植物生化專題酶學(xué)復(fù)習(xí)題目參考

1、植物生化專題酶學(xué)復(fù)習(xí)題參照答案一、名詞解說：構(gòu)造域：但它又不等同于蛋白質(zhì)的功能域，有時一個功能域由幾個構(gòu)造域構(gòu)成。模體：一個構(gòu)造域可包含數(shù)個模體，如催化構(gòu)造域可包含能和幾種不一樣底物相聯(lián)合的模體，調(diào)理構(gòu)造域也可含有和不一樣調(diào)理物聯(lián)合的模體。激酶：信號肽：10-30，疏水，堿性，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)前序列：約2030個殘基，酸性，帶羥基線粒體。審定位序列：在DNA聯(lián)合構(gòu)造域可能有一個特異序列的氨基酸片斷，它起著介導(dǎo)素受體復(fù)合物與染色質(zhì)中特定的部位相聯(lián)合，發(fā)揮審定位信號的作用。次生性同工酶：近來幾年來將同一基因生成的不一樣mRNA所翻譯出來的酶蛋白也列入同工酶的范圍，但酶蛋白合成后經(jīng)不一樣種類的共價修飾（如糖化

2、加工、側(cè)鏈基團改變）而造成的多種酶分子形式，也有人稱其為次生性同工酶(secodaryisozyme)。原級同工酶：基因性同工酶(geneticisozyme)又稱原級同工酶(primaryisozyme)，是指在基因水平上產(chǎn)生同工酶。多基因位點同工酶：指一組同工酶的肽鏈由染色體上不一樣位點的基因所編碼，不一樣基因可位于不一樣染色體或同一染色體的不一樣位點，相互相互獨立，受不一樣要素調(diào)控，能夠不一樣時表達。復(fù)等位基因酶：從集體看法看，同一基因位點可出現(xiàn)多個不一樣的等位基因，稱為復(fù)等位基因，后者編碼的同工酶就成為復(fù)等位基因酶，等位基因酶：好像工酶的基因位點發(fā)生遺傳變異，致使編碼酶蛋白上氨基酸的置

3、換或缺失，這種遺傳變異而還可以催化相同反響（也可能致使活力喪失）的同工酶，稱為等位基因酶。必要殘基：酶活性中心的一些化學(xué)基團為酶發(fā)揮催化作用所必要，故稱為必要基團。構(gòu)造殘基：這些基團與保持整個酶分子的空間構(gòu)象有關(guān)，可使活性中心中各有關(guān)基團保持于最適的空間地點，間接地對酶的催化活性發(fā)揮其必不行少的作用，有人稱之為構(gòu)造基團（或殘基）。差異標(biāo)記：第二信使：細胞表面受體接受細胞外信號后變換而來的細胞內(nèi)信號稱為第二信使,而將細胞外的信號稱為第一信使(firstmessengers)。模擬酶：模擬酶一般是在基本骨架相連結(jié)酶活性中心的化學(xué)基團而形成的，這些基團能夠聯(lián)合底物，并能催化底物。抗體酶：抗體酶(ab

4、zyme)又稱為催化性抗體(catalyticantibody)，是一類擁有生物催化功能的抗體分子。抗體(antidody)是由抗原(antigent)引誘產(chǎn)生的與抗原擁有特異性聯(lián)合功能的免疫球蛋白。修飾酶：將酶分子中的AA殘基的側(cè)鏈基團與化學(xué)修飾試劑共價連結(jié)，使酶分子的構(gòu)造和性質(zhì)發(fā)生改變。蛋白激酶C（PKC）是一種和細胞外信號跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)以及細胞分化和增殖親密有關(guān)的重要酶類，已發(fā)現(xiàn)起碼有12種同工酶（表7）。小G蛋白小分子G蛋白為單鏈構(gòu)造，Mr一般為2000030000，與異三聚體G蛋白相同擁有GTP、GDP聯(lián)合能力，以及GTP聯(lián)合活化，GDP聯(lián)合失活的特色。連接蛋白連接蛋白(adaptin,A

5、P)參加披網(wǎng)格蛋白小泡組裝的一種蛋白質(zhì),分子量為100kDa,在披網(wǎng)格蛋白小泡組裝中與受體的細胞質(zhì)構(gòu)造域相互作用,起連接作用。脂類信號脂類小分子，擁有第二信使的作用。參與產(chǎn)生脂類信號分子的酶類主要有各樣磷脂酶和磷脂酰肌醇-3-激酶。酶的活性中心：酶蛋白的催化構(gòu)造域中和底物結(jié)歸并發(fā)揮催化作用的部位，是酶顯示活性直接有關(guān)的地區(qū)。二、代號：PKA蛋白激酶A（PKA）Pyk丙酮酸激酶（PyK）LDH乳酸脫氫酶（LDH）DG甘油二酯ST唾液酸轉(zhuǎn)移酶（ST）DPP二肽酰肽酶TPK酪氨酸蛋白激酶(TPK)PMA佛波酯SRP信號顆粒（SRP）信號肽辨別體GST谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)G蛋白G蛋白，即鳥苷三

6、磷酸聯(lián)合蛋白ERK細胞外信號調(diào)理激酶cAMP環(huán)腺苷酸MEK甲乙酮Grb2聯(lián)合蛋白2GAPGTP酶激活蛋白GNRP鳥苷酸開釋蛋白AC活化因子GC氣相色譜法)PI-PLC磷脂酰肌醇專一性磷脂酶C(PI-PLC)SH2Src同源地區(qū)-2SH3Src同源地區(qū)-3PI-3K磷脂酰肌醇-3激酶EF-手作為PH構(gòu)造和酶的其余部分的柔性連結(jié)區(qū)，也與聯(lián)合Ca2+有關(guān)。PTP2（酪氨酸蛋白磷酸酯酶）RTPGEF鳥苷酸互換因子CaM鈣調(diào)素，鈣調(diào)蛋白Gq含a亞基的G蛋白PLA2磷脂酶A2(PLA2)IP3三磷酸肌醇（IP3）PIP3：磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸；PA(磷脂酸)LPA（溶血磷脂酸）CaLB(Ca2+

7、依靠性磷脂聯(lián)合域)LPC（溶血磷脂酰膽堿）磷脂酰肌醇（PI）蛋白激酶G（PKG）Grp(生長因子受體聯(lián)合蛋白)磷脂酶C-（PLC-），磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)F-2,6-BP(2,6-二磷酸果糖)生物素羧化酶(BC)、羧基轉(zhuǎn)移酶（CT）接觸因子（CF）鈣聯(lián)合模體（CaBS）互補DNA（cDNA）佛波酯（PMA）糖基化磷脂肌醇（GPI）二、簡答題：6種膜蛋白的構(gòu)造特色。好多蛋白質(zhì)定位于細胞的膜質(zhì)構(gòu)造上。發(fā)現(xiàn)有6型膜蛋白（圖1），以不一樣的方式鑲嵌或掛靠在膜構(gòu)造的脂質(zhì)中，此中許多屬于酶蛋白或擁有酶活力，它們大部分包含4個構(gòu)造域（或區(qū)），即膜外構(gòu)造域、跨膜構(gòu)造域、莖區(qū)和催化構(gòu)造域。I型膜蛋白

8、如存在于細胞表面的好多激素或生長因子的受體、抗原辨別分子和粘附分子等，其N端在膜外，接著是一段疏水的跨膜構(gòu)造域，由2030所氨基酸構(gòu)成的螺旋10余個氨基酸構(gòu)成的折疊，肽鏈進入胞內(nèi)后，有一段莖區(qū)連結(jié)著分子較大的端催化構(gòu)造域。型膜蛋白一種狀況是細胞質(zhì)膜上的酶，它和I型的差異主假如C端在膜外，而N端在膜內(nèi)胞質(zhì)中。另一狀況是和細胞內(nèi)膜質(zhì)構(gòu)造相聯(lián)合的酶，其N端雖也在胞質(zhì)中，但C端則伸入膜構(gòu)造的管腔中。3.型膜蛋白是一類多次跨膜蛋白（無論N端或C端在膜外），包含視紫紅質(zhì)等和G蛋白偶聯(lián)的細胞膜受體和細胞色素P450及大腸桿菌中的某種肽酶等。4.型膜蛋白主假如一些跨膜的離子通道或小分子親水物質(zhì)的通道，由數(shù)個跨

9、膜的亞基構(gòu)成。亞基間并沒有肽鏈或其余共價連結(jié)。5.型膜蛋白膜蛋白并不是嵌入膜中，而是經(jīng)過糖基化的磷脂肌醇（GPI）將蛋白質(zhì)錨定于脂質(zhì)構(gòu)成的膜中。型膜蛋白1996年發(fā)現(xiàn)了一種新式的既有多次跨膜，其以端連結(jié)GPI糖基磷酯酰肌醇的膜蛋白，當(dāng)前僅發(fā)現(xiàn)膜橋蛋白(ponticulin)一種。V型膜蛋白與GPI的連結(jié)方式。型膜蛋白膜蛋白并不是嵌入膜中，而是經(jīng)過糖基化磷脂肌醇（GPI）將蛋白質(zhì)錨定于脂質(zhì)構(gòu)成的膜中，如細胞表面的一些水解酶，包含乙酰膽堿酯酶，堿性磷酸酶和豬腎二肽酶等。這些酶的C尾端（常是小側(cè)鏈殘基，如Gly、Ser、Asp、Asn、Cys）羧基和磷糖的另一端則連于磷酯肌醇（PI）的肌醇-6位羥基

10、上。PI其實是膜質(zhì)的一部分，其長鏈脂酰或脂烴則堅固嵌入膜中。PKG、PKC、肌球蛋白輕鏈激酶的構(gòu)造和性質(zhì)的異同點。如在各樣蛋白激酶中，除cAMP依靠的蛋白激酶A（PKA）有分開的催化亞基調(diào)理亞基外，這兩個不一樣功能的地區(qū)一般都存在于一條肽鏈中，形成催化構(gòu)造域和調(diào)理構(gòu)造域，此中cGMP依靠的蛋白激酶GPKG），鈣甘油二酯，佛波酯-磷脂依靠的蛋白激酶C（PKC）其調(diào)理構(gòu)造域都位于N側(cè)，催化構(gòu)造域位于C側(cè)，而肌球蛋白輕鏈激酶則其調(diào)理域在C側(cè)。它們的催化域（連同PKA的催化亞基）都有極大的同源性，有從N端到C端擺列的ATP聯(lián)合區(qū)段、AspPheGly(DFG)催化位點和蛋白質(zhì)底物聯(lián)合區(qū)段。而它們的調(diào)理

11、域則有大差異，分別與不一樣的激活劑聯(lián)合。弗林PrE的四肽模體和酸性模體的氨基酸序列及功能。弗林蛋白酶（Furin）是一種蛋白質(zhì)前體加工酶，它借跨膜構(gòu)造定位于外側(cè)高爾基體網(wǎng)絡(luò)（TGN），也可存在于細胞膜及胞外基質(zhì)中。但它在胞外的逗留十分短暫，可經(jīng)過胞飲作用而從頭返回TGN。弗林蛋白酶的胞質(zhì)構(gòu)造域中有兩個分開的四肽模體和酸性模體，前者是位于762765位的YKGL，后者為774783的CPSDSEEDEG。四肽模體在人、鼠、牛根源的弗林蛋白酶中完好守舊，且廣泛存在于各樣能經(jīng)過胞飲門路循環(huán)于細胞膜與高爾基體之間的膜蛋白中，它們都處于相距跨膜構(gòu)造域2030氨基酸殘基的胞質(zhì)區(qū)。酸性模體也可能在酶定位于膜

12、構(gòu)造中起作用。因為一些膜蛋白，如運鐵蛋白受體、表皮生長因子受體、低密度脂蛋白受體以致溶酶體的酸性磷酸酶中也存在這種酸性模體，說明擁有不一樣功能的酶只需有某一相同或相像的性能，便可能存在這種同源性的酸性模體。另一風(fēng)趣的例子是磷脂酶A2、磷脂酶C、蛋白激酶C和GTP酶活化蛋白（GAP）等都可和膜聯(lián)合與受鈣激活，都含有高度同源的Ca2+依靠性膜連結(jié)模體。構(gòu)造中的模體對酶活性的調(diào)理？蛋白激酶C（PKC）的N端1/2肽段為調(diào)理構(gòu)造域，慣例型PKC（包含、四種亞型或同工酶）含有3個與酶活力調(diào)理有關(guān)的模體假底物模體PS，此中心肽段為ArgLys(或Arg、Gln)GlyAlaLen(或Ile、Val、Arg

13、)Arg六肽，和被PKC磷酸化的底物的肽段ArgXXSerXArg基真相同，不過第4位的Ser（磷酸化位點）換以Ala，故不可以被自己催化而成為假底物。但這個假底物序列可和酶催化中心的底物聯(lián)合位點相聯(lián)合而阻斷真底物和酶的聯(lián)合。兩個富含Cys的模體（CRR-1和CRR-2），CRR-1能和激活劑甘油二酯（DG）或佛波酯（PMA）聯(lián)合，CRR-2模體中的Asn在聯(lián)合中起重要作用，可增添DG或PMA的結(jié)協(xié)力。DG或PMA和CRR模體聯(lián)合后，可惹起酶的變構(gòu)，改變肽鏈的折疊狀態(tài)，排除假底物序列對催化中心的阻斷作用而致使酶的激活。鈣聯(lián)合模體CaBS,DG對酶的激活需要Ca2+的存在，因Ca2+和鈣聯(lián)合區(qū)聯(lián)

14、合后可增強酶的激活。新式PKC(、亞型)因為缺少CaBS模體而不受Ca2+激活，但仍受DG及磷脂激活。PKC的C端1/2為催化地區(qū)，除有ATP聯(lián)合模體（圖2中的ABS）外，另有蛋白質(zhì)聯(lián)合模體（PBS）和催化位點AspPheGly(DFG)。蛋白質(zhì)工程與化學(xué)修飾法比較有什么長處？蛋白質(zhì)工程是近來幾年來發(fā)展的研究酶必要基團和活性中心的最初進方法，將酶相應(yīng)的互補DNA（cDNA）定點突變，此突變的cDNA表達出只有一個或幾個氨基酸置換的酶蛋白，再測定其活性就能夠知道被置換的氨基酸能否為活力所必要。本法有上述化學(xué)修飾方法無可比較的長處：可改變酶蛋白中任一氨基酸而不影響其余同類殘基；可改變疏水殘基，使其

15、轉(zhuǎn)變結(jié)婚水或另一疏水殘基；可同時改變活性中心內(nèi)外的幾個氨基酸，研究這些氨基酸之間的相互關(guān)系；可人工造成一個或幾個氨基酸的缺失或插入，認(rèn)識肽鏈的縮短或延伸對酶活力的關(guān)系；可定點改變酶蛋白的磷酸化位點或糖化位點，研究磷酸化或糖化對酶構(gòu)造和功能的影響；不會惹起底物和活性中心聯(lián)合的立體阻礙?；瘜W(xué)修飾使被修飾的氨基酸殘基變大，可致使底物和活性中心聯(lián)合的立體阻礙。酶活性中心最常有的AA有哪些？用化學(xué)修飾方法測出在大部分酶的活性中心上有8種氨基酸的頻次最高，即Ser、His、Cys、Tyr、Try、Asp、Clu、Lys。S（絲氨酸）、C（半胱氨酸）、H（組氨酸）、K（賴氨酸）、T（蘇氨酸）、Y（酪氨酸）、

16、W（色氨酸）、D（天冬氨酸）、E（谷氨酸）舉出各細胞器的標(biāo)記酶。寫出溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、過氧化體等細胞器的分揀信號？定位于溶酶體的蛋白:必定的糖鏈構(gòu)造就成為溶酶體蛋白的投送信號甘露糖6磷酸（Man-6-P）。過氧化體中一些酶蛋的的C端常含SerLysLeu(SKL)三肽，可能是過氧化體的投送信號，此中Lys可被Arg或His代替而不影響投送，但Leu是十分必要的。在一些滯留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的蛋白質(zhì)，其尾端常帶有KDEL四肽，被以為是滯留信號，如應(yīng)投送到溶酶體的組織蛋白酶D的C端如接上KDEL，則此酶滯留于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。在溶菌酶的C端接上KDEL，溶菌酶也滯留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中而不再被分泌，帶有KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白（如

17、Bip）還可以和一些肽鏈折疊不正確的蛋白質(zhì)聯(lián)合使后者也不被投送。以上各種均說了然蛋白質(zhì)或酶肽鏈中不一樣部位的某些氨基酸區(qū)段是它們投送到不一樣亞細胞構(gòu)造的信號，是定位的決定性要素。蛋白質(zhì)的一級構(gòu)造沒有發(fā)生改變，它的空間構(gòu)象與功能能否改變？為何喪失活力變異的同工酶可用天然酶的抗體予免得疫測定？如氨基酸改變在活性中心或鄰近可有動力學(xué)性質(zhì)的不一樣，但它們在免疫性質(zhì)上常常是可交錯的，故喪失活力的變異酶可用天然酶的抗體予免得疫測定。酶整體構(gòu)象改變和酶活力喪失能否同步？近來幾年來的研究證明，酶蛋白變性時間與構(gòu)象的改變和活力的變化其實不是同步的。用紫外分光光譜、熒光光譜、圓二色光譜、光散射和測定內(nèi)埋巰基裸露等

18、手段研究肌酸激酶、核糖核酸酶、乳酸脫氫酶及3-磷酸甘油醛脫氫酶等在鹽酸胍和尿素溶液中變性不一樣的構(gòu)象變化，即肽鏈去折疊的過程，同時測定酶活力的降落，發(fā)現(xiàn)酶活力的喪失常常先于酶分子的整體構(gòu)象變化。用熱變性法也相同證明酶活力的降落在前，整體構(gòu)象變化在后。因熱變性時無化學(xué)變劑存在，故活力的第一喪失不是變性劑對酶克制的結(jié)果。進一步用探測活性中心構(gòu)象的方法來研究，如3-磷酸甘油醛脫氫酶活性中心的巰基被甲羧基化后再經(jīng)激發(fā)光照，可在活性中生成擁有熒光的NAD+共價聯(lián)合物，可借熒光發(fā)射光譜的改變來探測活性中心的構(gòu)象變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，活性中心的構(gòu)象改變先于酶分子整體的構(gòu)象改變，而與活力喪失幾乎同步。這些實考證明酶

19、的活性中心的空間構(gòu)造對酶分子整體而言，處于分子中一個柔性的局部地區(qū)，由較弱的化學(xué)鍵保持其空間構(gòu)造，對各樣變性要素較為敏感。能否存在酶分子整體構(gòu)象改變和酶活力喪失同步，甚至整體構(gòu)象改變快于酶活力喪失的狀況？從堿性磷酸酶的實驗可發(fā)現(xiàn)酶分子肽鏈的伸展惹起變性的速度常大于酶失活的速度常數(shù)，證明確實存在構(gòu)象的改變在前，活力降低在后的狀況。這一實驗增補了酶活性中心的柔性大于整體可塑性的理論，說明不一樣酶蛋白的活性中心可能處于酶分子不一樣部位，如處于不易受擾亂或易于受保護的部位，加上底物對活性中心的保護或金屬離子對酶活性中心的螯合固定作用（堿性磷酸酶含鋅離子），就有可能出現(xiàn)活性中心的構(gòu)象變化慢于整體構(gòu)象變化

20、，因此活力降低慢于整體構(gòu)象改變狀況。寡聚酶亞基的聚合和解聚對酶活性的調(diào)理？亞基的聚合和解聚可改變酶的活力，也可改變酶的催化性質(zhì)。(1)擁有同種亞基的寡聚酶（純聚體）發(fā)生解聚后常常惹起活力的降落或喪失?；蛟S對底物的Km增添，如M2型丙酮激酶主要以四聚體形式存在，也有部分為二聚體，與四聚體保持動向均衡。底物及激活劑可使均衡偏向四聚體，使活力增添，底物Km減小?？酥苿﹦t能使二聚體穩(wěn)固，使活力降落，底物Km增添。動物的乙酰輔酶A羧化酶由兩個相同的亞基構(gòu)成，每個亞基擁有BCCP、BC和CT三種催化功能。二聚體的Mr約為520000，但無酶活力。當(dāng)檸檬酸存在時，可使二聚體聚合成Mr為4000000-800

21、0000的多聚體，有酶活力；而軟脂酰CoA或丙二酰CoA（后者為該酶的產(chǎn)物）則可使其解聚成無活性的二聚體形式。所以亞基的聚合和解聚也是酶活力的一種重要調(diào)理方式。2）擁有異種亞基的寡聚體酶（雜交體）發(fā)生解聚后一般致使活力的喪失，因其活性有賴于各樣不一樣功能亞基的合作，一旦解聚成分別的亞基，失掉亞基間的傳導(dǎo)和聯(lián)系，就不可以表現(xiàn)活力。亞基的解聚也能改變酶的催化性質(zhì)，如大腸桿菌色氨酸合成酶，含有兩個亞基和一個（含磷酸吡哆醛）亞基，催化吲哚甘油磷和L-絲氨酸形成L-色氨酸和3-磷酸甘油醛，但此時吲哚其實不從亞基上開釋出來。亞基獨自可催化吲哚和L-絲氨酸合成L-色氨酸，當(dāng)加入亞基后，吲哚才從亞基開釋而被利

22、用，構(gòu)成完好的能利用吲哚甘油磷酸為底物的L-色氨酸合成酶。3）假如異種亞基是由催化亞基（C）和調(diào)理亞基R）構(gòu)成，則視調(diào)理亞基的功能而決定解聚后的酶活力變化。如cAMP依靠性蛋白激酶，其R其實是C的克制蛋白，一旦R和cAMP聯(lián)合成cAMP-R后，就離開C亞基而使后者活化。大腸桿菌天冬氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶的R亞基對C亞基起別構(gòu)調(diào)理作用，能與別構(gòu)激活劑ATP或別構(gòu)克制劑CTP聯(lián)合。當(dāng)R和C分別后，C亞基仍有催化活力，但不再受ATP或CTP的別構(gòu)調(diào)理。PyK同工酶產(chǎn)生的原由以及它們的構(gòu)造與功能？同一基來由不起點轉(zhuǎn)錄或原始RNA（核內(nèi)不均一RNA）經(jīng)不一樣剪接加工而生成不一樣的m-RNA也能形成同工酶，今以典

23、型的丙酮酸激酶（PyK）同工酶說明之。1.不一樣起點轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的同工酶存在于肝及腎此質(zhì)的PyK或存在于紅細胞的R型PyK由同一PyK的L基因轉(zhuǎn)錄。L基因有12個外顯子和11個內(nèi)含子，第一個外顯子的上游有CAT啟動子，R-PyK的RNA就從這個CAT處開始轉(zhuǎn)錄，而第一外顯子的下游，即第一內(nèi)含子中有TATA啟動子，L-PyK的RNA則從TATA處開始轉(zhuǎn)錄，故LPyK的MRNA較R-PyK的mRNA約短一個外顯子長度，酶蛋白亞基也就少31個氨基酸（L和R型分別含543和574個氨基酸）。L-PyK亞基第3543的氨基酸序列和R型亞基第34574的序列完好相同。所以，和R型PyK有勻叉免疫反響，都對底物

24、PEP是正共同別構(gòu)效應(yīng)，唯和Hill系數(shù)（都是反應(yīng)酶別構(gòu)效應(yīng)的動力學(xué)參數(shù)）不一樣而已。紅細胞中R-PyK先本性缺少的患者，其肝中LPyK也同時缺少。原始轉(zhuǎn)錄RNA不一樣剪接形成的同工酶肌肉和腦中的M1-Pyk和寬泛散布于各組織（肌肉除外）的M2-Pyk均含有530個AA。都由Pky的M基因編碼。M基因也有12個外顯子，只有一和啟動方式，但其原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在剪接加工過程中，第9個外顯子的序列進入M1-Pyk的mRNA，而第10個外顯子的序列進入M2-Pky的RNA，第1-8和11-12個外顯子則為M1和M2-Pyk的共同序列。故兩型mRNA只有160個核苷酸序列的差異。而兩型的蛋白質(zhì)只有一段53個

25、AA序列的差異，并且這些序列中還有8個殘基是相同的。不一樣的肽段恰好位于和亞基聚合有關(guān)的結(jié)構(gòu)域中，說明為何M2-Pyk有別構(gòu)效應(yīng)，而M1則沒有。但二者的催化性質(zhì)又十分近似，且也有交錯免疫性。LDH中A、B兩亞基構(gòu)造差異與酶活力的調(diào)理。乳酸脫氫酶（LDH）的A，B兩種亞基各有329及331個氨基酸殘基。如以A亞基缺失第17及330位殘基而與B亞基比較的話，可發(fā)現(xiàn)兩類亞基有75%的同源性，并且被置換的25%的氨基酸中，其DNA上相應(yīng)的三聯(lián)密碼僅差一個堿基。用辯解的X射線衍射還發(fā)現(xiàn)兩種亞基的空間構(gòu)象幾乎完好一致。在活性中心與NDA（H）或底物聯(lián)合的部位，約有32個氨基酸殘基參加，僅4個殘基不一樣，此

26、中三個疏水殘基之間的相互置換，而只有一個是Ala和Gln的置換（A亞基為Ala29，B亞基為Gln30。B亞基經(jīng)過Gln30的側(cè)鏈與NAD（H）的焦磷酸形成氫鍵，而A亞基Ala的側(cè)鏈不可以形成氫鍵，故B亞基和NAD（H）的聯(lián)合較A亞基堅固，解離常數(shù)較A亞基約小20倍。因LDH催化反響的限速步驟是輔酶與酶的聯(lián)合或解離，故B亞基的kcat小于A亞基。并且在丙酮酸存在下，已結(jié)+4+合NAD的B還可以與丙酮酸聯(lián)合而形成酶-NAD-丙酮權(quán)三聯(lián)復(fù)合物，后者可克制活力。故B亞基易受高濃度（L）的丙酮酸克制；而A亞基因不易形成三聯(lián)復(fù)合物，也就中易受丙酮的克制。GST為何抗衡癌藥擁有耐藥性？大鼠谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移

27、酶(GST)有10余種同工酶，都是編號為18的八類亞基純聚或雜交而成的二聚體，分紅、三大族（表8）。人類也有這三族，族間的GST無交錯免疫，但同一族（甚至來自不一樣種族）的GST則有共同抗原必性。各型同工酶對不一樣底物（接受GSH的受體）的Km有很大不一樣。GST1-1、2-2、5-5和7-7有GSH過氧物酶的活力，SGT6-6則有白三烯C4合成酶的活力。來自胎盤的GST7-7（在大鼠GST-P，人類稱GST-）的活性中心有Cys47，受巰基試劑的克制，而來自肝丈夫的族或族GST則未發(fā)現(xiàn)巰基參加其活性中心。GST-（P）的這一特色使其與抗癌藥的抗藥性有關(guān)。因許多抗癌藥職阿霉素、絲裂霉素等都能在

28、體內(nèi)產(chǎn)生超氧離子、過氧離子或羥自由基，再經(jīng)過這些活性氧或自由基以及由此產(chǎn)生的過氧化脂質(zhì)來殺傷癌細胞。GST-活必事心中的巰基對活性氧及自由基較其余GST敏感得多，能經(jīng)過其巰基的被氧化而除去活性氧或自由基，防止他們對GST-對一些陰離子化合物的聯(lián)合有力也大于其余的GST。這些性質(zhì)使表達GST-的腫瘤細胞能更有效地除去或滅活一些對腫瘤生長不利的化合物或離子，故表現(xiàn)出抗衡癌藥的耐藥性。試述唾液酸轉(zhuǎn)移酶（ST）跨膜序列對蛋白質(zhì)定位的作用？定位于膜構(gòu)造上的一些蛋白質(zhì)，其跨膜構(gòu)造域中的疏水氨基酸不只有益于蛋白質(zhì)固定在脂質(zhì)膜上，還帶有蛋白質(zhì)投送到哪種膜構(gòu)造的信號。以定位于高爾基體的2，6唾液酸轉(zhuǎn)移酶（2，6

29、ST）為例，有人將此酶的胞質(zhì)、跨膜和莖區(qū)三個構(gòu)造域（分別為9、17、18年氨基酸殘基）的編碼cDNA分別和另一個定位于細胞表面膜的屬于型膜蛋白的二肽酰肽酶（DPP）相應(yīng)的三個構(gòu)造域（分別為6、23、18個氨基酸殘基）的cDNA相互雜交交融，再配上小雞溶菌酶的基因作為報告基因。將重組質(zhì)粒在COS細胞中表達，用免疫熒光法檢測報告蛋白溶菌酶的細胞定位。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：交融酶蛋白中如帶有2，6ST的跨膜域序列都能投送到高爾基體，而帶有DPP胞質(zhì)跨膜域序列的交融蛋白則投送到細胞表面。如交融酶的莖區(qū)也來自ST或在DPP胞質(zhì)域C端加上兩個帶正電荷的Lys，也能增強交融酶投送到高爾基體而使其在細胞表面的定位減少。假

30、如用多聚Leu代替跨膜區(qū)的疏水序列，只有當(dāng)多聚Leu中的Leu數(shù)相當(dāng)于ST跨膜域的殘基數(shù)（17個）以及莖區(qū)也來自ST時，融合蛋白才投送到高爾基體而當(dāng)L數(shù)目相當(dāng)于DPPIV跨膜域的殘基數(shù)（23個）或莖區(qū)來自DPP時則交融蛋白投送到細胞表面（表3）。因而可知，跨膜區(qū)疏水氨基酸的序列及數(shù)目對酶蛋白投送到高爾基體膜仍是細胞表面膜擁有決定性作用，而莖區(qū)的序列也與膜蛋白的定位有關(guān)。膜受體的構(gòu)造域與分類？受體是細胞的一種生物大分子，它能專一性地辨別細胞的化學(xué)信號分子，依據(jù)其存在地點的不一樣，主要分兩種，位于細胞膜上的稱為膜受體，位于細胞質(zhì)、核質(zhì)、胞內(nèi)膜上的稱為胞內(nèi)受體。膜受體一般有3個構(gòu)造域，即胞外域(也即

31、配體聯(lián)合域)、跨膜域和胞內(nèi)域。依據(jù)其不一樣的構(gòu)造和功能，膜受體可分紅四類，。1.離子通道受體蛋白偶聯(lián)受體3.酪氨酸蛋白激酶有關(guān)受體4.其余有酶活力的受體離子通道受體這種受體由多個蛋白質(zhì)亞基聚合構(gòu)成一個膜孔，即離子通道。當(dāng)受體與配體聯(lián)合時，致使受體構(gòu)象的變化，使離子通道開放，同意離子跨膜流動，形成膜電位的變化，稱為配體門控通道(ligand-gatedchannel)，如乙酰膽堿的蕈毒堿受體。當(dāng)膜電位發(fā)生改變時，有些離子通道也能夠開放，這種離子通道，稱電壓門控通道(voltage-gatedchannel)。蛋白偶聯(lián)受體這種受體嵌入膜內(nèi)，在膜的內(nèi)側(cè)有G蛋白辨別序列，活化受體能夠與G蛋白偶聯(lián)。這種

32、受體大部分有一個共同的構(gòu)造特色，都有由螺旋形成的7次跨膜構(gòu)造。配體與受體聯(lián)合后，經(jīng)過G蛋白與一些效應(yīng)酶偶聯(lián)，如腺苷酸環(huán)化酶、磷脂酶C(PLC)等，產(chǎn)生第二信使，或許激活的受體經(jīng)過G蛋白直接調(diào)控離子通道，如蕈毒堿受體、某些腎上腺素能受體等。有的G蛋白偶聯(lián)受體的配體是一種蛋白酶，如凝血酶受體，受體經(jīng)配體的蛋白酶作用發(fā)生剪切，形成活化的受體。酪氨酸蛋白激酶有關(guān)受體這種受體有3種形式：受體的胞內(nèi)構(gòu)造域自己有酪氨酸蛋白激酶(TPK)活性，聯(lián)合配體后，受體的胞內(nèi)域能夠自己磷酸化，進而招集胞質(zhì)中的多種酶到自己磷酸化的部位，使它們靠近底物或產(chǎn)生第二信使，或直接啟動蛋白激酶級聯(lián)系統(tǒng)，大部分生長因子的受體屬于這一

33、類，它們的TPK構(gòu)造域稱為受體型TPK。受體自己沒有TPK活性，可是直接和胞液中非受體型TPK偶聯(lián)，配體的聯(lián)合致使受體的聚合，進而與胞液中的TPK作用，并激活其活性，好多細胞因子如促紅細胞生成素(EPO)和擾亂素(INF)的受體屬于這種種類。受體肽鏈無TPK活性，也不直接和胞液中的非受體型TPK偶聯(lián)，而是和另一肽鏈形成異二聚體，經(jīng)過這一肽鏈再和胞液中的非受體型TPK相互作用而轉(zhuǎn)導(dǎo)配體的信息，如白介素-6(IL-6)受體肽鏈與gp130肽鏈形成雜二聚體，而gp130再和胞液中的一種非受體型TPK偶聯(lián)，這種起信息轉(zhuǎn)導(dǎo)作用的肽鏈常常是幾種同類受體的共用鏈，且不只gp130一種。其余有酶活力的受體其余

34、有酶活力的受體，依據(jù)酶性質(zhì)的不一樣，主要可分紅3種亞類：受體的胞內(nèi)域有鳥苷酸環(huán)化酶活力，如心鈉素(atrialnatriureticfactor，ANF)受體。受體的胞內(nèi)域有絲/蘇氨酸蛋白激酶活力，如轉(zhuǎn)變生長因子-(TGF-)受體。受體的胞內(nèi)域有蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)活性，如白細胞的CD45。G蛋白偶聯(lián)受體的構(gòu)造特色？這種受體嵌入膜內(nèi)，在膜的內(nèi)側(cè)有G蛋白辨別序列，活化受體能夠與G蛋白偶聯(lián)。這種受體大部分有一個共同的構(gòu)造特色，都有由螺旋形成的7次跨膜構(gòu)造。配體與受體聯(lián)合后，經(jīng)過G蛋白與一些效應(yīng)酶偶聯(lián)，如腺苷酸環(huán)化酶、磷脂酶C(PLC)等，產(chǎn)生第二信使，或許激活的受體經(jīng)過G蛋白直接調(diào)控離子通道

35、，如蕈毒堿受體、某些腎上腺素能受體等。有的G蛋白偶聯(lián)受體的配體是一種蛋白酶，如凝血酶受體，受體經(jīng)配體的蛋白酶作用發(fā)生剪切，形成活化的受體。TPK有關(guān)受體的作用方式？一些肽類生長因子如血小板源生長因子(PDGF)、表皮生長因子(EGF)、纖維生長因子(FGF)和神經(jīng)生長因子(NGF)等的受體TPK與生長因子聯(lián)合后，活化TPK的磷酸酪氨酸殘基，可聯(lián)合PI-PLC的SH2構(gòu)造域，使其Tyr783(Tyr771、Tyr1254)等酪氨酸磷酸化，磷酸化后的PLC發(fā)生膜轉(zhuǎn)位，進而發(fā)生進一步激活(圖10C)。好多非受體型TPK如Src、Syk、Lck、Fyn、ZAP-70、Jak/Tyk等受磷酸化活化后，也

36、能夠經(jīng)過PI-PLC的SH2構(gòu)造聯(lián)合PI-PLC，并使PI-PLC發(fā)生酪氨酸磷酸化而激活(圖10D)。值得注意的是，一些屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族成員，如血管緊張素或血小板活化因子(PAF)受體，聯(lián)合配體活化后，也能使PI-PLC發(fā)生酪氨酸磷酸化，詳細體制還不清楚，可能與近來幾年發(fā)現(xiàn)的富含脯氨酸的非受體型TPK家族新成員Pyk-2有關(guān)?？墒?，PI-PLC在不經(jīng)酪氨酸磷酸化的狀況下，也能夠被一些磷脂根源的第二信使活化。如PLD作用的產(chǎn)物PA，是PI-PLC1的別構(gòu)激活劑，在微管有關(guān)蛋白tau或tau樣蛋白存在下，PLA2的產(chǎn)物AA也能刺激PI-PLC的活性，磷脂酰肌醇-3-激酶(PI-3-K)作用

37、的產(chǎn)物PI-3，4，5-P3也能聯(lián)合PI-PLC，進而活化PLC。G蛋白的分類，構(gòu)造和功能及其作用模式？G蛋白，即鳥苷三磷酸聯(lián)合蛋白(guanosinetriphosphate-bindingprotein)，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)它是一個蛋白質(zhì)家族，包含大批構(gòu)造和功能極為相像的成員，在細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起著偶聯(lián)膜受體和效應(yīng)器的中介作用。它與GTP聯(lián)合狀態(tài)為活化狀態(tài)，與GDP聯(lián)合狀態(tài)為非活性狀態(tài)。因為其大小構(gòu)造不一樣，往常分紅兩大類：一是異三聚體G蛋白，簡稱G蛋白，由、及三類亞基構(gòu)成；另一類是單鏈小分子G蛋白，往常稱為小G蛋白。異三聚體G蛋白分類異三聚體G蛋白的、三類亞基，分別又有多種形式。所以，由它們構(gòu)成

38、的三聚體G蛋白可有上千種，這些數(shù)目眾多的G蛋白可概括為四類。能活化腺苷酸環(huán)化酶。、Go和Gt系列Gi能克制腺苷酸環(huán)化酶電壓門控Ca2+通道和磷脂酰肌醇專一性磷脂酶C(PI-PLC)，活化K+離子通道和Na+通道等，Go能克制神經(jīng)元Ca2+通道，Gt能活化cGMP磷酸二酯酶。系列包含Gq、G11、G14、G16，能活化磷脂酶C(PI-PLC)。和G13系列功能還不清楚，可能與活化JNK(c-JunN-terminalkinase)、Na+/K+互換系統(tǒng)和活化立早基因轉(zhuǎn)錄等有關(guān)。構(gòu)造亞基密切聯(lián)合形成一個功能單位，能分開。作用模式(geranylgeranylation)G亞基G有2個構(gòu)造域：GTP

39、聯(lián)合域和催化域。催化域有GTP水解酶(GTPase)活性，與其余GTP酶超家族成員，如小G蛋白和蛋白質(zhì)合成中的延伸因子等有相像的構(gòu)造。GTP聯(lián)合域是獨到的螺旋構(gòu)造域，它把GPT包埋在整個蛋白質(zhì)的中心。G在合成后加工過程中，其N端的甘氨酸和豆蔻酸(十四烷酸)共價連結(jié)，并以此插入質(zhì)膜的脂雙層中。G亞基亞基有7個片層構(gòu)造，此中一個組氨酸能夠被磷酸化，并且磷酸基團往常來自GTP而不是ATP，其功能還不清楚。亞基有一個N端無規(guī)則卷曲，此中半胱氨酸能夠發(fā)生脂化如法尼基化(farnesylation)或牻牛兒牻牛兒基化，錨定在膜內(nèi)側(cè)。亞基與只有在變性時才因為G蛋白三類亞基都有好多種亞型，使得G蛋白有很大的多

40、樣性，有益于與多種受體和多種效應(yīng)分子起作用，形成復(fù)雜的信號通路。受體、G蛋白及效應(yīng)分子相互作用能夠有不一樣的模式(圖5)。圖5受體-G蛋白-效應(yīng)分子的作用模式H：信號分子；R：G蛋白偶聯(lián)受體；G：G蛋白；、：G蛋白的亞基；E：效應(yīng)分子。(1)一個配體-受體復(fù)合物(HR)和一個G蛋白作用，再和下游的一個效應(yīng)分子作用；(2)一個HR和一個G作用，再和兩個E作用；(3)兩個HR和兩個G，再和一個E作用；一個HR和兩個G，再分別和兩個E作用；(5)一個HR分別和G蛋白中的G和G作用，后二者再分別和兩個E作用活化和功能G的活化及功能在基礎(chǔ)狀態(tài)時，G蛋白的、三個亞基以三聚體形式存在，并有GDP聯(lián)合于亞基，

41、當(dāng)配體與有7次跨膜螺旋的受體聯(lián)合后，致使受體第3和第6個螺旋的方向改變，影響了胞內(nèi)域的構(gòu)象變化，裸露出G蛋白的聯(lián)合位點。當(dāng)G蛋白與活化受體聯(lián)合后，也發(fā)生構(gòu)象改變，使和亞基相互分別，亞基開釋GDP而聯(lián)合GTP，進而激活G蛋白。因為其構(gòu)象的改變，使G蛋白與配體-受體復(fù)合物分別，并降低配體-受體親和力，使配體-受體復(fù)合物也解離。G蛋白的亞基再與效應(yīng)分子(腺苷酸環(huán)化酶、PI-PLC等)聯(lián)合，使效應(yīng)分子激活。亞基發(fā)揮GTP酶的作用，使GTP水解成GDP和Pi，變?yōu)槿ゼせ顮顟B(tài)，進而與亞基從頭聯(lián)合?；罨腉能夠調(diào)理好多效應(yīng)酶，如Gs激活腺苷酸環(huán)化酶，Gi則克制腺苷酸環(huán)化酶，Gt活化光受體cGMP磷酸二酯酶，

42、Gq活化PI-PLC等。一些G亞基還可以調(diào)理Na+/H+互換等。2.G的活化及功能G亞基向來被以為不過起到協(xié)助和調(diào)理亞基，并使G亞基與膜的結(jié)合更加堅固的功能，自己其實不可以激活效應(yīng)酶。但是，近來幾年的研究表示，亞基也能與效應(yīng)酶作用，如能直接調(diào)理PI-PLC的1，2和3亞型，直接調(diào)理腺苷酸環(huán)化酶，直接或間接活化離子通道，活化磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)、絲裂原激活的蛋白激酶(MAPK)等，以及與Rho、Rac、Arf等小分子G蛋鶴發(fā)生作用。GTP/GDP的轉(zhuǎn)變是G蛋白活性調(diào)理的重點。所以，體外研究經(jīng)常用一些抗水解的GTP近似物，如GTP中和磷酸基因連結(jié)的氧鍵換成硫鍵的GTPS等，可使G蛋白連

43、續(xù)激活。一些細菌毒素能作用于G蛋白，如霍亂毒素(CTX)和百日咳毒素(PTX)，是一類惹起ADP-核糖基化(ADPribosylation)作用的酶，G亞基是這種酶的適合底物?；魜y毒素能夠使Gs發(fā)生ADP-核糖基化，進而克制其GTP酶的活性，延伸GTP的作用，使Gs蛋白連續(xù)活化，百日咳毒素則能夠使Gi、Go、Gr的亞基發(fā)生ADP-核糖基化，進而克制GTP與亞基的聯(lián)合，使Gi、Go和Gt處于無活性狀態(tài)。但Gq系列的亞基對百日咳毒素不敏感。PLA2、PLC、PI-PLC的分類，構(gòu)造特色以及它們的調(diào)理與功能？磷脂酶A2PLA2催化水解磷脂中的2位酯酰鍵，產(chǎn)生游離不飽和脂肪酸(USFA)和溶血磷脂(l

44、ysophospholipid)。.PLA2的分類和構(gòu)造依據(jù)PLA2的構(gòu)造同源性、分子大小、細胞內(nèi)定位以及能否依靠Ca2+和其余酶學(xué)特征，人們將PLA2分紅9類()(表9)。表9磷脂酶A2的主要種類類根源存Mr(Ca2+二別在需要硫103)鍵眼鏡蛇、印度毒蛇豬/人胰腺B響尾蛇、毒蛇、人滑膜液、血小板分13mmol7泌15/L分13mmol7泌15/L分13mmol7泌15/L加蓬毒蛇、鼠睪分13mmol6B丸泌15/L鼠睪丸分15mmol8C泌/L蜜蜂、蜥蜴分16mmol5泌18/L鼠腎、人、U937、胞85m血小板液ol/L人、鼠心、肺、分14mmol6P388D泌/LP388D、巨噬細胞8

45、0否胞、CHO細胞液85人血漿分45否泌牛腦胞29否液海生蝸牛分1442，不一樣的Gq能夠在不一樣的組織中，不一樣程度的激活不一樣的PI-PLC。緩激肽、凝血酶、組胺、乙酰膽堿、促甲狀腺激素等受體都經(jīng)過Gq或G11活化PI-PLC(圖10A)。G蛋白中亞基也能激活PI-PLC，各亞型受激活的能力是321，不激活4。在PI-PLC氨基端的2/3的序列與G亞基聯(lián)合有關(guān)。膽堿能蕈毒堿m2受體就是受G亞基激活PLC的一個例子(圖10B)。PLD的調(diào)理與功能？磷脂酶D(PLD)的底物主假如磷脂酰膽堿(PC)，產(chǎn)物是磷脂酸(PA)和膽堿。在牛肺的胞液中也曾發(fā)現(xiàn)能水解磷脂酰乙醇胺(PE)和磷脂酰肌醇(PI)

46、的PLD，產(chǎn)物除PA外，分別是乙醇胺和肌醇，但膜聯(lián)合性PLD只對PC起作用。磷脂酶D除有水解功能外，另有磷脂酰轉(zhuǎn)移功能?？蓪⒘字；鶊F從PC轉(zhuǎn)至另一堿基(如乙醇胺)或醇基(如乙醇)上，進而合成PE或磷脂酰乙醇，后一反響常用來測定PLD的活力。.PLD的生化特征PLD也有不一樣亞型，它們的組織散布、最適pH、對Ca2+的要求以及激活劑等都不相同，如腦和肺組織中的PLD受油酸激活，而腎臟和脾臟中的另一型PLD不受油酸激活，但受小分子G蛋白激活，比如從豬肺微粒體中獲取較高純化的PLD，Mr為190000，最適，只催化PC水解，受磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸(PI-4，5-P2)和小分子G蛋白激活。在好

47、多組織中，PLD在質(zhì)膜、高爾基體和細胞核中活性較高，在胞質(zhì)中也有顯然的活性，但在線粒體中沒有PLD。PLD1主要存在于核周邊，如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、內(nèi)體(endosome)等，PLD2則主要存在于質(zhì)膜。圖11磷脂酶D(PLD)的4個守舊序列氨基酸殘基.PLD的調(diào)控用PKC的激活劑佛波酯和克制劑證明大多細胞中的PLD受PKC的激活，特別是PKC和PKC，但激活體制尚不清楚。一些實驗結(jié)果顯示，PKC激活PLD可能經(jīng)過非磷酸化方式。TPK也能激活PLD，但體制也不清楚，小分子G蛋白如Arf和Rho等對PLD也有激活作用。GTP可能作為小分子G蛋白的激活劑，進而激活PLD。但PLD最主要的激活劑可能是P

48、I-4，5-P2對PLD呈別構(gòu)激活作用。.PLD的生物學(xué)功能PLD第一能夠?qū)⑸锬ど系腜C變?yōu)镻A，開釋出極性的膽堿(choline)，同時改變生物膜的構(gòu)成和電荷，使膜的生理特征發(fā)生明顯變化。產(chǎn)物PA還可近似第二信使，惹起多種生理效應(yīng)，如促使DNA合成和肌動蛋白聚合，調(diào)理超氧離子生成和GTP酶激活蛋白(Ras-GAP)，PA還可經(jīng)PA磷酸酶作用，轉(zhuǎn)變?yōu)镈G。PKC的后期和連續(xù)激活可能主要遇到來自PLD作用產(chǎn)生的DG的影響。PA經(jīng)PLA2作用產(chǎn)生的LPA是活化的血小板和其余一些細胞的一種主要的胞外信號分子。LPA尚可激活Rho蛋白和某些非典型PKC如型，有報導(dǎo)以為PLD和PKC參加細胞囊泡的運輸

49、和出胞作用(excytosis)。固然PLC的產(chǎn)物DG也能經(jīng)甘油二酯激酶生成PA，后者再經(jīng)PLA2轉(zhuǎn)變?yōu)長PA，但體內(nèi)PA和LPA的直接根源應(yīng)是PLD，或許PLD在體內(nèi)的主要功能是經(jīng)過PA和LPA來實現(xiàn)的。磷脂酰肌醇-3激酶磷脂酰肌醇(PI)中肌醇的3、4、5位均可被磷酸化，分別由磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)、-4激酶(PI-4K)和-5激酶(PI-5K)催化，其磷酸基團的供體都是ATP。這些磷酸化數(shù)目及部位不一樣的PI衍生物的代謝轉(zhuǎn)變?nèi)鐖D12所示。肌醇基團被磷酸化的序次是4位5位3位，或4位3位，但PI-3，4-P2不可以轉(zhuǎn)變?yōu)镻I-3，4，5-P3，后者只好來自PI-4，5-P2的3位

50、磷酸化。各磷酸基團又可被相應(yīng)的磷酸酶水解轉(zhuǎn)變?yōu)樯僖粋€磷酸基團的PI衍生物。這里主要介紹細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中最主要的磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)。圖12磷脂酰肌醇磷酸衍生物的代謝轉(zhuǎn)變PI-3K，-4K，-5K：磷脂酰肌醇-3激酶，-4激酶，-5激酶；3-Pase，4-Pase，5-Pase：3-磷酸酶，4-磷酸酶，5-磷酸酶分類與構(gòu)造依據(jù)構(gòu)造及底物專一性，PI-3K主要分紅3類：.類PI-3K這種PI-3K能夠磷酸化PI、PI-4-P和PI-4，5-P2，但在體內(nèi)的優(yōu)先底物是PI-4，5-P2，其催化亞基為p110蛋白，它們從近N端到C端分別為Ras聯(lián)合域、PI-3K域和一個Ser/thr蛋白激酶域，并都可和調(diào)理亞基聯(lián)合成異二聚體。