示。各組間差異采用單因素方差分析。3結(jié)果電針對(duì)大鼠缺血的側(cè)腦組織sd、da活性的影響：表1示，各造模組大鼠血漿sd活性比正常組均有所降低，模型組與各組比擬有顯著性差異(p0.05)；各造模組大鼠血漿da的含量比正常組均有所升高，模型組與各組比擬有顯著性差異(p0.01)；電針組與正常組比擬有顯著性差異(p0.05)。表1：各組大鼠腦組織sd、ad的變化x-s注：與模型組比擬p0.05

8、，p0.01；與正常組比p0.054討論研究發(fā)現(xiàn),腦缺血后可產(chǎn)生大量的自由基，引起腦組織的脂質(zhì)過氧化，導(dǎo)致血腦屏障損害和神經(jīng)元凋亡或死亡，自由基的損害作用已成為腦缺血的關(guān)鍵性病理環(huán)節(jié)之一。3國(guó)內(nèi)外研究均認(rèn)為，氧自由基損傷是腦缺血再灌注損傷的最重要而肯定的原因之一，許多文獻(xiàn)曾報(bào)道，大鼠腦缺血再灌注過程中，腦組織的sd活力降低，而ad含量升高。本實(shí)驗(yàn)也證明了這一點(diǎn)，術(shù)后24h，腦組織內(nèi)的sd活性明顯下降，而da程度明顯升高，說明這些腦區(qū)的氧自由基生成增多，直接破壞了抗氧化酶，脂質(zhì)過氧化程度加劇。給予電針治療后，sd活性升高，da程度降低，說明針灸可通過去除自由基，或減輕氧自由基對(duì)抗氧化酶的破壞作用，從而以到達(dá)保護(hù)缺血腦細(xì)胞的效果。參考文獻(xiàn)1張平，張本恕，蘇立凱，等.粉防己堿對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦組織鈣離子和氧自由基的作用j.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2022,19(14):2098-2