ABO血型正定型標準操作規(guī)程

ABO血型正定型標準操作規(guī)程ABO血型正定型標準操作規(guī)程ABO血型正定型標準操作規(guī)程資料僅供參考文件編號：2022年4月ABO血型正定型標準操作規(guī)程版本號：A修改號：1頁次：1.0審核：批準:發(fā)布日期：ABO血型正定型標準操作規(guī)程一．目的：規(guī)范ABO血型正反定型的操作。二．適用范圍：適用于ABO血型正反定型。三．支持性文件：全國臨床檢驗操作規(guī)程第二版。四．原理：根據(jù)紅細胞上有或無A抗原或／和B抗原，將血型分為A型、B型、AB型及O型。可利用紅細胞凝集試驗，通過正反定型準確鑒定ABO血型。所謂正定型，是用已知抗A和抗B分型血清來測定紅細胞上有無相應的A抗原或／和B抗原；五．儀器：離心機。六．試劑：1．抗A、抗B分型血清；定期進行效價滴定,以保分型血清質量性能符合要求?？笰：1∶128，抗B：1∶128。七．樣本要求：1．紅細胞可用針刺手指采血，并直接用生理鹽水稀釋制成5%紅細胞懸液；也可靜脈采血，用1∶9枸櫞酸鈉抗凝．。2．血清取靜脈血將血液沿管壁慢慢注入干燥試管中，待自然凝固后用玻璃棒輕輕攪動血塊，使之與試管壁分離?；蛑?7℃水浴1小時，使血塊收縮離心分離血清。八．操作步驟：1．取潔凈小試管3支，分別標明抗Ａ．抗Ｂ和抗A＋B，用滴管分別加抗Ａ．抗B和抗A＋B分型血清各1滴于試管底部，再以滴管分別加入受檢者5%紅細胞懸液1滴，混合。2．另取潔凈小試管3支，分別標明A、B和O細胞；用滴管分別加入受檢者血清1滴于試管底部，再分別以滴管加入A、B和O型5%試劑紅細胞懸液1滴，混合。3．用離心機以1000r／min離心1分鐘；或3400r/10秒。4．將試管輕輕搖動，使沉于管底的紅細胞浮起，先以肉眼觀察有無凝集（溶血）現(xiàn)象。如肉眼不見凝集，應將反應物倒于玻片上，再以低倍鏡檢查。5．觀察結果時既要看有無凝集，更要注意凝集強度，此有助于A、B亞型；類B或cisAB的發(fā)現(xiàn)。6．凝集強度判斷標準：4＋＝紅細胞凝集成一大塊，血清清晰透明3＋＝紅細胞凝集成數(shù)小塊，血清尚清被鑒定血的血型抗A（B型）抗B（A型）A型+—B型—+O型——AB型++九．注意事項1．觀察結果時不可用力振搖；2．嚴格按規(guī)程操作，避免操作失誤，以免重新試驗浪費時間和試劑；3．試驗結束后，試劑置2-6℃冰箱保存，以免試劑中的免疫球蛋白變質聚凝胺法交叉配血實驗操作規(guī)程

1.

目的：檢出和鑒定意外抗體。

2.

原理：凝聚胺溶解后產生的陽離子中和紅細胞表面的唾液酸使紅細胞間距縮短，發(fā)生由IgG直接搭橋的可逆的非特異性凝集，當非特異性凝集回復時，只剩下由抗原抗體搭橋的特異性凝集。

3.

適用范圍：配血。

4.

所需材料：聚凝胺試劑、、潔凈試管、滴管、離心機

5.

操作程序：

以生理鹽水洗滌受血者和獻血者紅細胞1—3次，配成3-5%的懸液。

交叉配血試驗：

主側：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC懸液。

次側：2滴供者血清加1滴患者3-5%的RBC懸液。。

每只試管加4滴低離子液，混合放置1分。

分別加2滴Polybrene應用液，混合放置15秒。

離心3400轉/分15秒，棄上清，控干。

觀察管底有無聚凝物，如果沒有則需重做。

每管各加2滴解聚液，輕輕混合10秒，觀察結果并做記錄。

結果判定：10秒內若為Polybrene引起的聚合應該會散開，判為陰性。若為抗原抗體