分子生物學(xué)檢驗技術(shù)產(chǎn)前診斷pgd

無創(chuàng)產(chǎn)技檢生無創(chuàng)產(chǎn)技檢生學(xué)P257and1風險計受精著床癥狀出2臨癥狀著床風險計受精著床癥狀出2臨癥狀著床非整倍數(shù)目增非整倍數(shù)目增加或減少定義：體細條或數(shù)條3類型a.單體型：2n‐1；X，21，22號類型a.單體型：2n‐1；X，21，22號丟失常見b.三體型：2n+1；常13、18、21體常見，性XYY三體型有、XXY 多體型：僅見于性48YY421三體綜合唐氏綜合征（21三體綜合唐氏綜合征（Down’sSyndrome，愚足月新生兒最常見的至今沒有根治方疾病，我國每年約2000萬新生兒,每年約有26600DS兒出生。我國有大約60萬以上的DS者5臨床表特殊面容：面部扁平、鼻梁低平、眼距寬、外眥上斜、：患者智商臨床表特殊面容：面部扁平、鼻梁低平、眼距寬、外眥上斜、：患者智商（IQ）通常為30～60生長發(fā)育遲緩和肌張力減退：出生體重偏低，肌張力低下，身材矮小，短頸，頸背皮膚松垂，手短而寬、通貫至少1/3食管瘺等伴發(fā)癥也較其它疾病常見。患白血病的風險為618三體綜合18三體綜合征是次于18三體綜合18三體綜合征是次于新生兒發(fā)生率約為1/7500愚型的第二種常見主要臨床表現(xiàn)智力、生長發(fā)育遲緩、胸骨短、嚴重的心臟畸形以及肌張力等。顱面部的畸形包括小頜畸形、枕部突出、小耳以及低位耳13三體綜合1313三體綜合13三體綜合為1/20000～25000主要臨床表現(xiàn)：嚴重的中樞神經(jīng)系統(tǒng)畸形，內(nèi)臟畸形，顱面部的畸形，手足畸形821三體21三體綜合征二級預(yù)防模9母親血清標記物和超聲篩查度唐氏綜合癥檢出率:~65%，假陽性率:4.5-母親血清標記物和超聲篩查度唐氏綜合癥檢出率:~65%，假陽性率:4.5-增加抑制素A，可以將檢出率增加到的NT測量，21三體檢出率：77%，假陽性率的唐氏綜合癥的檢測檢出率可以達到89%，假陽性結(jié)合生化分析和頸WapnerR,etal.-trimesterscreeningfortrisomies21and18.NEnglJMed血清學(xué)篩查存在的問?孕周的確確血清學(xué)篩查存在的問?孕周的確確?許未嚴格控制孕期篩查的時?取血時間與開單時間，稱體重時間不一致的問?操作缺的技術(shù)規(guī)侵入性產(chǎn)風11周之前可侵入性產(chǎn)風11周之前可行性較侵入性產(chǎn)的利與47,XY,弊：侵入性產(chǎn)的利與47,XY,弊：a）周期長：1c）主要參考文獻：TaborA,etal.RCTofamniocentesisin4606low目前快速產(chǎn)方法的利?目前快速產(chǎn)方法的利?????基于FISH的產(chǎn)優(yōu)點：所需樣本量少，檢測周期短（）缺點：價格昂貴，通量小?；诙縋CR的產(chǎn)優(yōu)點：①所需樣本量少，檢測周期短（24h）。②價格便宜，通量大?缺點：對于嵌合型21三體，定量PCR可能會出現(xiàn)樣本中母血的污染也會影響結(jié)果的判斷，技?第1第2代）?(卵細胞漿技?第1第2代）?(卵細胞漿內(nèi)注射?第3（pre-)diagnosis,PGD胚胎植入?第三代”技??–具有遺傳學(xué)異常的父母，其子代也?第三代”技??–具有遺傳學(xué)異常的父母，其子代也有遺傳學(xué)異常的高度風險，不愿意進行選擇的–易位導(dǎo)致的反復(fù)自者–大于37歲的婦非整倍體性的體者，尤其常見的分子生物學(xué)檢測技?單細胞主要用于常見的分子生物學(xué)檢測技?單細胞主要用于缺陷遺傳的?熒光原位雜交技術(shù):主要用疾病?比組雜?技基于新一技術(shù)的非侵入性前非整倍體檢測基于新一技術(shù)的非侵入性前非整倍體檢測的優(yōu)非侵入性，避，等風險，降低孕婦心理擔高靈敏度，高特異檢測周期短——5天（12個工作日通量大，質(zhì)控容易（只有文是手動過程外周血含有游離胚胎胚胎外周血含有游離胚胎胚胎段比小，長度在75bp250bp之間cffDNA主要參考文獻：Fetalcf‐DNAdetectedviaYchromosome。LoYMetal.,Lancet血漿DNA的存在形血漿DNA的存在形體cffDNA快速降分體cffDNA快速降分Loetal.AmJHumGenet1998;血漿DNA的DNA背血20血漿DNA的DNA背血20DNA高背景帶來的檢測難血20DNA高背景帶來的檢測難血203體帶來的微量DNA變純胚胎DNA，唐氏與正常21的劑量變化?3:2=血漿DNA中胚3體帶來的微量DNA變純胚胎DNA，唐氏與正常21的劑量變化?3:2=血漿DNA中胚胎DNA占20%時，唐氏與正常21化的劑量?11:10=血漿DNA中胚胎的DNA一般占5%到30%，大多小于唐氏與正常21的劑量變化大多<當胚胎DNA只占5%時量理論上會增加胚胎血漿DNA的2121組的1.3%，檢測1.3%的全部DNA的2.5%只占增量要求非常高的精確熒光定量PCR（realtimePCR）的精確度（CV）在數(shù)碼PCR（digitalPCR)的精確度（CV）在的精確度（CV）在第二胚胎含量5%的情組拷貝/mL血5%胚胎含量5%的情組拷貝/mL血5%胚50胚組組分辨率50/2000胚胎比例Chr.11:Chr.21:Chr.11:Chr.21:第二?第二?提取血漿?適應(yīng)人12孕周以上適應(yīng)人12孕周以上的所有孕尤其是具有以下情況者?????高齡孕史、心理壓力史局限?三體疾病中極少數(shù)是由嵌合體引起。因嵌合體的三體細胞與二體細局限?三體疾病中極少數(shù)是由嵌合體引起。因嵌合體的三體細胞與二體細比例不定，基于深技術(shù)檢測嵌合體存在一定難度。對于多胞胎而言也有似情況，如多胞胎中的某一患有21三體綜合征而另為正常，該技檢測多胞胎存在一定難度。本檢測結(jié)果可能受此影響。嵌合體或多胞胎色體三體患者在總?cè)巳褐械谋壤龢O低?如孕婦本人疾病患者，本檢測結(jié)果可能受此影響?即使嚴格按照技術(shù)規(guī)范流程進行操作，在極少數(shù)情況下可能因樣本自然溶或血漿游離DNA含量過低（體重過大等）等原因?qū)е聼o法進行檢測，在種情況下，需要重樣本，不愿重者不予退費局限?在極少數(shù)情況下，孕婦近期接受過異體輸血、移局限?在極少數(shù)情況下，孕婦近期接受過異體輸血、移植手術(shù)、干細胞治療等，檢測結(jié)果可能受此影響?在極少數(shù)情況下患有除21、18、13外的其異常，檢測結(jié)果可能受此影響?在極少