質(zhì)譜分析法定性與定量課件

北京市海淀區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所國(guó)家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心2011年06月23日質(zhì)譜分析方法——定性與定量北京市海淀區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所質(zhì)譜分析方法——定性與定量1ThebirthofVenus《LCandMS:AMatchMadeinHeaven》JamesJorgenson，UniversityofNorthCarolina59th，ASMS，June5，Denver，USAThebirthofVenus《LCandMS:2TheArnolfiniWedding阿爾諾菲尼的婚禮揚(yáng).凡.艾克1434TheArnolfiniWedding阿爾諾菲尼的婚禮3主要內(nèi)容一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語二、定性（確證）方法三、定量方法主要內(nèi)容一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語4真空系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)檢測(cè)器數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)量分析器離子源大氣壓質(zhì)譜儀的基本結(jié)構(gòu)GCLCICCEEI、CIESIAPCI、APPIMALDIDART-四級(jí)桿離子阱飛行時(shí)間磁質(zhì)譜FT-ICR一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語真空系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)檢測(cè)器數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)量分析器離子源大氣壓質(zhì)譜儀的5各種離子化方法的使用范圍

選擇的依據(jù)揮發(fā)性熱穩(wěn)定性極性

Neutral101102103104105MolecularWeightIonicAnalytePolarityESIorMALDIAPCI/APPIGC/MS各種離子化方法的使用范圍選擇的依據(jù)Neutral101106質(zhì)量范圍質(zhì)譜儀所能測(cè)定的離子質(zhì)荷比的范圍不同儀器不同應(yīng)用質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)掃描速度分辨率色譜峰的數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)目和峰寬、掃描時(shí)間有關(guān)質(zhì)量范圍質(zhì)譜儀所能測(cè)定的離子質(zhì)荷比的范圍質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)7質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)8質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)磁質(zhì)譜的分辨率定義最為嚴(yán)格：對(duì)兩個(gè)相等強(qiáng)度的相鄰峰，當(dāng)兩峰間的峰谷不大于其峰高10%時(shí)，則認(rèn)為兩峰已經(jīng)分開，其分辨率：磁質(zhì)譜中，R不隨m/z變化，在測(cè)定小分子時(shí)有優(yōu)勢(shì)eg.R=5000，500與500.15000與5001分辨率質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)磁質(zhì)譜的分辨率定義9有機(jī)質(zhì)譜僅要求50％峰谷剛剛分開就算分開（這時(shí)稱為有機(jī)質(zhì)譜的單位質(zhì)量分辨）簡(jiǎn)化為用單峰法表示，即測(cè)定一個(gè)峰半峰高處的全峰寬FullwidthhalfMaximum（簡(jiǎn)寫為FWHM）分辨率eg.FWHM=0.25m/z=100，R=400m/z=1000，R=4000有機(jī)質(zhì)譜僅要求50％峰谷剛剛分開就算分開（這時(shí)稱為有機(jī)質(zhì)譜的10分辨率例如：要區(qū)分以下離子，分辨率要達(dá)到CO+ 27.9949 N2+ 28.0061ArCl+ 74.9312As+ 74.9216分辨率例如：要區(qū)分以下離子，分辨率要達(dá)到11atto摩爾級(jí)的靈敏度；優(yōu)于2ppm的MS質(zhì)量準(zhǔn)確度優(yōu)于5ppm的MS/MS質(zhì)量準(zhǔn)確度線性動(dòng)態(tài)范圍可以達(dá)到五個(gè)數(shù)量級(jí)；質(zhì)量分辨率至20,000高速數(shù)據(jù)采集能力（每秒獲得10張MS/MS譜圖），更好地兼容超快速液相色譜寬質(zhì)量范圍：m/z范圍從25～20,000u舉例：atto摩爾級(jí)的靈敏度；舉例：12質(zhì)譜峰類型分子離子必須是化合物譜圖中質(zhì)量最高的離子必須是奇電子離子、符合氮規(guī)則必須能通過丟失合理的中性離子，產(chǎn)生譜圖中高質(zhì)量區(qū)的重要離子準(zhǔn)分子離子碎片離子同位素離子由于天然同位素的存在，因此在質(zhì)譜圖上出現(xiàn)M+1，M+2等峰，由這些同位素所形成的峰稱之為同位素峰一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語術(shù)語質(zhì)譜峰類型一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語術(shù)語131-Cl2-Cl1-Cl2-Cl141-Br2-Br1-Br2-Br153-Br4-Br3-Br4-Br16Beynon表例如：M=150化合物M+1M+2 化合物M+1M+2C6H14NOCl8.150.49 C7H11N49.250.38C6H14O46.861.0 C8H6O38.360.95C7H2O47.751.06 C8H8NO29.230.78C7H4NO38.131.06 C8H11N2O9.610.61C7H6N2O28.500.72 C8H12N39.980.45C7H8N3O8.880.55 C9H10O29.960.84Beynon表例如：M=15017二、定性（確證）方法質(zhì)譜法只有在與色譜分離在線或脫機(jī)聯(lián)用時(shí)才能作為確證方法在分析儀器上的進(jìn)樣順序是：空白溶劑、陰性控制樣品、要確證的樣品、陽性控制樣品再進(jìn)樣，最后是陰性控制樣品

1.基本原則二、定性（確證）方法質(zhì)譜法只有在與色譜分離在線或脫機(jī)聯(lián)用時(shí)才18保留時(shí)間實(shí)驗(yàn)室條件下分析物的最小可接受保留時(shí)間，>2t0氣相色譜（GC）或液相色譜（LC）時(shí)，半峰寬應(yīng)在原來峰寬的90-110%以內(nèi)，保留時(shí)間的變化應(yīng)在5%以內(nèi)二、定性（確證）方法

2.

色譜分離保留時(shí)間二、定性（確證）方法2.色譜分離19保留時(shí)間測(cè)試部分中分析物的保留時(shí)間（或相對(duì)保留時(shí)間），應(yīng)在一個(gè)特定的保留時(shí)間窗口范圍內(nèi)與校正標(biāo)準(zhǔn)的保留時(shí)間相符。保留時(shí)間窗口與該色譜系統(tǒng)的分辨能力相當(dāng)。分析物和內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間之比，應(yīng)與校正溶液的相對(duì)保留時(shí)間一致，GC偏差為±0.5%，LC偏差為±2.5%

二、定性（確證）方法

2.

色譜分離保留時(shí)間二、定性（確證）方法2.色譜分離20GBT16631-2008高效液相色譜法通則：同樣條件下重復(fù)試驗(yàn)的保留數(shù)據(jù)的分散性，RSD≤3%JJG705-2002液相色譜儀檢定規(guī)程：定性測(cè)量重復(fù)性（6次測(cè)量）RSD≤1.5%JJF（閩）1032－2010液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范：定性重復(fù)性RSD≤2%JY/T021—1996分析型氣相色譜方法通則：整機(jī)重復(fù)性保留時(shí)間RSD≤5％二、定性（確證）方法關(guān)于保留時(shí)間的討論GBT16631-2008高效液相色譜法通則：同樣條件下21GB/T22260-2008飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法試樣保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品的相對(duì)偏差不大于15%GB/T22147-2008飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測(cè)定液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法樣品與標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間的相對(duì)偏差不大于0.5%二、定性（確證）方法關(guān)于保留時(shí)間的討論GB/T22260-2008飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定高效22全掃描scan選擇離子監(jiān)測(cè)SIMMS-MSn技術(shù)，如多反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM二、定性（確證）方法

3.質(zhì)譜檢測(cè)全掃描scan二、定性（確證）方法3.質(zhì)譜檢測(cè)23全掃描scan用記錄全掃描質(zhì)譜圖進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，在標(biāo)準(zhǔn)品參考圖譜中所有相對(duì)豐度>10%（分子離子、分子離子的特征加成物、特征碎片離子、同位素離子等）的特征離子都必須檢測(cè)選擇離子監(jiān)測(cè)SIM用碎片離子色譜圖進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，分子離子最好是一個(gè)選擇的檢測(cè)離子。選擇的檢測(cè)離子并不一定要源于分子的同一部分。每個(gè)檢測(cè)離子的信噪比應(yīng)≥3︰1二、定性（確證）方法

3.質(zhì)譜檢測(cè)全掃描scan二、定性（確證）方法3.質(zhì)譜檢測(cè)24相對(duì)豐度（%基峰）EI-GC-MS（相對(duì)）CI-GC-MS、GC-MSn、LC-MS、LC-MSn（相對(duì)）>50%±10%±20%>20%to50%±15%±25%>10%to20%±20%±30%≤10%±50%±50%相對(duì)離子豐度最大容許偏差二、定性（確證）方法相對(duì)豐度（%基峰）EI-GC-MS（相對(duì)）CI-GC-MS、25二、定性（確證）方法2002/657/EC規(guī)定：要確證指令96/23/EC附錄I-A組所列的物質(zhì)，最少需要4個(gè)識(shí)別點(diǎn)，包括具有促合成作用和其他未允許的化合物，如二苯乙烯類化合物及其衍生物、鹽、酯等、抗甲狀腺劑、甾醇、二羥基苯甲酸內(nèi)酯如玉米赤霉醇、β-受體激動(dòng)劑等要確證指令96/23/EC附錄I-B組所列的物質(zhì)，最少需要3個(gè)識(shí)別點(diǎn)，包括獸藥和污染物，獸藥如抗菌藥、驅(qū)蟲藥、抗球蟲藥、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、鎮(zhèn)靜藥、非甾體抗炎藥等；其他環(huán)境污染物如有機(jī)氯、有機(jī)磷、真菌毒素、染料等二、定性（確證）方法2002/657/EC規(guī)定：26MS技術(shù)每種離子的識(shí)別點(diǎn)數(shù)低分辨質(zhì)譜（LR）1.0LR-MSn母離子1.0LR-MSn子離子1.5高分辨質(zhì)譜（HR）2.0HR-MSn母離子2.0HR-MSn子離子2.5質(zhì)量碎片類型和識(shí)別點(diǎn)的關(guān)系每個(gè)離子計(jì)算一次

EI-GC-MS、CI-GC-MS作為不同的技術(shù)計(jì)算用不同反應(yīng)得到的衍生物，可增加識(shí)別點(diǎn)數(shù)包括二級(jí)離子和多級(jí)離子可最多結(jié)合三種不同的技術(shù)確定最小識(shí)別點(diǎn)數(shù)二、定性（確證）方法MS技術(shù)每種離子的識(shí)別點(diǎn)數(shù)低分辨質(zhì)譜（LR）1.0LR-MS27質(zhì)譜分析法定性與定量課件28m/z+202→122m/z-179→79.9ESI-ESI+甜蜜素SN/T1948-2007進(jìn)出口食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的檢測(cè)方法m/z+202→122m/z-179→79.9ES29應(yīng)研究樣品基質(zhì)和檢測(cè)器性能引起的圖譜改變應(yīng)研究樣品基質(zhì)和檢測(cè)器性能引起的圖譜改變30化合物保留時(shí)間（min）定性離子對(duì)定量離子對(duì)Fragmentor（V）CE（V）麻黃堿6.9166/148166/1488010166/13320偽麻黃堿8.0166/148166/1488010166/13320化合物保留時(shí)間（min）定性離子對(duì)定量離子對(duì)Fragment31外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)加入法基質(zhì)效應(yīng)三、定量方法外標(biāo)法三、定量方法32三、定量方法

1.外標(biāo)法單點(diǎn)校正法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法1.外標(biāo)法單點(diǎn)校正法33三、定量方法

單點(diǎn)校正法實(shí)際上是利用原點(diǎn)作為標(biāo)準(zhǔn)曲線上的另一個(gè)點(diǎn)，當(dāng)方法存在系統(tǒng)誤差時(shí)（即標(biāo)準(zhǔn)工作曲線不通過原點(diǎn)），單點(diǎn)校正法的誤差較大單點(diǎn)校正法三、定量方法單點(diǎn)校正法實(shí)際上是利用原點(diǎn)作為標(biāo)準(zhǔn)曲34三、定量方法以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T21317-2007動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測(cè)方法“根據(jù)樣液中被測(cè)四環(huán)素類獸藥殘留的含量情況，選定峰高相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液”，“對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體積參插進(jìn)樣測(cè)定”GB/T22147-2008飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測(cè)定“采用M+1的準(zhǔn)分子離子的色譜峰面積做單點(diǎn)校正定量”單點(diǎn)校正法三、定量方法以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液?jiǎn)吸c(diǎn)校正法35三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T21320-2007動(dòng)物源食品中阿維菌素類藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法“分別取適量試樣溶液和相近濃度的基質(zhì)添加標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，做單點(diǎn)校正”，“對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液等體積參插進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定”單點(diǎn)校正法三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液?jiǎn)吸c(diǎn)校正法36三、定量方法以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T22260-2008

飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T22955-2008河豚魚、鰻魚和烤鰻中苯并咪唑類藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T21324-2007食用動(dòng)物肌肉和肝臟中苯并咪唑類藥物殘留量檢測(cè)方法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法37三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T23409-2009蜂王漿中土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T23408-2009蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留量測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T22986-2008牛奶和奶粉中氫化潑尼松殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T22978-2008牛奶和奶粉中地塞米松殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法38三、定量方法

空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取后得到系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液GB/T21312-2007動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T22969-2008奶粉和牛奶中鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡那霉素殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T

水果、蔬菜中啶蟲脒殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T21313-2007動(dòng)物源性食品中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取39a:以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Aab:以空白樣品的提取液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Abc:在空白樣品加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，提取后得到基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Ac絕對(duì)回收率Ac/Aa，包含提取效率和基質(zhì)效應(yīng)提取回收率Ac/Ab，不包含基質(zhì)效應(yīng)絕對(duì)回收率=提取回收率*絕對(duì)基質(zhì)效應(yīng)GB/T27404-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測(cè)“如果檢測(cè)結(jié)果用回收率進(jìn)行校準(zhǔn)，應(yīng)在原始記錄的結(jié)果中明確說明并描述校準(zhǔn)公式”三、定量方法a:以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Aa三、定量方法40三、定量方法

2.內(nèi)標(biāo)法單點(diǎn)校正法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法2.內(nèi)標(biāo)法單點(diǎn)校正法41三、定量方法

2.內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)物要滿足以下要求：（a）試樣中不含有該物質(zhì)；（b）與被測(cè)組分性質(zhì)比較接近；（c）不與試樣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；（d）出峰位置應(yīng)位于被測(cè)組分附近。三、定量方法2.內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)物要滿足以下要求：42內(nèi)標(biāo)法計(jì)算式準(zhǔn)確稱取一定量的試樣m，加入一定量?jī)?nèi)標(biāo)物ms，試樣中待測(cè)物的含量wi為：內(nèi)標(biāo)法計(jì)算式準(zhǔn)確稱取一定量的試樣m，加入一定量?jī)?nèi)標(biāo)43內(nèi)標(biāo)法特點(diǎn)(a)內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許變動(dòng)對(duì)定量結(jié)果的影響不大(b)內(nèi)標(biāo)物和被測(cè)組分處在同一基體中，因此可以消除基體帶來的干擾(c)若將內(nèi)標(biāo)法中的試樣取樣量和內(nèi)標(biāo)物加入量固定，則：內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法內(nèi)標(biāo)法特點(diǎn)(a)內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許44內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法

配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入等量的內(nèi)標(biāo)物,混合后進(jìn)行色譜分析。以待測(cè)組分的濃度為橫坐標(biāo)，待測(cè)組分與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比率為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線（或線性方程）

在分析未知樣品時(shí)，分別加入與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)等量的內(nèi)標(biāo)物，用樣品與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出被測(cè)組分的濃度或用線形方程計(jì)算內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法45三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以純?nèi)軇┡渲葡盗袠?biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T23406-2009腸衣中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T23407-2009蜂王漿中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T23411-2009蜂王漿中17種喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T23412-2009蜂蜜中19種喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以純?nèi)軇┡渲葡盗袠?biāo)準(zhǔn)工作溶液46三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以空白樣品的提取液配制系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T22992-2008牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、雙烯雌酚殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T22959-2008河豚魚、鰻魚和烤鰻中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T20756-2006可食動(dòng)物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以空白樣品的提取液配制系列標(biāo)準(zhǔn)工47三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取后得到基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液GB/T21311-2007動(dòng)物源性食品中硝基呋喃類藥物代謝物殘留量檢測(cè)方法高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T21310-2007動(dòng)物源性食品中甲狀腺拮抗劑殘留量檢測(cè)方法高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法空白樣品加入系列濃度的標(biāo)48沙丁胺醇-D36.10克倫特羅-D915.6沙丁胺醇6.16塞曼特羅7.01特布他林6.24塞布特羅11.07萊克多巴胺14.65克倫特羅15.66溴代克倫特羅16.52溴布特羅17.47苯氧丙酚胺18.72馬布特羅18.77馬賁特羅23.11內(nèi)標(biāo)的選擇

GB/T22286-2008保留時(shí)間minSN/T1924-2007沙丁胺醇-D36.10克倫特羅-D915.6沙丁胺醇6.1649三、定量方法3.標(biāo)準(zhǔn)加入法先測(cè)定出未知樣品的大概值，然后根據(jù)這個(gè)測(cè)定值去設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法中第一點(diǎn)加入標(biāo)準(zhǔn)溶液為“0”，第二點(diǎn)加入的量約與待測(cè)組分的含量大致相等，共3~5個(gè)點(diǎn)，以加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制工作曲線工作曲線在橫坐標(biāo)延長(zhǎng)線上的交點(diǎn)到坐標(biāo)原點(diǎn)的距離即為樣品中待測(cè)組分的濃度三、定量方法3.標(biāo)準(zhǔn)加入法先測(cè)定出未知樣品的大概值，然后根50三、定量方法3.標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法可以看作是內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法的結(jié)合由于待測(cè)組分以及加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液處在相同的樣品基體中，因此，這種方法可以消除基質(zhì)干擾但是，由于對(duì)每一個(gè)樣品都要配制三個(gè)以上的、含樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的混合溶液，因此，這種方法不適于大批樣品的分析三、定量方法3.標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法可以看作是內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)51前提具有線性關(guān)系，并且標(biāo)準(zhǔn)曲線通過坐標(biāo)原點(diǎn)盡可能減小系統(tǒng)誤差試樣的基質(zhì)效應(yīng)不得隨被測(cè)組分含量對(duì)干擾組分含量比值改變而改變必須扣除背景和空白值

3.標(biāo)準(zhǔn)加入法三、定量方法前提3.標(biāo)準(zhǔn)加入法三、定量方法52三、定量方法概念產(chǎn)生機(jī)制來源如何評(píng)價(jià)如何消除4.基質(zhì)效應(yīng)三、定量方法概念4.基質(zhì)效應(yīng)53三、定量方法基質(zhì)效應(yīng)是指在樣品測(cè)試過程中，由于待測(cè)物以外的其他物質(zhì)的存在，直接或間接影響待測(cè)物響應(yīng)的現(xiàn)象由于質(zhì)譜檢測(cè)的高選擇性，基質(zhì)效應(yīng)的影響在色譜圖上往往觀察不到，即空白基質(zhì)色譜圖表現(xiàn)為一條直線，但這些共流出組分會(huì)改變待測(cè)物的離子化效率，引起對(duì)待測(cè)物檢測(cè)信號(hào)的抑制或提高4.基質(zhì)效應(yīng)三、定量方法基質(zhì)效應(yīng)是指在樣品測(cè)試過程中，由于待測(cè)物以外的其54三、定量方法待測(cè)物與基質(zhì)成分的電荷競(jìng)爭(zhēng)形成氣態(tài)離子的競(jìng)爭(zhēng)改變表面張力，形成大液滴，不充分的去溶劑化基質(zhì)效應(yīng)的產(chǎn)生機(jī)制三、定量方法基質(zhì)效應(yīng)的產(chǎn)生機(jī)制55三、定量方法內(nèi)源性的：來源于待測(cè)樣品，如蛋白、脂質(zhì)、多糖、目標(biāo)組分的類似物，其他色譜共流出物外源性的：流動(dòng)相組成、樣品處理過程中帶入、管路、環(huán)境基質(zhì)效應(yīng)的來源三、定量方法內(nèi)源性的：來源于待測(cè)樣品，如蛋白、脂質(zhì)、多糖、目56三、定量方法提取后加入法基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)

是一種靜態(tài)的方法，只能提供基質(zhì)效應(yīng)在待測(cè)成分出峰位置點(diǎn)上的影響信息,但能以具體的數(shù)據(jù)體現(xiàn)基質(zhì)效應(yīng)對(duì)待測(cè)成分響應(yīng)的影響程度AaAb三、定量方法提取后加入法基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)是一種靜態(tài)57三、定量方法提取后加入法基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)絕對(duì)基質(zhì)效應(yīng)（基質(zhì)效應(yīng)影響分析的程度）

matrixfactor（MF,%）=Ab*100/Aa%MF>100%基質(zhì)增強(qiáng)MF<100%基質(zhì)抑制MF85~115%三、定量方法提取后加入法基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)絕對(duì)基質(zhì)效應(yīng)58三、定量方法提取后加入法基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)相對(duì)基質(zhì)效應(yīng)（樣品間基質(zhì)效應(yīng)大小的差異）選擇至少六個(gè)不同來源的基質(zhì)，基質(zhì)效應(yīng)變異系數(shù)應(yīng)小于15%采用5個(gè)不同批次或個(gè)體的基質(zhì)配制標(biāo)準(zhǔn)曲線，把5條標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的精密度作為考察相對(duì)基質(zhì)效應(yīng)標(biāo)準(zhǔn),若5條標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3%~4%,則認(rèn)為此方法不受基質(zhì)效應(yīng)影響三、定量方法提取后加入法基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)59三、定量方法柱后灌注法基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)三、定量方法柱后灌注法基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)60柱后灌注法基質(zhì)效應(yīng)并不僅限于在溶劑前沿發(fā)生基質(zhì)抑制程度可以>90%液液萃取蛋白沉淀流動(dòng)相動(dòng)態(tài)觀察基質(zhì)效應(yīng)在整個(gè)色譜分析過程中對(duì)待測(cè)成分響應(yīng)的影響。該法的優(yōu)點(diǎn)是可以方便地考察評(píng)價(jià)不同樣品處理方法，流動(dòng)相添加物對(duì)響應(yīng)的影響，以及選擇合適的色譜條件柱后灌注法基質(zhì)效應(yīng)并不僅限于在溶劑前沿發(fā)生液液萃取蛋白沉淀61三、定量方法前處理方法：基質(zhì)效應(yīng)的消除三、定量方法前處理方法：基質(zhì)效應(yīng)的消除62三、定量方法色譜條件：小體積進(jìn)樣或樣品稀釋低流速或柱后分流利用電解質(zhì)效應(yīng)基質(zhì)效應(yīng)的消除

三、定量方法色譜條件：基質(zhì)效應(yīng)的消除63三、定量方法色譜條件：喹諾酮類藥物殘留的測(cè)定GB/T21312-2007

0.2%甲酸水溶液GB/T23411-2009甲醇+水（2+8）SN/T2578-2010乙腈+甲醇+0.15%甲酸水（2+20+78）SNT1751.2-20070.1%甲酸乙腈+0.1%甲酸水（13+87）基質(zhì)效應(yīng)的消除三、定量方法色譜條件：喹諾酮類藥物殘留的測(cè)定基質(zhì)效應(yīng)的消除64三、定量方法改變色譜分離條件基質(zhì)效應(yīng)的消除三、定量方法改變色譜分離條件基質(zhì)效應(yīng)的消除65三、定量方法改變色譜分離條件基質(zhì)效應(yīng)的消除

三、定量方法改變色譜分離條件基質(zhì)效應(yīng)的消除66三、定量方法內(nèi)標(biāo)：同系物或同位素內(nèi)標(biāo)離子源：APCI>ESI,ESI+>ESI-基質(zhì)效應(yīng)的消除三、定量方法內(nèi)標(biāo)：同系物或同位素內(nèi)標(biāo)基質(zhì)效應(yīng)的消除67謝謝謝謝68北京市海淀區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所國(guó)家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心2011年06月23日質(zhì)譜分析方法——定性與定量北京市海淀區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所質(zhì)譜分析方法——定性與定量69ThebirthofVenus《LCandMS:AMatchMadeinHeaven》JamesJorgenson，UniversityofNorthCarolina59th，ASMS，June5，Denver，USAThebirthofVenus《LCandMS:70TheArnolfiniWedding阿爾諾菲尼的婚禮揚(yáng).凡.艾克1434TheArnolfiniWedding阿爾諾菲尼的婚禮71主要內(nèi)容一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語二、定性（確證）方法三、定量方法主要內(nèi)容一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語72真空系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)檢測(cè)器數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)量分析器離子源大氣壓質(zhì)譜儀的基本結(jié)構(gòu)GCLCICCEEI、CIESIAPCI、APPIMALDIDART-四級(jí)桿離子阱飛行時(shí)間磁質(zhì)譜FT-ICR一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語真空系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)檢測(cè)器數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)量分析器離子源大氣壓質(zhì)譜儀的73各種離子化方法的使用范圍

選擇的依據(jù)揮發(fā)性熱穩(wěn)定性極性

Neutral101102103104105MolecularWeightIonicAnalytePolarityESIorMALDIAPCI/APPIGC/MS各種離子化方法的使用范圍選擇的依據(jù)Neutral1011074質(zhì)量范圍質(zhì)譜儀所能測(cè)定的離子質(zhì)荷比的范圍不同儀器不同應(yīng)用質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)掃描速度分辨率色譜峰的數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)目和峰寬、掃描時(shí)間有關(guān)質(zhì)量范圍質(zhì)譜儀所能測(cè)定的離子質(zhì)荷比的范圍質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)75質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)76質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)磁質(zhì)譜的分辨率定義最為嚴(yán)格：對(duì)兩個(gè)相等強(qiáng)度的相鄰峰，當(dāng)兩峰間的峰谷不大于其峰高10%時(shí)，則認(rèn)為兩峰已經(jīng)分開，其分辨率：磁質(zhì)譜中，R不隨m/z變化，在測(cè)定小分子時(shí)有優(yōu)勢(shì)eg.R=5000，500與500.15000與5001分辨率質(zhì)譜儀主要性能指標(biāo)磁質(zhì)譜的分辨率定義77有機(jī)質(zhì)譜僅要求50％峰谷剛剛分開就算分開（這時(shí)稱為有機(jī)質(zhì)譜的單位質(zhì)量分辨）簡(jiǎn)化為用單峰法表示，即測(cè)定一個(gè)峰半峰高處的全峰寬FullwidthhalfMaximum（簡(jiǎn)寫為FWHM）分辨率eg.FWHM=0.25m/z=100，R=400m/z=1000，R=4000有機(jī)質(zhì)譜僅要求50％峰谷剛剛分開就算分開（這時(shí)稱為有機(jī)質(zhì)譜的78分辨率例如：要區(qū)分以下離子，分辨率要達(dá)到CO+ 27.9949 N2+ 28.0061ArCl+ 74.9312As+ 74.9216分辨率例如：要區(qū)分以下離子，分辨率要達(dá)到79atto摩爾級(jí)的靈敏度；優(yōu)于2ppm的MS質(zhì)量準(zhǔn)確度優(yōu)于5ppm的MS/MS質(zhì)量準(zhǔn)確度線性動(dòng)態(tài)范圍可以達(dá)到五個(gè)數(shù)量級(jí)；質(zhì)量分辨率至20,000高速數(shù)據(jù)采集能力（每秒獲得10張MS/MS譜圖），更好地兼容超快速液相色譜寬質(zhì)量范圍：m/z范圍從25～20,000u舉例：atto摩爾級(jí)的靈敏度；舉例：80質(zhì)譜峰類型分子離子必須是化合物譜圖中質(zhì)量最高的離子必須是奇電子離子、符合氮規(guī)則必須能通過丟失合理的中性離子，產(chǎn)生譜圖中高質(zhì)量區(qū)的重要離子準(zhǔn)分子離子碎片離子同位素離子由于天然同位素的存在，因此在質(zhì)譜圖上出現(xiàn)M+1，M+2等峰，由這些同位素所形成的峰稱之為同位素峰一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語術(shù)語質(zhì)譜峰類型一、質(zhì)譜基礎(chǔ)及相關(guān)術(shù)語術(shù)語811-Cl2-Cl1-Cl2-Cl821-Br2-Br1-Br2-Br833-Br4-Br3-Br4-Br84Beynon表例如：M=150化合物M+1M+2 化合物M+1M+2C6H14NOCl8.150.49 C7H11N49.250.38C6H14O46.861.0 C8H6O38.360.95C7H2O47.751.06 C8H8NO29.230.78C7H4NO38.131.06 C8H11N2O9.610.61C7H6N2O28.500.72 C8H12N39.980.45C7H8N3O8.880.55 C9H10O29.960.84Beynon表例如：M=15085二、定性（確證）方法質(zhì)譜法只有在與色譜分離在線或脫機(jī)聯(lián)用時(shí)才能作為確證方法在分析儀器上的進(jìn)樣順序是：空白溶劑、陰性控制樣品、要確證的樣品、陽性控制樣品再進(jìn)樣，最后是陰性控制樣品

1.基本原則二、定性（確證）方法質(zhì)譜法只有在與色譜分離在線或脫機(jī)聯(lián)用時(shí)才86保留時(shí)間實(shí)驗(yàn)室條件下分析物的最小可接受保留時(shí)間，>2t0氣相色譜（GC）或液相色譜（LC）時(shí)，半峰寬應(yīng)在原來峰寬的90-110%以內(nèi)，保留時(shí)間的變化應(yīng)在5%以內(nèi)二、定性（確證）方法

2.

色譜分離保留時(shí)間二、定性（確證）方法2.色譜分離87保留時(shí)間測(cè)試部分中分析物的保留時(shí)間（或相對(duì)保留時(shí)間），應(yīng)在一個(gè)特定的保留時(shí)間窗口范圍內(nèi)與校正標(biāo)準(zhǔn)的保留時(shí)間相符。保留時(shí)間窗口與該色譜系統(tǒng)的分辨能力相當(dāng)。分析物和內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間之比，應(yīng)與校正溶液的相對(duì)保留時(shí)間一致，GC偏差為±0.5%，LC偏差為±2.5%

二、定性（確證）方法

2.

色譜分離保留時(shí)間二、定性（確證）方法2.色譜分離88GBT16631-2008高效液相色譜法通則：同樣條件下重復(fù)試驗(yàn)的保留數(shù)據(jù)的分散性，RSD≤3%JJG705-2002液相色譜儀檢定規(guī)程：定性測(cè)量重復(fù)性（6次測(cè)量）RSD≤1.5%JJF（閩）1032－2010液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范：定性重復(fù)性RSD≤2%JY/T021—1996分析型氣相色譜方法通則：整機(jī)重復(fù)性保留時(shí)間RSD≤5％二、定性（確證）方法關(guān)于保留時(shí)間的討論GBT16631-2008高效液相色譜法通則：同樣條件下89GB/T22260-2008飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法試樣保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品的相對(duì)偏差不大于15%GB/T22147-2008飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測(cè)定液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法樣品與標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間的相對(duì)偏差不大于0.5%二、定性（確證）方法關(guān)于保留時(shí)間的討論GB/T22260-2008飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定高效90全掃描scan選擇離子監(jiān)測(cè)SIMMS-MSn技術(shù)，如多反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM二、定性（確證）方法

3.質(zhì)譜檢測(cè)全掃描scan二、定性（確證）方法3.質(zhì)譜檢測(cè)91全掃描scan用記錄全掃描質(zhì)譜圖進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，在標(biāo)準(zhǔn)品參考圖譜中所有相對(duì)豐度>10%（分子離子、分子離子的特征加成物、特征碎片離子、同位素離子等）的特征離子都必須檢測(cè)選擇離子監(jiān)測(cè)SIM用碎片離子色譜圖進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，分子離子最好是一個(gè)選擇的檢測(cè)離子。選擇的檢測(cè)離子并不一定要源于分子的同一部分。每個(gè)檢測(cè)離子的信噪比應(yīng)≥3︰1二、定性（確證）方法

3.質(zhì)譜檢測(cè)全掃描scan二、定性（確證）方法3.質(zhì)譜檢測(cè)92相對(duì)豐度（%基峰）EI-GC-MS（相對(duì)）CI-GC-MS、GC-MSn、LC-MS、LC-MSn（相對(duì)）>50%±10%±20%>20%to50%±15%±25%>10%to20%±20%±30%≤10%±50%±50%相對(duì)離子豐度最大容許偏差二、定性（確證）方法相對(duì)豐度（%基峰）EI-GC-MS（相對(duì)）CI-GC-MS、93二、定性（確證）方法2002/657/EC規(guī)定：要確證指令96/23/EC附錄I-A組所列的物質(zhì)，最少需要4個(gè)識(shí)別點(diǎn)，包括具有促合成作用和其他未允許的化合物，如二苯乙烯類化合物及其衍生物、鹽、酯等、抗甲狀腺劑、甾醇、二羥基苯甲酸內(nèi)酯如玉米赤霉醇、β-受體激動(dòng)劑等要確證指令96/23/EC附錄I-B組所列的物質(zhì)，最少需要3個(gè)識(shí)別點(diǎn)，包括獸藥和污染物，獸藥如抗菌藥、驅(qū)蟲藥、抗球蟲藥、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、鎮(zhèn)靜藥、非甾體抗炎藥等；其他環(huán)境污染物如有機(jī)氯、有機(jī)磷、真菌毒素、染料等二、定性（確證）方法2002/657/EC規(guī)定：94MS技術(shù)每種離子的識(shí)別點(diǎn)數(shù)低分辨質(zhì)譜（LR）1.0LR-MSn母離子1.0LR-MSn子離子1.5高分辨質(zhì)譜（HR）2.0HR-MSn母離子2.0HR-MSn子離子2.5質(zhì)量碎片類型和識(shí)別點(diǎn)的關(guān)系每個(gè)離子計(jì)算一次

EI-GC-MS、CI-GC-MS作為不同的技術(shù)計(jì)算用不同反應(yīng)得到的衍生物，可增加識(shí)別點(diǎn)數(shù)包括二級(jí)離子和多級(jí)離子可最多結(jié)合三種不同的技術(shù)確定最小識(shí)別點(diǎn)數(shù)二、定性（確證）方法MS技術(shù)每種離子的識(shí)別點(diǎn)數(shù)低分辨質(zhì)譜（LR）1.0LR-MS95質(zhì)譜分析法定性與定量課件96m/z+202→122m/z-179→79.9ESI-ESI+甜蜜素SN/T1948-2007進(jìn)出口食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的檢測(cè)方法m/z+202→122m/z-179→79.9ES97應(yīng)研究樣品基質(zhì)和檢測(cè)器性能引起的圖譜改變應(yīng)研究樣品基質(zhì)和檢測(cè)器性能引起的圖譜改變98化合物保留時(shí)間（min）定性離子對(duì)定量離子對(duì)Fragmentor（V）CE（V）麻黃堿6.9166/148166/1488010166/13320偽麻黃堿8.0166/148166/1488010166/13320化合物保留時(shí)間（min）定性離子對(duì)定量離子對(duì)Fragment99外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)加入法基質(zhì)效應(yīng)三、定量方法外標(biāo)法三、定量方法100三、定量方法

1.外標(biāo)法單點(diǎn)校正法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法1.外標(biāo)法單點(diǎn)校正法101三、定量方法

單點(diǎn)校正法實(shí)際上是利用原點(diǎn)作為標(biāo)準(zhǔn)曲線上的另一個(gè)點(diǎn)，當(dāng)方法存在系統(tǒng)誤差時(shí)（即標(biāo)準(zhǔn)工作曲線不通過原點(diǎn)），單點(diǎn)校正法的誤差較大單點(diǎn)校正法三、定量方法單點(diǎn)校正法實(shí)際上是利用原點(diǎn)作為標(biāo)準(zhǔn)曲102三、定量方法以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T21317-2007動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測(cè)方法“根據(jù)樣液中被測(cè)四環(huán)素類獸藥殘留的含量情況，選定峰高相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液”，“對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體積參插進(jìn)樣測(cè)定”GB/T22147-2008飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測(cè)定“采用M+1的準(zhǔn)分子離子的色譜峰面積做單點(diǎn)校正定量”單點(diǎn)校正法三、定量方法以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液?jiǎn)吸c(diǎn)校正法103三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T21320-2007動(dòng)物源食品中阿維菌素類藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法“分別取適量試樣溶液和相近濃度的基質(zhì)添加標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，做單點(diǎn)校正”，“對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液等體積參插進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定”單點(diǎn)校正法三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液?jiǎn)吸c(diǎn)校正法104三、定量方法以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T22260-2008

飼料中甲基睪丸酮的測(cè)定高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T22955-2008河豚魚、鰻魚和烤鰻中苯并咪唑類藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T21324-2007食用動(dòng)物肌肉和肝臟中苯并咪唑類藥物殘留量檢測(cè)方法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)工作溶液外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法105三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T23409-2009蜂王漿中土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T23408-2009蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留量測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T22986-2008牛奶和奶粉中氫化潑尼松殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T22978-2008牛奶和奶粉中地塞米松殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法以空白樣品提取液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法106三、定量方法

空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取后得到系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液GB/T21312-2007動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T22969-2008奶粉和牛奶中鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡那霉素殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T

水果、蔬菜中啶蟲脒殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T21313-2007動(dòng)物源性食品中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取107a:以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Aab:以空白樣品的提取液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Abc:在空白樣品加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，提取后得到基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Ac絕對(duì)回收率Ac/Aa，包含提取效率和基質(zhì)效應(yīng)提取回收率Ac/Ab，不包含基質(zhì)效應(yīng)絕對(duì)回收率=提取回收率*絕對(duì)基質(zhì)效應(yīng)GB/T27404-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測(cè)“如果檢測(cè)結(jié)果用回收率進(jìn)行校準(zhǔn)，應(yīng)在原始記錄的結(jié)果中明確說明并描述校準(zhǔn)公式”三、定量方法a:以純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定的峰面積Aa三、定量方法108三、定量方法

2.內(nèi)標(biāo)法單點(diǎn)校正法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法三、定量方法2.內(nèi)標(biāo)法單點(diǎn)校正法109三、定量方法

2.內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)物要滿足以下要求：（a）試樣中不含有該物質(zhì)；（b）與被測(cè)組分性質(zhì)比較接近；（c）不與試樣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；（d）出峰位置應(yīng)位于被測(cè)組分附近。三、定量方法2.內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)物要滿足以下要求：110內(nèi)標(biāo)法計(jì)算式準(zhǔn)確稱取一定量的試樣m，加入一定量?jī)?nèi)標(biāo)物ms，試樣中待測(cè)物的含量wi為：內(nèi)標(biāo)法計(jì)算式準(zhǔn)確稱取一定量的試樣m，加入一定量?jī)?nèi)標(biāo)111內(nèi)標(biāo)法特點(diǎn)(a)內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許變動(dòng)對(duì)定量結(jié)果的影響不大(b)內(nèi)標(biāo)物和被測(cè)組分處在同一基體中，因此可以消除基體帶來的干擾(c)若將內(nèi)標(biāo)法中的試樣取樣量和內(nèi)標(biāo)物加入量固定，則：內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法內(nèi)標(biāo)法特點(diǎn)(a)內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許112內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法

配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入等量的內(nèi)標(biāo)物,混合后進(jìn)行色譜分析。以待測(cè)組分的濃度為橫坐標(biāo)，待測(cè)組分與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比率為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線（或線性方程）

在分析未知樣品時(shí)，分別加入與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)等量的內(nèi)標(biāo)物，用樣品與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出被測(cè)組分的濃度或用線形方程計(jì)算內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法113三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以純?nèi)軇┡渲葡盗袠?biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T23406-2009腸衣中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T23407-2009蜂王漿中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T23411-2009蜂王漿中17種喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法GB/T23412-2009蜂蜜中19種喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以純?nèi)軇┡渲葡盗袠?biāo)準(zhǔn)工作溶液114三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以空白樣品的提取液配制系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液GB/T22992-2008牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、雙烯雌酚殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T22959-2008河豚魚、鰻魚和烤鰻中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T20756-2006可食動(dòng)物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法以空白樣品的提取液配制系列標(biāo)準(zhǔn)工115三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法空白樣品加入系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，提取后得到基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液GB/T21311-2007動(dòng)物源性食品中硝基呋喃類藥物代謝物殘留量檢測(cè)方法高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T21310-2007動(dòng)物源性食品中甲狀腺拮抗劑殘留量檢測(cè)方法高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法三、定量方法內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法空白樣品加入系列濃度的標(biāo)116沙丁胺醇-D36.10克倫特羅-D915.6沙丁胺醇6.16塞曼特羅7.01特布他林6.24塞布特羅11.07萊克多巴胺14.65克倫特羅15.66溴代克倫特羅16.52溴布特羅17.47苯氧丙酚胺18.72馬布特羅18.77馬賁特羅23.11內(nèi)標(biāo)的選擇

GB/T22286-2008保留時(shí)間minSN/T1924-2007沙丁胺醇-D36.10克倫特羅-D915.6沙丁胺醇6.16117三、定量方法3.標(biāo)準(zhǔn)加入法先測(cè)定出未知樣品的大概值，然后根據(jù)這個(gè)測(cè)定值去設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法中第一點(diǎn)加入標(biāo)準(zhǔn)溶液為“0”，第二點(diǎn)加入的量約與待測(cè)組分的含量大致相等，共3~5個(gè)點(diǎn)，以加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制工作曲線工作曲線在橫坐標(biāo)延長(zhǎng)線上的交點(diǎn)到坐標(biāo)原點(diǎn)的距離即為樣品中待測(cè)組分的濃度三、定量方法3.標(biāo)準(zhǔn)加入法先測(cè)定出未知樣品的大概值，然后根118三、定量方法3.標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法可以