恬心湯對壓力超負(fù)荷性心肌肥厚大鼠心功能的影響

恬心湯對壓力超負(fù)荷性心肌肥厚大鼠心功能的影響吳明華，趙志國，吳俊喜，楚立【摘要】目的研究中藥復(fù)方恬心湯對壓力超負(fù)荷性心肌肥厚模型大鼠的作用及機(jī)理。方法采用大鼠腹主動(dòng)脈縮窄法復(fù)制壓力超負(fù)荷性心肌肥厚模型。于術(shù)后第8周測定心臟重量指數(shù)及血液生化指標(biāo)，包括血管緊張素Ⅱ〔AngⅡ〕、內(nèi)皮素(ET)、醛固酮〔ALD〕、心房鈉尿肽(ANP〕、一氧化氮〔N〕、一氧化氮合酶〔NS〕、超氧化物歧化酶〔SD〕。結(jié)果模型對照組與假手術(shù)組比擬,心臟重量指數(shù)顯著增加〔P0.01〕；AngⅡ、ALD、ET、ANP顯著升高，而NS、N、SD顯著降低?？ㄍ衅绽M、恬心湯干預(yù)組分別與模型對照組比擬，心臟重量指數(shù)顯著降低〔P0.01〕；AngⅡ、ALD、ET、ANP顯著降低，而NS、N、SD顯著升高。結(jié)論恬心湯可明顯抑制壓力超負(fù)荷性心肌肥厚大鼠心肌肥厚的開展，可能通過腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS〕以及N系統(tǒng)而發(fā)揮作用?！娟P(guān)鍵詞】恬心湯；壓力超負(fù)荷；心肌肥厚；大鼠心肌肥大是心肌細(xì)胞對持續(xù)性負(fù)荷增加的一種適應(yīng)性反響。初期的心肌肥大有一定代償意義，但心肌肥大引起的心肌肥厚及心肌重構(gòu)最終可導(dǎo)致心力衰竭，因此防止心肌肥厚對治療心力衰竭有重要的意義。我們在長期臨床理論和理論探究的根底上，研制出治療心衰行之有效的益氣活血中藥復(fù)方恬心湯，臨床應(yīng)用于各類心臟病所導(dǎo)致的心力衰竭，獲得了良好的臨床療效。本研究旨在討論恬心湯對壓力超負(fù)荷性心肌肥厚的作用，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)根據(jù)。1材料與儀器1.1藥物恬心湯由人參、當(dāng)歸、白芍、川芎、赤芍、丹參、炙黃芪、丹皮等組成，用水提醇沉法制成煎劑〔1g生藥/l〕，河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院提供，實(shí)驗(yàn)時(shí)稀釋至所需濃度。1.2動(dòng)物安康雄性SD大鼠40只，體質(zhì)量220～280g，購于河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。1.3試劑與儀器卡托普利，常州制藥廠消費(fèi)，批號：0602281。FA2022型電子天平，上海良平儀器儀表。722光柵分光光度計(jì)，上海第三儀器廠。N-1001型EYELA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SB-2000型EYELA水浴鍋，上海愛郎儀器。FJ-2021型γ-放射免疫計(jì)數(shù)器，西安二六二廠。2方法大鼠隨機(jī)分為5組：假手術(shù)組、模型對照組、卡托普利組、恬心湯干預(yù)組〔孝大劑量組〕，每組10只，按照以下方法復(fù)制壓力負(fù)荷性心肌肥厚模型：用20g/L戊巴比妥40g/kg腹腔注射麻醉大鼠，翻開腹腔，在腎動(dòng)脈分支以上，鈍性別離暴露腹主動(dòng)脈。用5號醫(yī)用絲線將直徑約0.6的6號去尖注射針頭與腹主動(dòng)脈一起平行結(jié)扎，抽出針頭，即可形成腹主動(dòng)脈狹窄。假手術(shù)組同樣別離腹主動(dòng)脈，但不結(jié)扎。手術(shù)后第6周起，假手術(shù)組、模型對照組每天生理鹽水腹腔注射1l/100g；卡托普利組給予卡托普利灌胃30g/kg；恬心湯孝大劑量組分別灌胃給藥〔1，3g/kg〕，1次/d。第8周時(shí)用25%烏拉坦4l/kg麻醉后稱重，股動(dòng)脈取血，測定血管緊張素Ⅱ〔AngⅡ〕、內(nèi)皮素〔ET)、醛固酮〔ALD〕、心房鈉尿肽〔ANP)、一氧化氮〔N〕、一氧化氮合酶〔NS〕、超氧化物歧化酶〔SD〕；取其心臟，滿意臟重量及心室重量，計(jì)算心臟重量指數(shù)〔心臟重/體質(zhì)量〕、心室重量指數(shù)〔心室重/體質(zhì)量〕。3結(jié)果3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量分析參加實(shí)驗(yàn)50只大鼠，在實(shí)驗(yàn)期間模型對照組大鼠因急性心衰死亡2只，卡托普利組因急性心衰死亡1只；恬心湯小劑量組因急性心衰死亡1只，恬心湯大劑量組和假手術(shù)組大鼠沒有死亡。在實(shí)驗(yàn)觀察終點(diǎn)時(shí)，存活大鼠共46只。3.2各組大鼠體質(zhì)量、心臟重量指數(shù)、心室重量指數(shù)比擬各組大鼠體質(zhì)量比擬，差異無顯著意義〔P0.05)，模型組心臟重量指數(shù)、心室重量指數(shù)較假手術(shù)組明顯增加〔P0.01)，說明模型組大鼠心肌明顯肥厚?？ㄍ衅绽M與恬心湯組心臟重量指數(shù)、心室重量指數(shù)較模型組明顯降低〔P0.01〕。見表1。表1各組大鼠的體質(zhì)量、心臟重量指數(shù)、心室重量指數(shù)比擬(略)轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.3.3各組大鼠血液生化指標(biāo)比擬模型對照組與假手術(shù)組比擬，AngⅡ，ALD，ET，ANP顯著升高，而NS、N、SD顯著降低。卡托普利組、恬心湯干預(yù)組分別與模型對照組比擬，AngⅡ、ALD、ET、ANP顯著降低，而NS、N、SD顯著升高。結(jié)果見表2。表2各組大鼠血液生化指標(biāo)比擬(略)3.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)展數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析，組間比擬采用單因素方差分析。4討論本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組心臟重量指數(shù)較假手術(shù)組明顯增加，說明模型組大鼠心肌明顯肥厚，復(fù)制模型成功。而經(jīng)卡托普利、恬心湯干預(yù)后心肌肥厚明顯減輕。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為，充血性心力衰竭病機(jī)特點(diǎn)為本虛標(biāo)實(shí)，本虛為氣虛、陽虛，標(biāo)實(shí)為血瘀水停，心氣虛是心衰早期的主要病理特征，而血瘀是心衰晚期由于氣虛陽虛帥血無力所引起的，故心衰的根本病機(jī)是“心陽不振、肺失清肅〞。治療心衰時(shí)需心肺兼治，扶正祛邪并舉。我們在長期臨床理論和理論探究的根底上，研制出治療心衰行之有效的益氣活血復(fù)方中藥恬心湯，應(yīng)用于各類心臟病所導(dǎo)致的心衰，獲得了良好療效。其現(xiàn)代藥理研究諸藥可到達(dá)強(qiáng)心、擴(kuò)血管、抗血小板、利尿及保護(hù)心肌的效果。對于壓力負(fù)荷導(dǎo)致心肌肥厚的作用機(jī)制有兩種觀點(diǎn)［1］：直接作用和間接作用。循環(huán)壓力負(fù)荷直接導(dǎo)致心肌肥厚的觀點(diǎn)認(rèn)為壓力負(fù)荷〔機(jī)械信號〕本身就足以刺激心肌細(xì)胞內(nèi)部的肥厚反響；間接作用那么認(rèn)為還有一些自分泌、旁分泌和內(nèi)分泌因子介入了這一過程，一方面直接刺激細(xì)胞生長，另一方面作為次級信號分子調(diào)節(jié)細(xì)胞對壓力負(fù)荷的適應(yīng)性反響，且這些分泌因子在心肌肥厚發(fā)生中的作用多年來一直是研究的熱點(diǎn)，包括腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)〔RAAS〕、兒茶酚胺類、N合成系統(tǒng)等。研究證實(shí)其中許多成分直接誘導(dǎo)或是介入了心肌肥厚的發(fā)生和開展過程，同時(shí)各系統(tǒng)之間并非孤立而是嚴(yán)密相關(guān)的。如RAAS和N合成系統(tǒng)之間通過血管緊張素轉(zhuǎn)化酶〔AE〕和緩激肽互相影響。AE不僅決定著AngⅡ的最終產(chǎn)生，同時(shí)通過失活緩激肽來調(diào)節(jié)N的產(chǎn)生，因?yàn)榛罨木徏る目梢源碳S的活性。AngⅡ與N的作用正好相反，顯然它們之間的作用平衡將決定心肌細(xì)胞的收縮功能和能量消耗，這也是心肌肥厚發(fā)生的決定因素［2］。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，壓力負(fù)荷后AngⅡ、ALD顯著升高，說明RAAS被激活，引起心肌肥厚?？ㄍ衅绽麑儆谘芫o張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑〔AEi〕，可明顯抑制AngⅡ、ALD的上升，進(jìn)而改善心肌肥厚。恬心湯也具有類似的作用，說明抑制RAAS的活性可能是其抗心肌肥厚的機(jī)制之一。ANP為胚胎期表達(dá)的基因，出生后在正常心肌組織中表達(dá)量很低。假如檢測到ANP含量明顯增加，那么屬于胚胎期基因重演，為病理性心肌肥大的可靠指標(biāo)［3］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，伴隨心肌肥厚的發(fā)生，ANP顯著升高，而經(jīng)藥物干預(yù)后ANP含量下降，說明恬心湯在抑制RAAS并改善心肌肥厚的同時(shí)也影響著ANP的表達(dá)。ET是一種21個(gè)氨基酸組成的縮血管活性肽，具有多種生物學(xué)活性，包括促血管平滑肌增殖、纖維化、炎癥等，是一種潛在的心肌細(xì)胞生長因子和肥厚因子。N是一種極強(qiáng)的舒張血管的物質(zhì)，心臟中的N除引起冠狀血管舒張，調(diào)節(jié)冠脈供血等一系列效用外，可通過自分泌和〔或)旁分泌的途徑抑制細(xì)胞增生和膠原合成改善心肌纖維化，故N是一種重要的抗心肌纖維化因子。N在心肌肥厚中發(fā)揮拮抗ET等縮血管物質(zhì)的作用［1～5］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示伴隨心肌肥厚的產(chǎn)生，ET升高顯著，而N、NS顯著降低。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，在心肌肥厚發(fā)生后的病理狀態(tài)下，舒縮血管活性物質(zhì)之間的平衡狀態(tài)被打破，發(fā)生調(diào)節(jié)紊亂。而經(jīng)卡托普利、恬心湯干預(yù)后，這一平衡狀態(tài)有所恢復(fù)，這可能是恬心湯抗心肌肥厚的又一機(jī)制。SD是體內(nèi)去除氧自由基最主要的酶，可以有效地去除并終止2-·引發(fā)的連鎖反響，對機(jī)體的氧化和抗氧化平衡起著關(guān)鍵作用，其含量的上下間接反映了機(jī)體去除氧自由基的才能［6］。本次實(shí)驗(yàn)中，恬心湯干預(yù)組大鼠SD明顯高于模型組，說明恬心湯可阻止氧自由基對細(xì)胞膜的攻擊，減輕脂質(zhì)過氧化損傷，從而改善心肌肥厚。綜上所述，恬心湯可通過多途徑、多環(huán)節(jié)發(fā)揮抗心肌肥厚的作用，其中以RAAS、N系統(tǒng)最為重要，其詳細(xì)機(jī)制還有待于系統(tǒng)全面地研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】［1］張?jiān)骑w,吳先均,文秀華,等.心肌肥厚機(jī)制研究進(jìn)展［J］.心血管病學(xué)進(jìn)展,2022,26(2):197.［2］alderneA,Thaik,TakahashiN,etal.Nitrixide,atrialnatriuretipeptideandyliGPinhibitthegrth-prtingeffetsfnrepinephrineinardiayytesandfibrblasts［J］.JlinInvest,1998,101:812.［3］劉培慶,魯偉,潘敬運(yùn).一氧化氮抑制AngⅡ介導(dǎo)的心肌肥大反響的信號機(jī)制［J］.生理學(xué)報(bào),2022,54(3):213.［4］詹昌德.一氧化氮在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