生物安全微生物課件

2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革1實驗室生物安全之微生物

－總論

張革中山大學藥學院微生物與生化制藥實驗室2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革2

歷史上的實驗室微生物感染著名事件(1)1979年前蘇聯(lián)斯維爾德洛夫斯克炭疽菌泄漏事件醫(yī)生秘密日記：至1979年4月20日,350人發(fā)病，45人死亡，214人瀕臨死亡。高級官員從莫斯科趕來。消毒隊用氯對醫(yī)院進行了徹底消毒，房屋也被清洗。野狗被打死。街道的表層被推土機挖走然后重鋪。1992年之前，政府統(tǒng)一的說法是有少數(shù)人食用了遭炭疽菌污染的肉制品而致病。克格勃拿走了尸檢報告.2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革3死亡數(shù)字依舊沒有解密1992年，葉利欽曾公開承認這件事是“我們的軍事研究出了問題”.

前蘇聯(lián)設在葉卡捷琳堡的國防微生物實驗室的地下試驗場在試驗武器時發(fā)生了事故(可能是武器爆炸)，從而導致了炭疽菌的泄露。1979年到1989年十年間對葉卡捷琳堡的人口統(tǒng)計表明，該地區(qū)的人口呈明顯下降趨勢，男女比例嚴重失調(diào)，新生兒中有中樞神經(jīng)問題的達80%。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革4(2)1967年德國馬爾堡病毒實驗室感染事件1967年德國馬爾堡，法蘭克福和南斯拉夫的貝爾格萊德三個實驗室使用來自烏干達的猴子用于脊髓灰質(zhì)炎疫苗研究。實驗室人員，醫(yī)務人員等37人感染馬爾堡出血熱，1/4的人死亡。原發(fā)性感染發(fā)生在實驗室工作人員中。繼發(fā)性病例涉及2名醫(yī)生、一名護士、一名尸檢助理和一名獸醫(yī)的妻子

.馬爾堡出血熱是一種惡性病毒傳染病，主要通過體液傳染，能引起高燒、惡心、腹瀉和嘔吐等各種緊急病癥，5至7天后會出現(xiàn)嚴重的出血癥狀，如果治療不及時病人會在一周內(nèi)死亡。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革53個月后德國專家才找到罪魁禍首：馬爾堡病毒，一種由猴類傳染給人類的危險的新病毒。馬爾堡病毒，與埃博拉病毒為同一家族，卻比埃博拉病毒厲害得多埃博拉也是一種十分罕見、極度恐怖的病毒，屬于已知感染人的最烈性病原體.這種病毒因其1976年首先在剛果的埃博拉河地區(qū)被發(fā)現(xiàn)而得名，據(jù)世界衛(wèi)生組織公布的最新數(shù)字顯示，全世界已有1100人感染了這一病毒，其中793人死于該病毒引起的埃博拉出血熱。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革6埃博拉-馬爾堡病毒病又叫做非洲出血熱、馬爾堡病毒病、埃博拉病毒出血熱這兩種疾病均無疫苗或有效治療，盡管延續(xù)幾年涉及檢測數(shù)百種動物、昆蟲和植物的強化調(diào)查，但是尚未查明該病毒的動物儲主或其它環(huán)境源。猴子易受感染，但未被認為是可生存的有效儲主，因為幾乎所有受感染動物太快死亡以至于不能維持該病毒的生存。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革7(3)3起嚴重的實驗室SARS病毒感染事件

1.新加坡的實驗室sars感染事件

2003年9月新加坡國立大學27歲的研究生在環(huán)境衛(wèi)生研究院實驗室中感染SARS病毒。該研究生是被確診前已經(jīng)與多人有過接觸。原因調(diào)查：實驗室安全程序不當。該研究生在實驗室做西尼羅河病毒研究工作的，這個實驗室同時也做具有活性的SARS冠狀病毒研究。實驗室內(nèi)西尼羅河病毒與SARS病毒交叉污染是這次的傳染源。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革8第一，環(huán)境衛(wèi)生研究院只具有P2的生物安全設備，卻在院內(nèi)設立了用來進行更具危險性病毒研究的實驗室。第二，研究院同一時間處理多種不同的活性病毒研究，增加了生物安全方面的復雜程度，因處理程序不當，冠狀病毒與這名研究生研究的西尼羅病毒交叉感染。第三，其他研究機構的科研人員也可利用研究院的設備，而每一個科研人員的安全意識都不同環(huán)境部長就此事件事件，向新加坡人民致歉事故結論及處理：2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革92、中國臺灣地區(qū)的實驗室感染事件

2003年12月一名臺灣的SARS研究人員在實驗室感染SARS病毒。臺灣這名感染的研究人員工作的“國防預防醫(yī)學研究所”屬臺灣軍方研究單位，設立在山洞中，以兩層阻絕設施與外界隔離。這所實驗室擁有全臺最頂尖的實驗設備，實驗室等級列為P4，是臺灣唯一的“第4級生物安全實驗室”，超過“衛(wèi)生署疾病管制局”及“臺大醫(yī)院”等P3等級的實驗室，被譽為臺灣生化資源重鎮(zhèn)。當時在亞洲僅有日本擁有同等級的生物實驗室。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革10事故結論及處理：詹中校從實驗室操作到后來發(fā)病的處理過程，包括在實驗室清除廢棄物時出現(xiàn)疏失，沒有主動通報，后來還跑到新加坡去開會，出現(xiàn)發(fā)燒癥狀也沒有第一時間告知、通報，有一連串的錯誤，以致造成民眾心理的沖擊、甚至影響經(jīng)濟此外，根據(jù)世界衛(wèi)生組織的調(diào)查，臺灣SARS實驗室的一個主要問題是人手不足，科研人員常常單獨工作，提高了發(fā)生意外和錯誤被忽視的風險。世衛(wèi)組織人員強調(diào)科研人員不應單獨在實驗室工作，至少應有兩人在一起。世衛(wèi)組織人員指出，臺灣實驗室人員雖接受安全程序的教導，但他們?nèi)狈ψ銐虻谋O(jiān)督以確保他們真正遵守規(guī)章。給予詹中校停權處分。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革113、中國大陸的實驗室感染事件

2004年4月安徽、北京先后發(fā)現(xiàn)新的SARS病例，經(jīng)證實傳染源為中國CDC病毒實驗室的兩名研究生。安徽出現(xiàn)兩例SARS病例：安徽醫(yī)科大學的學生宋某和她的母親。北京患者李某則是曾護理宋某的護士。另一患者為中國CDC病毒實驗室工作的博士生楊某。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革12疫情源于實驗室內(nèi)感染

2004年4月非疫情的專項調(diào)查。調(diào)查結果如下：1.宋某和楊某兩個原發(fā)病例發(fā)生在同一實驗室。該實驗室有SARS冠狀病毒（SARS-CoV）的科研工作。2.封鎖病毒所后，未再出現(xiàn)任何SARS病人。3.從二代病例魏某（宋某之母）胸水分離到SARS-CoV，其全基因組序列與該室用于實驗的毒株高度同源。4.沒有發(fā)現(xiàn)宋某和楊某與野生動物接觸感染的證據(jù)。5.宋某和楊某發(fā)病潛伏期內(nèi)沒有任何其他SARS病例報告，沒有實驗室外接觸其他SARS病人而被感染的可能。6.楊某與宋某最后一次接觸，到楊某發(fā)病相距15天，僅在走廊碰面，楊某發(fā)病不可能是宋某傳染。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革13事故結論及處理：衛(wèi)生部、科技部聯(lián)合調(diào)查組調(diào)查認定，這次疫情源于實驗室內(nèi)感染，是一起因?qū)嶒炇野踩芾聿簧?，?zhí)行規(guī)章制度不嚴，技術人員違規(guī)操作，安全防范措施不力，導致實驗室污染和工作人員感染的重大責任事故。中國CDC病毒所腹瀉病毒室跨專業(yè)從事SARS研究，采用未經(jīng)論證和效果驗證的非典病毒滅活方法，在不符合防護要求的普通實驗室內(nèi)操作非典感染材料，發(fā)現(xiàn)人員健康異常情況未及時上報。中國CDC主任李立明、副主任楊曉光等因?qū)Σ《竟芾聿簧曝撚兄匾I導責任，引咎辭職。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革14微生物基本知識：分類2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革15（2）微生物基本知識－病原微生物霍亂弧菌流感病毒2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革16放線菌螺旋體支原體2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革17黃曲霉白色念珠菌2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革18（3）微生物與疾病病毒感染真菌局部感染2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革19細菌全身感染2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革20中毒腫瘤2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革21（4）微生物與傳染病蚊蟲傳播飛沫傳播垂直傳播2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革22與傳染病相關的微生物G(+)G(-)細菌2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革23超級細菌（1）MRSA耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌MRSA對所有?-內(nèi)酰胺類藥物如青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類、碳頭孢烯類和含酶抑制劑的復合制劑報告為耐藥，并常表現(xiàn)為對其他類抗生素的多重耐藥。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革24目前國內(nèi)未發(fā)現(xiàn)耐萬古的金黃色葡萄球菌。但是萬古霉素用于體內(nèi)治療MRSA亦有失敗的病例報道。實驗室使用耐萬古的金黃色葡萄球菌，要備案并且在安全實驗室進行2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革25（2）超廣譜?-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）

產(chǎn)ESBLs的代表菌株為肺炎克雷伯菌及大腸埃希菌，其他革蘭陰性桿菌如奇異變形桿菌、產(chǎn)酸克雷伯菌等也能產(chǎn)生。這種酶能水解新一類?-內(nèi)酰胺類藥物。頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢三嗪等及氨曲南等單環(huán)類抗生素，并介導細菌對這些抗生素耐藥的β-內(nèi)酰胺酶2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革26(3)耐青霉素肺炎鏈球菌和奈瑟菌奈瑟式菌肺炎鏈球菌2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革27(4)耐糖肽類和多種抗生素耐藥的腸球菌屬2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革28病毒：肝炎病毒、EBV、CMV、HSV、HZV、HIV等EBVHSV肝炎病毒HIV2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革29真菌隱球菌組織胞漿菌念珠菌

曲菌2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革30其他原核微生物支原體衣原體立克次體螺旋體2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革31（5）中華人民共和國傳染病防治法

(1989年2月21日中華人民共和國第七屆全國人民代表大會常務委員會第六次會議通過1989年2月21日中華人民共和國主席令第15號公布自1989年9月1日起施行)2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革32第一章總則第一條為了預防、控制和消除傳染病的發(fā)生與流行，保障人體健康，制定本法。

第二條國家對傳染病實行預防為主的方針，防治結合，分類管理。

第三條本法規(guī)定管理的傳染病分為甲類、乙類和丙類。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革33甲類傳染病是指：鼠疫、霍亂。

乙類傳染病是指：病毒性肝炎、細菌性和阿米巴性痢疾、傷寒和副傷寒、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹、百日咳、白喉、流行性腦脊髓膜炎、猩紅熱、流行性出血熱、狂犬病、鉤端螺旋體病、布魯氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹傷寒、流行性乙型腦炎、黑熱病、瘧疾、登革熱。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革34丙類傳染病是指：肺結核、血吸蟲病、絲蟲病、包蟲病、麻風病、流行性感冒、流行性腮腺炎、風疹、新生兒破傷風、急性出血性結膜炎、除霍亂、痢疾、傷寒和副傷寒以外的感染性腹瀉病。國務院可以根據(jù)情況，增加或者減少甲類傳染病病種，并予公布；國務院衛(wèi)生行政部門可以根據(jù)情況，增加或者減少乙類、丙類傳染病病種，并予公布。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革35第二章預防第十五條醫(yī)療保健機構、衛(wèi)生防疫機構和從事致病性微生物實驗的單位，必須嚴格執(zhí)行國務院衛(wèi)生行政部門規(guī)定的管理制度、操作規(guī)程，防止傳染病的醫(yī)源性感染、醫(yī)院內(nèi)感染、實驗室感染和致病性微生物的擴散。第十六條傳染病菌種、毒種的保藏、攜帶、運輸，必須按照國務院衛(wèi)生行政部門的規(guī)定嚴格管理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革36第十七條被甲類傳染病病原體污染的污水、污物、糞便，有關單位和個人必須在衛(wèi)生防疫機構的指導監(jiān)督下進行嚴密消毒后處理；拒絕消毒處理的，當?shù)卣梢圆扇娭拼胧?/p>

被乙類、丙類傳染病病原體污染的污水、污物、糞便，有關單位和個人必須按照衛(wèi)生防疫機構提出的衛(wèi)生要求進行處理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革37第二十條對從事傳染病預防、醫(yī)療、科研、教學的人員，現(xiàn)場處理疫情的人員，以及在生產(chǎn)、工作中接觸傳染病病原體的其他人員，有關單位應當根據(jù)國家規(guī)定，采取有效的防護措施和醫(yī)療保健措施。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革38有關菌種保藏的規(guī)定由國和院行政部門指定的單位負責；一、二類菌（毒）種的供應由國務院衛(wèi)生行政部門指定的保藏管理單位供應。三類菌（毒）種由設有專業(yè)實驗室的單位或者國務院衛(wèi)生行政部門指定的保藏管理單位供應；2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革39有關菌種使用的規(guī)定使用一類菌（毒）種的單位，必須經(jīng)國務院衛(wèi)生行政部門批準；使用二類菌（毒）種的單位必須經(jīng)省級政府衛(wèi)生行政部門批準；使用三類菌（毒）種的單位，應當經(jīng)縣級政府衛(wèi)生行政部門批準；2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革40有關菌種運輸?shù)囊?guī)定一、二類菌（毒）種，應派專人向供誚單位領取，不得郵寄；三類菌（毒）種的郵寄單位的證明，并按照菌（毒）種出寄與裝的有關規(guī)定辦理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革41第六章法律責任

第三十七條有本法第三十五條所列行為之一，引起甲類傳染病傳播或者有傳播嚴重危險的，比照刑法第一百七十八條的規(guī)定追究刑事責任。

第三十八條從事實驗、保藏、攜帶、運輸傳染病菌種、毒種的人員，違反國務院衛(wèi)生行政部門的有關規(guī)定，造成傳染病菌種、毒種擴散，后果嚴重的，依照刑法第一百一十五條的規(guī)定追究刑事責任；情節(jié)輕微的，給予行政處分。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革42新刑法－傳染病菌種擴散罪

第三百三十一條：從事實驗、保藏、攜帶、運輸傳染病菌種、毒種的人員，違反國務院衛(wèi)生行政部門的有關規(guī)定，造成傳染病菌種、毒種擴散，后果嚴重的，處三年以下有期徒刑或者拘役；后果特別嚴重的，處三年以上七年以下有期徒刑。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革43（6）消毒與滅菌滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法，包括殺滅細菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物消毒：殺死物體上病原微生物的方法，并不一定能殺死含芽孢的細菌或非病原微生物防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法無菌：不存在活菌的意思2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革44(6-1)干熱滅菌法

A焚燒：

B燒灼：

C干烤：160°～180℃，2hD紅外線滅菌：利用干烤箱，加熱160～180℃2小時，可殺死一切微生物，包括芽胞菌。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革45高壓蒸汽滅菌法：121℃加熱20～30分鐘，殺滅所有微生物及芽孢。(6-2)濕熱滅菌法2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革46(6-3)紫外線消毒空氣與物體表面(6-4)化學消毒劑1酚類：濃度：石炭酸為3%-5%、來蘇兒為2%用途：地面、器具表面和皮膚的消毒2醇類：濃度：乙醇70%-75%用途：用于皮膚的消毒和體溫計等的浸泡3重金屬鹽類：（1）2%紅汞：皮膚、粘膜和小創(chuàng)傷（2）0.05-0.01%升汞：非金屬器皿2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革474氧化劑：（1）0.1%高錳酸鉀：皮膚、尿道、水果（2）3%過氧化氫：創(chuàng)傷、皮膚粘膜（3）2%-2.5%碘酒：皮膚消毒（4）0.2ppm-0.5ppm氯：飲水和游泳池（5）10%-20%漂白粉：地面、廁所等

5表面活性劑：

0.05%-0.1%新潔爾滅：皮膚粘膜、手術器械

6烷化劑：

10%甲醛：物品表面、空氣2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革48(6-5)消毒劑在實驗室的應用1皮膚：2.5%碘酒、70%酒精、2%紅汞2粘膜：1%硝酸銀、3%過氧化氫、0.1%高錳酸鉀等3被污染的空氣：甲醛熏蒸4手：2%來蘇兒、2%碘酊、70%酒精

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革49實驗室分類按部門分醫(yī)學實驗室：1、疾控機構專業(yè)實驗室（病原微生物、理化、毒理、消殺、生化和動物實驗室等）2、醫(yī)學臨床實驗室：門診化驗室、生化實驗室3、教學實驗室：大專院校4、研究型實驗室：研究院、各種重點實驗室5、其他特殊實驗室：醫(yī)藥企業(yè)的GMP廠房等2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革50（7）病原微生物與實驗室分級

國家對病原微生物按照其對人類和動物以及環(huán)境的危害程度實行分類管理，對實驗室根據(jù)其對病原微生物的防護水平實行分級管理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革51病原微生物的分類和管理第四類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人或者動物疾病的微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物疾病，發(fā)生實驗室暴露可能引起感染，但不會引起嚴重危害，且能夠有效實施預防和治療的微生物

國家將病原微生物分為四類，衛(wèi)生部負責制定并調(diào)整四類病原微生物的種類。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革52第二類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，但不易在人或者動物間傳播，且能夠有效實施預防和治療的微生物。第一類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，容易在人或者動物間傳播，或者沒有有效的預防和治療措施的微生物。

第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革53

國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準（中華人民共和國國家標準

GB19489-2004實驗室生物安全通用要求）。國家根據(jù)實驗室防護水平，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。

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實驗室生物安全防護分級一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL1或P1二級生物安全防護實驗室，簡稱BSL2或P2三級生物安全防護實驗室，簡稱BSL3或P3四級生物安全防護實驗室，簡稱BSL4或P42022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革55一級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如工程細菌、工程真菌等。大腸桿菌啤酒酵母2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革56基礎實驗室從事基礎教學與研究，接觸1級生物危害微生物，即接觸不引起人或動物疾病的細菌、真菌、病毒等生物因子，如枯草桿菌、犬肝炎病毒等。只需開放式長形工作臺和好的微生物操作技術。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革57

本學院分子生物、基因工程、藥理、毒理等實驗室(布局在學院二樓)按一級生物安全防護標準執(zhí)行。其中生物材料的使用：菌株：大腸桿菌工程菌株、枯草桿菌工程菌株、啤酒酵母工程菌株以及其他工程菌株。載體：克隆及表達質(zhì)粒（不包括哺乳病毒載體）細胞：不含安全性不明的致病性病毒的原代及傳代細胞核酸：DNA、RNA、PCR擴增產(chǎn)物等2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革58二級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。如：病原微生物分離培養(yǎng)、藥物實驗及病毒的血清學實驗2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革59基礎實驗室從事實驗健康服務、診斷、研究、接觸2級生物危害微生物，即引起人動物發(fā)病但不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染后不導致嚴重疾病，具有有效的治療和預防方法，傳播風險有限，如乙型肝炎病毒、沙門菌、弓形體等。除了開放式長形工作臺還應配置生物安全柜。實驗室應有生物危害標記。操作人員應身著防護服，有好的微生物操作技術，

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革60

本學院涉及以下實驗的實驗室按二級生物安全防護標準執(zhí)行（布局在學院二樓的P2實驗室）。其中生物材料的使用：菌株：病原微生物的分類和管理法中對應的第三類微生物。如：TB,

MRSA，淋球菌等載體：哺乳病毒載體，尤其是生物安全性不明的逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒載體。細胞：含致病性哺乳動物病毒或生物安全性不明的原代及傳代細胞。如EB病毒。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革612022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革62(一）腺病毒載體有些腺病毒在動物體內(nèi)可致瘤，在體外能轉(zhuǎn)化細胞。在美國軍隊中出現(xiàn)腺病毒引起的呼吸道疾病之后，腺病毒疫苗已經(jīng)徹底地檢查了其安全性,這促進了針對人免疫缺陷病毒和狂犬病病毒的重組腺病毒疫苗的研制發(fā)展?；蚬こ滩《据d體2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革63（二）腺相關病毒(AAV)載體是一種人細小病毒

本身無致病性，宿主范圍廣，轉(zhuǎn)移外源基因時，不伴隨任何病毒基因，以位點特異方式整合入人19號染色體

缺點：包裝容量有限，<5kb

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革64（三）逆病毒轉(zhuǎn)錄載體、慢病毒載體易與宿主細胞基因穩(wěn)定整合，長期表達，隨機整合入宿主基因組，有致突變危險，不穩(wěn)定

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革652022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革66攜帶病毒的細胞B958細胞株EB病毒含腺病毒的細胞株含逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒的細胞2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革67三級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預防傳染的疫苗。如：艾滋病毒的研究應在三級生物安全防護實驗室中進行。HIV遏制實驗室

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革68遏制實驗室從事特殊診斷與服務，接觸3級生物危害微生物，即引起人或動物嚴重疾病但通常不因偶然在個體間傳播，有治療方法的病原體，如TB、致病性真菌、圣路易斯腦炎病毒等。需要生物安全柜和其他操作所需的基本裝置，實驗室應有生物危害標記。操作人員身著特殊防護服，有好的微生物操作技術。人員進入受限，實驗室內(nèi)有定向氣流。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革69HIV實驗室生物安全級別艾滋病血清學檢測艾滋病血清學檢測（包括篩查和確認實驗室）、免疫學和核酸檢測應在符合Ⅱ級生物安全實驗室（BSL-2）要求的艾滋病檢測實驗室中進行。HIV分離、研究

HIV分離、細胞培養(yǎng)及研究工作應在Ⅲ級生物安全實驗室（BSL-3）中進行。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革70四級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。SARS如：愛博拉-馬堡病毒

（嚴格遏制實驗室）2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革71嚴格遏制實驗室從事危險病原體操作。接觸4級生物危害微生物，即引起人類或動物非常嚴重的疾病，能在人與人、人與動物之間造成傳播，尚無有效治療和預防方法的病原體。應有配套的生物安全柜，人員身著帶正壓的連衣褲，實驗室空氣經(jīng)過濾，配備帶雙門的高壓滅菌器。除了三級防護措施外，人員進入實驗室時，應經(jīng)過密封的過渡艙，離開時應經(jīng)風淋，生物廢棄物應經(jīng)特殊處理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革72目前世界上最先進的高危病毒實驗室———法國讓.梅里厄

P4實驗室。這個實驗室1999年3月開始運作，目標除了研究最毒、最新的病毒，也對歷史上舊的、變種的病毒作深入的研究、建檔，并找出治療的方法。面積僅為600平方米的實驗室造價達4000萬法郎，其中的儀器設備價值1000萬法郎，每年的運行維持和實驗費用是190萬歐元。里昂的

P4實驗室全部用由玻璃和鋼材建成，被一致公認為“新一代

P4的首創(chuàng)”。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革73主樓分三層：上層是空氣處理區(qū)，保證實驗室人員和動物呼吸用氣及實驗室空氣的消毒；下層是廢物處理區(qū)，對實驗室器材和實驗垃圾進行消毒；中層為真正的P4區(qū)。方形主樓的旁邊，還有一個兩層的、半圓柱形的、金屬附屬樓，負責進行實驗準備，控制實驗室的安全，全部由計算機實行中央控制。P4區(qū)主要有兩個面積為60至70平方米、相互獨立的實驗室和一個動物試驗室2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革74研究人員進出入實驗工作臺，必須經(jīng)過這樣的程序：用通行卡和個人密碼打開實驗區(qū)的第一道門，進入房間脫衣、進行清潔淋浴、穿上類似潛水員的密封服；進入另一室檢查服裝的密封性；再開一道門，即可進入動物實驗室；此后，還有兩道門將存放病菌的恒溫箱和實驗廳分開。在進入動物實驗室之前的每一個房間都是逐步減壓的，房間的門上都安裝充氣密封墊，以防止病菌往外擴散。與外界完全隔離的P4級無泄漏病毒實驗室

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革75讓.梅里厄

P4實驗室2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革76

加拿大P4實驗室2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革77我國的P4實驗室我國唯一的一個生物安全四級（P4）實驗室，于05年底興建，地址：武漢市P4實驗室項目以現(xiàn)有中科院武漢病毒所為依托建設，投資1.2億元由法國科學家協(xié)助建設2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革78

本學院無三級及四級防護實驗室。

本藥學大樓各實驗室

嚴禁傳染病防治法中甲類、乙類傳染病中涵蓋病原微生物菌株的使用、保存及操作。嚴禁病原微生物的分類和管理法中對應的第一、二類高致病性微生物菌株的使用、保存及操作。實驗中所涉及到的此類病原微生物必須在相應的三級及四級防護實驗室進行。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革79本校的P3實驗室-中山大學生物安全三級(BSL-3)實驗室

中山大學北校區(qū)微生物樓八樓

2007年11月,衛(wèi)生系統(tǒng)在華南地區(qū)獲批準的第一家生物安全三級實驗室2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革80具備開展高致病性禽流感病毒、SARS冠狀病毒、艾滋病毒、結核分枝桿菌等高致病性病原體實驗室活動的條件進入P3實驗室實驗按規(guī)定進行申請和培訓2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革81實驗室的負壓梯度通過自動控制系統(tǒng)控制以保持恒定，還設有監(jiān)控和對講系統(tǒng)、緊急報警裝置、個人密碼門禁系統(tǒng)等各種安全配置，以保障實驗室能安全使用。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革82實驗室內(nèi)共有二間BSL-3實驗室，一間小動物BSL-3（ABSL-3）實驗室，為負壓污染區(qū)；尚設有準備間及各緩沖間，為負壓半污染區(qū)；一更、二更及淋浴間等為常壓清潔區(qū)。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革83準備間及各功能實驗室配置有生物安全柜、CO2培養(yǎng)箱、離心機、顯微鏡、低溫和普通冰箱、立式高壓滅菌器、負壓吸引系統(tǒng)等，準備間與消毒清洗間之間還設置有雙扉高壓滅菌器。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革84本學院的P2實驗室-中山大學藥學院生物安全二級(BSL-2)實驗室位于東校區(qū)藥學院二樓實驗室，于08年通過驗收是P2+或P3-實驗室可以從事具有有效的治療和預防方法，傳播風險有限的微生物培養(yǎng)或微生物藥物等試驗2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革85實驗室生物安全之微生物

－總論

張革中山大學藥學院微生物與生化制藥實驗室2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革86

歷史上的實驗室微生物感染著名事件(1)1979年前蘇聯(lián)斯維爾德洛夫斯克炭疽菌泄漏事件醫(yī)生秘密日記：至1979年4月20日,350人發(fā)病，45人死亡，214人瀕臨死亡。高級官員從莫斯科趕來。消毒隊用氯對醫(yī)院進行了徹底消毒，房屋也被清洗。野狗被打死。街道的表層被推土機挖走然后重鋪。1992年之前，政府統(tǒng)一的說法是有少數(shù)人食用了遭炭疽菌污染的肉制品而致病?？烁癫米吡耸瑱z報告.2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革87死亡數(shù)字依舊沒有解密1992年，葉利欽曾公開承認這件事是“我們的軍事研究出了問題”.

前蘇聯(lián)設在葉卡捷琳堡的國防微生物實驗室的地下試驗場在試驗武器時發(fā)生了事故(可能是武器爆炸)，從而導致了炭疽菌的泄露。1979年到1989年十年間對葉卡捷琳堡的人口統(tǒng)計表明，該地區(qū)的人口呈明顯下降趨勢，男女比例嚴重失調(diào)，新生兒中有中樞神經(jīng)問題的達80%。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革88(2)1967年德國馬爾堡病毒實驗室感染事件1967年德國馬爾堡，法蘭克福和南斯拉夫的貝爾格萊德三個實驗室使用來自烏干達的猴子用于脊髓灰質(zhì)炎疫苗研究。實驗室人員，醫(yī)務人員等37人感染馬爾堡出血熱，1/4的人死亡。原發(fā)性感染發(fā)生在實驗室工作人員中。繼發(fā)性病例涉及2名醫(yī)生、一名護士、一名尸檢助理和一名獸醫(yī)的妻子

.馬爾堡出血熱是一種惡性病毒傳染病，主要通過體液傳染，能引起高燒、惡心、腹瀉和嘔吐等各種緊急病癥，5至7天后會出現(xiàn)嚴重的出血癥狀，如果治療不及時病人會在一周內(nèi)死亡。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革893個月后德國專家才找到罪魁禍首：馬爾堡病毒，一種由猴類傳染給人類的危險的新病毒。馬爾堡病毒，與埃博拉病毒為同一家族，卻比埃博拉病毒厲害得多埃博拉也是一種十分罕見、極度恐怖的病毒，屬于已知感染人的最烈性病原體.這種病毒因其1976年首先在剛果的埃博拉河地區(qū)被發(fā)現(xiàn)而得名，據(jù)世界衛(wèi)生組織公布的最新數(shù)字顯示，全世界已有1100人感染了這一病毒，其中793人死于該病毒引起的埃博拉出血熱。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革90埃博拉-馬爾堡病毒病又叫做非洲出血熱、馬爾堡病毒病、埃博拉病毒出血熱這兩種疾病均無疫苗或有效治療，盡管延續(xù)幾年涉及檢測數(shù)百種動物、昆蟲和植物的強化調(diào)查，但是尚未查明該病毒的動物儲主或其它環(huán)境源。猴子易受感染，但未被認為是可生存的有效儲主，因為幾乎所有受感染動物太快死亡以至于不能維持該病毒的生存。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革91(3)3起嚴重的實驗室SARS病毒感染事件

1.新加坡的實驗室sars感染事件

2003年9月新加坡國立大學27歲的研究生在環(huán)境衛(wèi)生研究院實驗室中感染SARS病毒。該研究生是被確診前已經(jīng)與多人有過接觸。原因調(diào)查：實驗室安全程序不當。該研究生在實驗室做西尼羅河病毒研究工作的，這個實驗室同時也做具有活性的SARS冠狀病毒研究。實驗室內(nèi)西尼羅河病毒與SARS病毒交叉污染是這次的傳染源。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革92第一，環(huán)境衛(wèi)生研究院只具有P2的生物安全設備，卻在院內(nèi)設立了用來進行更具危險性病毒研究的實驗室。第二，研究院同一時間處理多種不同的活性病毒研究，增加了生物安全方面的復雜程度，因處理程序不當，冠狀病毒與這名研究生研究的西尼羅病毒交叉感染。第三，其他研究機構的科研人員也可利用研究院的設備，而每一個科研人員的安全意識都不同環(huán)境部長就此事件事件，向新加坡人民致歉事故結論及處理：2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革932、中國臺灣地區(qū)的實驗室感染事件

2003年12月一名臺灣的SARS研究人員在實驗室感染SARS病毒。臺灣這名感染的研究人員工作的“國防預防醫(yī)學研究所”屬臺灣軍方研究單位，設立在山洞中，以兩層阻絕設施與外界隔離。這所實驗室擁有全臺最頂尖的實驗設備，實驗室等級列為P4，是臺灣唯一的“第4級生物安全實驗室”，超過“衛(wèi)生署疾病管制局”及“臺大醫(yī)院”等P3等級的實驗室，被譽為臺灣生化資源重鎮(zhèn)。當時在亞洲僅有日本擁有同等級的生物實驗室。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革94事故結論及處理：詹中校從實驗室操作到后來發(fā)病的處理過程，包括在實驗室清除廢棄物時出現(xiàn)疏失，沒有主動通報，后來還跑到新加坡去開會，出現(xiàn)發(fā)燒癥狀也沒有第一時間告知、通報，有一連串的錯誤，以致造成民眾心理的沖擊、甚至影響經(jīng)濟此外，根據(jù)世界衛(wèi)生組織的調(diào)查，臺灣SARS實驗室的一個主要問題是人手不足，科研人員常常單獨工作，提高了發(fā)生意外和錯誤被忽視的風險。世衛(wèi)組織人員強調(diào)科研人員不應單獨在實驗室工作，至少應有兩人在一起。世衛(wèi)組織人員指出，臺灣實驗室人員雖接受安全程序的教導，但他們?nèi)狈ψ銐虻谋O(jiān)督以確保他們真正遵守規(guī)章。給予詹中校停權處分。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革953、中國大陸的實驗室感染事件

2004年4月安徽、北京先后發(fā)現(xiàn)新的SARS病例，經(jīng)證實傳染源為中國CDC病毒實驗室的兩名研究生。安徽出現(xiàn)兩例SARS病例：安徽醫(yī)科大學的學生宋某和她的母親。北京患者李某則是曾護理宋某的護士。另一患者為中國CDC病毒實驗室工作的博士生楊某。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革96疫情源于實驗室內(nèi)感染

2004年4月非疫情的專項調(diào)查。調(diào)查結果如下：1.宋某和楊某兩個原發(fā)病例發(fā)生在同一實驗室。該實驗室有SARS冠狀病毒（SARS-CoV）的科研工作。2.封鎖病毒所后，未再出現(xiàn)任何SARS病人。3.從二代病例魏某（宋某之母）胸水分離到SARS-CoV，其全基因組序列與該室用于實驗的毒株高度同源。4.沒有發(fā)現(xiàn)宋某和楊某與野生動物接觸感染的證據(jù)。5.宋某和楊某發(fā)病潛伏期內(nèi)沒有任何其他SARS病例報告，沒有實驗室外接觸其他SARS病人而被感染的可能。6.楊某與宋某最后一次接觸，到楊某發(fā)病相距15天，僅在走廊碰面，楊某發(fā)病不可能是宋某傳染。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革97事故結論及處理：衛(wèi)生部、科技部聯(lián)合調(diào)查組調(diào)查認定，這次疫情源于實驗室內(nèi)感染，是一起因?qū)嶒炇野踩芾聿簧?，?zhí)行規(guī)章制度不嚴，技術人員違規(guī)操作，安全防范措施不力，導致實驗室污染和工作人員感染的重大責任事故。中國CDC病毒所腹瀉病毒室跨專業(yè)從事SARS研究，采用未經(jīng)論證和效果驗證的非典病毒滅活方法，在不符合防護要求的普通實驗室內(nèi)操作非典感染材料，發(fā)現(xiàn)人員健康異常情況未及時上報。中國CDC主任李立明、副主任楊曉光等因?qū)Σ《竟芾聿簧曝撚兄匾I導責任，引咎辭職。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革98微生物基本知識：分類2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革99（2）微生物基本知識－病原微生物霍亂弧菌流感病毒2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革100放線菌螺旋體支原體2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革101黃曲霉白色念珠菌2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革102（3）微生物與疾病病毒感染真菌局部感染2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革103細菌全身感染2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革104中毒腫瘤2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革105（4）微生物與傳染病蚊蟲傳播飛沫傳播垂直傳播2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革106與傳染病相關的微生物G(+)G(-)細菌2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革107超級細菌（1）MRSA耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌MRSA對所有?-內(nèi)酰胺類藥物如青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類、碳頭孢烯類和含酶抑制劑的復合制劑報告為耐藥，并常表現(xiàn)為對其他類抗生素的多重耐藥。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革108目前國內(nèi)未發(fā)現(xiàn)耐萬古的金黃色葡萄球菌。但是萬古霉素用于體內(nèi)治療MRSA亦有失敗的病例報道。實驗室使用耐萬古的金黃色葡萄球菌，要備案并且在安全實驗室進行2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革109（2）超廣譜?-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）

產(chǎn)ESBLs的代表菌株為肺炎克雷伯菌及大腸埃希菌，其他革蘭陰性桿菌如奇異變形桿菌、產(chǎn)酸克雷伯菌等也能產(chǎn)生。這種酶能水解新一類?-內(nèi)酰胺類藥物。頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢三嗪等及氨曲南等單環(huán)類抗生素，并介導細菌對這些抗生素耐藥的β-內(nèi)酰胺酶2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革110(3)耐青霉素肺炎鏈球菌和奈瑟菌奈瑟式菌肺炎鏈球菌2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革111(4)耐糖肽類和多種抗生素耐藥的腸球菌屬2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革112病毒：肝炎病毒、EBV、CMV、HSV、HZV、HIV等EBVHSV肝炎病毒HIV2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革113真菌隱球菌組織胞漿菌念珠菌

曲菌2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革114其他原核微生物支原體衣原體立克次體螺旋體2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革115（5）中華人民共和國傳染病防治法

(1989年2月21日中華人民共和國第七屆全國人民代表大會常務委員會第六次會議通過1989年2月21日中華人民共和國主席令第15號公布自1989年9月1日起施行)2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革116第一章總則第一條為了預防、控制和消除傳染病的發(fā)生與流行，保障人體健康，制定本法。

第二條國家對傳染病實行預防為主的方針，防治結合，分類管理。

第三條本法規(guī)定管理的傳染病分為甲類、乙類和丙類。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革117甲類傳染病是指：鼠疫、霍亂。

乙類傳染病是指：病毒性肝炎、細菌性和阿米巴性痢疾、傷寒和副傷寒、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹、百日咳、白喉、流行性腦脊髓膜炎、猩紅熱、流行性出血熱、狂犬病、鉤端螺旋體病、布魯氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹傷寒、流行性乙型腦炎、黑熱病、瘧疾、登革熱。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革118丙類傳染病是指：肺結核、血吸蟲病、絲蟲病、包蟲病、麻風病、流行性感冒、流行性腮腺炎、風疹、新生兒破傷風、急性出血性結膜炎、除霍亂、痢疾、傷寒和副傷寒以外的感染性腹瀉病。國務院可以根據(jù)情況，增加或者減少甲類傳染病病種，并予公布；國務院衛(wèi)生行政部門可以根據(jù)情況，增加或者減少乙類、丙類傳染病病種，并予公布。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革119第二章預防第十五條醫(yī)療保健機構、衛(wèi)生防疫機構和從事致病性微生物實驗的單位，必須嚴格執(zhí)行國務院衛(wèi)生行政部門規(guī)定的管理制度、操作規(guī)程，防止傳染病的醫(yī)源性感染、醫(yī)院內(nèi)感染、實驗室感染和致病性微生物的擴散。第十六條傳染病菌種、毒種的保藏、攜帶、運輸，必須按照國務院衛(wèi)生行政部門的規(guī)定嚴格管理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革120第十七條被甲類傳染病病原體污染的污水、污物、糞便，有關單位和個人必須在衛(wèi)生防疫機構的指導監(jiān)督下進行嚴密消毒后處理；拒絕消毒處理的，當?shù)卣梢圆扇娭拼胧?/p>

被乙類、丙類傳染病病原體污染的污水、污物、糞便，有關單位和個人必須按照衛(wèi)生防疫機構提出的衛(wèi)生要求進行處理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革121第二十條對從事傳染病預防、醫(yī)療、科研、教學的人員，現(xiàn)場處理疫情的人員，以及在生產(chǎn)、工作中接觸傳染病病原體的其他人員，有關單位應當根據(jù)國家規(guī)定，采取有效的防護措施和醫(yī)療保健措施。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革122有關菌種保藏的規(guī)定由國和院行政部門指定的單位負責；一、二類菌（毒）種的供應由國務院衛(wèi)生行政部門指定的保藏管理單位供應。三類菌（毒）種由設有專業(yè)實驗室的單位或者國務院衛(wèi)生行政部門指定的保藏管理單位供應；2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革123有關菌種使用的規(guī)定使用一類菌（毒）種的單位，必須經(jīng)國務院衛(wèi)生行政部門批準；使用二類菌（毒）種的單位必須經(jīng)省級政府衛(wèi)生行政部門批準；使用三類菌（毒）種的單位，應當經(jīng)縣級政府衛(wèi)生行政部門批準；2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革124有關菌種運輸?shù)囊?guī)定一、二類菌（毒）種，應派專人向供誚單位領取，不得郵寄；三類菌（毒）種的郵寄單位的證明，并按照菌（毒）種出寄與裝的有關規(guī)定辦理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革125第六章法律責任

第三十七條有本法第三十五條所列行為之一，引起甲類傳染病傳播或者有傳播嚴重危險的，比照刑法第一百七十八條的規(guī)定追究刑事責任。

第三十八條從事實驗、保藏、攜帶、運輸傳染病菌種、毒種的人員，違反國務院衛(wèi)生行政部門的有關規(guī)定，造成傳染病菌種、毒種擴散，后果嚴重的，依照刑法第一百一十五條的規(guī)定追究刑事責任；情節(jié)輕微的，給予行政處分。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革126新刑法－傳染病菌種擴散罪

第三百三十一條：從事實驗、保藏、攜帶、運輸傳染病菌種、毒種的人員，違反國務院衛(wèi)生行政部門的有關規(guī)定，造成傳染病菌種、毒種擴散，后果嚴重的，處三年以下有期徒刑或者拘役；后果特別嚴重的，處三年以上七年以下有期徒刑。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革127（6）消毒與滅菌滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法，包括殺滅細菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物消毒：殺死物體上病原微生物的方法，并不一定能殺死含芽孢的細菌或非病原微生物防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法無菌：不存在活菌的意思2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革128(6-1)干熱滅菌法

A焚燒：

B燒灼：

C干烤：160°～180℃，2hD紅外線滅菌：利用干烤箱，加熱160～180℃2小時，可殺死一切微生物，包括芽胞菌。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革129高壓蒸汽滅菌法：121℃加熱20～30分鐘，殺滅所有微生物及芽孢。(6-2)濕熱滅菌法2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革130(6-3)紫外線消毒空氣與物體表面(6-4)化學消毒劑1酚類：濃度：石炭酸為3%-5%、來蘇兒為2%用途：地面、器具表面和皮膚的消毒2醇類：濃度：乙醇70%-75%用途：用于皮膚的消毒和體溫計等的浸泡3重金屬鹽類：（1）2%紅汞：皮膚、粘膜和小創(chuàng)傷（2）0.05-0.01%升汞：非金屬器皿2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革1314氧化劑：（1）0.1%高錳酸鉀：皮膚、尿道、水果（2）3%過氧化氫：創(chuàng)傷、皮膚粘膜（3）2%-2.5%碘酒：皮膚消毒（4）0.2ppm-0.5ppm氯：飲水和游泳池（5）10%-20%漂白粉：地面、廁所等

5表面活性劑：

0.05%-0.1%新潔爾滅：皮膚粘膜、手術器械

6烷化劑：

10%甲醛：物品表面、空氣2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革132(6-5)消毒劑在實驗室的應用1皮膚：2.5%碘酒、70%酒精、2%紅汞2粘膜：1%硝酸銀、3%過氧化氫、0.1%高錳酸鉀等3被污染的空氣：甲醛熏蒸4手：2%來蘇兒、2%碘酊、70%酒精

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革133實驗室分類按部門分醫(yī)學實驗室：1、疾控機構專業(yè)實驗室（病原微生物、理化、毒理、消殺、生化和動物實驗室等）2、醫(yī)學臨床實驗室：門診化驗室、生化實驗室3、教學實驗室：大專院校4、研究型實驗室：研究院、各種重點實驗室5、其他特殊實驗室：醫(yī)藥企業(yè)的GMP廠房等2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革134（7）病原微生物與實驗室分級

國家對病原微生物按照其對人類和動物以及環(huán)境的危害程度實行分類管理，對實驗室根據(jù)其對病原微生物的防護水平實行分級管理。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革135病原微生物的分類和管理第四類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人或者動物疾病的微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物疾病，發(fā)生實驗室暴露可能引起感染，但不會引起嚴重危害，且能夠有效實施預防和治療的微生物

國家將病原微生物分為四類，衛(wèi)生部負責制定并調(diào)整四類病原微生物的種類。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革136第二類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，但不易在人或者動物間傳播，且能夠有效實施預防和治療的微生物。第一類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，容易在人或者動物間傳播，或者沒有有效的預防和治療措施的微生物。

第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革137

國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準（中華人民共和國國家標準

GB19489-2004實驗室生物安全通用要求）。國家根據(jù)實驗室防護水平，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革138

實驗室生物安全防護分級一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL1或P1二級生物安全防護實驗室，簡稱BSL2或P2三級生物安全防護實驗室，簡稱BSL3或P3四級生物安全防護實驗室，簡稱BSL4或P42022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革139一級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如工程細菌、工程真菌等。大腸桿菌啤酒酵母2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革140基礎實驗室從事基礎教學與研究，接觸1級生物危害微生物，即接觸不引起人或動物疾病的細菌、真菌、病毒等生物因子，如枯草桿菌、犬肝炎病毒等。只需開放式長形工作臺和好的微生物操作技術。

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革141

本學院分子生物、基因工程、藥理、毒理等實驗室(布局在學院二樓)按一級生物安全防護標準執(zhí)行。其中生物材料的使用：菌株：大腸桿菌工程菌株、枯草桿菌工程菌株、啤酒酵母工程菌株以及其他工程菌株。載體：克隆及表達質(zhì)粒（不包括哺乳病毒載體）細胞：不含安全性不明的致病性病毒的原代及傳代細胞核酸：DNA、RNA、PCR擴增產(chǎn)物等2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革142二級生物安全防護實驗室

實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。如：病原微生物分離培養(yǎng)、藥物實驗及病毒的血清學實驗2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革143基礎實驗室從事實驗健康服務、診斷、研究、接觸2級生物危害微生物，即引起人動物發(fā)病但不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染后不導致嚴重疾病，具有有效的治療和預防方法，傳播風險有限，如乙型肝炎病毒、沙門菌、弓形體等。除了開放式長形工作臺還應配置生物安全柜。實驗室應有生物危害標記。操作人員應身著防護服，有好的微生物操作技術，

2022/10/22中山大學微生物與生化制藥實驗室張2022/10/29中山大學微生物與生化制藥實驗室張革144

本學院涉及以下實驗的實驗室按二級生物安全防護標準執(zhí)行（布局在學院二樓的P2實驗室）。其中生物材料的使用：菌株：病原微生物的分類和管理法中對應的第三類微生物。如：TB,

MRSA，淋球菌等載體：哺乳病毒載體，尤其是生物安全性不明的逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒載體。細胞：含致病性哺乳動物病毒或生物安全性不明