循環(huán)腫瘤細(xì)胞在結(jié)腸癌術(shù)后復(fù)發(fā)的臨床檢測(cè)及意義

循環(huán)腫瘤細(xì)胞在結(jié)腸癌術(shù)后復(fù)發(fā)的臨床檢測(cè)及意義〔〕:

摘要：目的討論循環(huán)腫瘤細(xì)胞〔CTCs〕在結(jié)腸癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的動(dòng)態(tài)變化對(duì)判斷其預(yù)后的應(yīng)用價(jià)值。方法選擇行結(jié)腸癌根治術(shù)后隨訪患者80例，根據(jù)術(shù)后是否復(fù)發(fā)，分為非復(fù)發(fā)組48例和復(fù)發(fā)組32例。應(yīng)用第二代CTCs富集方法及熒光顯影技術(shù)，分別于手術(shù)后1月、3月、6月和12個(gè)月檢測(cè)外周血CTCs。分析患者在不同時(shí)期CTCs趨勢(shì)變化，比擬兩組預(yù)后和病理分期等情況。結(jié)果80例結(jié)腸癌患者中，兩組術(shù)后基線程度比擬差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔P>0.05〕；非復(fù)發(fā)組CTCs術(shù)后動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔P>0.05〕；復(fù)發(fā)組CTCs術(shù)后表達(dá)隨著時(shí)間逐漸增高，與前期比擬有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔P0.05〕；復(fù)發(fā)組病理分期高患者的CTCs表達(dá)高，與同期病理分期低的患者和非復(fù)發(fā)組同期一樣病理分期患者比擬，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔P

1資料和方法

1.1一般資料。本研究選取2022年10月至2022年12月，我院胃腸外科行結(jié)腸癌根治術(shù)后且臨床病理檢查證實(shí)為Ⅰ-Ⅲ期患者共80例，資料搜集包括患者名字、性別、年齡、腫瘤病理分期和組織學(xué)分型。結(jié)腸癌分期標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)際抗癌聯(lián)盟〔UICC〕頒發(fā)的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)。本研究中復(fù)發(fā)是指結(jié)癌根治術(shù)后出現(xiàn)與原發(fā)癌相關(guān)的再發(fā)癌，包括肝臟、肺和骨骼等轉(zhuǎn)移癌以及局部復(fù)發(fā)等。復(fù)發(fā)需經(jīng)病理、CT、MRI、B超和X線檢查等至少一項(xiàng)證實(shí)。其中病理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)為金標(biāo)準(zhǔn)，包括手術(shù)、穿刺活檢及體液細(xì)胞學(xué)檢查等，影像學(xué)證據(jù)須經(jīng)屢次檢查證實(shí)腫瘤進(jìn)展。所有患者分為非復(fù)發(fā)組48例和復(fù)發(fā)組32例。

1.2納入和排除標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①醫(yī)院承受內(nèi)鏡檢查并有明確病理檢查資料，確診為結(jié)腸癌患者；②患者承受常規(guī)腫瘤根治性手術(shù)，手術(shù)順利，術(shù)后恢復(fù)良好；③術(shù)后病理檢查診斷明確為結(jié)腸癌；④隨訪開始后未再行任何手術(shù)治療；⑤術(shù)后病理檢查結(jié)果符合UICC頒發(fā)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)的病理檢查要求。排除標(biāo)準(zhǔn)：①曾患或現(xiàn)患有與本研究無關(guān)的腫瘤患者；②不能按期完成隨訪的患者；③入院前進(jìn)展過任何與腫瘤相關(guān)的治療；④合并有影響隨訪的重大疾病患者。

1.3研究方法。所有研究對(duì)象均采用真空采血管采集肘正中靜脈血5mL于抗凝管中。采用應(yīng)用第二代循環(huán)腫瘤細(xì)胞富集方法及熒光顯影技術(shù)〔美國(guó)Fluxion公司IsofluxCTC檢測(cè)平臺(tái)和配套試劑盒〕，在熒光顯微鏡下觀察并統(tǒng)計(jì)CTCs。所有患者隨訪于手術(shù)后1月、3月、6月、9月和12月檢查入選患者CTCs。5次測(cè)量的采血量、采血時(shí)間、采血部位等均保持一致。同時(shí)觀察所有患者的組織分化程度、腫瘤是否轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及生存時(shí)間。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。計(jì)量資料采用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差〔s〕表示，正態(tài)分布資料組間比擬采用t檢驗(yàn)，非正態(tài)分布資料組間比擬采用秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料組間比擬采用r檢驗(yàn)，以P

2.2兩組CTCs表達(dá)動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)。非復(fù)發(fā)組48例，隨訪一年均未失訪。術(shù)后1月、3月、6月、9月和12月CTCs表達(dá)變化平穩(wěn)，并有逐漸下降趨勢(shì)。復(fù)發(fā)組32例，隨訪一年后2例死亡，其余均未失訪。復(fù)發(fā)分別為1月1例，3月3例，6月9例，9月10例，12月9例。術(shù)后6月、9月和12月CTCs表達(dá)上升趨勢(shì)明顯，復(fù)發(fā)后CTCs表達(dá)較非復(fù)發(fā)組同期明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異〔P

2.3腫瘤分期對(duì)CTCs表達(dá)變化比擬。非復(fù)發(fā)組48例，I/II期患者32例，III期患者16例。I/II期和III期同期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔P>0.05〕，并且12月較1月比擬不同病理分期均無差異〔P>0.05〕。復(fù)發(fā)組32例，I/II期患者10例，III期患者22例。I/II期和III期6月、9月和12月同期不同病理分期比擬有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異〔P

3討論

中國(guó)每年新增結(jié)腸癌患者約370萬人，每年約190萬人死于結(jié)腸癌。結(jié)腸癌的發(fā)病率和死亡率逐年增加，目前死亡率已位居國(guó)內(nèi)腫瘤的第五位【3】。結(jié)腸癌是高度異質(zhì)性疾病，大多數(shù)結(jié)腸癌患者被診斷時(shí)均已出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。術(shù)后易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率高是影響結(jié)腸癌轉(zhuǎn)歸的重要因素【4】。因此早期發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，并在患者疾病進(jìn)展前給予及時(shí)高效地判斷以改良治療方案，已成為目前結(jié)腸癌治療研究的熱點(diǎn)。

循環(huán)腫瘤細(xì)胞〔CTC〕由腫瘤原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶的腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)所形成，是腫瘤轉(zhuǎn)移的必要條件，已腫瘤快速檢測(cè)研究的熱點(diǎn)【5】。雖然結(jié)腸癌患者預(yù)后影響因子較多，但CTCs作為獨(dú)立的預(yù)后因素，不僅反映了腫瘤負(fù)荷，還影響著腫瘤的生物學(xué)行為〔包括腫瘤的血管形成和侵襲轉(zhuǎn)移等〕【6】。TieJ等【7】研究顯示CTC可用來預(yù)測(cè)結(jié)腸癌患者的術(shù)后復(fù)發(fā)，而GarlanF等[8]對(duì)結(jié)腸癌患者第1個(gè)周期化療完畢后1個(gè)月進(jìn)展CTC檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CTC可以預(yù)測(cè)患者預(yù)后。本研究結(jié)果顯示，CTCs在腫瘤復(fù)發(fā)后明顯升高，與非復(fù)發(fā)組比擬差異顯著；而CTCs的升高，與結(jié)腸癌腫瘤病理分期程度有關(guān)，腫瘤病理分期越高，腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移可能越大，患者術(shù)后CTCs升高概率越高。CTCs升高與患者術(shù)后復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移有明顯關(guān)系，升高越多，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移概率越大。循環(huán)腫瘤細(xì)胞的表達(dá)變化對(duì)于結(jié)腸癌術(shù)后復(fù)發(fā)具有指導(dǎo)意義。

我們的研究還說明，通過對(duì)CTCs的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，對(duì)于結(jié)腸癌患者腫瘤復(fù)發(fā)的早期判斷、病理分期，以及對(duì)于腫瘤預(yù)后的預(yù)測(cè)有一定價(jià)值。復(fù)發(fā)組較非復(fù)發(fā)組同期病理分期患者CTCs表達(dá)明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說明可以通過監(jiān)測(cè)結(jié)腸癌患者術(shù)后CTCs的變化程度，特別是中晚期患者，可及時(shí)理解結(jié)腸癌患者病情變化情況，指導(dǎo)患者后續(xù)治療方案，提早做出預(yù)判。有研究結(jié)果顯示，針對(duì)局部對(duì)常規(guī)化療方案不敏感的患者，通過對(duì)CTCs的表達(dá)變化可及早更改治療方案，以期改善預(yù)后[9]。CTCs的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)對(duì)于術(shù)后短期內(nèi)復(fù)發(fā)的I-III期結(jié)腸癌患者的治療方案選擇和改良有一定的指導(dǎo)意義[10]。本研究結(jié)果顯示，對(duì)于結(jié)腸癌患者術(shù)后CTCs的長(zhǎng)期持續(xù)性動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，可以對(duì)結(jié)腸癌術(shù)后復(fù)發(fā)進(jìn)展初步判斷，對(duì)不同病理分期患者的術(shù)后復(fù)發(fā)情況提供指導(dǎo)。

CTCs檢測(cè)也是一個(gè)有前途的非侵入性的監(jiān)測(cè)腫瘤變化的標(biāo)志[11]。外周血標(biāo)本是臨床上較為理想的標(biāo)本來源，容易采集，并且創(chuàng)傷性小，檢測(cè)所需的血液標(biāo)本容易獲取，防止有創(chuàng)的組織活檢帶來的醫(yī)療風(fēng)險(xiǎn)增加。在患者依從性較好，經(jīng)濟(jì)情況能充分負(fù)擔(dān)的情況下，堅(jiān)持屢次動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CTCs是結(jié)腸癌患者隨訪預(yù)后的有效措施，也能給臨床醫(yī)師及早進(jìn)展干預(yù)提供根據(jù)[12]。Haber等[13]在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，CTCs檢測(cè)結(jié)果與臨床病情進(jìn)展一致，CTCs藥敏實(shí)驗(yàn)可以幫助醫(yī)生對(duì)惡性腫瘤患者及早做出干預(yù)，使患者得到及時(shí)有效的治療。結(jié)腸癌死亡的主要原因是腫瘤的局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，通過對(duì)CTCs的動(dòng)態(tài)檢測(cè)，對(duì)患者術(shù)后復(fù)發(fā)的早期判斷、病理分期對(duì)術(shù)后復(fù)發(fā)影響，以及術(shù)后短期內(nèi)復(fù)發(fā)的結(jié)腸癌治療方案選擇及改良有指導(dǎo)意義。在結(jié)腸癌的臨床診治中發(fā)揮更大的作用，從而造福更多的患者。

參考文獻(xiàn)

【1】祝青,任秋霞,吳磊,等.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及相關(guān)炎性因子在結(jié)腸癌腫瘤中的表達(dá)及臨床意義[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版),2022,9(11):29-32.

【2】鄧均,汪江.結(jié)腸癌術(shù)前動(dòng)態(tài)增強(qiáng)磁共振成像參數(shù)與腫瘤病灶中血管新生、細(xì)胞增殖的相關(guān)性[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2022,23(21):2987-2989+2993.

【3】王俊華.miRNA在結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞中的表達(dá)譜及功能機(jī)制研究[D].東南大學(xué),2022.

【4】歐銳.結(jié)腸癌術(shù)前中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞比、血小板淋巴細(xì)胞比與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)臨床研究[D].廣西醫(yī)科大學(xué),2022.

【5】丁國(guó)良.多排螺旋CT對(duì)間位結(jié)腸癌術(shù)前分期的研究[D].華北理工大學(xué),2022.

【6】徐梅,石亮榮,方成,等.氟尿嘧啶結(jié)合CIK細(xì)胞在小鼠結(jié)腸癌模型中抗腫瘤效應(yīng)的研究[J].現(xiàn)代免疫學(xué),2022,35(02):114-118.

【7】李艷艷,丁修冬,李瀟,等.TSGF、IGF-1、CEA、CA19-9結(jié)合檢測(cè)在結(jié)腸癌的診斷及預(yù)后評(píng)價(jià)的應(yīng)用[J].武警后勤學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2022,23(12):1022-1024.

[8]張鈞書,王科,黃建.腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志CD166在結(jié)腸癌中的表達(dá)及其臨床生物學(xué)意義[J].浙江醫(yī)學(xué),2022,35(12):1123-1126+1234.

[9]張亞軍,滕寶群,周好,等.Th17/Treg及其相關(guān)細(xì)胞因子在結(jié)腸癌中的表達(dá)并與腫瘤分期的相關(guān)性[J].現(xiàn)代免疫學(xué),2022,33(02):123-126+122.

[10]田同德,楊峰,唐靜雯,等.腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在晚期結(jié)腸癌組織中的計(jì)數(shù)與腫瘤轉(zhuǎn)移及患者生存時(shí)間相關(guān)性研究[J].中醫(yī)學(xué)報(bào),2022,27(08):933-935.

[11]張姍姍.CD133+CXCR4