轉基因動物與應用

轉基因動物及其在醫(yī)藥

行業(yè)中的應用指導教師：楊凌1806組欒宏偉SeminarI1報告內容轉基因動物的概念及技術手段轉基因動物在醫(yī)藥行業(yè)的應用展望2什么是轉基因動物轉基因動物是指用實驗導入的方法將外源基因在染色體基因內穩(wěn)定整合并能穩(wěn)定表達的一類動物。（包括基因敲除的動物）3外源基因導入的時機（Ⅰ）初期生殖細胞的改造；（Ⅱ）將DNA或基因結構用微注射技 術注射到受精卵中；（Ⅲ）將改造的細胞（包括胚胎干細胞） 融合到后期胚胎。精子卵子受精卵胚胎干細胞4轉基因的技術手段

（Ⅰ）DNA顯微注射（Ⅱ）核轉移技術（克?。á螅┡咛ジ杉毎夹g（Ⅳ）逆轉錄病毒介導的基因轉移（Ⅴ）RNA干擾（Ⅵ）精子作為載體5轉基因的技術手段6一、DNA顯微注射技術?2003JohnWileyandSonsPublishers優(yōu)缺點：1.可靠性高、重復性好2.對于小鼠來說，產生轉基因動物的效率比較高3.導入DNA片段的大小和類型不受限制4.轉基因在代與代之間傳遞的穩(wěn)定性好5.整合位點的隨意性可能對轉基因表達造成影響6.可能會出現(xiàn)不希望的插入突變7.開發(fā)裝置和技術的花費大時間長1980PNAS77,7380-73847二、核移植技術優(yōu)點：轉基因效率顯著超過顯微注射可以方便的建立生產畜群可以預測基因表達水平可以使用定點整合目標基因的技術方法處理胚胎數(shù)移植數(shù)生產牛犢數(shù)轉基因牛數(shù)顯微注射115411541292克隆法2763333顯微法和克隆法效率比較1997Nature385,810–8138三、胚胎干細胞技術(1993)Nature365,87–899四、逆轉錄病毒介導的基因轉染缺點：低拷貝數(shù)需要逆轉錄病毒插入DNA大小有限可能產生不希望的重組高頻的鑲嵌現(xiàn)象逆轉錄病毒的序列可能干擾轉基因表達(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.82,6148–615210五、RNA干擾技術(1998)Nature391,806–81111六、精子介導法將外源DNA與精子一起孵育，精子可捕獲外源DNA，并通過受精過程將外源DNA導入受精卵。此法不僅可免去復雜而昂貴的設備，且可省去不少繁雜的操作和條件準備。但該法有些結果不能重復。Lavitrano,M.etal.(1989)SpermcellsasvectorsforintroducingforeignDNAintoeggs:genetictransformationofmice.Cell57,717–72312小結13轉基因動物在醫(yī)藥行業(yè)中的應用人類疾病造模藥物產品的生產異種移植14人類疾病造模動物模型對疾病產生機理和治療是必不可少的工具利用轉基因動物可以創(chuàng)造出多種動物模型轉基因動物用于發(fā)病機理研究的例子：AD對AD患者死亡后腦部解剖發(fā)現(xiàn)腦部存積了一種β淀粉狀蛋白的蛋白質將人類β淀粉狀蛋白的基因轉到大鼠體內使其發(fā)病，再清除β淀粉狀蛋白，發(fā)現(xiàn)確實能夠減慢甚至停止病情。

(1991)Science253,323–325(2004)Mol.Psychiatry9,664–68315藥物產品的生產主要通過乳腺生產（動物乳腺生物反應器），少數(shù)通過腎臟和膀胱。1999年，只有三種產品進入臨床實驗；到2004年，已經(jīng)有40多種進入臨床實驗或即將進入市場。2005DDT10,757-76716異種移植豬的臟器移植給人，會發(fā)生超急性排斥反應。轉基因技術生產能降低或掩蓋半乳糖基轉移酶活性的轉基因豬。(2002).Science295,1089–109217展望18尚待解決的問題轉基因動物的成功率較低。目的基因在宿主染色體的整合及其特異性表達問題。產品純化問題。安全性問題。19前景轉基因動物制藥（乳腺生物反應器）是21世紀生物醫(yī)