精液的稀釋課件

精液的稀釋精液稀釋的步驟1.稀釋前的準(zhǔn)備工作2.精液直觀指標(biāo)測定3.活力測定4.密度測定5.精液的稀釋6.精液的分裝7.精液的保存8.實(shí)驗(yàn)器材的清洗、消毒1.稀釋前的準(zhǔn)備工作①稀釋液的制備每天進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的第一件事就是制作稀釋液。稀釋液有三個(gè)部分組成：稀釋粉、二重蒸餾水、慶大霉素。稀釋粉：蒸餾水：慶大霉素=50g：1L：8萬IU

當(dāng)天制作當(dāng)天用，不可放到第二天繼續(xù)使用。制作好的稀釋液放入37℃的恒溫水浴箱里備用。

2.直觀指標(biāo)測定采精室送來的精液應(yīng)在最短的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行稀釋和保存，但在稀釋前應(yīng)對精液進(jìn)行一些檢查，以確定精液是否有使用價(jià)值

容量新鮮精液容量應(yīng)在100－250ml；過多，可能是混有尿液或副性腺有炎癥，過少，說明采精方法不當(dāng)或公豬生精能力降低。

色澤精液色澤應(yīng)為乳白色或灰白色，紅色說明有血液。綠色說明有膿液，清黃色說明有尿液；精液色澤越白越濃（可能偏黃）說明精子濃度越高。

氣味精液應(yīng)沒有明顯異味，有腥味說明有膿液，有臊味說明混有尿液；

2.直觀指標(biāo)測定3.活力測定將精液輕輕搖動(dòng)或用潔凈的玻璃棒攪動(dòng)，用微量移液器或玻璃棒取精液20uI，放于預(yù)溫后載玻片中央，蓋上蓋坡片，在載物臺上預(yù)溫片刻，用推進(jìn)器將載玻片推至物鏡下，在100和400倍下進(jìn)行觀察。如果精子無凝集、出現(xiàn)大群運(yùn)動(dòng)波，無明顯死亡精子。應(yīng)為“很好”；如果精液出現(xiàn)大群波動(dòng)，但有少量死亡精子應(yīng)為“好”；如果有成群運(yùn)動(dòng)，但有精子凝集現(xiàn)象，應(yīng)為“一般”；有大片凝集或死亡，但有部分精子在正常運(yùn)動(dòng)應(yīng)為“差”。

3.活力測定注意事項(xiàng)：（1）顯微鏡的光源光圈應(yīng)盡量小些，光線過強(qiáng)，就無法看清精子；（2）每次調(diào)節(jié)顯微鏡焦距時(shí)，都應(yīng)先將載物臺先調(diào)到與物鏡最近的距離，但不能使載玻片與物鏡接觸，然后緩慢放低載物臺，同時(shí)從目鏡觀察，直到觀察到精子為止；觀察活力時(shí)應(yīng)輕輕調(diào)節(jié)微調(diào)，以觀察各個(gè)層次的精子活動(dòng)情況。4.密度測定經(jīng)過品質(zhì)檢查合格的精液應(yīng)立即進(jìn)行稀釋。①確定精液的稀釋份數(shù)與所加入稀釋液的量。一般要求每份輸精劑量為80ml，含有效精子40億。例如：采得一頭公豬的精液量為200ml，通過精液質(zhì)量檢查確定活率為0.7，其密度為2.0億/ml，依據(jù)公式可得：理論稀釋份數(shù)=200mlⅹ2.0億/mlⅹ0.7÷40億/份=8.7份,實(shí)際稀釋份數(shù)=可根據(jù)實(shí)際情況在理論數(shù)的基礎(chǔ)上保守約為8份。稀釋液量=80ⅹ8-200=440ml。②

稀釋前，稀釋液的溫度應(yīng)和精液接近，相差不能超過1℃。根據(jù)計(jì)算好的稀釋頭份，用量杯量取稀釋液的體積，或簡單一點(diǎn)，按1ML精液或稀釋液約等于1克，用精密電子天平直接稱量，國外專業(yè)公豬站多采用此法。5.精液的稀釋6.精液的分裝①精液的分裝，有瓶裝和袋裝兩種，裝精液用的瓶子和袋子均為對精子無毒害作用的塑料制品。瓶裝的精液分裝時(shí)簡單方便，易于操作，但輸精時(shí)需人為擠、壓或瓶底開口，因瓶子有一定的固體形態(tài)；袋裝的精液分裝一般需要專門的精液分裝機(jī)，用機(jī)械分裝、封口，但輸精時(shí)因其較軟，一般不需人為擠壓。瓶子一般上面均有刻度，最高一刻度為80ML，袋子一般為80ML。②分裝后的精液，要逐個(gè)粘貼標(biāo)簽，一般一個(gè)品種一個(gè)顏色，便于區(qū)分。注意要在上面標(biāo)明公豬耳號、采精處理時(shí)間、稀釋后密度、經(jīng)手人等，并將以上各項(xiàng)登記到記錄本上，以備查驗(yàn)。

6.精液的分裝7.稀釋后精液的保存①分裝后的精液，不能立即放入17℃左右的恒溫冰箱內(nèi)，應(yīng)先留在冰箱外1小時(shí)左右，讓其溫度下降，以免因溫度下降過快而刺激精子，造成死精子等增多。

②放入冰箱時(shí)，不同品種的公豬精液應(yīng)分開放置，否則匆忙中容易拿錯(cuò)精液。不論是瓶裝的或是袋裝的，均應(yīng)平放，并可疊放。從放入冰箱開始，每隔12小時(shí)，要搖勻一次精液，因精子放置時(shí)間一長，會(huì)大部分沉淀。對于一般豬場來說，可在早上上班，下午下班時(shí)各搖勻一次。為了便于監(jiān)督，每次搖動(dòng)的人都應(yīng)有搖動(dòng)時(shí)間和人員的記錄。

③保存過程中，一定要時(shí)時(shí)注意冰箱內(nèi)溫度計(jì)的變化，以免因意想不到的原因而造成電壓不穩(wěn)而導(dǎo)致溫度升高或降低。8.實(shí)驗(yàn)器材的清洗、消毒最后就是把實(shí)驗(yàn)器材進(jìn)行清洗，消毒所有器皿應(yīng)用對皮膚危害性小的、易洗滌的清潔劑清洗，并用自來水沖凈，再