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現(xiàn)代生物科技專題基因工程的“剪刀”是,主要來(lái)源于,能夠識(shí)別雙鏈DNA特定核苷酸序列,并使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的斷開,形成或,具有專一性和特異性基因工程的“針線”是,主要來(lái)源于,可將雙鏈DNA片段縫合起來(lái),恢復(fù)被限制酶切的,一般連接酶只連接黏性末端,連接酶既可連接黏性末端又可連接平末端基因工程的“分子運(yùn)輸車”是,種類可分為最常用的,λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等,能夠攜帶進(jìn)入受體細(xì)胞,可在中自我復(fù)制或整合到染色體DNA上,隨染色體DNA同步復(fù)制作為載體需要滿足的條件有:能在中復(fù)制并穩(wěn)定保存;具有一至多個(gè)位點(diǎn);具有,有復(fù)制原點(diǎn)基因工程的基本操作程序是,其中最核心的步驟是目的基因是指的基因,也可以是一些具有的因子目的基因的獲取方法有三種,第一種是從中分離,如從基因組文庫(kù)或cDNA文庫(kù)中獲?。坏诙N是,包括利用mRNA反轉(zhuǎn)錄和通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法合成;第三種是利用擴(kuò)增PCR擴(kuò)增的原理是PCR擴(kuò)增的前提是已知,以便根據(jù)這一序列合成引物PCR擴(kuò)增的條件:PCR擴(kuò)增過(guò)程首先是,溫度大于90℃,雙鏈DNA解聚為單鏈;然后是,約50℃,兩種引物與兩DNA單鏈結(jié)合;最后是,約72℃,合成子鏈PCR擴(kuò)增的結(jié)果是1個(gè)DNA變成個(gè)DNAPCR技術(shù)在環(huán)境中的應(yīng)用:基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的是:使在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在、表達(dá)、發(fā)揮作用并可遺傳給下一代基因表達(dá)載體由目的基因,啟動(dòng)子,終止子,復(fù)制原點(diǎn),標(biāo)記基因組成,其中目的基因是;啟動(dòng)子是的部位,驅(qū)動(dòng);終止子位于,終止;復(fù)制原點(diǎn)是自我復(fù)制的起點(diǎn);標(biāo)記基因可鑒別中是否含有目的基因?qū)⒛康幕驅(qū)胧荏w細(xì)胞有多種方法,其中針對(duì)植物細(xì)胞的方法有,花粉管通道法,基因槍法等;針對(duì)動(dòng)物細(xì)胞使用;針對(duì)微生物,常用處理原核細(xì)胞,使之處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為,然后將重組載體與感受態(tài)細(xì)胞混合,完成轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌內(nèi)含有,當(dāng)農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后,能將上的T-DNA序列轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上目的基因是否插入的檢測(cè)需要,現(xiàn)象是;檢測(cè)是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,使用的是,現(xiàn)象是;檢測(cè)是否翻譯成蛋白質(zhì),使用的是,現(xiàn)象是;個(gè)體鑒定的檢測(cè)是用,現(xiàn)象是動(dòng)物基因工程用于提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度;用于改善;用動(dòng)物生產(chǎn)藥物;用動(dòng)物作器官移植的供體植物基因工程用于培育抗蟲轉(zhuǎn)基因植物、抗病轉(zhuǎn)基因植物和抗逆轉(zhuǎn)基因植物;利用轉(zhuǎn)基因改良基因診斷又稱為DNA診斷,是采用的方法來(lái)判斷患者是否出現(xiàn)了基因異?;驍y帶病原體基因治療是把導(dǎo)入病人體內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用,從而達(dá)到治療疾病的目的基因治療的成果:將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入取自患者的中,使能產(chǎn)生腺苷酸脫氨酶,然后再將這種細(xì)胞轉(zhuǎn)入患者體內(nèi),從而治療蛋白質(zhì)工程的目的是改造現(xiàn)有或制造,以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求蛋白質(zhì)的基本思路是:預(yù)期蛋白質(zhì)功能——設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)————找到相對(duì)應(yīng)的序列DNA在溶液中溶解度最低;DNA不溶于酒精,但某些溶于酒精沸水浴條件下,DNA與反應(yīng)呈藍(lán)色在DNA的粗提取與鑒定中,要選用的生物組織,不能選用哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞,原因是:在DNA的粗提取與鑒定中,將DNA析出時(shí),需將處理后的溶液過(guò)濾,加入等體積的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為的溶液在DNA的粗提取與鑒定中,兩次使用蒸餾水的目的是動(dòng)植物細(xì)胞DNA的提取不需要在環(huán)境下進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是:植物組織培養(yǎng)的原理是:植物細(xì)胞全能性表達(dá)的條件:在生物體生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,并非所有細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性,原因是特定的時(shí)間和空間條件下,愈傷組織是植物組織培養(yǎng)的過(guò)程是:外植體通過(guò)形成愈傷組織,再通過(guò)形成胚狀體,根或芽,再形成植物體脫分化是,再分化是是啟動(dòng)細(xì)胞分裂,脫分化,再分化的關(guān)鍵激素,生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值高,有利于;生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值低,有利于;生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值適中,有利于形成植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理是植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中需要和去壁,原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法,物理法包括;化學(xué)法一般是用作為誘導(dǎo)劑來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交的意義是克服不同生物植物細(xì)胞工程可應(yīng)用在(繁殖速度快,并可保持優(yōu)良品種的遺傳特性),(利用莖尖、根尖等分生區(qū)細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗),(以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等為材料,經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子),培育作物新品種,細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等方面植物細(xì)胞工程是培育轉(zhuǎn)基因植物,植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件中營(yíng)養(yǎng)需要:合成培養(yǎng)基+動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境,培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行;培養(yǎng)過(guò)程中加;定期更換培養(yǎng)液,清除動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需適宜的溫度:適宜的pH:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需合適的氣體環(huán)境:95%空氣,其中氧氣是、5%二氧化碳,主要作用是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程是:取動(dòng)物組織塊——剪碎、用或處理——原代培養(yǎng)——或處理后分瓶培養(yǎng)——傳代培養(yǎng)分散細(xì)胞時(shí)不能用胃蛋白酶,原因是原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是生長(zhǎng),,體現(xiàn)了細(xì)胞膜的,與有關(guān)傳代培養(yǎng)的特點(diǎn):代時(shí)增殖緩慢、甚至停止,部分細(xì)胞核型可能發(fā)生改變,當(dāng)繼續(xù)傳代培養(yǎng)時(shí),少數(shù)細(xì)胞會(huì)獲得不死性,可目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞一般為以內(nèi),以保持核移植技術(shù)的原理:核移植分為和核移植的過(guò)程:取供體細(xì)胞培養(yǎng),注入到期去核卵母細(xì)胞進(jìn)行融合,形成重組胚胎,胚胎移植到代孕動(dòng)物體中,最后生產(chǎn)出與遺傳物質(zhì)相同的幼體核移植技術(shù)用于畜牧業(yè),加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn),還可用于醫(yī)療衛(wèi)生等方面,但核移植技術(shù)成功率非常低,理論研究較為滯后,大多克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題,表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等動(dòng)物細(xì)胞融合的原理:動(dòng)物細(xì)胞的常用誘導(dǎo)因素有聚乙二醇,點(diǎn)激和動(dòng)物細(xì)胞融合結(jié)果形成,突破了有性雜交方法的局限,使;動(dòng)物細(xì)胞融合能制備單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):?jiǎn)慰寺】贵w的制備中需兩次篩選雜交瘤細(xì)胞,第一次用篩選,第二次篩選用檢測(cè)單克隆抗體可以作為診斷試劑,能夠運(yùn)載藥物,制成,也可以治療疾病排卵是指卵子從中排出,而不是指卵泡從卵巢中排出精子獲能是指在獲得受精能力卵子在輸卵管中進(jìn)一步成熟,到時(shí),才具備與精子受精的能力受精過(guò)程的第一道屏障是,第二道屏障是常以卵細(xì)胞膜與透明帶的間隙觀察到為受精的標(biāo)志,而受精完成的標(biāo)志是胚胎早期發(fā)育卵裂時(shí),細(xì)胞的數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體積桑葚胚時(shí),細(xì)胞,每個(gè)細(xì)胞都屬于全能細(xì)胞囊胚分為滋養(yǎng)層,囊胚腔和內(nèi)細(xì)胞團(tuán),滋養(yǎng)層包括,內(nèi)細(xì)胞團(tuán)包括原腸胚是細(xì)胞高度分化時(shí)期,出現(xiàn)三個(gè)和胚胎移植時(shí)使用對(duì)供體,受體進(jìn)行同期發(fā)情處理;使用對(duì)供體進(jìn)行超數(shù)排卵處理胚胎移植過(guò)程中兩次檢查分別是胚胎移植能夠充分發(fā)揮胚胎分割使用的是發(fā)育良好、形態(tài)正常的或,屬于或克隆胚胎分割,分割囊胚時(shí),注意將均等分割胚胎干細(xì)胞來(lái)源于或胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上,體積小,細(xì)胞核,核仁,在功能上具有;體外培養(yǎng)條件下可以增殖而不發(fā)生治療性克隆是指用于修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織或器官,以治療疾病,屬于生殖性克隆是指用于生育,獲得人的復(fù)制品,屬于中國(guó)政府對(duì)于治療性克隆和生殖性克隆的態(tài)度是生態(tài)工程的目的是遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境污染,達(dá)到與的同步發(fā)展生態(tài)工程與傳統(tǒng)工程相比,生態(tài)工程是一類的工程體系生態(tài)經(jīng)濟(jì)的原則是生態(tài)經(jīng)濟(jì)的目的是實(shí)現(xiàn)生態(tài)工程研究和處理的對(duì)象是實(shí)現(xiàn)物質(zhì)循環(huán)往復(fù),分層分級(jí)利用的是原理物種繁多而復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)一般具有較高的抵抗力穩(wěn)定性的是利用原理處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡,除考慮生物的生態(tài)適應(yīng)性外,還需考慮環(huán)境承載力的是原理進(jìn)行生態(tài)工程建設(shè)時(shí),不但要考慮自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律,還要考慮經(jīng)濟(jì)和社會(huì)等系統(tǒng)的影響力的是原理運(yùn)用系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理,系統(tǒng)整體性原理的是原理克隆動(dòng)物,試管動(dòng)物與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的相同點(diǎn)是:答案:限制性核酸內(nèi)切酶,原核細(xì)胞,磷酸二酯鍵,黏性末端,平末端DNA連接酶,大腸桿菌,T4噬菌體,磷酸二酯鍵,大腸桿菌DNA,T4噬菌體載體,質(zhì)粒,外源DNA片段,受體細(xì)胞受體細(xì)胞,限制酶切割,標(biāo)記基因目的基因的獲取-基因表達(dá)載體的構(gòu)建-將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞-目的基因的檢測(cè)與鑒定,基因表達(dá)載體的構(gòu)建編碼蛋白質(zhì),調(diào)控作用自然界已有的物種,人工合成,PCRDNA半保留復(fù)制目的基因的一段核苷酸序列DNA母鏈,2種引物,熱穩(wěn)定DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸變性;復(fù)性;延伸2n跟蹤檢測(cè)環(huán)境中的基因工程菌,檢測(cè)環(huán)境指示菌,檢測(cè)環(huán)境中的致病菌目的基因編碼蛋白質(zhì)的基因;RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合,轉(zhuǎn)錄;基因尾端,轉(zhuǎn)錄;載體;受體細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;顯微注射法;Ca2+,感受態(tài)細(xì)胞Ti質(zhì)粒,Ti質(zhì)粒DNA分子雜交,是否出現(xiàn)雜交帶;分子雜交,是否出現(xiàn)雜交帶;抗原-抗體雜交,是否出現(xiàn)雜交帶;抗性實(shí)驗(yàn),抗性是否存在畜產(chǎn)品品質(zhì);轉(zhuǎn)基因;轉(zhuǎn)基因植物的品質(zhì)基因檢測(cè)正?;蛄馨图?xì)胞蛋白質(zhì),新蛋白質(zhì)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列0.14mol/L的NaCl,蛋白質(zhì)
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