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文檔簡介
(一)堿基互補規(guī)律(complementarybase反子順反子9.增色效應(hyperchromiceffect)10.減色效應(hypochromiceffect)13.DNA的熔解溫度(meltingtemperatureTm)14.分子雜交(molecularhybridization)15.環(huán)化核苷酸(cyclicnucleotide)16、堿基堆積力(basestacking×17、18、限制性內(nèi)切酶(restrictionendonuclease)(二)DNA雙螺旋結構模型 年 中,RNA主要位 堿基與戊糖間是C-C連接的 DNA中 嘧啶堿與RNA中 DNA中 嘧啶堿與RNA中 關系給動物食用3H標記 12.B型DNA雙螺旋的螺距 在DNA分子中,一般來說G-C含量高時, 在 DNA分子的沉降系數(shù)決定 DNA變性后,紫外吸
_,粘度
_。
nm處有吸收峰,可用紫外分光光度雙鏈DNA熱變性后,或在pH2以下,或在pH12以上時,其OD260 下,單鏈DNA的OD260 ,所DNA應保存在 mol/L的NaCI溶液mRNA在細胞內(nèi)的種類 ,但只占RNA總量的 變性DNA的復性與許多因素有關,包 維持DNA雙螺旋結構穩(wěn)定的主要因素是 mRNA的二級結構呈 形,其3'末端有一共同堿基序列 位磷酸-OH環(huán)真核細胞的mRNA帽子 組成,其尾部 組成,他們的功能分別 28.28.DNA在水溶解中熱變性之后,如果將溶液迅速冷卻,則DNA保持 使溶液緩慢冷卻,則DNA重新形成 (三) hnRNARNA B.TψC環(huán)C.DHU 根據(jù)Watson-Crick模型,求得每一微米DNA雙螺旋含核苷酸對的平均數(shù)為:: 胞核 B.線粒體 D. B. E.9DNA對260nm紫外吸收減少 雙鏈DNATm E A.cAMPcGMP的生物學作用相反B.重要的環(huán)核苷酸有cAMP與C.cAMP真核生物DNA纏繞在組蛋白上構成核小體,核小體含有的蛋白質是A.H1、H2、H3、H4各兩分子 B.H1a、H1b、H2b、H2a各兩分子C.H2a、H2b、H3a、H3b各兩分子 D.H2a、H2b、H3、H4各兩分子E.H2a、H2b、H4a、H4b各兩分子(四)()1.DNA是生物遺傳物質,RNA()23’()3.原核生物和真核生物的均為DNA與組蛋白的復合體()4pH()6.核酸中的修飾成分(也叫稀有成分)tRNA()7.DNATmAT含量有關,ATTm()8mRNA5`A()9.DNATm值隨(A+T)/(G+C)()10.B-DNADNAA型、Z型和三()11.DNA復性(退火)Tm20()13DNA()14.mRNA是細胞內(nèi)種類最多、含量最豐富的RNA()15.tRNAtRNA()16DNA樣品,測得OD260/OD280<1.8RNA()17.表達的最終產(chǎn)物都是蛋白質()18ABAOD260/OD280BOD260/OD280A的B的純度。()19.毫無例外,從結構中DNA序列可以推出相應的蛋白質序列()20mRNA3’-OH(五)T7DNA2.5×107DNA鏈的長度(設核650編碼88個核苷酸的tRNA的有多長9.6mRNA,相對分子質量為多少(設每個氨基酸120)?=(1)互補鏈中(A+G)/(T+C)=在整個DNA分子中(A+G)/(T+C)=若一條鏈中(A+T)/(GC)0.7,則互補鏈中(A+T)/(GC)=在整個DNA分子中(AT)/(GC)=DNA熱變性有何特點?Tm×在pH7.0,0.165mol/LNaClDNA樣品的Tm89.3℃。求出四種(2)(2)9、在穩(wěn)定的DNA雙螺旋中,哪兩種力在維系分子結構方面起主要作用12.如何將分子量相同的單鏈DNARNA已知:AMPA260=15400GMP的摩爾消光系數(shù)A26011700CMPA260=7500UMP的摩爾消光系數(shù)A260=9900dTMP的摩爾消光系數(shù)A2609200()32μmol/LAM()47.μoLM()6.0μoL(4)48μmol/LAMP32μmol/LUMPA260(5)A260=0.325GMP溶液的摩爾濃度(以摩爾/pH7.0)(6)A2600.090dTMP溶液的摩爾濃度(以摩爾/升表示,pH7.0)。14.如果有1014個細胞每細胞的DNA量為6.4×109個堿基對試計算的總長度是多少?是-地球之間距離(2.2×109公里)的多少倍pH值比較合適?此時它們是向哪一極移動當要把上述四種核苷酸吸附于陰離子交換樹脂柱上時,應調到什么pH×18DNA32%17%,計算這兩種不同來源DNA四種核苷酸的相對百分組成。兩種細菌中哪一種是從溫泉(一) bonds ratio 反子(anticodon:在tRNA鏈上有三個特定的堿基,組成一個子,由這些反子按堿基配對原則識別mRNA鏈上的 構。 renaturation在適宜的溫度下,分散開的兩條DNA鏈可以完全重新結合成和原來一樣的雙股螺旋。DNA (annealing effect260nm10.減色效應(hypochromiceffect:DNA260nmDNA分子中的各260nm處吸收的光密度的總和小得多(35%~40%),這現(xiàn)象稱為“減色(phage:12.發(fā)夾結構(hairpinstructure:RNA是單鏈線形分子,只有局部區(qū)域為雙鏈結構。RNA單鏈分子通過自身回折使得互補的堿基對相遇,形成氫鍵結合而13.DNA的熔解溫度(Tm值DNA發(fā)生“熔解”的溫度變化范圍只不過幾度,(Tmhybridization:15.環(huán)化核苷酸(cyclicnucleotide)3’-OH5’-(二) 4.5.β; 10.11.12.13.14.15.16.17.18.19.20.21.22.多;5%;DNA23.樣品的均一度;DNA的濃度 24.堿基堆積力;氫鍵;離子鍵 25.L型;CCA26.cAMP;cGMP27.m7G;polyA;m7G識別起始信號的一部分;polyAmRNA的穩(wěn)定性具有一定影28.(三)E:tRNA的功能是以它的反子區(qū)與mRNA的子堿基互補配對,來決定攜帶氨DWatson-Crick0.34nm1μmDNA雙螺旋平均1000nm/0.34nm2941對。5’→3’TCTAp。BmRNA5’,5’-磷酸二酯鍵連接的甲基鳥嘌呤核苷m7GPPPNmP。級結構,有時可以失去部分或全部生物活性。DNA變性后,由于雙螺旋,堿基堆光的吸光率比變性前明顯升高(增加B對。DG≡CA=TG≡C含量越高的DNATm值越高,UACA3’,’-cA和3’,’-環(huán)鳥苷酸c3’,’8H2A、H2B、H3、H4DNA鏈(四)錯:真核生物的為DNA與組蛋白的復合體,原核生物的為DNA與堿性精錯:DNATmGC含量有關,GC含量高則TmmRNA3`A(G+C)A+)/(+C)Z對:生物體內(nèi),負超螺旋DNA容易解鏈,便于進行、轉錄等反應錯:對于提純的DNAOD260/OD280<1.8錯:核酸樣品的純度可以根據(jù)樣品的OD260/OD280的比值判斷,純的DNA樣品3’-OH。(五)問答題及計算題(解題要點答:核酸完全水解后可得到堿基、戊糖、磷酸三種組分。DNARNA的水解產(chǎn)物戊糖(1)(2.5×107/650)(2)650/0.34=1.9×106/μm(3)880.34nm30nm=0.3μm(4)10430.34=106nm0.11μm(5)(96000/120)332076800(1)A=βTTα=β,α=Cβ:Cα=β,因為,(AαGα)/(TβCβ)(AαGα)/(AβGβ)所以,互補鏈中(AβGβ)/(TβCβ)1/0.7在整個DNA分子中,因為ATGC,所以,A+G=T+C(A+G)/(T+C)=1(1Aα+Tα= Aβ,Gα+Cα=(Aα+在整個DNA(Aα+Tα+Aβ+Tβ)/(Gα+Cα+Gβ+Cβ)=2(Aα+Tα)/2(Gα+Cα)=DNA70~100℃幾分鐘后,雙螺旋結構即發(fā)生破壞,氫鍵斷裂DNA的熱變性,有以下特點:變性溫度范圍很窄,260nm處的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性喪失;比旋度下降;酸堿滴定曲線改變。Tm值代表核酸的變性溫度(熔解溫度、。在數(shù)值上等于DNA5.答:為(GC)Tm69.3)2.44=(89.3-69.3)×2.44G=C=24.4%(A+T)%=1-48.8%=51.2%A=T=25.6%(1)DNA的復性;Tm的溫度可以促進DNADNA鏈濃度增高可以加快互補鏈隨機碰撞的速度、機會,從而促進DNAWatson-Crick模型,DNA的結構特點有:兩條反相平行的多核苷酸鏈圍繞同一手螺旋;雙螺旋的直徑為2nm,堿基堆積距離為0.34nm,兩核酸之間的夾角是36°,每對螺旋由10A=T,G≡C答:在穩(wěn)定的DNA雙螺旋中,堿基堆積力和堿基配對氫鍵在維系分子結構方面起葉柄是氨基酸臂。其上含有CCA-OH3’,此結構是接受氨基酸的位氨基酸臂對面是反子環(huán)。在它的中部含有三個相鄰堿基組成的反子,可mRNA上的子相互識別答:不同。RNADNA2’碳原子上沒有羥基,所以DNA不能被堿水解。(1)用堿水解。RNA能夠被水解,而DNA進行顏色反應。二苯胺試劑可以使DNA變成藍色;苔黑酚(地衣酚)用酸水解后,進行單核苷酸的分析(層析法或電泳法URNAT的DNA。(1)A260=32×10-6×15400=(2)47.5μmol/LCMPA260A260=47.5×10-6×7500=(3)6.0μmol/LUMPA260A260=6.0×10-6×9900=(4)48μmol/LAMP32μmol/LUMPA260A260=32×10-6×9900+48×10-6×15400=0.493=(5)0.325/11700=2.78×10-(6)0.090/9200=9.78×10-(1)6.4×109
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