六血鈣測定(范玉平)課件

實(shí)驗(yàn)六血鈣測定實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握甲基麝香草酚藍(lán)比色法測定血清鈣的原理。2熟悉總鈣和離子鈣的關(guān)系。血鈣概述鈣是體內(nèi)含量最多的無機(jī)鹽，占體重的1.5%～2%，總量約700～1400g。99%以上的鈣沉積于骨骼、牙齒。骨骼是鈣的最大儲(chǔ)備庫。血鈣概述細(xì)胞外鈣指存在于血漿或血清等細(xì)胞外的鈣，參考范圍：成人：2.10~2.55mmol/L兒童:2.25~2.67mmol/L血鈣概述存在形式離子鈣（游離鈣）占總血鈣的50%,是起直接生理作用的部分,約1.12~1.34mmol/L。蛋白結(jié)合鈣約40%總血鈣與血漿蛋白結(jié)合,主要是結(jié)合ALB，不能透過毛細(xì)血管壁，又稱非擴(kuò)散結(jié)合鈣可擴(kuò)散結(jié)合鈣約10%為與有機(jī)酸根離子結(jié)合的鈣，如枸櫞酸鈣，磷酸鈣等，可透過毛細(xì)血管壁。血鈣概述血鈣游離鈣（50%）結(jié)合鈣蛋白結(jié)合鈣（40%）可擴(kuò)散結(jié)合鈣（10%）可擴(kuò)散鈣

非擴(kuò)散鈣血鈣概述1以上三種鈣處于不斷交換的動(dòng)態(tài)平衡中。2當(dāng)pH↓→ALB的氨基酸鏈帶正電荷↑→結(jié)合鈣↓,游離鈣↑。3ALB↓→結(jié)合鈣部分↓,總鈣↓,但游離鈣可正常。鈣的排泄80%經(jīng)腸道，20%經(jīng)腎臟。測定方法項(xiàng)目方法總鈣測定

染料結(jié)合法、滴定法、熒光法、原子吸收分光光度法、酶法、同位素稀釋質(zhì)譜法等。離子鈣測定

離子選擇電極法測定方法注：在評(píng)價(jià)鈣的生物學(xué)活性方面，以測定離子鈣為佳，但從反映機(jī)體鈣的總體代謝狀況，總鈣測定更為客觀，兩者不能完全相互替代。

實(shí)驗(yàn)原理（MTB比色法）血清中鈣離子在堿性溶液中與甲基麝香草酚藍(lán)(MTB)結(jié)合，生成藍(lán)色的絡(luò)合物。加入適當(dāng)?shù)?-羥基喹啉，可消除鎂離子對(duì)測定的干擾，與同樣處理的鈣標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比較，以求得血清總鈣的含量。甲基麝香草酚藍(lán)線性范圍：0-3.75mmol/L（超過時(shí)，用生理鹽水5或10倍稀釋后再測定，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。）單位換算：1mmol/L血清鈣=4.0mg/dL試劑試劑1（顯色劑）甲基麝香草酚藍(lán)0.12mmol/L聚乙烯吡咯烷酮0.10mmol/L8-羥基喹啉13.8mmol/L濃硫酸25.5mmol/L試劑2(緩沖液)二乙胺0.72mmol/L試劑顯色應(yīng)用液臨用前,根據(jù)樣本的多少,將上述的試劑1、2兩液等量混合。鈣標(biāo)準(zhǔn)液濃度：2.5mmol/L計(jì)算:血清鈣（mmol/L）=測定管A標(biāo)準(zhǔn)管A×2.5mmol/L臨床意義血鈣增高見于原發(fā)性和繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)，繼發(fā)性佝僂病，軟骨病，慢性腎功能衰歇。代謝性酸中毒，VitD過多。血鈣降低可引起神經(jīng)肌肉應(yīng)激性增強(qiáng)發(fā)生手足抽搐。見于原發(fā)性和繼發(fā)性甲狀旁腺功能減退，VitD缺乏引起的佝僂病，軟骨病，吸收不良性低鈣血癥，急性胰腺炎，新生兒低鈣血癥，術(shù)后等。評(píng)價(jià)4.一般來說總鈣測定比離子鈣更簡便易行，但血漿總鈣濃度明顯受到總蛋白的影響，尤其是清蛋白的影響。清蛋白下降10g/L將導(dǎo)致總鈣減少約0.25mmol/L。此時(shí)實(shí)際鈣含量（mmol/L）＝鈣測定量（mmol/L）－0.025血清清蛋白