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反轉(zhuǎn)錄包括生物材料一定大小范圍DMAPCR獲取目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞基因文庫(kù)mRNADNA1.2基因工程的基本操作程序(第1課時(shí))班級(jí)姓名一.基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟:反轉(zhuǎn)錄包括生物材料一定大小范圍DMAPCR獲取目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞基因文庫(kù)mRNADNA一、目的基因的獲?。耗康幕颍悍先藗冃枰?,編碼蛋白質(zhì)的。獲取目的基因的方法從基因文庫(kù)中獲取目的基因基因文庫(kù):將含有某種生物不同基因的許多,導(dǎo)人受體菌的群體中—,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因,稱(chēng)為基因文庫(kù)。「基因組文庫(kù):含有一種生物的基因種類(lèi)cDNA文庫(kù):含有一種生物的基因「基因組文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)的方法:V-cDNA文庫(kù)目的基因的獲取根據(jù)基因的有關(guān)信息:基因的序列、基因上的位置、基因的產(chǎn)物mRNA、基因的產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性獲取目的基因。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。PCR:是一項(xiàng)在生物體外特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。原理:.條件:已知目的基因的序列;;;;過(guò)程:變性向復(fù)性-延伸目的基因DNA受熱形成,與結(jié)合,然后的作用下進(jìn)行延伸形成DNA。方式:指數(shù)擴(kuò)增=2?(n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù))人工合成法:基因較小,核昔酸序列已知,可以人工合成。根據(jù)基因工程的有關(guān)內(nèi)容在下列方框中或橫線(xiàn)上填寫(xiě)適當(dāng)?shù)奈淖帧BCDEFGH就分子結(jié)構(gòu)而論,質(zhì)粒是:A、環(huán)狀雙鏈DNA分子B、環(huán)狀單鏈DNA分于C、環(huán)狀單鏈RNA分子D、線(xiàn)狀雙鏈DNA分子關(guān)于限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別序列和切開(kāi)部位的特點(diǎn),敘述錯(cuò)誤的是:所識(shí)別的序列都可以找到一條中軸線(xiàn)B?中軸線(xiàn)兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ(chēng)重復(fù)排列C?只識(shí)別和切斷特定的核昔酸序列D.在任何部位都能將DNA切開(kāi)下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的說(shuō)法,正確的是:限制酶主要從真核生物中分離出來(lái)B.限制酶的識(shí)別序列只能由6個(gè)核昔酸組成限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核昔酸序列,并使鏈間的氫鍵斷裂限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端有兩種形式DNA連接酶的作用是:識(shí)別DNA分子上的特定堿基序列B.WDNA分子長(zhǎng)鏈切開(kāi)C.將堿基進(jìn)行配對(duì)D.將來(lái)源不同的兩個(gè)DNA片段進(jìn)行連接作為基因工程中的“分子運(yùn)輸車(chē)”一載體,應(yīng)具備的條件是:①必須有一個(gè)或多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn),以便目的基因可以插入到載體上②載體必須具備自我復(fù)制的能力,或整合到受體染色體DNA上隨染色體DNA的復(fù)制而同步復(fù)制③必須帶有標(biāo)記基因,以便進(jìn)行重組后的篩選④必須是安全的,不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害,或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去⑤大小應(yīng)合適,太大則不易操作A.①②③④B.①②③⑤C.①②④⑤D.①②③④⑤大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來(lái)做基因工程中的載體,這與它的哪項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)有關(guān):A.具有黏性末端B.分子呈環(huán)狀,便于限制酶切割對(duì)宿主細(xì)胞的生存沒(méi)有決定性作用D,分子小,能自主復(fù)制,有標(biāo)記基因下列說(shuō)法中,正確的是:DNA連接酶最初是從人體細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列C?質(zhì)粒是基因工程中唯一用作運(yùn)載目的基因的運(yùn)載體利用運(yùn)載體在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制的過(guò)程可稱(chēng)為“克隆,,下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取目的基因②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因③反轉(zhuǎn)錄法④通過(guò)DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成A.①②③④B.①②③C.②③④D.②③下列有關(guān)PCR技術(shù)的說(shuō)法不正確的是PCR技術(shù)是在細(xì)胞內(nèi)完成的PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)PCR技術(shù)的原理與DNA復(fù)制的原理相同PCR技術(shù)的前提是有一段已知的目的基因的核昔酸序列11.基因工程技術(shù)也稱(chēng)為DNA重組技術(shù),其實(shí)施必須具備的四個(gè)必要條件是:A-目的基因限制酶運(yùn)載體受體細(xì)胞B.重組DNARNA聚合酶限制酶連接酶C.工具酶目的基因運(yùn)載體受體細(xì)胞。.模板DNAmRNA質(zhì)粒受體細(xì)胞12.有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)(by)的DNA分子,用限制酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000by,用Kpnl單獨(dú)酶切得到400by和600by兩種長(zhǎng)度的DNA分子,用EcoRI、Kpnl同時(shí)酶切后得到200by和600by兩種長(zhǎng)度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是:EcoRlKpnlKfrnl物】£?RIKpid‘600|的|i瓶[MOiWOOiA.B.C.DA.B.C.D.13.甲、乙兩圖表示從細(xì)菌細(xì)胞中獲取目的基因的兩種方法,以下說(shuō)法中錯(cuò)誤的是某細(xì)菌的DNA某細(xì)菌的DNAllllllllllllIIIIIIIIIIIIIIllllllllllllIIIIIIIIIIIIIIT/、~信使RNAI?目的基因lllllllllllllII甲乙A.甲方法可建立該細(xì)菌的基因組文庫(kù)B.乙方法可建立該細(xì)菌的cDNA文庫(kù)C.甲方法要以脫氧核昔酸為原料D.乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述,正確的是:質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子質(zhì)粒只有在侵入宿主細(xì)胞后在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制細(xì)菌質(zhì)粒的復(fù)制過(guò)程一定是在宿主細(xì)胞外獨(dú)立進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)可表示為A、PECB、PERC、PDRD、PCR在已知序列信息的情況下,獲取目的基因的最方便方法是A、化學(xué)合成法B、基因組文庫(kù)法C、CDNA文庫(kù)法D、聚合酶鏈反應(yīng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過(guò)程一般經(jīng)歷下述多次循環(huán):95°C下使模板DNA變性、解鏈T5°C下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)一72°C下引物鏈延伸(形成新的脫氧核昔酸鏈)。下列有關(guān)PCR過(guò)程的敘述中不正確的是:變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn)復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核昔酸PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高下列屬于PCR技術(shù)的條件的是:①單鏈的脫氧核昔酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脫氧核昔酸④核糖核昔酸⑤DNA連接酶⑥D(zhuǎn)NA聚合酶⑦DNA限制性?xún)?nèi)切酶A.①②③⑤B.①②③⑥C.①②③⑤⑦D.①②④⑤⑦在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個(gè)脫氧核昔酸對(duì),其中腺嘌嶺脫氧核昔酸是460個(gè))放入DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代,那么,在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核昔酸的個(gè)數(shù)是A.540個(gè)B.8100個(gè)C.17280個(gè)D.7560個(gè)番茄在運(yùn)輸過(guò)程中,由于過(guò)早成熟而易腐爛。應(yīng)用基因工程技術(shù),通過(guò)抑制某種促進(jìn)果實(shí)成熟的激素的合成能力,可使番茄的貯藏時(shí)間延長(zhǎng),培育成耐貯藏的番茄新品種,這種轉(zhuǎn)基因番茄已于1993年在美國(guó)上市。請(qǐng)完成下列問(wèn)題:(1)促進(jìn)果實(shí)成熟的重要激素。在培育轉(zhuǎn)基因番茄的基因操作中,所用的基因的“剪刀”是,基因的“針線(xiàn)”是,基因的“運(yùn)輸工具”是。與雜交育種、誘變育種相比,通過(guò)基因工程來(lái)培育新品種的主要優(yōu)點(diǎn)是、和O21.人們?cè)噲D利用基因工程的方法,用乙種生物生產(chǎn)甲種生物的一種蛋白質(zhì)。請(qǐng)根據(jù)下面圖解完成下列問(wèn)題:獲得甲生物合成的蛋白質(zhì)的mRNA—^目的基因一^與質(zhì)粒DNA重組一^導(dǎo)入乙生物細(xì)胞—D^獲得甲生物的蛋白質(zhì)。A過(guò)程需要加入的核昔酸所含的堿基是(填符號(hào)),此外,還必須加入酶。B過(guò)程首先要用切斷質(zhì)粒DNA,再用將目的基因與質(zhì)粒連接重組在一起。此過(guò)程中,若目的基因的黏性末端為:一Lttaa,則其載體(質(zhì)粒
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