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文檔簡介

病毒感染與宿主免疫

病毒感染的實驗室診斷技術(shù)病毒感染與宿主免疫

病毒感染的實驗室診斷技術(shù)1病毒感染:病毒侵入人體并在

體內(nèi)增殖,與機體

發(fā)生相互作用的過程~。病毒感染:病毒侵入人體并在

2病毒性疾病:機體感染病毒后,由于入侵病毒特性、機體反應(yīng)狀態(tài)不同,引發(fā)臨床癥狀且具病毒感染特征的疾病~病毒性疾?。簷C體感染病毒3病毒感染的方式病毒感染的方式41、Horizontaltransmission(人——人)(表面接觸、血液制品)2、Verticaltransmission(親代——子代)(胎盤、產(chǎn)道)1、Horizontaltransmission5病毒的感染類型:(一)1napparentinfection(二)apparentinfection1、acuteinfection2、persistentinfection(三)致腫瘤作用

病毒的感染類型:6Persistentinfection:(1)latentviralinfection(2)chronicviralinfection(3)slowviralinfection(4)delayedcomplicationafteracuteviralinfectionPersistentinfection:7latentviralinfection潛伏性病毒感染:病毒感染后只是以病毒的基因或基因產(chǎn)物的形式長期潛伏于組織或細胞內(nèi),不產(chǎn)生病毒顆粒,不引發(fā)臨床癥狀。但有可能被激活組成新病毒顆粒引起致病。latentviralinfection潛伏性病毒感染:8

chronicviralinfection

慢性病毒感染:病毒感染后(顯、隱性),病毒長期在體內(nèi)未被清除,可間歇性復(fù)制,持續(xù)性排毒,導(dǎo)致感染病程漫長~

chronicviralinfection

慢性病毒感9

slowviralinfection

慢發(fā)病毒感染(遲發(fā)病毒感染):病毒感染后潛伏期很長(數(shù)月、數(shù)年或數(shù)十年)。此期機體無癥狀,病毒未能分離。一旦癥狀出現(xiàn),多表現(xiàn)為亞急性進行性,最終導(dǎo)致死亡。

slowviralinfection

慢發(fā)病毒感染(遲10

delayedcomplication

afteracuteviralinfection

急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥:急性病毒性感染后1年或數(shù)年,發(fā)生致死性的病毒病~

delayedcomplication

after11病毒致腫瘤作用動物實驗病毒的生物學(xué)特性病毒感染與腫瘤發(fā)生、發(fā)展腫瘤組織證明病毒基因病毒致腫瘤作用動物實驗12引起人類惡性腫瘤的病毒病毒:逆轉(zhuǎn)錄病毒人類嗜T淋巴細胞病毒1型(HTLV-1)DNA病毒EB病毒單純皰疹病毒Ⅱ型(HSV-2)人乳頭瘤病毒(HPV)乙型肝炎病毒(HBV)引起人類惡性腫瘤的病毒病毒:13與病毒感染相關(guān)的腫瘤所致腫瘤:成人T細胞白血病/淋巴瘤Burkitts淋巴瘤鼻咽癌皮膚癌子宮頸癌肝癌與病毒感染相關(guān)的腫瘤所致腫瘤:14病毒的整合感染病毒的DNA和或逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA整合在宿主細胞染色體上,可通過其編碼蛋白引起細胞轉(zhuǎn)化,發(fā)生細胞形態(tài)學(xué)變化,喪失其接觸抑制的特性,導(dǎo)致細胞增生,并在細胞膜上出現(xiàn)新的腫瘤移植抗原。病毒的整合感染病毒的DNA和或逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA整15病毒的致病機理(一)病毒對宿主細胞的直接作用(病毒毒性)(二)病毒感染引起的機體變化(免疫病理)病毒的致病機理(一)病毒對宿主細胞的直16病毒的直接作用1、cytocidaleffect(殺細胞效應(yīng))2、steadystateinfection(穩(wěn)定狀態(tài)感染)3、cellapotosis(細胞凋亡)4、inclusionformation(包涵體的形成)病毒的直接作用1、cytocidaleffect17病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件18病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件19steadystateinfection病毒不斷從感染細胞釋放,但細胞的新成代謝核分裂不受影響,也不改變?nèi)苊阁w膜的通透性,不引起細胞溶解或死亡。steadystateinfection病毒不斷從感染20細胞凋亡細胞凋亡以細胞質(zhì)收縮,核染色體裂解核凋亡小體形成為特征。細胞凋亡21病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件22病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件23病毒感染的間接作用1、組織器官的損傷親嗜性受染細胞膜改變受染組織細胞炎癥病毒感染的間接作用1、組織器官的損傷242、免疫病理損傷體液免疫的損傷作用循環(huán)-免疫復(fù)合物引起的~細胞免疫的~自身免疫應(yīng)答引起的~2、免疫病理損傷25宿主的抗病毒免疫(一)非特異性抗病毒免疫(二)特異性抗病毒免疫宿主的抗病毒免疫(一)非特異性抗病毒免疫26非特異性抗病毒免疫(一)先天不感受性(二)屏障作用(三)非特異性細胞作用(四)干擾素及其作用非特異性抗病毒免疫(一)先天不感受性27干擾現(xiàn)象、干擾素干擾現(xiàn)象(Interference)當(dāng)二種病毒感染同一細胞時,一種病毒可以增殖,而另一種病毒則被抑制,這種現(xiàn)象~。干擾素(Interferon,IFN)一種能干擾病毒增殖的物質(zhì)稱為~。干擾現(xiàn)象、干擾素干擾現(xiàn)象(Interference)28干擾素的性質(zhì)和種類性質(zhì):由病毒或其他干擾素誘生劑(polyI:C),刺激機體多種細胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白,作用于機體細胞,表現(xiàn)抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用。干擾素的性質(zhì)和種類性質(zhì):29種類:

Ⅰ型—α、β、ω。Ⅱ型—γ。α型(人白細胞);β型(其他細胞);ω型(白細胞);γ型(T細胞)。種類:30病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件31干擾素的生物效應(yīng)1、具嚴格種屬特異性2、Ⅰ型抗病毒作用強,具廣泛性;Ⅱ型抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)作用強(活化NK、Tc;增加MIC-Ⅰ類分子;抑制DNA合成)。干擾素的生物效應(yīng)1、具嚴格種屬特異性32特異性抗病毒免疫(一)體液免疫的抗病毒作用(二)細胞免疫的抗病毒作用(三)抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時間(四)免疫病理作用特異性抗病毒免疫(一)體液免疫的抗病毒作用33體液免疫的抗病毒作用1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白IgMIgGIgA2、抗體對靶細胞的作用體液免疫的抗病毒作用1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白34中和作用和中和抗體中和作用:抗體與病毒結(jié)合,阻止病毒的吸附與穿入,保護細胞免受病毒感染,也有效防止病毒的血行播散,這種保護作用稱~。中和作用和中和抗體中和作用:35中和抗體:機體接受病毒感染或疫苗接種后體內(nèi)出現(xiàn)的具有中和作用的特異性抗體稱~。

中和抗體:36細胞免疫的抗病毒作用對進入細胞內(nèi)的病毒加以清除。發(fā)揮作用細胞:遲發(fā)性超敏反應(yīng)T細胞(TH)殺傷性T細胞(Tc或CTL)。作用機制:(略)細胞免疫的抗病毒作用對進入細胞內(nèi)的病毒加以清除。37抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時間1、病毒感染后誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生,早但維時短。特異性抗體IgM早現(xiàn),早消;IgG隨后,維時長。2、新生兒從母體獲得(經(jīng)胎盤)IgG(母乳)IgA,維時6個月。3、抗病毒免疫持續(xù)時間隨感染病毒種類而異??共《久庖邞?yīng)答的形成和持續(xù)時間1、病毒感染后誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生,38病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件391、殺傷靶細胞時,細胞損傷,炎癥。2、抗病毒抗體親和力低、抗原-抗體比例不合適,沉積基底膜引發(fā)超敏反應(yīng)。3、受染細胞膜抗原性改變,隱蔽抗原暴露引發(fā)自身免疫病。

免疫病理作用

1、殺傷靶細胞時,細胞損傷,炎

免疫病理作用

40病毒感染的實驗室診斷技術(shù)病毒感染的實驗室診斷技術(shù)411、病毒感染實驗室診斷的意義:指導(dǎo)臨床病毒性疾病的診斷,指導(dǎo)臨床病毒性疾病的治療,為控制病毒性疾病的流行制定有效措施。1、病毒感染實驗室診斷的意義:422、病毒性疾病實驗室診斷技術(shù):病毒的分離與鑒定病毒的血清學(xué)診斷分子病毒學(xué)的檢測病毒感染的快速診斷2、病毒性疾病實驗室診斷技術(shù):43病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件44人類病毒的感染途徑感染途徑:呼吸道感染消化道感染經(jīng)皮膚(蟲媒)感染眼及泌尿生殖道感染胎內(nèi)(垂直)與產(chǎn)道感染人類病毒的感染途徑感染途徑:45傳播方法及媒介:空氣飛沫、痰、唾液、皮屑飲食物(糞便污染)昆蟲叮咬、動物咬傷、注射輸血、刺破皮膚面盆、澡盆、毛巾、分娩、尿經(jīng)胎盤或出生時經(jīng)產(chǎn)道感染傳播方法及媒介:46標(biāo)本的采集、處理與運送(一)標(biāo)本的采集、處理:采集的時間采集的種類采集的方法采集后的處理標(biāo)本的采集、處理與運送(一)標(biāo)本的采集、處理:47(二)標(biāo)本的運送和保存立即送檢冷藏快送低溫暫存-70℃加DMSO/甘油

(二)標(biāo)本的運送和保存48病毒形態(tài)學(xué)檢查(一)普通光學(xué)顯微鏡:大病毒顆粒、包涵體(二)電子顯微鏡:直接法(負染)間接法(免疫)(三)X線晶體衍射法病毒形態(tài)學(xué)檢查(一)普通光學(xué)顯微鏡:49包涵體:

含義、特征、意義。包涵體:

含義、特征、意義。50電鏡(負染)電鏡(負染)51脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩基病毒脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩基病毒52病毒顆粒大小的測定(一)電子顯微鏡直接測量(二)超過濾法(三)超速離心法病毒顆粒大小的測定53病毒的分離與鑒定(一)雞胚接種(二)組織細胞接種(三)動物接種病毒的分離與鑒定54雞胚接種:雞胚接種:55病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件56雞胚接種途徑有:羊膜腔—流感病毒尿囊腔—流感病毒、腮腺炎病毒絨毛尿囊膜—皰疹病毒、痘病毒卵黃囊—乙型腦炎病毒雞胚接種途徑有:57組織細胞接種(1)原代和次代細胞(2)二倍體細胞:經(jīng)多次連續(xù)傳代仍保持其二倍染色體特征~(3)傳代細胞:可無限傳代~組織細胞接種(1)原代和次代細胞58病毒在細胞中增殖的指標(biāo)(1)細胞病變(CPE)(2)紅細胞吸附(3)干擾現(xiàn)象(4)細胞代謝改變病毒在細胞中增殖的指標(biāo)(1)細胞病變(CPE)59組織細胞接種:

A:正常猴腎單層上皮細胞B:繼續(xù)培養(yǎng)的正常猴腎單層上

C:MRC-5成纖維雙倍體細胞D:繼續(xù)培養(yǎng)的成纖維雙倍體細胞組織細胞接種:

A:正常猴腎單層上皮細胞B60病毒致細胞病變效應(yīng)(CPE)

A:正常Hep-2單層細胞B:腺病毒感染,細胞腫脹變圓,呈葡萄串狀C:副流感病毒III感染,細胞變圓呈合胞現(xiàn)象病毒致細胞病變效應(yīng)(CPE)

A:正常Hep-2單層細胞61病毒的數(shù)量與感染性的確定蝕斑測定:細胞準備稀釋病毒相對固定記數(shù)換算病毒的數(shù)量與感染性的確定蝕斑測定:6250%感染量(ID50)或50%組織感染量(TCID50):用使半數(shù)動物或組織細胞感染劑量,以表示病毒感染性的強弱及含量。50%感染量(ID50)63動物接種試驗敏感動物適宜途徑觀察指標(biāo)動物接種試驗敏感動物64新分離病毒的鑒定1、病毒核酸類型的測定2、病毒理化性狀的檢測3、病毒的血清學(xué)鑒定新分離病毒的鑒定1、病毒核酸類型的測定65病毒的血清學(xué)檢測病毒的血清學(xué)檢測66方法:中和試驗補體結(jié)合試驗血凝及血凝抑制試驗?zāi)z免疫擴散免疫組織化學(xué)法ELISA法及其他方法:67中和試驗:原理—用特異性抗體中和病毒的致病性或感染性的試驗。用途—鑒定病毒、分析病毒抗原的性質(zhì)、免疫血清的抗體效價、疫苗接種療效以及待檢樣本中的抗體輔助診斷。中和試驗:68補體結(jié)合試驗:原理—特異性病毒抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物時能結(jié)合補體。用途—流行病學(xué)調(diào)查(操作繁瑣、特異性低、維時短,呈淘汰趨勢)補體結(jié)合試驗:69血凝及血凝抑制試驗:原理—某些病毒或病毒血凝素能選擇性地引起個別種類的哺乳動物的RBC凝集(血凝),當(dāng)加入相應(yīng)的特異性抗體時,上述凝集現(xiàn)象被抑制(血凝抑制)。用途—病毒鑒定、病毒分型、輔助診斷。血凝及血凝抑制試驗:70機理結(jié)果機理結(jié)果71原理:結(jié)果原理:結(jié)果72凝膠免疫擴散:原理—以半固體瓊脂糖為載體,在其上面進行抗原、抗體的沉淀反應(yīng)。用途—病毒鑒定、輔助診斷等(被新型方法、技術(shù)替代)凝膠免疫擴散:73病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件74相同不同交叉相同不同75免疫組織化學(xué)法:原理—利用標(biāo)記抗體直接對樣本中病毒抗原的存在與否進行檢測;標(biāo)記抗體為特異性抗體(一抗)時,稱直接法,標(biāo)記抗體為二抗時則稱間接法。(熒光、酶或放射性同位素等)免疫組織化學(xué)法:76用途—檢測標(biāo)本中的病毒抗原,可對病毒抗原作定性的同時可抗原作定位和分布的分析。用途—檢測標(biāo)本中的病毒抗原,77病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件78酶聯(lián)免疫吸附試驗:原理—用酶標(biāo)記的抗體或抗抗體(二抗)來檢測標(biāo)本中病毒抗原或血清中病毒抗體用途—檢測病毒特異性抗原或抗體,疾病輔助診斷。酶聯(lián)免疫吸附試驗:79病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件80其他:發(fā)光免疫分析技術(shù)固相放射免疫測定膠體金標(biāo)記免疫層析等等其他:81病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件82

病毒的分子生物學(xué)檢測

83分子雜交技術(shù):原理—利用DNA雙鏈分子的堿基是互補的,在高溫和變性劑存在時可解鏈,遇低溫時又可復(fù)性(雙鏈)的特性,在復(fù)性時加入示蹤物~分子雜交技術(shù):84常用的方法:斑點雜交固相雜交原位雜交Southern/northern印跡分支DNA技術(shù)

常用的方法:85聚合酶鏈反應(yīng)(PCR):原理—選擇特異性引物,通過多個熱變性-復(fù)性-延伸的循環(huán)過程,在體外由酶促擴增待檢的DNA/RNA片段用途—疾病的輔助診斷、病毒的鑒定。聚合酶鏈反應(yīng)(PCR):86常用技術(shù):巢/半巢式PCR多重PCR逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)定量PCR原位PCRRNA捕獲PCR等

常用技術(shù):87病毒感染與宿主免疫

病毒感染的實驗室診斷技術(shù)病毒感染與宿主免疫

病毒感染的實驗室診斷技術(shù)88病毒感染:病毒侵入人體并在

體內(nèi)增殖,與機體

發(fā)生相互作用的過程~。病毒感染:病毒侵入人體并在

89病毒性疾?。簷C體感染病毒后,由于入侵病毒特性、機體反應(yīng)狀態(tài)不同,引發(fā)臨床癥狀且具病毒感染特征的疾病~病毒性疾?。簷C體感染病毒90病毒感染的方式病毒感染的方式911、Horizontaltransmission(人——人)(表面接觸、血液制品)2、Verticaltransmission(親代——子代)(胎盤、產(chǎn)道)1、Horizontaltransmission92病毒的感染類型:(一)1napparentinfection(二)apparentinfection1、acuteinfection2、persistentinfection(三)致腫瘤作用

病毒的感染類型:93Persistentinfection:(1)latentviralinfection(2)chronicviralinfection(3)slowviralinfection(4)delayedcomplicationafteracuteviralinfectionPersistentinfection:94latentviralinfection潛伏性病毒感染:病毒感染后只是以病毒的基因或基因產(chǎn)物的形式長期潛伏于組織或細胞內(nèi),不產(chǎn)生病毒顆粒,不引發(fā)臨床癥狀。但有可能被激活組成新病毒顆粒引起致病。latentviralinfection潛伏性病毒感染:95

chronicviralinfection

慢性病毒感染:病毒感染后(顯、隱性),病毒長期在體內(nèi)未被清除,可間歇性復(fù)制,持續(xù)性排毒,導(dǎo)致感染病程漫長~

chronicviralinfection

慢性病毒感96

slowviralinfection

慢發(fā)病毒感染(遲發(fā)病毒感染):病毒感染后潛伏期很長(數(shù)月、數(shù)年或數(shù)十年)。此期機體無癥狀,病毒未能分離。一旦癥狀出現(xiàn),多表現(xiàn)為亞急性進行性,最終導(dǎo)致死亡。

slowviralinfection

慢發(fā)病毒感染(遲97

delayedcomplication

afteracuteviralinfection

急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥:急性病毒性感染后1年或數(shù)年,發(fā)生致死性的病毒病~

delayedcomplication

after98病毒致腫瘤作用動物實驗病毒的生物學(xué)特性病毒感染與腫瘤發(fā)生、發(fā)展腫瘤組織證明病毒基因病毒致腫瘤作用動物實驗99引起人類惡性腫瘤的病毒病毒:逆轉(zhuǎn)錄病毒人類嗜T淋巴細胞病毒1型(HTLV-1)DNA病毒EB病毒單純皰疹病毒Ⅱ型(HSV-2)人乳頭瘤病毒(HPV)乙型肝炎病毒(HBV)引起人類惡性腫瘤的病毒病毒:100與病毒感染相關(guān)的腫瘤所致腫瘤:成人T細胞白血病/淋巴瘤Burkitts淋巴瘤鼻咽癌皮膚癌子宮頸癌肝癌與病毒感染相關(guān)的腫瘤所致腫瘤:101病毒的整合感染病毒的DNA和或逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA整合在宿主細胞染色體上,可通過其編碼蛋白引起細胞轉(zhuǎn)化,發(fā)生細胞形態(tài)學(xué)變化,喪失其接觸抑制的特性,導(dǎo)致細胞增生,并在細胞膜上出現(xiàn)新的腫瘤移植抗原。病毒的整合感染病毒的DNA和或逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA整102病毒的致病機理(一)病毒對宿主細胞的直接作用(病毒毒性)(二)病毒感染引起的機體變化(免疫病理)病毒的致病機理(一)病毒對宿主細胞的直103病毒的直接作用1、cytocidaleffect(殺細胞效應(yīng))2、steadystateinfection(穩(wěn)定狀態(tài)感染)3、cellapotosis(細胞凋亡)4、inclusionformation(包涵體的形成)病毒的直接作用1、cytocidaleffect104病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件105病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件106steadystateinfection病毒不斷從感染細胞釋放,但細胞的新成代謝核分裂不受影響,也不改變?nèi)苊阁w膜的通透性,不引起細胞溶解或死亡。steadystateinfection病毒不斷從感染107細胞凋亡細胞凋亡以細胞質(zhì)收縮,核染色體裂解核凋亡小體形成為特征。細胞凋亡108病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件109病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件110病毒感染的間接作用1、組織器官的損傷親嗜性受染細胞膜改變受染組織細胞炎癥病毒感染的間接作用1、組織器官的損傷1112、免疫病理損傷體液免疫的損傷作用循環(huán)-免疫復(fù)合物引起的~細胞免疫的~自身免疫應(yīng)答引起的~2、免疫病理損傷112宿主的抗病毒免疫(一)非特異性抗病毒免疫(二)特異性抗病毒免疫宿主的抗病毒免疫(一)非特異性抗病毒免疫113非特異性抗病毒免疫(一)先天不感受性(二)屏障作用(三)非特異性細胞作用(四)干擾素及其作用非特異性抗病毒免疫(一)先天不感受性114干擾現(xiàn)象、干擾素干擾現(xiàn)象(Interference)當(dāng)二種病毒感染同一細胞時,一種病毒可以增殖,而另一種病毒則被抑制,這種現(xiàn)象~。干擾素(Interferon,IFN)一種能干擾病毒增殖的物質(zhì)稱為~。干擾現(xiàn)象、干擾素干擾現(xiàn)象(Interference)115干擾素的性質(zhì)和種類性質(zhì):由病毒或其他干擾素誘生劑(polyI:C),刺激機體多種細胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白,作用于機體細胞,表現(xiàn)抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用。干擾素的性質(zhì)和種類性質(zhì):116種類:

Ⅰ型—α、β、ω。Ⅱ型—γ。α型(人白細胞);β型(其他細胞);ω型(白細胞);γ型(T細胞)。種類:117病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件118干擾素的生物效應(yīng)1、具嚴格種屬特異性2、Ⅰ型抗病毒作用強,具廣泛性;Ⅱ型抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)作用強(活化NK、Tc;增加MIC-Ⅰ類分子;抑制DNA合成)。干擾素的生物效應(yīng)1、具嚴格種屬特異性119特異性抗病毒免疫(一)體液免疫的抗病毒作用(二)細胞免疫的抗病毒作用(三)抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時間(四)免疫病理作用特異性抗病毒免疫(一)體液免疫的抗病毒作用120體液免疫的抗病毒作用1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白IgMIgGIgA2、抗體對靶細胞的作用體液免疫的抗病毒作用1、具有抗病毒作用的免疫球蛋白121中和作用和中和抗體中和作用:抗體與病毒結(jié)合,阻止病毒的吸附與穿入,保護細胞免受病毒感染,也有效防止病毒的血行播散,這種保護作用稱~。中和作用和中和抗體中和作用:122中和抗體:機體接受病毒感染或疫苗接種后體內(nèi)出現(xiàn)的具有中和作用的特異性抗體稱~。

中和抗體:123細胞免疫的抗病毒作用對進入細胞內(nèi)的病毒加以清除。發(fā)揮作用細胞:遲發(fā)性超敏反應(yīng)T細胞(TH)殺傷性T細胞(Tc或CTL)。作用機制:(略)細胞免疫的抗病毒作用對進入細胞內(nèi)的病毒加以清除。124抗病毒免疫應(yīng)答的形成和持續(xù)時間1、病毒感染后誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生,早但維時短。特異性抗體IgM早現(xiàn),早消;IgG隨后,維時長。2、新生兒從母體獲得(經(jīng)胎盤)IgG(母乳)IgA,維時6個月。3、抗病毒免疫持續(xù)時間隨感染病毒種類而異??共《久庖邞?yīng)答的形成和持續(xù)時間1、病毒感染后誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生,125病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件1261、殺傷靶細胞時,細胞損傷,炎癥。2、抗病毒抗體親和力低、抗原-抗體比例不合適,沉積基底膜引發(fā)超敏反應(yīng)。3、受染細胞膜抗原性改變,隱蔽抗原暴露引發(fā)自身免疫病。

免疫病理作用

1、殺傷靶細胞時,細胞損傷,炎

免疫病理作用

127病毒感染的實驗室診斷技術(shù)病毒感染的實驗室診斷技術(shù)1281、病毒感染實驗室診斷的意義:指導(dǎo)臨床病毒性疾病的診斷,指導(dǎo)臨床病毒性疾病的治療,為控制病毒性疾病的流行制定有效措施。1、病毒感染實驗室診斷的意義:1292、病毒性疾病實驗室診斷技術(shù):病毒的分離與鑒定病毒的血清學(xué)診斷分子病毒學(xué)的檢測病毒感染的快速診斷2、病毒性疾病實驗室診斷技術(shù):130病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件131人類病毒的感染途徑感染途徑:呼吸道感染消化道感染經(jīng)皮膚(蟲媒)感染眼及泌尿生殖道感染胎內(nèi)(垂直)與產(chǎn)道感染人類病毒的感染途徑感染途徑:132傳播方法及媒介:空氣飛沫、痰、唾液、皮屑飲食物(糞便污染)昆蟲叮咬、動物咬傷、注射輸血、刺破皮膚面盆、澡盆、毛巾、分娩、尿經(jīng)胎盤或出生時經(jīng)產(chǎn)道感染傳播方法及媒介:133標(biāo)本的采集、處理與運送(一)標(biāo)本的采集、處理:采集的時間采集的種類采集的方法采集后的處理標(biāo)本的采集、處理與運送(一)標(biāo)本的采集、處理:134(二)標(biāo)本的運送和保存立即送檢冷藏快送低溫暫存-70℃加DMSO/甘油

(二)標(biāo)本的運送和保存135病毒形態(tài)學(xué)檢查(一)普通光學(xué)顯微鏡:大病毒顆粒、包涵體(二)電子顯微鏡:直接法(負染)間接法(免疫)(三)X線晶體衍射法病毒形態(tài)學(xué)檢查(一)普通光學(xué)顯微鏡:136包涵體:

含義、特征、意義。包涵體:

含義、特征、意義。137電鏡(負染)電鏡(負染)138脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩基病毒脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩基病毒139病毒顆粒大小的測定(一)電子顯微鏡直接測量(二)超過濾法(三)超速離心法病毒顆粒大小的測定140病毒的分離與鑒定(一)雞胚接種(二)組織細胞接種(三)動物接種病毒的分離與鑒定141雞胚接種:雞胚接種:142病毒感染與宿主免疫病毒感染的實驗室診斷技術(shù)課件143雞胚接種途徑有:羊膜腔—流感病毒尿囊腔—流感病毒、腮腺炎病毒絨毛尿囊膜—皰疹病毒、痘病毒卵黃囊—乙型腦炎病毒雞胚接種途徑有:144組織細胞接種(1)原代和次代細胞(2)二倍體細胞:經(jīng)多次連續(xù)傳代仍保持其二倍染色體特征~(3)傳代細胞:可無限傳代~組織細胞接種(1)原代和次代細胞145病毒在細胞中增殖的指標(biāo)(1)細胞病變(CPE)(2)紅細胞吸附(3)干擾現(xiàn)象(4)細胞代謝改變病毒在細胞中增殖的指標(biāo)(1)細胞病變(CPE)146組織細胞接種:

A:正常猴腎單層上皮細胞B:繼續(xù)培養(yǎng)的正常猴腎單層上

C:MRC-5成纖維雙倍體細胞D:繼續(xù)培養(yǎng)的成纖維雙倍體細胞組織細胞接種:

A:正常猴腎單層上皮細胞B147病毒致細胞病變效應(yīng)(CPE)

A:正常Hep-2單層細胞B:腺病毒感染,細胞腫脹變圓,呈葡萄串狀C:副流感病毒III感染,細胞變圓呈合胞現(xiàn)象病毒致細胞病變效應(yīng)(CPE)

A:正常Hep-2單層細胞148病毒的數(shù)量與感染性的確定蝕斑測定:細胞準備稀釋病毒相對固定記數(shù)換算病毒的數(shù)量與感染性的確定蝕斑測定:14950%感染量(ID50)或50%組織感染量(TCID50):用使半數(shù)動物或組織細胞感染劑量,以表示病毒感染性的強弱及含量。50%感染量(ID50)150動物接種試驗敏感動物適宜途徑觀察指標(biāo)動物接種試驗敏感動物151新分離病毒的鑒定1、病毒核酸類型的測定2、病毒理化性狀的檢測3、病毒的血清學(xué)鑒定新分離病毒的鑒定1、病毒核酸類型的測定152病毒的血清學(xué)檢測病毒的血清學(xué)檢測153方法:中和試驗補體結(jié)合試驗血凝及血凝抑制試驗?zāi)z免疫擴散免疫組織化學(xué)法ELISA法及其他方法:154中和試驗:原理—用特異性抗體中和病毒的致病性或感染性的試驗。用途—鑒定病毒、分析病毒抗原的性質(zhì)、免疫血清的抗體效價、疫苗接種療效以及待檢樣本中的抗體輔助診斷。中和試驗:155補體結(jié)合試驗:原理—特異性病毒抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物時能結(jié)合補體。用途—流行病學(xué)調(diào)查(操作繁瑣、特異性低、維時短,呈淘汰趨勢)補體結(jié)合試驗:156血凝及血凝抑制試驗:原理—某些病毒或病毒血

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