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微生物培訓(xùn)教案(一)微生物與人類疾病的關(guān)系及預(yù)防2022/11/81一、微生物定義存在于自然界的一群體形微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼看不見,必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍甚至數(shù)萬倍后才能觀察到的微小生物。2022/11/82二、分類種類繁多,至少10萬種以上,按其結(jié)構(gòu)、組成等可分為三大類:

1.非細(xì)胞型微生物最小的一類微生物,能通過除菌濾器,沒有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu),無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng),只能在活的細(xì)胞內(nèi)生長繁殖,病毒屬之。2.原核細(xì)胞型微生物僅有原始核質(zhì),系呈裸露的環(huán)狀DNA團(tuán)塊結(jié)構(gòu),無核膜或核仁;細(xì)胞器不完善,只有核蛋白體。這類微生物眾多,包括細(xì)菌、支原體、立克次體、衣原體、螺旋體和放線菌。3.真核細(xì)胞型微生物細(xì)胞核分化程度高,有核膜和核仁;細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器完整,真菌屬此類。分布極為廣泛,以土壤中的微生物最多。2022/11/832022/11/85三、微生物與人類的關(guān)系絕大多數(shù)微生物對(duì)人類和動(dòng)、植物是有益的,而且有些是必須的。例如:土壤中的微生物能將動(dòng)、植物的有機(jī)氮化為無機(jī)氮化物,以供植物生長的需要。比外空氣中的大量游離氮,也只有依靠固氮菌等作用后才能被植物吸收。在農(nóng)業(yè)方面,我國廣泛應(yīng)用微生物制造菌肥、植物生長激素等。在工業(yè)方面,應(yīng)用于食品、皮革、紡織、石油、化工、冶金等部門越趨廣泛。例如采用鹽酸水解法生產(chǎn)1噸味精需要小麥30噸,現(xiàn)改用微生物發(fā)酵法只需薯粉3噸。

在醫(yī)藥工業(yè)方面,有許多抗生素是微生物的代謝產(chǎn)物,也可利用微生物來制造一些維生素、輔酶、ATP等藥物。

2022/11/862022/11/872022/11/8818世紀(jì)清乾隆年間,我國師道南在《天愚集》鼠死行篇中寫道“東死鼠,西死鼠,人見死鼠如見虎,鼠死不了幾日,人死如圻堵,晝死人莫問數(shù),日色滲淡云護(hù),三人行未十步多,忽死兩人橫截路……。”生動(dòng)地描述了當(dāng)時(shí)鼠疫猖镢流行的可怕慘凄景況,同時(shí)也正確地指出了鼠疫的流行環(huán)節(jié)。2022/11/810四、微生物的發(fā)現(xiàn)荷蘭人于1676年列文虎克用自磨鏡片做了一架能放大266倍的原始顯微鏡,正確地描述了其形態(tài)有球形、桿形和螺旋狀等。微生物另一奠基人德國學(xué)者郭霍,利用固體培養(yǎng)基對(duì)細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)。2022/11/812

葡萄球菌在多個(gè)不規(guī)則面上分裂,分裂后無一定規(guī)則地粘附在一起似一串葡萄。

雙球菌在一個(gè)平面上分裂,分裂后兩個(gè)菌體成對(duì)排列,如腦膜炎球菌、肺炎球菌。2022/11/814(二)細(xì)菌檢查1.顯微鏡放大法2022/11/8152.染色法常用的是革蘭染色法。是丹麥細(xì)菌學(xué)家革蘭于1884年創(chuàng)建。標(biāo)本固定后,先用結(jié)晶紫初染,再加碘液媒染,使之生成結(jié)晶紫-碘復(fù)合物;此時(shí)不同細(xì)菌均被染成深紫色,然后用95%乙醇染色,有些細(xì)菌被脫色,有些不能。最后用稀釋變紅或沙黃復(fù)染。不被乙醇脫色仍保留紫色者為G+菌,被乙醇脫色后復(fù)染成紅色者為G-菌。革蘭染色法的實(shí)際意義有鑒別細(xì)菌和選擇抗菌藥物等。上圖為大腸埃希桿菌,革蘭染色染色顯示腸桿菌科典型的革蘭陽性桿菌。大都有相似的形態(tài),所以不能用革蘭染色鑒別。(革蘭染色,放大1000倍)

2022/11/816(三)細(xì)菌的殺滅法

分為物理消毒滅菌法和化學(xué)消毒滅菌法影響消毒滅菌的效果受環(huán)境、微生物種類及消毒劑本身等多種因素的影響。消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時(shí)間各種消毒劑的理化性的理化性質(zhì)不同,對(duì)微生物的作用大小也有異。例如表面活性劑對(duì)革蘭陽性菌的殺滅效果比對(duì)革蘭陰性菌好;龍膽紫對(duì)葡萄球菌作用較強(qiáng)。同一種消毒劑的濃度不同,其消毒效果也不同。絕大多數(shù)消毒劑在高濃度時(shí)殺菌作用大,當(dāng)濃度降低至一定程度時(shí)只有抑菌作用。但醇類則例外,70%乙醇或50%—80%異丙醇的消毒效果最好。其機(jī)制是高濃度乙醇等,能使菌體表面蛋白質(zhì)迅速凝固,反而影響其繼續(xù)滲透入,殺菌效力反低。消毒劑在一定濃度下,對(duì)細(xì)菌的作用時(shí)間愈長,消毒效果也愈強(qiáng)。2022/11/817微生物的種類與數(shù)量70%乙醇可殺死一般細(xì)菌繁殖體,但不能殺死細(xì)菌的芽胞,因此,必須根據(jù)消毒對(duì)象選擇合適的消毒劑。溫度一般溫度升高,可提高溫度效果。酸堿度新潔爾滅的殺菌作用是PH愈低所需殺菌濃度愈高;如在PH3時(shí)較PH9時(shí)高10倍左右。有機(jī)物病原菌常隨同排泄物、分泌物一起存在,這些物質(zhì)可阻礙消毒劑與病原菌的接觸,因而減弱消毒效果。其他影響消毒效果的因素還有溫度、穿透力、表面張力及拮抗物質(zhì)等。2022/11/818(二)內(nèi)源性的感染使用大量的抗生素導(dǎo)致菌群失調(diào)或長期應(yīng)用激素類藥物使機(jī)體免疫力功能減低時(shí),正常群菌就成為條件致病而致病。2022/11/820按傳播方式與途徑分為下面幾類:

呼吸道感染呼吸道感染的疾病有肺結(jié)核、白喉、百日咳、軍團(tuán)病等。消化道感染傷寒、細(xì)菌性痢疾、霍亂、食物中毒等胃腸疾病,大多因飲食被患者或帶菌者的糞便等排泄物污染后攝入消化道而造成。水、手指、蒼蠅等昆蟲是傳播的重要媒介。創(chuàng)傷感染致病性的葡萄球菌、鏈球菌等可侵入引起化膿性感染破傷風(fēng)梭菌、氣性能壞疽病原菌等的芽胞進(jìn)入深部傷口適宜時(shí)就發(fā)芽、繁殖,產(chǎn)生毒素而致病。2022/11/821七、環(huán)境因素對(duì)感染的影響自然因素和社會(huì)因素對(duì)感染的發(fā)生、發(fā)展亦有明顯影響。冬季易發(fā)生呼吸系統(tǒng)傳染病,因寒冷能降低呼吸道粘膜的抵抗力。夏季易發(fā)生消化系統(tǒng)傳染病。社會(huì)因素、戰(zhàn)爭(zhēng)、災(zāi)荒、貧困等促使傳染病的發(fā)生和流行。2022/11/823八、球菌對(duì)人類有致病性的病原球菌主要引起化膿性炎癥,其中有葡萄球菌、鏈球菌、腦膜炎球菌和淋球菌等。(一)葡萄球菌所致疾病有侵襲性疾病和毒素性疾病。侵襲性疾病:主要引起化膿性炎癥,可通過多種途徑侵入機(jī)體,導(dǎo)致皮膚或器官的多種感染甚至敗血癥。毒素性疾病:由葡萄球菌產(chǎn)生的有關(guān)外毒素引起。2022/11/824(二)鏈球菌引起人類的疾病主要有各種化膿性炎癥、猩紅熱、新生兒敗血癥、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和風(fēng)濕熱、腎小球腎炎等變態(tài)反應(yīng)性疾病。主要通過飛沫傳播,應(yīng)對(duì)病菌和帶菌者及時(shí)治療,對(duì)急性咽峽炎和扁桃體炎患者,尤其是兒童須治療徹底,以防止急性腎小球腎炎、風(fēng)濕熱等的發(fā)生。青霉素G為首選藥物。2022/11/826(三)奈氏菌有腦膜炎奈氏菌和淋病奈氏菌。我國已廣泛應(yīng)用腦膜炎球菌莢膜多糖菌苗,保護(hù)率在90%以上。淋病奈氏菌人類是淋球菌的唯一宿主,主要通過性接觸傳染。人類對(duì)淋球菌的感染無天然免疫力,多數(shù)患者可以自愈,并出現(xiàn)抗體,但再感染和慢性患者較普遍存在。2022/11/827九、腸道桿菌是一大群寄居在人類和動(dòng)物腸道中生物學(xué)性狀近似的革蘭陰性桿菌,隨排泄物廣泛分布于土壤、水和腐物中。大多數(shù)腸道桿菌是腸道的正常菌群,但當(dāng)宿主免疫力降低或細(xì)菌侵入腸道外部位等條件下也可成為條件致病菌而引起疾病。分為埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬。2022/11/828(二)志賀菌屬是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌。通稱痢疾桿菌。引起細(xì)菌性痢疾,傳染源是病人和帶菌者,無動(dòng)物宿主,主要通過糞口傳播。人對(duì)志賀菌較易感,10~200個(gè)細(xì)菌就可使10%~50%志愿者致病。志賀菌隨飲食進(jìn)入體內(nèi),潛伏期一般1~3天,急性痢疾細(xì)菌性常駐有發(fā)熱、腹痛、里急后重等癥狀,并排出膿血粘液便?;颊呓?jīng)及時(shí)治療,預(yù)后良好。若治療不徹底,可轉(zhuǎn)為慢性。急性中毒性菌痢以小兒為多見無明顯的消化道癥狀,主要表現(xiàn)為全身性中毒癥狀。此因其內(nèi)毒素率致使微血管痙孿、缺血和缺氧,導(dǎo)致DIC重要器官功能衰竭、腦水腫和腦疝,死亡率高。治療藥物很多,但很易出現(xiàn)多重耐藥菌株。2022/11/830沙門菌屬一大群寄生于人類和動(dòng)物腸道中,生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭陰性桿菌。對(duì)人致病的僅少數(shù)。大部分為人畜共患病,人類因食用患病動(dòng)物的肉、乳、蛋或被病鼠尿污染的食物而罹患。只有傷寒門菌和副傷寒門菌僅對(duì)人致病。①傷寒和副傷寒病菌隨污染食物進(jìn)入消化道后,到達(dá)腸壁固有層的淋巴集結(jié),迅速被巨噬細(xì)胞吞噬并繼續(xù)生長繁殖,經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入血流引起第一次菌血癥。病人出現(xiàn)發(fā)熱、不適、全身疼痛等前驅(qū)期癥狀。菌隨血流進(jìn)入肝、脾、腎、膽囊等器官并在其中繁殖,被所在器官中吞噬細(xì)胞吞噬入血,引起第二次菌血癥。該癥狀明顯,持續(xù)高熱,肝脾腫大,皮膚出現(xiàn)玫瑰疹,外周血白細(xì)胞明顯下降。自3周以后病情開始好轉(zhuǎn)。②腸炎型由攝入鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌等污染的食物引起,潛伏期6-24小時(shí)。主要癥狀為發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉,一般3-5天內(nèi)較快恢復(fù),偶爾低燒持續(xù),腹瀉不停。有相應(yīng)疫苗可以治療。

2022/11/831十、弧菌屬霍亂弧菌引起的霍亂是烈性傳染病,曾在全球引起七次世界大流行1992年10月起在印度、孟加拉國家發(fā)現(xiàn)新血清型(0.39)霍亂弧菌所致的流行在自然情況下,人類是霍亂弧菌的唯一易感者,傳播途徑主要是通過污染的水源或食物經(jīng)口攝入。大量飲食水造成胃酸被稀釋有利于霍亂弧菌的生長繁殖。一般在吞食細(xì)菌后2-3天突然出現(xiàn)劇烈腹瀉及嘔吐。由此造成嚴(yán)重失水,血容量明顯減少,出現(xiàn)微循環(huán)衰竭。因大量喪失鈉、鉀、鈣離子和氯化物可導(dǎo)致肌肉痙孿,電解質(zhì)失調(diào),代謝性酸中毒。病人最終因腎功能衰竭、休克而死亡。如果能及時(shí)補(bǔ)充液體及電解質(zhì),死亡率僅為1%,未經(jīng)治療者,死亡率可達(dá)50%-75%。應(yīng)用抗生素如四環(huán)素可縮短腹瀉期及病程。2022/11/832十一、厭氧菌屬破傷風(fēng)梭菌是破傷風(fēng)的病原菌,大量存在于人和動(dòng)物腸道中,由糞便污染土壤,可形成芽胞而長期存在。當(dāng)機(jī)體受傷,創(chuàng)口被污染或分娩接生時(shí)使用不潔器械剪臍帶,本菌即可侵入傷口生長繁殖,釋放外毒素。發(fā)病后機(jī)體痙孿抽搐,可因窒息或呼吸衰竭而死亡。治療:正確處理創(chuàng)口及清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)是重要的預(yù)防措施。注入破傷風(fēng)抗毒素作緊急預(yù)防。2022/11/833十二、分枝桿菌屬(一)結(jié)核桿菌是引起結(jié)核病的病原菌,可侵犯全身各器官,但以肺結(jié)核為最多見。可通過呼吸道、消化道或皮膚損傷侵入易感機(jī)體。治療:①發(fā)現(xiàn)和治療痰菌陽性的患者,一個(gè)每年可感染10-14人②新生接種卡介苗。(二)麻風(fēng)桿菌一種慢性傳染病,流行地區(qū)廣泛。長期以來一直認(rèn)為麻風(fēng)桿菌主要通過破損的皮膚,粘膜進(jìn)入人體、呼吸道、痰汗等也有麻風(fēng)菌排出,可通過接觸傳染。2022/11/834微生物限度標(biāo)準(zhǔn)①口服給藥制劑:細(xì)菌、霉菌和酵母菌數(shù)、大腸埃希菌。②手術(shù)、燒傷及嚴(yán)重創(chuàng)傷的局部給藥制劑:無菌。③耳、鼻、呼吸道眼部給藥制劑:細(xì)菌、霉菌、酵母菌數(shù)、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌。④含動(dòng)物組織(包括提取物)的口服給藥制:沙門菌。2022/11/835人身上攜帶的各種微生物污染潔凈室

人體給微生物生長繁殖創(chuàng)造了良好的環(huán)境,人體各部份都生長著各類微生物,甚至某些部位存在著“常居細(xì)菌”,它們的存在對(duì)人體可能無害,但對(duì)于生產(chǎn)藥品的潔凈室,尤其是無菌室卻是不允許的,甚至是致命的。2022/11/836人體各部位的正常微生物

部位部分常見微生物舉例皮膚葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、真菌口腔乳酸桿菌、綠色鏈球菌、螺旋體、真菌腸道葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、雙岐桿菌、腺病毒、真菌鼻咽腔葡萄球菌、奈氏菌屬、綠膿桿菌、腺病毒、真菌外耳道葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌眼結(jié)膜葡萄球菌、結(jié)膜干燥桿菌尿道大腸桿菌、擬桿菌、革蘭氏陽性球菌2022/11/837手是一個(gè)重要的污染源。手部的汗毛、油脂、皮層、皮膚只要與污染物接觸,就會(huì)沾上污垢、油脂、化學(xué)物、塵粒及微生物等,微生

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