培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案

培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案資料僅供參考文件編號：2022年4月培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案版本號：A修改號：1頁次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證第1頁共7頁培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案起草人：日期：年月日方案審核人：日期：年月日方案批準(zhǔn)人：日期：年月日目錄1.驗(yàn)證目的…………32.參照標(biāo)準(zhǔn)…………33.驗(yàn)證項(xiàng)目…………34.驗(yàn)證小組人員及職責(zé)……………3-45.驗(yàn)證可接受的標(biāo)準(zhǔn)………………46.驗(yàn)證材料…………4-57.菌液制備…………58.適用性檢查………………………5-69.控制菌檢查………………………71.驗(yàn)證目的：需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培養(yǎng)基及控制菌培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適合需氧菌、霉菌及酵母菌、大腸埃希菌的測定和控制菌適用性檢查。2.參照標(biāo)準(zhǔn)：2015版中國藥典微生物限度檢查法。3.驗(yàn)證項(xiàng)目：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查4.驗(yàn)證小組人員及職責(zé)：驗(yàn)證小組人員:小組人員職務(wù)姓名所在部門職務(wù)組長劉秀質(zhì)量管理部經(jīng)理組員郝枝桃質(zhì)量管理部QC主任組員王和霞質(zhì)量管理部檢驗(yàn)員組員蘭丹質(zhì)量管理部檢驗(yàn)員驗(yàn)證人員職責(zé)及要求按驗(yàn)證方案及相關(guān)文件實(shí)施驗(yàn)證。認(rèn)真觀察并做好驗(yàn)證原始記錄。對實(shí)施驗(yàn)證的結(jié)果負(fù)責(zé)。驗(yàn)證中各部門的職責(zé)驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)組職責(zé)制訂驗(yàn)證總計劃，負(fù)責(zé)全公司驗(yàn)證工作的管理。確定驗(yàn)證項(xiàng)目及驗(yàn)證項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料及結(jié)果的審核工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證報告的批準(zhǔn)工作。驗(yàn)證工作小組職責(zé)負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草工作。參與驗(yàn)證方案的討論、確認(rèn)工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的實(shí)施。負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)果的分析、統(tǒng)計、報告工作。參與驗(yàn)證結(jié)果的評價工作。質(zhì)量部職責(zé)負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證過程中儀器、儀表、計量器具的校驗(yàn)工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證中各項(xiàng)檢測工作，提供驗(yàn)證的檢驗(yàn)記錄、檢驗(yàn)報告，對驗(yàn)證過程中的各項(xiàng)檢驗(yàn)工作負(fù)責(zé)。負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料和報告的審核工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件回收、歸檔管理工作。5.合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。6.試驗(yàn)材料：.被驗(yàn)證培養(yǎng)基：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基.儀器設(shè)備：手提式不銹鋼蒸鍋型電熱恒溫培養(yǎng)箱250B生化培養(yǎng)箱101型電熱恒溫培養(yǎng)箱.驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基麥康凱瓊脂培養(yǎng)基麥康凱液體培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂對照培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂對照培養(yǎng)基麥康凱瓊脂對照培養(yǎng)基麥康凱液體對照培養(yǎng)基.驗(yàn)證用菌株：(第代)試驗(yàn)菌株培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間（小時）白色念珠菌沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基20-25℃24-48h黑曲霉5-7天金黃色葡萄球菌胰酪大豆胨培養(yǎng)基30—35℃18-24h大腸埃希菌銅綠假單胞菌7.菌液制備.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、白色念球菌的新鮮培養(yǎng)物。.用%的無菌氯化鈉溶液，制成適宜濃度的菌懸液。.取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3-5ml濃度為%的無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。7..4.采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管中。.用%的無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的孢子懸液。.注意事項(xiàng)：菌液制備后，如在室溫下放置，應(yīng)在2h內(nèi)使用；如保存在2-8℃，可在24h內(nèi)使用，黑曲霉孢子懸液可保存在2-8℃，在驗(yàn)證過的儲存期內(nèi)使用。8、培養(yǎng)基適用性檢查：分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的菌液至胰酪大豆胨培養(yǎng)基。每株試驗(yàn)菌平行制備2個平板，混勻、凝固，置于30-35℃培養(yǎng)不超過3天計數(shù)。分別接種不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉的菌液至沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。每個試驗(yàn)菌平行制備2個平板，混勻、凝固，置于20-25℃培養(yǎng)不超過5天計數(shù)。用對應(yīng)的對照培養(yǎng)基代替被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述試驗(yàn)。結(jié)果判定：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)≥對照培養(yǎng)基上菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大少與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，判定培養(yǎng)基的適用性試驗(yàn)檢測符合規(guī)定。試驗(yàn)時間年月日完成時間年月日驗(yàn)證菌株平皿號供試品組cfu∕ml對照培養(yǎng)基組cfu∕ml回收率%應(yīng)≥70%銅綠假單胞菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1--2--平均值金黃色葡萄球菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1--2--平均值大腸埃希菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1--2--平均值白色念珠菌(培養(yǎng)5天開始計數(shù))1--2--平均值黑曲霉菌(培養(yǎng)5天開始計數(shù))1--2--平均值結(jié)論試驗(yàn)人復(fù)核人9、控制菌檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長能力、抑制能力及指示特性的檢查。常用培養(yǎng)基適用性檢測項(xiàng)目及所用菌株見下表。大腸埃希菌麥康凱液體培養(yǎng)基促生長能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌麥康凱瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示特性大腸埃希菌麥康凱液體培養(yǎng)基適用性檢查促生長能力檢查分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。在35℃條件下培養(yǎng)24h，與對照培養(yǎng)基管比較。檢查標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌應(yīng)生長良好。檢驗(yàn)結(jié)果：抑制能力檢查分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。在35℃條件下培養(yǎng)24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基管比較。檢查標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基管和對照培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌均不得生長檢驗(yàn)結(jié)果：麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查：促生長能力+指示特性的檢查用涂布法分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。在35℃條件下培養(yǎng)24h。檢查標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基上試驗(yàn)菌生長的菌落大小、形態(tài)特征應(yīng)、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)一致。檢驗(yàn)結(jié)