ABO血型正定型標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

ABO血型正定型標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程ABO血型正定型標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程ABO血型正定型標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程資料僅供參考文件編號(hào)：2022年4月ABO血型正定型標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程版本號(hào)：A修改號(hào)：1頁次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：ABO血型正定型標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程一．目的：規(guī)范ABO血型正反定型的操作。二．適用范圍：適用于ABO血型正反定型。三．支持性文件：全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第二版。四．原理：根據(jù)紅細(xì)胞上有或無A抗原或／和B抗原，將血型分為A型、B型、AB型及O型?？衫眉t細(xì)胞凝集試驗(yàn)，通過正反定型準(zhǔn)確鑒定ABO血型。所謂正定型，是用已知抗A和抗B分型血清來測(cè)定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的A抗原或／和B抗原；五．儀器：離心機(jī)。六．試劑：1．抗A、抗B分型血清；定期進(jìn)行效價(jià)滴定,以保分型血清質(zhì)量性能符合要求?？笰：1∶128，抗B：1∶128。七．樣本要求：1．紅細(xì)胞可用針刺手指采血，并直接用生理鹽水稀釋制成5%紅細(xì)胞懸液；也可靜脈采血，用1∶9枸櫞酸鈉抗凝．。2．血清取靜脈血將血液沿管壁慢慢注入干燥試管中，待自然凝固后用玻璃棒輕輕攪動(dòng)血塊，使之與試管壁分離?；蛑?7℃水浴1小時(shí)，使血塊收縮離心分離血清。八．操作步驟：1．取潔凈小試管3支，分別標(biāo)明抗Ａ．抗Ｂ和抗A＋B，用滴管分別加抗Ａ．抗B和抗A＋B分型血清各1滴于試管底部，再以滴管分別加入受檢者5%紅細(xì)胞懸液1滴，混合。2．另取潔凈小試管3支，分別標(biāo)明A、B和O細(xì)胞；用滴管分別加入受檢者血清1滴于試管底部，再分別以滴管加入A、B和O型5%試劑紅細(xì)胞懸液1滴，混合。3．用離心機(jī)以1000r／min離心1分鐘；或3400r/10秒。4．將試管輕輕搖動(dòng)，使沉于管底的紅細(xì)胞浮起，先以肉眼觀察有無凝集（溶血）現(xiàn)象。如肉眼不見凝集，應(yīng)將反應(yīng)物倒于玻片上，再以低倍鏡檢查。5．觀察結(jié)果時(shí)既要看有無凝集，更要注意凝集強(qiáng)度，此有助于A、B亞型；類B或cisAB的發(fā)現(xiàn)。6．凝集強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)：4＋＝紅細(xì)胞凝集成一大塊，血清清晰透明3＋＝紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊，血清尚清被鑒定血的血型抗A（B型）抗B（A型）A型+—B型—+O型——AB型++九．注意事項(xiàng)1．觀察結(jié)果時(shí)不可用力振搖；2．嚴(yán)格按規(guī)程操作，避免操作失誤，以免重新試驗(yàn)浪費(fèi)時(shí)間和試劑；3．試驗(yàn)結(jié)束后，試劑置2-6℃冰箱保存，以免試劑中的免疫球蛋白變質(zhì)聚凝胺法交叉配血實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程

1.

目的：檢出和鑒定意外抗體。

2.

原理：凝聚胺溶解后產(chǎn)生的陽離子中和紅細(xì)胞表面的唾液酸使紅細(xì)胞間距縮短，發(fā)生由IgG直接搭橋的可逆的非特異性凝集，當(dāng)非特異性凝集回復(fù)時(shí)，只剩下由抗原抗體搭橋的特異性凝集。

3.

適用范圍：配血。

4.

所需材料：聚凝胺試劑、、潔凈試管、滴管、離心機(jī)

5.

操作程序：

以生理鹽水洗滌受血者和獻(xiàn)血者紅細(xì)胞1—3次，配成3-5%的懸液。

交叉配血試驗(yàn)：

主側(cè)：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC懸液。

次側(cè)：2滴供者血清加1滴患者3-5%的RBC懸液。。

每只試管加4滴低離子液，混合放置1分。

分別加2滴Polybrene應(yīng)用液，混合放置15秒。

離心3400轉(zhuǎn)/分15秒，棄上清，控干。

觀察管底有無聚凝物，如果沒有則需重做。

每管各加2滴解聚液，輕輕混合10秒，觀察結(jié)果并做記錄。

結(jié)果判定：10秒內(nèi)若為Polybrene引起的聚合應(yīng)該會(huì)散開，判為陰性。若為抗原抗體