中成藥常規(guī)檢查

中成藥常規(guī)檢查及

中蒙藥薄層色譜鑒別

內蒙古藥品檢驗所郝美玲前言中成藥常規(guī)檢查中蒙藥薄層色譜鑒別前言中成藥檢驗主要包括：性狀、鑒別、檢查、含量測定等。性狀從某種程度來講也是檢查的一個部分，可以作為直觀檢查。

一.中成藥常規(guī)檢查

《中國藥典》2000年版一部附錄“制劑通則”項下共介紹了28個劑型，2005年版一部附錄“制劑通則”項下共介紹了30個劑型，新增了凝膠劑和涂膜劑。這里主要講幾個常見劑型的檢查項目及判定標準。有：丸劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑。

（一）丸劑的檢查

中國藥典2005年版一部附錄5頁丸劑包括：蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、蠟丸。外觀應圓整、均勻、色澤一致，蜜丸應細膩滋潤、軟硬適中。1.水分

（1）不含或少含揮發(fā)性成分的藥品采用第一法，也叫烘干法。具體操作：取供試品（≤3mm顆?；蛩槠?～5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱瓶中，厚度不超過5mm，疏松供試品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100～105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計算供試品中含水量（%）（2）含揮發(fā)性成分的藥品采用第二法，也叫甲苯法。具體操作：取供試品適量（約相當于含水量1～4ml），精密稱定，置A瓶中，加甲苯約200ml，必要時加入干燥、潔凈的沸石或玻璃珠數(shù)粒，將儀器各部分連接，自冷凝管頂端加入甲苯，至充滿B管的狹細部分。將A瓶置電熱套中，待甲苯開始沸騰時，調節(jié)溫度，使每秒鐘餾出2滴。待水分完全餾出，即測定管刻度部分的水量不再增加時，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，拆卸裝置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加亞甲藍粉末少量，使水染成藍色，以便分離觀察）。檢讀水量，并計算供試品中的含水量（%）。甲苯法儀器裝置A為500ml的短頸圓底燒瓶。B為水分測定管。C為直形冷凝管。（3）含有揮發(fā)性成分的貴重藥品（麝香）采用第三法,也叫減壓干燥法。（4）第四法,也叫氣相色譜法。判定標準

大小蜜丸、濃縮蜜丸水分不得過15.0%。水蜜丸、濃縮水蜜丸水分不得過12.0%。水丸、糊丸、濃縮丸水分不得過9.0%。蠟丸不檢查水分。2.重量差差異異按丸服用用的丸劑劑照第一一法檢查查取供試品品10份，分別稱稱定重量量，再與與標示總總量（每每丸標示示重量××稱取丸丸數(shù)）或或標示重重量相比比較（無無標示重重量的丸丸劑，與與平均重重量比較較）。判定標標準準9g—±±6%（丸重范范圍9.54~8.46）6g—±±7%（丸重范范圍6.42~5.58）3g—±±8%（丸重范范圍3.24~2.76）超出重量量差異限限度的不不得多于于2份，并不得得有1份超出限度度一倍。。按重量服服用的丸丸劑照第第二法檢檢查。10丸為為1份，，共取10份，分別稱稱定重量量，再與與每份標標示重量量相比較較（無無標示重重量的丸丸劑，與與平均重重量比較較）。2g—±±7%（重量范范圍2.14~1.86）1g—±±8%（重量范范圍1.08~0.92）判定標標準準超出重量量差異限限度的不不得多于于2份，并不得得有1份超出限度度一倍。。包糖衣的的丸劑應應檢查丸丸芯的重重量差異異并符合合規(guī)定，，包糖衣衣后不再再檢查重重量差異異。其他他包衣丸丸劑應在在包衣后后檢查重重量差異異并符合合規(guī)定；；凡進行行裝量差差異檢查查的單劑劑量包裝裝丸劑，，不再進進行重量量差異檢檢查。3.裝量差差異異單劑量分裝裝的丸劑（袋或瓶））取10袋（（瓶），分分別稱定每每袋（瓶））內容物的的重量，每每袋（瓶））裝量與標標示裝量相相比較。9g—±5%（丸重范圍圍9.45~8.55）6g—±6%（丸重范圍圍6.36~5.64）3g—±8%（丸重范圍圍3.24~2.76）判定標標準超出重量差差異限度的的不得多于于2袋（瓶）），并不得有有1袋（瓶））超出限度一一倍。4.裝裝量量裝量以重量量標示的多多劑量包裝裝的丸劑，，照最低裝裝量檢查法法（2005年版一一部附錄64頁），，目前多劑劑量包裝的的中成藥不不多見，蒙蒙成藥大多多是多劑量量包裝。具體操作：：取供試品品5個（50g以上者者3個），采用減重重法分別求求出每個內內容物的裝裝量與平均均裝量，應應符合下列列規(guī)定。如如有1個內內容物不符符合規(guī)定，，則另取5個同法進進行復驗。。判定標標準準標示裝量20g以下下規(guī)定：平均均裝量不少少于標示裝裝量，每個個內容物裝裝量不少于于標示裝量量的93%標示裝量20g至50g規(guī)定：平均均裝量不少少于標示裝裝量，每個個內容物裝裝量不少于于標示裝量量的95%標示裝量50g至500g規(guī)定：平均均裝量不少少于標示裝裝量，每個個內容物裝裝量不少于于標示裝量量的97%4.溶散時時限根據(jù)丸劑直直徑選擇不不同孔徑的的篩網（丸丸劑直徑在2.5mm以下的用孔徑約約0.42mm的篩網，在2.5～3.5mm之間的用孔孔徑1.0mm的篩網，在3.5mm以上的用孔徑約約2.0mm的篩網）供試品黏附附擋板妨礙礙檢查，去去掉擋板再再進行檢查查。判定標標準小蜜丸、水水蜜丸和水水丸應在1小時內全部溶散。。濃縮丸和糊糊丸應在2小時內全部溶散。。蠟丸照腸溶衣片崩解時限檢檢查法檢查查。大蜜丸不檢檢查溶散時時限。（二）片劑的檢查查《中國藥典典》2005年版一部附附錄7頁片劑包括：：浸膏片、、半浸膏片片和原粉片片片劑以口服服普通片為為主，另有有含片、咀咀嚼片、泡泡騰片、陰陰道片、陰陰道泡騰片片和腸溶片片等。外觀應完整整光潔，色色澤均勻，，應有適宜宜的硬度。。1.重量差差異取20片，精密稱定定總重量，，求得平均均片重，再再分別精密密稱定每片片的重量，，每片重量量與標示片片重相比較較（無標示示片重的片片劑，與平平均片重比比較）0.3g——±5%（（0.315～0.285）0.3g以以下—±7.5%糖衣片不檢檢查重量差差異判定標標準超出限度的的不得多于于2片，并不得有有1片超出限度一倍。2.崩解時限限做此項檢查（（附錄62頁頁）時應注意意：（1）1000ml的燒杯（2）T=37±1℃（3）擋板以以“V”字形放置（4）升降的的金屬支架上上下移動距離離為55mm±±2mm，往返頻率為為每分鐘30～35次次。（5）調節(jié)吊吊藍位置使其其下降時篩網網距燒杯底部25mm，上升時篩網網在水面下15mm處。判定標準準藥材原粉片（（未經提取、、濃縮等一系系列工藝制備備）——30分鐘糖衣片、薄膜膜衣片（可在在9‰鹽酸溶液液中檢查）、浸浸膏片(半浸浸膏片)———60分鐘腸溶衣片9‰鹽酸溶液液中檢查2小小時（不加擋板）），不得有裂裂隙、崩解或或軟化現(xiàn)象；；提出，用少少量水洗滌后后，再在磷酸酸鹽緩沖溶液液（PH6.8）中進行檢查（（加擋板），，1小時全部崩崩解并通過篩篩網。判定標標準泡騰片（含含NaHCO3和有機酸）250ml燒燒杯（200ml15～25℃℃的水）當氣體停止逸逸出時，片劑劑應溶解或分分散在水中，，無凝聚的顆顆粒剩留。5分鐘內崩解含有藥材浸膏膏、樹脂、油油脂或大量糊糊化淀粉的片片劑，如有小小部分顆粒狀狀物未通過篩篩網，已軟化化無硬芯，按按符合論。判定標準準陰道片照融變時限檢檢查法（附錄錄63頁）檢檢查供試品3片應在30分鐘內全部溶化或或崩解溶散并并通過開孔金金屬圓盤，或或僅殘留少量量無硬芯的軟軟性團塊。含片、咀嚼片片不檢查崩解解時限3.發(fā)泡泡量陰道泡騰片25ml具塞刻度試管管（內徑1.5cm）10支，各精精密加水2ml，置37±1℃℃水浴中5分鐘，各管中中投入供試品品1片，密塞塞，20分鐘內觀察最最大發(fā)泡量的的體積。判定標標準平均發(fā)泡體積積應不少于6ml少于4ml的不得超過2片（三）膠囊劑劑的檢查《中國藥典》》2005年版一部附錄錄10頁膠囊劑包括：：硬膠囊、軟軟膠囊、腸溶溶膠囊。外觀應整潔、、不得有粘結結、變形、滲滲漏或囊殼破破裂現(xiàn)象，并并應無異臭。。1.水分硬膠囊將將內容物倒出出來，按照水水分測定法進進行測定。常用方法為烘烘干法和甲苯苯法。判定標準：水水分不得過9.0%。硬膠囊內容物物為液體或半半固體者不檢檢查水分。2.裝量差異異取10粒，分別精密稱稱定重量，傾傾出內容物，，再精密稱定囊殼重重量，采用減減重法，求出出每粒內容物物的量，每粒粒裝量與標示示裝量相比較較（無標示裝裝量的膠囊劑劑，與平均裝裝量比較）。。限度為：±10%0.5g/粒粒（0.550g～0.450g））判定標準準超出限度的不不得多于2粒，并不得有1粒超出限度度一倍。3.崩解時限限操作同片劑必須加擋板判定標準準硬膠囊——30分鐘軟膠囊——60分鐘（可在人工胃胃液中進行））腸溶膠囊———同腸溶衣片片部分顆粒狀物物不能通過篩篩網，已軟化化無硬芯可作作符合論（四）顆粒劑劑的檢查《中國藥典》》2005年版一部附錄錄6頁顆粒劑包括：：可溶性顆粒粒劑、混懸性性顆粒劑和泡泡騰性顆粒劑劑。顆粒劑應應干燥、、顆粒均均勻、色色澤一致致，無吸吸潮、結結塊、潮潮解等現(xiàn)現(xiàn)象。1.粒度度取顆粒劑劑30g，稱定重重量，采采用雙篩篩分法，，置藥篩篩內過篩篩，將藥藥篩保持持水平狀狀態(tài)，左左右往返返輕輕篩篩動3分鐘。判定標準準不不能通過過一號篩篩和能通通過四號號篩的顆顆粒和粉粉末總和和不得過過15%。2.水分分按照水分分測定法法進行測測定。常用方法法為烘干干法和甲甲苯法。。判定標準準：不得得過6.0%。3.溶化性性1袋或10g（多劑量量包裝））+200ml熱水（70～80℃），攪拌5分鐘，立即觀觀察。判定標準準：可溶溶性顆粒粒劑應全全部溶化化，允許許有輕微微渾濁；；混懸性性顆粒劑劑應能混混懸均勻勻。泡騰性顆顆粒劑1袋+200ml水（15～～25℃℃），應能迅迅速產生生氣體而而呈泡騰騰狀，5分鐘內內顆粒應應完全分分散或溶溶解在水水中。均不得有有焦屑等等異物。。4.裝量差差異異單劑量分分裝的顆顆粒劑，，取10袋(瓶)，分別稱稱定每袋(瓶瓶)內容物的的重量，，每袋(瓶瓶)的重量與與標示裝裝量相比比較限度為：：±5%10g/袋(10.50g～9.50g)判定標標準準超出限度度的不得得多于2袋（瓶瓶），并不得得有1袋（瓶瓶）超出限度度一倍。。多劑量分裝的的顆粒劑照最最低裝量檢查查法。（五）滴丸劑劑的檢查《中國藥典》》2005年版一部附錄錄10頁。外觀應圓整均均勻，色澤一一致，無沾連連現(xiàn)象，表面面無冷凝液黏黏附。1.重量差異異取20丸，精密稱定總總重量，求得得平均丸重后后，再分別精精密稱定每丸丸的重量，每每丸重量與平平均丸重相比比較。判定標準：超出限度的不不得多于2丸，并不得有1丸超出限度度一倍。包糖衣的滴丸丸不檢查重量量差異，包薄薄膜衣的滴丸丸檢查重量差差異。2.溶散時限限操作同片劑滴丸很小，篩篩網孔徑應為為0.42mm。判定標準：不包衣的滴丸丸應在30分鐘內全部溶散，，包衣的滴丸丸應在60分鐘內全部溶散。。以明膠為基質質的滴丸，可可在人工胃液液中進行檢查查。中蒙藥薄層色色譜鑒別（（TLC鑒別別）薄層色譜法(ThinLayerChromatography，TLC)系將適宜宜的固定相涂涂布于玻璃板板、塑料或鋁鋁質基片上，，成一均勻薄薄層。待點樣樣、展開后，，與適宜的對對照物按同法法所得的色譜譜圖作對比，，用以進行藥藥物的鑒別、、雜質檢查或或含量測定的的方法。優(yōu)點：具有簡簡便、快速、、分離效率高高、專屬性強強及靈敏度高高等特點。中國藥典2005年版一部共收收載1146個品種（包括：：中、蒙、藏藏藥材及成藥藥），采用TLC法用于于鑒別的已達1523項，增加加TLC鑒別并不是趕趕時髦，而是是由于TLC鑒別的專屬性性強?？墒牵?，這并不表明明顯微鑒別、、理化鑒別就就沒用了、不不重要了,例例如：含麝麝香的中蒙藥藥，顯微鑒別別起著很重要要的作用。薄層色譜鑒別別操作全過程程示意如下供試液的制備

展開劑配制

紫外光燈、顯色劑

薄層板制備

檢視

展開

點樣

定性結果中蒙成藥TLC鑒別的目的是是鑒別而不是是分離提取，，因而在條件件考察時，對對吸附劑、展展開劑的選擇擇，不是如何何將檢品分離離成單一組分分，而是如何何在某一規(guī)定定的條件（如：硅膠G板、GF254板、H板等），將檢品制制成清晰、圓圓整、比移值值穩(wěn)定的層析析圖譜，以便便與對照品（（或對照藥材材）進行對照照比較。（一）供試液液的制備一個理想的TLC鑒別，關鍵是是所制備的供供試液是否理理想。供試液液的制備離不不開提取分離離(前處理)的選擇，并并不是所有的的成分用甲醇醇、乙醇都可可以提出，在在薄層板上點點樣、展開、、顯色、檢視視。例如：檢檢中藥或中成成藥中的苷類類成分(含人參、三三七、黃芪、、黃芩等藥材材的中蒙成藥藥)，需要較為復復雜的前處理理。另外點樣液不不能太濃，否否則點樣后易易造成嚴重拖拖尾。前處理理整個前處理包包括：提取、、萃取、柱層層析等等一系系列的處理過過程，在這兒兒主要講一下下萃取和柱層層析時應注意意的幾個方面面。萃?。褐饕⒁馊榛F(xiàn)象柱層析：層析柱下端用脫脂棉或或玻璃纖維塞塞住，吸附劑劑均勻地、一一次性加入，，操作過程中中應保持有充充分的洗脫劑劑留在吸附層層的上面。1.萃取取主要注意乳化化現(xiàn)象苷類成分用水水飽和的正丁丁醇萃取及有有機生物堿類類成分用乙醚醚或氯仿萃取取時，往往易易產生乳化現(xiàn)現(xiàn)象。振搖時注意避避免強力振搖搖。用乙醚或正己己烷等萃取脂脂溶性有機酸酸或用醋酸乙乙酯萃取黃酮酮類成分時，，一般不易產產生乳化現(xiàn)象象，可以強力力振搖。2.柱層層析色譜柱下端用用脫脂棉或玻玻璃纖維塞住住。吸附劑應均勻勻地、一次性性加入色譜柱柱，振動管壁壁使其均勻下下沉。洗脫過程中應應保持有充分分的洗脫劑留留在吸附層的的上面（二）薄層板的制備備將固定相和水水(或一定濃濃度的CMC-Na溶液液或其他水溶溶液)按1∶3的比例混勻研研磨,涂布成成均勻的、規(guī)規(guī)定厚度的薄薄層，自然晾晾干后，在110℃烘烤烤30分鐘活活化，放在有干燥燥劑的儲板箱箱中備用。（三）點樣點樣的質量對對分離效果影影響很大。點樣時最好在在空氣濕度比比較低的地方方，因為吸附附劑在空氣中中易吸收濕氣氣而降低其活活性。整個點樣過程程最好控制在在10分鐘左右。點樣基線距底底邊1.0～1.5cm，點樣直徑一般般為2～4mm，各原點必須在在同一水平線線上，點間距約為1.5～2.0cm。點樣時勿損傷傷薄層表面。。點樣量大時，，要分次點加加，使原點集中，，為保證樣品不不擴散，可借借助吹冷、熱熱風或加熱方方式進行點樣樣。（四）展開劑和展開開展開劑的選擇擇主要是根據(jù)據(jù)吸附劑、分分離物質的性性質以及展開開劑極性三者者之間的關系系來考慮。展開方式很多多，有上行、、下行、雙向向、多次展開開等。最常用用的是上行展展開法，所用用展開缸的底底部必須平整整，將薄層板板放入后能呈呈水平，磨口口蓋要嚴密，，必要時可涂涂少量凡士林林密封，但須須嚴防污染薄薄層板及展開開劑。在展開開缸中，薄層層板對溶劑蒸蒸氣的吸附對對薄層分離的的影響很大。。由于對飽和和度的要求不不同，如有的的需要用展開開劑先將展開開缸飽和，有有的需將薄層層板在展開缸缸中用展開劑劑飽和，有的的則不需要飽飽和，故需按按不同要求進進行操作。薄層板浸入展展開劑的深度度一般為0.5cm(上行展開)或或0.3cm(斜上行展開)，展開距離離一般為8～15cm,高效薄層板展展距5～8cm。展開劑宜臨用用新配，不宜宜反復使用。。（五）顯色色物理方法有熒熒光法、熒光光熄滅法等，，化學方法一一般是用化學學試劑顯色的的方法。顯色劑有通用用顯色劑(如如硫酸乙醇溶溶液、磷鉬酸酸乙醇溶液、、碘蒸氣等)和專屬顯色色劑(如生物物堿用稀碘化化鉍鉀、氨基基酸用茚三酮酮試液等)。。（六六））檢檢視視日光光下下目目測測檢檢視視：：斑斑點點本本身身有有顏顏色色、、顯顯色色劑劑顯顯色色后后斑斑點點呈呈色色。。紫外外光光燈燈下下檢檢視視：：365nm、、254nm六味味地地黃黃丸丸中中熊果果酸酸的的薄層層色色譜譜結結果果DocumentationwithdigitalcameraVisualinspectionofAstragalusandHedysarumTrack1,2,3=Astragalus2,5,10μμLTrack4,5,6=Hedysarum10,5,2TrTrack1,2,3=Astragalus2,5,10μμLTrack4,5,6=Hedysarum10,5,2μμL、25,2μμL2,3=Astragalus2,5,10μμLTrack4,5,6=Hedysarum10,5,2μμLμLH2SO4

123456UV366123456

UV254123456

VisuallightFluorescenceFluorescencequenchingImagecapturingValerian(纈草草)whitelightImagecapturingValerian(纈草草)UV-254nmImagecapturingValerian(纈草草)UV366\>400nmWeakfluorescentzones:useLongTimeIntegration（七七））檢檢出出物物的的定定性性薄層層分分離離的的斑斑點點檢檢出出后后需需要要定定性性，，鑒鑒別別直直接接在在薄薄層層上上進進行行。。在在薄薄層層上上進進行行定定性性鑒鑒別別，，由由于于影影響響薄薄層層分分離離的的因因素素很很多多，，僅僅僅僅靠靠測測量量Rf值值的的方方法法是是不不可可靠靠的的。。一一般般采采用用對對照照品品或或對對照照藥藥材材在在同同一一條條件件下下展展開開后后進進行行對對比比的的方方法法（（也也叫叫隨隨行行對對照照法法））。。采用用對對照照品品作作對對照照時時，，要要求求供供試試品品色色譜譜中中，，在在與與對對照照品品色色譜譜相相應應的的位位置置上上，，顯顯相相同同顏顏色色的的斑斑點點或或熒熒光光斑斑點點。。采采用用對對照照藥藥材材作作對對照照時時，，一一般般要要求求供供試試品品色色譜譜中中，，在在與與對對照照藥藥材材色色譜譜相相應應的的位位置置上上，，顯顯相相同同顏顏色色的的斑斑點點或或熒熒光光斑斑點點至至少少2～～3個個。從原原點點到到斑斑點點中中心心的的距距離離Rf值值=——————————————————————————從原原點點到到溶溶劑劑前前沿沿的的距距離離Rf值：0.2～0.8（八））薄層層層析析中遇遇到的的異常?，F(xiàn)象象及解解決辦辦法在薄層層層析析分析析中，，我們們希望望獲得得清晰晰、圓圓整、、Rf值（比比移值值）穩(wěn)穩(wěn)定且且適中中（0.2~0.8）的斑點點。但但是在在實際際檢驗驗工作作中，，往往往遇到到異常?，F(xiàn)象象，會會妨礙礙和干干擾薄薄層層層析結結果。。因此此，需需要探探討其其產生生的原原因與與克服服的辦辦法。。1.邊邊緣緣效效應應圖譜情情況：：在同一一塊薄薄層板板上，，用同同一種種展開開劑，，在同同一展展開槽槽內展展開，，薄層層板中中部的的斑點點較兩兩側斑斑點的的Rf值?。ǎㄓ绕淦涫窍南奶欤?。Rg1

ReRb1產生的的原因因：因為當當展開開劑在在薄層層板上上運行行時，，極性性較弱弱的展展開劑劑和揮揮發(fā)性性較強強的展展開劑劑在薄薄層兩兩邊較較易揮揮發(fā)。。因此此，它它們在在薄層層兩邊邊的濃濃度比比在中中間的的濃度度小，對于同同一組組分來來說，，兩側側的Rf值大于于中間間的，，因此此就產產生了了如圖圖所示示的邊邊緣效效應。。克服的的辦法法：（1））使展展開劑劑充分分飽和和，時時間一一般在在15分分鐘以以上，有的的展開開劑需需要飽飽和30分分鐘。將預先先點好好樣的的薄層層板放放入展展開缸缸中，，但不不浸入入展開開劑中中，讓讓薄層層板及及原點點上的的樣品品成分分充分分飽和和。。（2）在展展開缸缸內壁壁上貼貼以浸浸濕了了展開開劑的的濾紙紙條。。（3）用內內容較較小且且封閉閉嚴密密的展展開缸缸。（4）用窄窄的薄薄層板板或將將薄層層板下下角斜斜切成成“V”字形。。2.拖拖尾尾現(xiàn)現(xiàn)象象圖譜情情況：：在圓或或橢圓圓形斑斑點的的后方方呈現(xiàn)現(xiàn)拖尾尾，嚴嚴重者者呈倒倒火焰焰狀。。產生的的原因因:（1）點點樣量