體液免疫球蛋白的測定

第十八章體液免疫球蛋白的測定第十八章體液免疫球蛋白的測定AssayforhumoralIg第一部分目的要求和教學(xué)內(nèi)容一、目的要求：掌握免疫球蛋白定量測定的方法參考值及應(yīng)用評價。了解免疫球蛋白定量的醫(yī)學(xué)意義。二、教學(xué)內(nèi)容：1．免疫球蛋白定量的常用檢測方法和參考值2.免疫球蛋白定量檢測方法評價及應(yīng)用。3.免疫球蛋白定量臨床意義1）血清Ig定量臨床意義。2）尿微量Ig定量臨床意義。3）腦脊液Ig定量臨床意義。第二部分測試題一、選擇題：(一)單項選擇題(A型題)1．CSF中一般以IgG指數(shù)反映中樞NS鞘內(nèi)合成IgG能力（）A．IgG指數(shù)=CSF中IgG/血清中IgGB．IgG指數(shù)=CSF中IgG/CSF中ALbC．IgG指數(shù)=CSF中IgG/血清中IgG÷CSF中白蛋白/血清中白蛋白D．IgG指數(shù)=血清中IgG/CSF中IgG÷血清中白蛋白/CSF中白蛋白2.單項瓊脂擴(kuò)散試驗可用于免疫球蛋白的測定，有關(guān)敘述錯誤的是：A．應(yīng)選擇特異性強(qiáng)、效價高、親和力高的抗體Ｂ．制板時溫度控制在50℃~60Ｃ．待測樣品抗原如果含量高，應(yīng)稀釋后再檢測Ｄ．不同批次抗血清都可以使用相同的標(biāo)準(zhǔn)曲線Ｅ．同一批次抗血清可以使用相同的標(biāo)準(zhǔn)曲線3.免疫球蛋白的測定可用于哪些疾病的檢測：A．Ig全缺乏疾病B．選擇性Ig缺乏癥C．單克隆Ig血癥D．多克隆Ig血癥E．以上所有疾病4．人類免疫球蛋白占血漿蛋白總量的：A．5％B．10％C．15％D．20％E．50％5．免疫濁度測定法出現(xiàn)測量誤差的最大因素是：A．抗體過量B．鉤狀效應(yīng)C．環(huán)境溫度影響D．加入抗原、抗體的時間E．光源的強(qiáng)弱和波長的影響6．血清中缺乏IgG患者，易患下列哪種疾?。篈．革蘭陰性細(xì)菌敗血癥B．化膿性感染C．反復(fù)呼吸道感染D．巨球蛋白血癥E．重鏈病7．類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，Ig以哪型增高為主：A．IgAB．IgDC．IgED．IgGE．IgM8．腦脊液中Ig濃度依次是：A．IgG＞IgM＞IgAB．IgG＞IgA＞IgMC．IgM＞IgA＞IgGD．IgM＞IgG＞IgAE．IgA＞IgM＞IgG9．血清中IgE含量升高，常見于下列哪種情況：A．大量吸煙B．妊娠末期C．SLED．中毒性骨髓疾病E．腎病綜合癥10．免疫電泳常采用的抗血清是：A．IgG、IgM、IgA、IgD、IgCB．IgG、IgM、IgA、k、λC．IgG、IgA、IgD、k、λD．IgG、IgM、IgD、k、λE．IgG、IgM、IgA、sIgA、IgC11．M蛋白于相應(yīng)抗體反應(yīng)形成沉淀弧有何特點：A．較普通沉淀弧寬，向抗體槽凸出B．較普通沉淀弧窄，向抗體槽凹出C．較普通沉淀弧寬，向抗體槽凹出D．較普通沉淀弧窄，向抗體槽凸出E．與普通沉淀弧寬一樣（二）、配伍題(問題1~4)A.IgGB.IgAC.IgMD.IgEE.SIgA1.人體血液中含量最多和最主要的免疫球蛋白是：2.能通過胎盤的免疫球蛋白是：3．在外分泌液中含最多的免疫球蛋白是：4．在初乳中含量最多的免疫球蛋白。二、填空題1．免疫球蛋白根據(jù)重鏈的不同可分為（），（），（），（）和（）五類。2．免疫固定電泳的特點是：（）、（）、（）、（）。3．Ig中k/λ比率正常范圍是（）三、名詞解釋體液免疫(humoralimmunity):M蛋白（monoclonalprotein）:3.本-周蛋白（bence-Jones）:4.冷球蛋白：四、簡答題1．血清免疫球蛋白測定方法有那些？2．免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測定有何意義？3．如何評估腎小球濾膜破壞程度？4．如何判定血腦屏障受損程度？五、論述題１．試述本周蛋白檢測的意義？第三部分參考答案與題解一、選擇題：(一)單項選擇題(A型題)1．C2.D3.C4.D5.Ｂ6.Ｂ7.E8.Ｂ9.Ｃ10.Ｂ11.Ａ（二）配伍題1．Ａ2．Ａ3．Ｅ4．Ｅ二、填空題1IgMIgGIgAIgEIgD2．周期短、敏感性高、分辨清晰、結(jié)果易于分析。3．1.2～2.4三、名詞解釋1．體液免疫(humoralimmunity):B細(xì)胞介導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答。2．M蛋白（monoclonalprotein）:單克隆免疫球蛋白，是B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖所產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上十分均一的異常單克隆免疫球蛋白；3.本-周蛋白（bence-Jones）:尿中游離的免疫球蛋白輕連。4.冷球蛋白：一組低溫下發(fā)生沉淀，加溫后又復(fù)溶的Ig。四、簡答題1．血清免疫球蛋白測定方法有那些？答：單向免疫擴(kuò)散法：原理，優(yōu)點：簡單，條件要求低，但抗體需要高效價高特異性，靈敏度：mg/ml免疫比濁法:原理，優(yōu)點：檢測結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高，耗時短，靈敏度高ug/ml2．免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測定有何意義？答：IgG、IgA、IgM均升高則慢性疾病，IgG升高則多為細(xì)菌感染導(dǎo)致，新生兒血清IgM升高則常為宮內(nèi)感染。單一Ig顯著升高則多為免疫增殖?。憾喟l(fā)性骨髓瘤，重鏈病、惡性淋巴瘤。Ig降低則體液免疫缺陷或聯(lián)合免疫缺陷。3．如何評估腎小球濾膜破壞程度？答：根據(jù)選擇性尿蛋白指數(shù)-SPI評估腎小球濾膜破壞程度表明腎臟有高度選擇性的排泌分子量小的蛋白質(zhì)，SPI≤0.1表明腎臟有高度選擇性的排泌分子量小的蛋白質(zhì)，此時腎臟輕度病變。SPI≥0.2表明腎臟非選擇性的排泌分子量較大的蛋白質(zhì)，此時有膜性腎病，膜增值性腎炎和腎病綜合癥。尿中IgA顯著升高出現(xiàn)在原發(fā)性腎小球腎炎和慢性腎小球腎炎，IgG升高出現(xiàn)在原發(fā)性腎小球腎炎和慢性腎小球腎炎，IgM升高出現(xiàn)在慢性腎炎，4．如何判定血腦屏障受損程度？答檢測白蛋白商值(Albquotient)=[(ALbCSF×AlbS)×1000]反應(yīng)血腦屏障受損程度。＜9時提示無明顯受損，9-15為輕度受損，15-33為中度受損，33-100為重度受損；＞100為完全破裂。五、論述題１．本周蛋白即尿中游離的免疫球蛋白輕鏈，其檢測對輕鏈病的診斷是必不可少的項目，并對多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥、重鏈病等疾病的診斷、鑒別和預(yù)后判斷均有一定幫助。本周蛋白在pH5．0的條件下，加熱至50-60℃至90℃進(jìn)行化學(xué)方法的檢測。這種加熱沉淀法簡便易行。但敏感度低，也不能確定輕鏈的型別。也可使用抗k和λ型輕鏈抗血清進(jìn)行免疫電泳分析，為提高檢出率，尿標(biāo)本宜先用聚乙二醇通過半透膜濃縮。游離輕鏈往往與其中一型(k或λ)的抗血清反應(yīng)，在β-γ區(qū)附近形成一條致密的弓形沉淀弧。有時輕鏈外還含有其他蛋白，要注意識別。如多克隆免疫球蛋白常同時與k和λ兩型抗輕鏈血清形成沉淀弧，而單克隆免疫球蛋白(M蛋白)雖只與其中一型抗輕鏈血清反應(yīng)，但也與某一型重鏈抗血清產(chǎn)生一位置相同的沉淀弧，通過觀察分析多可作出正確判斷。輕鏈病患者尿中可測得本周蛋白，但由于其分子量較小，易迅速自腎臟排出，故血中反而呈陰性，檢測時應(yīng)該注意。非分泌型骨髓瘤患者蛋白區(qū)帶電泳中不能檢出單克隆丙種球蛋白的M區(qū)帶，往往呈現(xiàn)