《細(xì)胞融合和單克隆抗體》教案

PAGE7第三節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程細(xì)胞融合和單克隆抗體一、學(xué)習(xí)目標(biāo)（1）說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同。（2）簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的過(guò)程、方法與原理。（3）了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用，并說(shuō)其應(yīng)用實(shí)例。二、教學(xué)重點(diǎn)（1）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別（2）單克隆抗體的制備過(guò)程、方法與原理（3）單克隆抗體應(yīng)用三、教學(xué)難點(diǎn)單克隆抗體的制備（篩選的方法及必要性理解）與其特異性強(qiáng)的理解（克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體）四、課前準(zhǔn)備（學(xué)案編制、課件制作、教學(xué)模式整理）五、教學(xué)過(guò)程（一）情景導(dǎo)入，復(fù)習(xí)已有知識(shí)做好鋪墊1．學(xué)生閱讀“太空婚禮”新聞報(bào)道資料2022年12月30日，兩場(chǎng)籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號(hào)飛船上舉行，植物細(xì)胞“新人”—有液泡的黃花煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體和脫液泡的革新一號(hào)煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞“新人”是小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，兩批新人同時(shí)在“產(chǎn)房”—電融合儀內(nèi)孕育新生命。一段時(shí)間后，我國(guó)首批“太空娃娃”終于順利誕生。對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，細(xì)胞融合率大大提高。2．教師展示“神舟四號(hào)飛船”圖片，說(shuō)明如果這次“動(dòng)物細(xì)胞婚禮”進(jìn)展順利，人們將從雜交瘤細(xì)胞的分泌物中提取到乙肝抗體，這將為規(guī)劃未來(lái)空間藥廠提供第一手?jǐn)?shù)據(jù)。展示幾個(gè)月后已經(jīng)長(zhǎng)成的“太空煙草”和普通煙草對(duì)照?qǐng)D片。挑戰(zhàn)自我：神舟放飛強(qiáng)國(guó)夢(mèng)，你能主持“太空婚禮”中的科研項(xiàng)目嗎3．幫助學(xué)生回憶植物體細(xì)胞雜交過(guò)程，理解為什么在太空中細(xì)胞（原生質(zhì)體）融合率會(huì)大大上升為什么選用物理法誘導(dǎo)分析真實(shí)實(shí)驗(yàn)操作中關(guān)鍵細(xì)節(jié)：融合后需要篩選、要獲得優(yōu)良性狀的雜種植株需要經(jīng)過(guò)鑒定與篩選。4．讓學(xué)生填寫“太空婚禮”植物科研項(xiàng)目計(jì)劃書，教師評(píng)價(jià)項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交原理融合前處理促融方法步驟一步驟二步驟三步驟四用途（二）學(xué)習(xí)新知1動(dòng)物細(xì)胞融合1．1結(jié)合問(wèn)題閱讀課本：什么是動(dòng)物細(xì)胞融合它相當(dāng)于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的哪一步它們的過(guò)程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同學(xué)生嘗試回答后，教師評(píng)價(jià)。講解動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、滅活病毒誘導(dǎo)融合的原理；動(dòng)物細(xì)胞融合概念與意義。1．2根據(jù)體液免疫過(guò)程圖解，回答相關(guān)內(nèi)容：抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生其化學(xué)本質(zhì)是什么主要作用與抗原作用的特點(diǎn)主要分布在哪里1．3閱讀資料，討論相關(guān)免疫特異性問(wèn)題，糾正“一個(gè)天然抗原是引起產(chǎn)生一種效應(yīng)B細(xì)胞和一種特異性抗體”的錯(cuò)誤認(rèn)識(shí)，抗原決定簇才是引發(fā)免疫特異性細(xì)胞和物質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)?？乖瓫Q定簇是決定抗原性的特殊化學(xué)基團(tuán)。大多存在于抗原物質(zhì)的表面，有些存在于其內(nèi)部，須經(jīng)處理后才暴露出來(lái)。一個(gè)天然抗原物質(zhì)可有多種和多個(gè)決定簇。教材中所說(shuō)的抗原分子刺激淋巴細(xì)胞，說(shuō)的也就是抗原決定簇刺激B淋巴細(xì)胞，使其分裂分化出特異性的效應(yīng)B細(xì)胞，分泌特異性抗體。1．4．通過(guò)看圖分析說(shuō)明傳統(tǒng)抗體的生產(chǎn)方法及缺陷——產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低2單克隆抗體2．1單克隆抗體的概念閱讀資料，找出單克隆抗體的概念人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。讓學(xué)生分析“單、“克隆”、“單克隆抗體”的含義。2．2單克隆抗體的制備2．2．1請(qǐng)學(xué)生根據(jù)所學(xué)動(dòng)物細(xì)胞融合原理提出單克隆抗體的設(shè)計(jì)方案問(wèn)題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體小組討論，請(qǐng)代表發(fā)言。提示：可以通過(guò)對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲取單克隆抗體嗎我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的從誘變育種、基因工程、細(xì)胞工程等角度有哪些可能的設(shè)計(jì)思路2．2．2介紹1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒極富創(chuàng)造性的實(shí)驗(yàn)方案與實(shí)驗(yàn)過(guò)程步驟，讓學(xué)生看書上53頁(yè)單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，分組討論，單抗制備過(guò)程分哪幾步請(qǐng)用箭頭把搞亂的代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟圖解的字母按正確順序連接起來(lái)。順序是2．2．3讓學(xué)生描述單克隆抗體制備過(guò)程步驟，分析包含哪些原理、哪些動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)2．2．4引導(dǎo)學(xué)生分析討論單克隆抗體的制備過(guò)程中的關(guān)鍵問(wèn)題與方法問(wèn)題①注射抗原的目的是什么②誘導(dǎo)細(xì)胞融合的手段有哪些③若細(xì)胞兩兩融合后，有幾種融合情況④第一次篩選出的雜交瘤細(xì)胞為何需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)⑤實(shí)際操作中如何進(jìn)行兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞（用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行第一次篩選，有限稀釋法培養(yǎng)進(jìn)行第二次篩選）2．3單克隆抗體的應(yīng)用2．3．1單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)因?yàn)閱慰寺∈强寺蝹€(gè)雜交瘤細(xì)胞，制備的是抗一種抗原決定簇的特異性單克隆抗體，因此單抗的突出優(yōu)點(diǎn)——特異性強(qiáng)、靈敏度高。2．3．2單克隆抗體用途由于單抗的突出優(yōu)點(diǎn)，它的最廣泛的用途是作為①診斷試劑，以“早早孕單抗試劑”來(lái)說(shuō)明其準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的特點(diǎn)。②治療、預(yù)防疾?、圻\(yùn)載藥物（“生物導(dǎo)彈”—單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭，主要用于綠色抗癌）（三）總結(jié)歸納補(bǔ)全“太空婚禮”科研項(xiàng)目計(jì)劃書項(xiàng)目植物