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文檔簡介

1、PAGE8DNA重組技術(shù)的基本工具和基因工程的基本操作程序題組一基因工程及基本操作分子重組,并且在大腸桿菌體內(nèi)表達(dá)成功。請根據(jù)圖回答問題:(1)此圖表示的是采取_合成基因的方法獲取_基因的過程。(2)圖中DNA是以_為模板,_形成單鏈DNA,在酶的作用下合成雙鏈DNA,從而獲得了所需要的基因。(3)圖中代表_DNA,含_基因。(4)圖中表示_。分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化,圖中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是()ABCD3下列關(guān)于基因工程的敘述,不正確的是(多選)()A基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)槟康幕駼細(xì)菌質(zhì)粒是基因工程常用的運(yùn)載體,用另一種處理運(yùn)載

2、體DNAD為培育成抗除草劑的作物新品種,導(dǎo)入抗除草劑基因時只能以受精卵為受體題組二基因工程的操作程序4下圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程,請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題。(1)若限制酶的識別序列和切點(diǎn)是GATC,限制酶識別序列和切點(diǎn)是GGATCC,那么在過程中,應(yīng)用限制酶_切割質(zhì)粒,用限制酶_切割抗蟲基因。(2)將通過過程得到的大腸桿菌涂布在含有_的培養(yǎng)基上,若能夠生長說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒,反之則說明沒有導(dǎo)入。(3)要確定抗蟲基因?qū)牒?,是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá),需進(jìn)行檢測和鑒定工作,則在個體水平上的鑒定過程可簡述為:_。經(jīng)篩選分析,該植株細(xì)胞中含有一個攜帶抗蟲基因的DNA片段,因此可以把它看

3、作是雜合子。理論上,該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1中,仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的_。(4)過程所用的現(xiàn)代生物技術(shù)稱為_,從遺傳學(xué)角度來看,據(jù)細(xì)胞通過過程,能形成棉植株的根本原因是細(xì)胞具有_。5干擾素是病毒侵入人體后由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一種免疫活性物質(zhì),它具有廣譜抗病毒的作用。利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)干擾素的流程如下:(1)過程產(chǎn)生的物質(zhì)A是_,cDNA文庫_(大于/小于)人的基因組文庫。(2)過程用到的工具酶是_,過程需先用_處理受體細(xì)胞,過程通常采用_技術(shù)。(3)過程和的關(guān)鍵技術(shù)分別是_、_。(4)基因工程的核心步驟是圖中的_(填標(biāo)號)。題組三綜合題6(2022安徽理綜31)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基

4、因的能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用_酶短時處理幼蠶組織,以便獲得單個細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_和_之間。(3)采用H、Hind、Sma直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答問題。(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用_限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含_的培養(yǎng)基上進(jìn)行。(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是_(填字母代號)。A啟動子復(fù)制原點(diǎn)(3)過程可采用的操作方法是_(填字母代號)。大

5、腸桿菌轉(zhuǎn)化細(xì)胞融合(4)過程采用的生物技術(shù)是_。(5)對早期胚胎進(jìn)行切割,經(jīng)過程可獲得多個新個體。這利用了細(xì)胞的_性。(6)為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá),可采用_(填字母代號)技術(shù)?;蛐蛄蟹治鯟抗原抗體雜交參考答案1(1)人工胰島素原目的(2)胰島素原信使RNA逆轉(zhuǎn)錄(3)重組胰島素原(4)將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞【解析】本題是對基因工程操作程序的考查。操作時,首先要獲取目的基因,然后讓目的基因與載體結(jié)合構(gòu)建成重組DNA分子,再通過一定方法把重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞使其擴(kuò)增和表達(dá)(限制酶可在特定位點(diǎn)對DNA分子進(jìn)行切割;DNA聚合酶在DNA分子復(fù)制時將脫氧核苷酸連接成脫氧核苷酸鏈;DN

6、A連接酶可將限制酶切開的磷酸二酯鍵連接在一起;解旋酶的作用是將DNA雙鏈解開螺旋,為復(fù)制或轉(zhuǎn)錄提供模板。)(基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因;質(zhì)粒是基因工程常用的運(yùn)載體;通常用同一種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體,以獲得相同的黏性末端;受體細(xì)胞可以是受精卵,也可以是體細(xì)胞。D為培育成抗除草劑的作物新品種,導(dǎo)入抗除草劑基因時只能以受精卵為受體。)4(1)(2)四環(huán)素(3)讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉片,觀察害蟲的存活情況,以確定其是否具有抗蟲性狀eqf3,4(4)植物組織培養(yǎng)發(fā)育成完整個體的全部遺傳物質(zhì)【解析】本題極易出錯的部分有:在第(1)小題中沒有看清目的基因插入的位置,從而不能確定用限制酶還

7、是來切割質(zhì)粒還是切割抗蟲基因。第(3)小題檢測抗蟲性狀在個體水平上是否表達(dá),應(yīng)該讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉片,觀察害蟲的存活情況,這個地方也有出錯的,主要沒有看清是在哪個水平上進(jìn)行檢測的。在切割質(zhì)粒時應(yīng)遵循一個原則:不能同時將兩個標(biāo)記基因切開,至少保留一個,所以只能用酶切割,而從目的基因兩側(cè)堿基序列可知,只能用酶才得到含目的基因的DNA片段。如果導(dǎo)入了重組質(zhì)粒,此時重組質(zhì)粒中四環(huán)素抗性基因能正常表達(dá),而氨芐青霉素抗性基因已被破壞,所以涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上,能夠生長的話,說明導(dǎo)入了重組質(zhì)粒(普通質(zhì)粒)。如果把攜帶一個抗蟲基因的DNA片段看作雜合子,可以認(rèn)為是Aa,自交產(chǎn)生的F1中仍具有抗蟲特

8、性的植株占總數(shù)的比例為eqf3,4。把一個細(xì)胞培養(yǎng)成一個植株的技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng)。5(1)mRNA小于(2)限制性內(nèi)切酶DNA連接酶鈣離子顯微注射(3)胚胎移植核移植(4)【解析】(1)cDNA來自mRNA的逆轉(zhuǎn)錄或根據(jù)mRNA的堿基序列人工合成,cDNA文庫小于基因組文庫。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體用到限制酶和DNA連接酶。將目的基因?qū)氪竽c桿菌須用Ca2處理受體細(xì)胞;導(dǎo)入動物細(xì)胞用顯微注射法。(3)過程的關(guān)鍵技術(shù)是胚胎移植,過程的關(guān)鍵技術(shù)是細(xì)胞核移植。(4)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建,即。6(1)胰蛋白(或膠原蛋白)(2)啟動子終止子(3)對干擾素基因特異的DNA引物對TaqDNA聚合酶(4)擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長的附著面積【解析】本題綜合考查基因工程、細(xì)胞工程和H氨芐青霉素(2)A(3)C(4)胚胎移植技術(shù)(5)全能(6)C【解析】(1)由圖示可知:需用Hind和BamH限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因,因酶切后tetR四環(huán)素抗性基因結(jié)構(gòu)被破壞而ampR氨芐青霉素抗性基因結(jié)構(gòu)完好,故用含氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基可篩選含有重組載體的大腸桿菌。(2)啟動子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點(diǎn),可調(diào)控基因的特異性表達(dá)。(3)過程表示把重組載體導(dǎo)

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