苦參堿的提取課件

苦參堿的提取2022/12/11XXX1440XX班1440XXXX2022/12/12主要內(nèi)容苦參堿來源理化性質(zhì)藥理用途分離方法苦參堿是由豆科植物苦參的干燥根、植株、果實(shí)經(jīng)乙醇等有機(jī)溶劑提取制成的，是生物堿。一般為苦參總堿，其主要成分有苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿、槐定堿等多種生物堿，以苦參堿、氧化苦參堿含量最高。其他來源為山豆根及山豆根地上部分，純品外觀為白色粉末。2022/12/13苦參堿來源2022/12/1藥理用途

（1）在醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用：苦參堿對中樞神經(jīng)具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗驚厥、穩(wěn)定神經(jīng)等作用;對心血管系統(tǒng)具有明顯的負(fù)性頻率和正性肌力作用、能防治動(dòng)脈粥樣硬化、減輕心肌損傷等作用;對消化系統(tǒng)具有杭肝損傷、抗纖維化、升高白細(xì)胞等作用;還具有抗腫瘤、抗肝癌等作用。（2）臨床應(yīng)用：苦參素的制劑臨床主要用于慢性活動(dòng)性肝炎和慢性遷延性肝炎，對急性黃疸型肝炎也有作用；也用于慢性宮頸炎，老年性、滴蟲性、霉菌性陰道炎，附件炎，盆腔炎等，對子宮肌瘤及宮頸癌亦有較好的預(yù)防和治療作用；適用于腫瘤放、化療引起的白細(xì)胞低下及其它原因引起的白細(xì)胞減少癥；在心血管疾病中用于心率失常、心率衰竭、心肌炎、冠心病等；還可用于濕疹等?？鄥A添加到視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞培養(yǎng)導(dǎo)致降低腫瘤細(xì)胞的有絲分裂增殖速率下降，并加快腫瘤細(xì)胞細(xì)胞凋亡，同時(shí)，調(diào)節(jié)蛋白細(xì)胞或使凋亡周期發(fā)生相應(yīng)的變化2022/12/1分離方法1酸水提取法

苦參以稀酸水滲漉，酸水提取液通過強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂提取總生物堿?？鄥A和氧化苦參堿的分離，利用二者在乙醚中的溶解度不同進(jìn)行。氧化苦參堿的N→O半極性配位鍵，極性大，在水中溶解度較大，在乙醚中溶解度較小。將總生物堿溶于氯仿，加入10倍量乙醚，氧化苦參堿沉淀析出.具體操作流程實(shí)例：1.1取粉碎的苦參樣品,用80%的酸性乙醇(pH=2～4)滲漏提取至無生物堿反應(yīng),提取液減壓濃縮后用適量的自來水溶解,濾除不溶物,上清液用氯仿反復(fù)萃取至無生物堿反應(yīng),回收氯仿后得到苦參總生物堿。1.2苦參總生物堿用硅膠柱層析分離,溶劑:氯仿、甲醇、氨水(9:1:0.3),在此溶劑下,氧化苦參堿Rf=0.28(與標(biāo)準(zhǔn)樣對照),將相同組分合并,濃縮至適量后按1:1加入乙醚,濾除沉淀物,上清液繼續(xù)加入乙醚至氧化苦參堿全部沉淀,次日過濾,用丙酮重結(jié)晶得到氧化苦參堿單體,120℃烘干3h,mp.206.5℃,與標(biāo)準(zhǔn)品混合后測熔點(diǎn),熔點(diǎn)相同。2022/12/1分離方法2浸泡超聲提取法生產(chǎn)工藝步驟2.1將苦參根干燥粉碎，粒度60目，1：6～1：10的重量比例與60%乙醇溶液混合，25°C攪拌過夜。2.2以19～200kHz頻率超聲振蕩30min；過濾除去不溶物，提取液于80°C蒸干。2.3取上述干粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入氯仿25mL，濃氨試液0.3mL，稱定重量，搖勻，室溫放置過夜（16h以上），再稱定重量，補(bǔ)足損失的溶劑量，振搖后放置，用濾紙濾過。精密量取濾液10mL，置水浴蒸干，殘?jiān)右颐?mL放置。精密加硫酸滴定液（0.01mol·l-1）10mL，搖勻，置水浴上加熱使殘?jiān)耆芙獠⒊M乙醚，放冷。加新沸后放冷的蒸餾水15mL與甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02mol·l-1）滴定至黃色，即得。每1mL的硫酸滴定液（0.01mol·l-1）相當(dāng)于4.967mg的苦參堿。2022/12/1分離方法3高溫浸泡提取法生產(chǎn)工藝步驟3.1將苦參根干燥粉碎，粒度60目，1：6～1：10的重量比例與60%乙醇溶液混合，80°C攪拌過夜。3.2過濾除去不溶物，提取液于80°C蒸干。3.3取上述干粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入氯仿25mL，濃氨試液0.3mL，稱定重量，搖勻，室溫放置過夜（16h以上），再稱定重量，補(bǔ)足損失的溶劑量，振搖后放置，用濾紙濾過。精密量取濾液10mL，置水浴蒸干，殘?jiān)右颐?mL放置。精密加硫酸滴定液（0.01mol·l-1）10mL，搖勻，置水浴上加熱使殘?jiān)耆芙獠⒊M乙醚，放冷。加新沸后放冷的蒸餾水15mL與甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02mol·l-1）滴定至黃色，即得。每1mL的硫酸滴定液（0.01mol·l-1）相當(dāng)于4.967mg的苦參堿。2022/12/1檢測中的分離方法高效液相色譜法(HPLC)：以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對試樣的分析。其用于液液分離時(shí)，流動(dòng)相和固定相都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí)，服從于高效液相色譜計(jì)算公式：K=Cs/Cm=kVm/Vs.式中,Cs—溶質(zhì)在固定相中濃度；Cm--溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度；Vs—固定相的體積；Vm—流動(dòng)相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大；但也有不同之處,GPC中，流動(dòng)相對K影響不大,LLPC流動(dòng)相對K影響較大?？鄥A的檢測分離方法主要有高效液相色譜法