實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程

實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程HYEY-PGC-2016（第三版）2016年1月11日宣布2016年1月20日實行懷遠縣第二人民醫(yī)院實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC-2016校正表

第1頁共1頁第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行校正表版號規(guī)程號校正序次校正內(nèi)容贊同日期實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC-2016第1頁共1頁目錄第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行目錄HYEY-PGC01-2016實驗室人員出入實驗室HYEY-PGC02-2016實驗室檢測樣品收集HYEY-PGC03-2016實驗室檢測樣品包裝和運送HYEY-PGC04-2016實驗室檢測樣品接收HYEY-PGC05-2016樣品檢測操作規(guī)程HYEY-PGC06-2016電氣設(shè)備操作規(guī)程HYEY-PGC07-2016實驗室消毒劑配制標(biāo)準操作規(guī)程HYEY-PGC08-2016無菌間使用標(biāo)準操作規(guī)程HYEY-PGC09-2016實驗室荒棄物辦理標(biāo)準操作規(guī)程HYEY-PGC10-2016實驗室消毒標(biāo)準操作程序HYEY-PGC11-2016實驗室不測事故辦理實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC01-2016第1頁共1頁查驗科實驗室人員出入實驗室第3版第0次校正201年1月11日宣布/1月20日實行目的制定查驗科實驗室人員出入的標(biāo)準操作程序，保障實驗室生物安全。合用范圍合用于查驗科實驗室人員出入程序。職責(zé)實驗室工作人員履行本程序的規(guī)定。實驗室負責(zé)人負責(zé)督查履行。規(guī)程要求進入程序?qū)嶒炇胰藛T需將外衣掛入（防范將外衣與工作服混放），穿上工作服，按要求戴手套、口罩等防范用品方可進入實驗室。退出程序工作結(jié)束后，實驗室人員在實驗室將一次性口罩、手套、鞋套等放入指定容器。先用%新潔爾滅敵手進行消毒，再用消毒肥皂洗手。在指定地區(qū)脫下工作服，必要時進行紫外消毒。實驗室人員退出實驗室后，必然將實驗室入口門關(guān)好，方可走開實驗室。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC02-2016第1頁共4頁實驗室檢測樣品收集第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行目的為保障檢測實驗的順利進行，規(guī)范采樣程序，防范病原微生物在實驗室采樣過程中產(chǎn)生污染。合用范圍合用于實驗室內(nèi)收集、辦理動物樣品。職責(zé)收集檢測樣品的工作人員在收集過程中應(yīng)該防范病原擴散，并對樣本的根源、收集過程和辦理方法等作詳盡記錄。查驗人員必然嚴格依據(jù)本操作規(guī)程操作，不能夠私自做出超出本規(guī)程的操作，所有實驗人員對所從事的工作負相應(yīng)的責(zé)任。過程要求工作條件擁有收集、辦理樣品所需要的生物安全防范設(shè)備；擁有掌握有關(guān)專業(yè)知識和操作技術(shù)的工作人員；擁有有效的防范病原擴散的舉措；擁有保證檢測樣質(zhì)量量的技術(shù)方法和手段。實驗資料準備滅菌的解剖器械（剪刀、鑷子、手術(shù)刀、大刀、斧優(yōu)等）、滅菌試管、平皿或自封袋、載玻片、棉簽、營養(yǎng)肉湯、30%、50%甘油鹽水緩沖液、加抗生素的PBS（病毒保留液）、50％甘油磷酸鹽緩沖液、酒精燈、滅菌注射器、15mL的離心管、管、記號筆、署名筆、防范服、無粉乳膠手套、防范口罩、鉛筆、空白標(biāo)簽紙、膠布、75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒藥品、采樣單等。活畜樣品的收集血清樣品的收集實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC03-2016第2頁共4頁實驗室檢測樣品收集第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行采血方法對采血部位的皮膚先剃（拔）毛，碘酊消毒，75%的酒精消毒，待干燥后采血。采血方法實行生豬站立式前腔靜脈、牛羊站立式頸靜脈、禽類翅靜脈采血，采血過程嚴格無菌。采血數(shù)量單調(diào)病種抗體監(jiān)測的每頭（只）收集2～3mL全血，多病種抗體檢測的每頭（只）收集5～10mL全血。全血保留收集好的全血轉(zhuǎn)入盛血試管，斜面寄存，室溫凝結(jié)后直接放在盛有冰塊的保溫箱，送實驗室。從全血采出到血清分出的時間不超出10h。血清分別凝結(jié)全血在室溫2～4h后，有血清析出時，用無菌針剝離血凝塊，此后放入4℃冰箱4～8h后，待大量血清析出時，吸出血清。必要時經(jīng)離心計3000rpm、30min離心，吸出血清。分其他血清，一般不加防腐劑。血清若在1～2周內(nèi)即可查驗，可放4℃冰箱內(nèi)保留；假如保留時間較長，應(yīng)放在-20℃～-80℃冰箱內(nèi)保留。運送血清時可將血清放在盛有冰塊的保溫箱中運送。全血樣品的收集全血收集后應(yīng)直接注入盛有抗凝劑的試管中，馬上搖動，充分混淆。也可將全血液注入盛有玻璃珠的滅菌瓶中，馬上連續(xù)振蕩脫纖維蛋白?；钋輼悠返氖占屎硎米拥氖占簩⒚藓灢迦牒眍^口及上顎裂處往返刮3～5次取咽喉分泌液，泄殖腔拭子的收集：將棉簽插入取泄殖腔轉(zhuǎn)2～3圈并沾取少量糞便，再將咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有～加有抗生素PBS的EP管中，加蓋，編號。病死（屠宰）畜禽樣品的收集解剖前檢查實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC03-2016第3頁共4頁實驗室檢測樣品收集第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行急性死亡的牛、羊、豬、馬等動物，解剖以前應(yīng)作臨床檢查，疑似炭疽病的應(yīng)采血、鏡檢，除去炭疽病時，方可解剖。動物死亡后應(yīng)在6h內(nèi)進行剖檢。解剖人員要做好自我防范工作。肝、脾、腎、淋奉承、肺和牛、馬心臟樣品的收集3在肝、脾、腎、淋奉承、肺和牛、馬心臟有病變的部位各采用2～3cm的小方塊，分別置于滅菌的試管或平皿中。其他畜禽收集整個心臟，置于自封袋中。細菌分別樣品的收集可用燒紅的刀片燙烙臟器表面，在燒烙部位刺一孔，用滅菌后的鉑金耳伸入孔內(nèi)，取少量組織或液體，作涂片鏡檢或劃線接種于合適的培養(yǎng)基上。腦、脊髓樣品的收集3取腦、脊髓2～3cm浸入50%甘油鹽水中或?qū)⒄麄€頭部（豬、牛、馬除外）割下，用消毒紗布包裹，置于不漏水的容器中。腸、腸內(nèi)容物及糞便樣品的收集腸樣品的收集：選擇病變最嚴重的部分，將其中的內(nèi)容物棄去，用滅菌的生理鹽水輕輕沖刷后，置于試管中。腸內(nèi)容物樣品的收集：燒烙腸壁表面，用吸管扎穿腸壁，從腸腔內(nèi)吸取腸內(nèi)容物，放入盛有30%甘油鹽水中或許直接將帶有糞便的腸管兩頭結(jié)扎，從兩頭剪斷。糞便樣品的收集：用棉簽插到直腸黏膜表面收集糞便，此后將拭子放入盛有30%甘油鹽水中。液體病料樣品的收集收集膽汁、膿、粘液、關(guān)節(jié)液、水泡液等樣品時，用藥物或燙烙法消毒采樣部位，用滅菌吸管（毛細吸管、注射器）經(jīng)消毒部位插入，吸取內(nèi)部液體，此后將病料注入滅菌試管中，加蓋。也可用接種環(huán)經(jīng)消毒部位插入，提取病料直接接種在培養(yǎng)基上。胎兒樣品的收集取流產(chǎn)后的整個胎兒，裝入自封袋或不透水塑料薄膜中。皮膚樣品的收集用清水沖刷病變皮膚后，取病變皮膚3～5g放入滅菌小瓶中，加合適50％甘油磷實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC03-2016第4頁共4頁實驗室檢測樣品收集第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行酸鹽緩沖液，加蓋密封。死（屠宰）禽樣品的收集死（屠宰）禽樣品的收集除按上述方法收集，也可將整個死禽裝入不透水塑料薄膜袋或自封袋中或其他容器內(nèi)。組織樣品收集完后的無害化辦理活畜禽、病死畜禽組織樣品收集完后，應(yīng)做好樣品外包裝和環(huán)境消毒以及病死畜禽及其產(chǎn)品的無害化辦理。樣品編號、抽樣單填寫樣品編號每頭動物的不同樣部位的組織樣品應(yīng)獨自包裝。包裝好后，在樣品袋或平皿外貼上標(biāo)簽，標(biāo)簽注明樣品名、樣品編號、采樣日期等。收集好不同樣部位的樣品后，同一動物的樣品集中包裝。采樣單填寫可依據(jù)詳盡要求填寫。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC03-2016第1頁共2頁實驗室檢測樣品包裝和運送第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行目的保護檢測樣品的質(zhì)量，防范病原的泄露和擴散，保障樣品檢測的順利睜開。合用范圍合用于檢測樣品的包裝和運送。職責(zé)操作者必然嚴格依據(jù)本程序操作，不能夠私自做出超出本程序的操作，所有實驗人員對所從事的工作負相應(yīng)的責(zé)任。實驗室負責(zé)人負有對樣品包裝、運輸?shù)亩讲楹凸芾砺氊?zé)，并督查檢查有關(guān)工作人員的安全工作程序和行為。過程要求擬運輸?shù)臉悠罚髧缹嵃b，表面加以消毒，編號、登記后，貼上“生物危險”表記，并嚴防表記零落。樣品必然經(jīng)三層包裝。樣品的包裝內(nèi)包裝必然是不透水、防泄露的主容器，保證圓滿密封。必然是結(jié)實、不透水和防泄露的協(xié)助包裝。必然在主容器和協(xié)助包裝之間填充吸附資料。吸附資料必然充分，能夠吸取所有的內(nèi)裝物。多個主容器裝入一個協(xié)助包裝時，必然將它們分別包裝。主容器的表面貼上標(biāo)簽，注明樣品種類、編號、名稱、數(shù)量等信息。有關(guān)文件，比方毒種或樣本數(shù)量表格、危險性聲明、信函、毒種或樣本判斷資料、發(fā)送者和接收者的信息等應(yīng)該放入一個防水袋中，并貼在協(xié)助包裝的外面。外包裝外包裝的強度應(yīng)該充分知足關(guān)于其容器、重量及預(yù)期使用方式的要求。外包裝應(yīng)該印上生物危險表記。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC03-2016第2頁共2頁實驗室檢測樣品包裝和運送第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行包裝要求液體或許固體樣品在協(xié)助包裝周圍必然放置冰、干冰或許其他冷凍劑，或許依據(jù)規(guī)定將冷凍劑放在由一個也好多個圓滿包裝件組成的合成包裝件中，內(nèi)部要有支撐物，干冰或許干冰耗費掉此后，還能夠把協(xié)助包裝固定在原地點上。假如使用冰，包裝必然不透水；假如使用干冰，外包裝必然能排出二氧化碳氣體；假如使用冷凍劑，主容器和協(xié)助包裝必然保持優(yōu)秀的性能，在冷凍劑耗費完此后，還能夠承受運輸中的溫度和壓力。凍干樣品主容器必然是火焰封口的玻璃安瓿或許是用金屬封口的膠塞玻璃瓶。在協(xié)助包裝周圍還必然放置冰、干冰或許其他冷凍劑。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC04-2016第1頁共1頁實驗室檢測樣品接收第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行目的規(guī)范接收檢測樣品，保證生物安全。合用范圍合用于送檢樣品的交接收理。職責(zé)專人負責(zé)接收樣品和接樣的生物安全。過程要求檢測樣品由專人接收，在接收送檢樣品時應(yīng)作好樣品登記，填寫《樣品接收登記表》,并對樣品進行符合性檢查，檢查包括：樣品包裝、標(biāo)志及外觀能否圓滿；比較抽樣單核查樣品的名稱、采樣地點、樣品數(shù)量、性狀等信息；樣品能否損壞、污染或已過有效期。接樣人進行樣品登記、保留后，報告實驗室負責(zé)人安排檢測工作。查驗后的節(jié)余樣品，由樣品保留人負責(zé)保留。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC05-2016第1頁共1頁樣品檢測操作規(guī)程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行目的為規(guī)范樣品的檢測，特制定本規(guī)程。合用范圍合用不同樣待檢樣品的檢測。職責(zé)實驗室工作人員嚴格依據(jù)本規(guī)程進行樣品的檢測。實驗室負責(zé)人負責(zé)督查實驗室工作人員樣品的檢測工作。過程要求樣品的檢測方法應(yīng)采用《作業(yè)指導(dǎo)書-檢測標(biāo)準》（GTCADC-ZYBZ-2016）規(guī)定的方法。有關(guān)文件《作業(yè)指導(dǎo)書-檢測標(biāo)準》（GTCADC-ZYBZ-2016）實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC06-2016電氣設(shè)備操作規(guī)程目的

第1頁共1頁第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行為規(guī)范實驗室電氣設(shè)備的使用和保護，特制定本規(guī)程。合用范圍合用于電氣設(shè)備的操作和保護。職責(zé)實驗室工作人員嚴格依據(jù)本規(guī)程進履行用電氣設(shè)備。過程要求實驗室工作人員必然熟悉儀器的性能、用途、使用方法，嚴格依聽聞明書使用，恪守儀器操作規(guī)程。儀器使用過程中發(fā)生故障必然馬上停止使用，并報告實驗室負責(zé)人，實時查找原因，趕快除去，并登記。使用完成必然對使用過的儀器設(shè)備按有關(guān)要求去除污染，以減少污染風(fēng)險。有關(guān)文件《作業(yè)指導(dǎo)書-儀器設(shè)備操作規(guī)程》(GTCADC-ZYGC-2016)實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC07-2016實驗室消毒劑配制標(biāo)準操作規(guī)程目的

第1頁共2頁第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行規(guī)范實驗室消毒劑配制，保證消毒液的有效性和實驗室生物安全。2．合用范圍合用于查驗科實驗室常用消毒劑的配制。3．職責(zé)實驗室工作人員負責(zé)常用消毒劑的配制。4．過程要求消毒劑配制配制前，實驗室工作人員應(yīng)洗凈配制容器及量具，自然晾干。按試劑配制的配方和配質(zhì)量量取所需藥品。按配制要求的先后序次加入藥品，攪拌平均配制試劑。配制過程產(chǎn)熱的試劑待自然冷卻后分裝，并將填寫好品名、濃度、配制時間、有效期的標(biāo)簽貼于盛裝容器上。做好配制記錄。常用消毒劑的配方及注意事項見下表1。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC07-2016第2頁共2頁實驗室消毒劑配制標(biāo)準操作規(guī)程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行表1常用消毒劑種類和配制方法表消毒劑名稱用途配制方法備注%新潔爾滅手消毒，儀器表面消量取5%新潔爾滅溶液100mL置于配制容器中，加入2400mL純化水?dāng)嚢杌靹?。毒?%NaOH溶液稱取20gNaOH固體，遲緩加入純化水定容到強堿pH值大原位消毒1000mL。于1375%乙醇手表面消毒取750mL無水乙醇加純化水定容到1000mL。配制好的過氧乙酸需室冰醋酸∶H2O2∶濃H2SO4按體積比∶∶配制。根溫放置48h后15%~18%過氧乙酸實驗室薰蒸消毒據(jù)需要量分別量取所需的過氧化氫、冰醋酸和使用。超出濃硫酸。置于配制容器中攪拌平均。使用時可20%的過氧乙加入催化劑高錳酸鉀或加熱。酸會發(fā)生爆炸。一周內(nèi)用完。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC08-2016第1頁共2頁無菌間使用標(biāo)準操作規(guī)程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行目的保證無菌室環(huán)境的無菌狀態(tài)。合用范圍合用于無菌間空氣微生物監(jiān)測。職責(zé)實驗室工作人員負責(zé)實驗室空氣微生物監(jiān)測和實行。過程要求實驗室工作人員在進無菌間以前，應(yīng)先用2%石碳酸或來蘇爾敵手進行浸泡消毒。緩沖間在每次使用前，應(yīng)先翻開紫外燈，紫外照射30min；工作人員在進入無菌室前，必然于緩沖間內(nèi)改換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。查驗用的有關(guān)器械（待檢品除外），搬入無菌室前必然分別進行滅菌消毒。將無菌間和生物安全柜的紫外燈翻開照射30min后，才能進行工作。實驗完成后，用%新潔爾滅消毒液擦拭生物安全柜臺面，翻開生物安全柜內(nèi)紫外燈，照射30min。同時無菌間緩和沖間的紫外燈一并翻開，照射30min。工作人員在緩沖間脫下工作服、工作帽及工作鞋。合時對付無菌間進行熏蒸消毒。每個月對付無菌間進行一次無菌檢查記錄營養(yǎng)瓊脂平板的制備按營養(yǎng)瓊脂說明書配制營養(yǎng)瓊脂，120℃15min高壓滅菌后，冷卻到50℃左右傾倒于9cm的平板。待瓊脂凝結(jié)后，放37℃48h培養(yǎng)，無菌生長，方能夠使用。沉降菌數(shù)測定先翻開無菌室內(nèi)紫外燈照射30min后，將備妥的營養(yǎng)瓊脂平板5個。以無菌方式移入操作間，置四個角落和中央各1個，開蓋，裸露30分鐘后將蓋蓋上。在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)倒置培養(yǎng)48h，取出檢查。分別數(shù)出5個平板的生長菌落數(shù)并得出5個平板的平均菌落數(shù)。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC08-2016第2頁共2頁無菌間使用標(biāo)準操作規(guī)程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行結(jié)果判斷無菌室內(nèi)的潔凈級別應(yīng)達到10000級，即在進行沉降菌數(shù)測準時，平均菌落數(shù)應(yīng)小于或等于3個（φ90mm，）。如所測得的平均菌落數(shù)小于3個，則證明該無菌室無菌程度符合要求，否則該無菌室的無菌程度不符合要求，需要對無菌間進行完整消毒，直至重復(fù)檢查符合要求為止。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC09-2016第1頁共2頁實驗室荒棄物辦理標(biāo)準操作規(guī)程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行目的制定實驗室荒棄物安全辦理操作規(guī)程，保障實驗室生物安全。合用范圍合用于實驗室荒棄物的辦理。職責(zé)實驗室工作人員嚴格恪守本規(guī)程，并對所從事的工作負有生物安全責(zé)任。實驗室負責(zé)人負有督查和管理責(zé)任。過程要求實驗室工作人員做好個人防范。穿好工作服、戴妙手套、口罩和帽子等。實驗室荒棄物使用防滲專用包裝容器（袋）或許防銳器穿透密閉容器收集，實時進行無害化辦理，并做好實驗室荒棄物辦理記錄?；臈壩锓诸愞k理感染性荒棄物辦理培養(yǎng)基、標(biāo)本和菌（毒）種保留液、血液、血清、臨床標(biāo)本等感染性荒棄物須進行壓力蒸汽滅菌。用過的一次性實驗用品（包括手套、口罩、帽子等）及試管、吸管、移液器吸優(yōu)等感染性荒棄物可進行壓力蒸汽滅菌或消毒液浸泡24h。傷害性荒棄物辦理針頭、縫合針、解剖刀、手術(shù)刀、備皮刀、手術(shù)鋸，試驗玻片、玻璃試管、玻璃安瓿等能夠刺傷或割傷人體的荒棄的實驗利（銳）器等傷害性荒棄物需放入符合要求的利器盒里，容器裝滿3/4后封蓋，進行高壓蒸汽滅菌辦理。藥物性荒棄物辦理過期、裁汰、變質(zhì)或許被污染的診療試劑可采用壓力蒸汽滅菌辦理。病理性荒棄物辦理動物組織及動物尸體使用兩層防滲專用包裝容器（袋）包裝好（外包裝進行完整的消毒辦理），按要求進行燃燒、深埋或送往無害化辦理場辦理。做好荒棄物處實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC09-2016第2頁共2頁實驗室荒棄物辦理標(biāo)準操作規(guī)程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行理記錄。化學(xué)品荒棄按組分收集后，倒入專用化學(xué)荒棄物收集桶內(nèi)，集中辦理。實驗室生物安全標(biāo)準操作規(guī)程（SOP）HYEY-PGC10-2016第1頁共1頁實驗室消毒標(biāo)準操作規(guī)程第3版第0次校正2016年1月11日宣布/1月20日實行目的保護實驗室的生物安全，防范病原逃逸。合用范圍實驗室平常潔凈，實驗過程中產(chǎn)生的污染荒棄物、使用過的防范裝備及設(shè)備設(shè)備等的消毒。3職責(zé)實驗室工作人員依據(jù)本標(biāo)準進行平常消毒。4過程要求儀器設(shè)備表面：用%新潔爾或%～%有效氯消毒液擦拭，30min后再用潔凈的濕抹布擦拭2次。荒棄的病毒資料和操作過程中使用的一次性耗材先置于

2%NaOH溶液浸泡

2h，依據(jù)廢棄物的辦理程序辦理。生物安全柜臺面：用

%新潔爾、%～%有效氯等消毒液浸潤的無紡抹布擦拭，

30min后再用潔凈的濕抹布擦拭

2次。使用生物安全柜前后，要用紫外線照射消毒

30min。個人防范裝備：工作鞋、橡膠手套可用%～%有效氯消毒液浸泡2h，工作衣帽和口罩高溫高壓消毒后沖刷。手消毒：用75%乙醇進行消毒。地面及墻壁：用%～%有效氯消毒液浸潤的抹布擦拭，30min