抗核抗體譜免疫印跡法課件

抗核抗體譜檢測及其臨床意義抗核抗體譜檢測及其臨床意義課程章節(jié)單擊添加文本……抗核抗體譜的定義1單擊添加文本……自身免疫性疾病與ANAs的相關(guān)性2抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的臨床意義抗核抗體譜的檢測及意義3課程單擊添加文本……抗核抗體譜的定義1單擊添加文本…抗核抗體譜的定義第一章單擊添加文本……抗核抗體譜的定義1抗核抗體譜的定義第一章單擊添加文本……抗核抗體譜的定義1抗核抗體譜的定義傳統(tǒng)定義：針對細(xì)胞核成分的自身抗體的總稱。多核苷酸：dsDNA，ssDNA，RNA組蛋白：H1,H2A,H2B,H3,H4,H2A-H2B復(fù)合體核漿中的核糖核蛋白（ENA）：Sm,nRNP,SSA/Ro,SSB/La核仁抗原：U3-nRNP/Fibrillaria，PM-Scl/PM-1，7-2-RNP/To，4-6-S-RNA著絲點：著絲點蛋白其他蛋白：Scl-70,PCNA，核點,Mi-1,Mi-2,Ku，板層素，NOR-90根據(jù)細(xì)胞核內(nèi)靶抗原分子理化特性和分布部位分類：抗核抗體譜的定義傳統(tǒng)定義：多核苷酸：dsDNA，ssDNA抗核抗體譜的定義廣義定義：指抗細(xì)胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體的總稱。對ANA的理解已不再局限于核成分，而是指抗核酸（nucleicacid）和核蛋白（nucleoprotein）抗體的總稱。整個細(xì)胞，包括細(xì)胞核、細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架、細(xì)胞分裂周期蛋白等?？购丝贵w譜的定義廣義定義：指抗細(xì)胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體的自身免疫性疾病與ANAs的相關(guān)性第二章單擊添加文本……自身免疫性疾病與ANAs的相關(guān)性2自身免疫性疾病與ANAs的相關(guān)性第二章單擊添加文本……自慢性炎癥性結(jié)締組織病干燥綜合征(SS)SS-AandSS-B慢性炎癥性結(jié)締組織病(CICTD)夏普綜合征(MCTD)nRNP系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)dsDNA慢性炎癥性結(jié)締組織病(CICTD)系統(tǒng)性硬化癥(SSc)Scl-70andCenpB多肌炎/皮肌炎(PM/DM)MyositisProfileANCA相關(guān)性血管炎慢性炎癥性結(jié)締組織病干燥綜合征(SS)SS-Aand系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種多發(fā)于青年女性的累及多臟器的自身免疫性炎癥性結(jié)締組織病，早期、輕型和不典型的病例日漸增多。有些重癥患者（除患者有彌漫性增生性腎小球腎炎者外），有時亦可自行緩解。有些患者呈“一過性”發(fā)作，經(jīng)過數(shù)月的短暫病程后疾病可完全消失。系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）關(guān)節(jié)炎(至少2個關(guān)節(jié)以上受累;96%)血液系統(tǒng)受累(貧血等;

60%)狼瘡腎炎(51%)漿膜炎(胸膜炎,心包炎;

77%)神經(jīng)系統(tǒng)受累(30%)皮膚(蝴蝶狀皮疹,盤狀狼瘡;

74%)SLE在臨床上各器官受累的表現(xiàn)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）關(guān)節(jié)炎(至少2個關(guān)節(jié)以上血液系統(tǒng)受ANAs與系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的相關(guān)性系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）中的自身抗體抗原陽性率雙鏈DNA60-90%單鏈DNA70-95%RNA50%組蛋白95%U1-nRNP15-40%Sm5-40%SS-A（Ro）20-60%SS-B（La）10-20%細(xì)胞周期蛋白（PCNA）3%Ku10%核糖體P蛋白（rRNP）10%熱休克蛋白90kDA：Hsp-9050%心磷脂40-60%ANAs與系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的相關(guān)性系統(tǒng)性紅斑狼瘡（S類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種病因未明的慢性、以炎性滑膜炎為主的系統(tǒng)性疾病。其特征是手、足小關(guān)節(jié)的多關(guān)節(jié)、對稱性、侵襲性關(guān)節(jié)炎癥，經(jīng)常伴有關(guān)節(jié)外器官受累及血清類風(fēng)濕因子陽性，可以導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形及功能喪失。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是ANAs與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）的相關(guān)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的抗核抗體抗原陽性率組蛋白15-50%單鏈DNA（ssDNA）8%U1-nRNP3%RANA90-95%ANAs與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）的相關(guān)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的抗核抗干燥綜合征（SS）腮腺腫脹口腔干燥外分泌腺受累的自身免疫疾病癥狀:-口腔干燥

-唾液及眼淚減少

-腮腺腫脹

-胰腺外分泌腺分泌不足干燥綜合征（SS）腮腺腫脹口腔干燥外分泌腺受累的自身免疫疾病ANAs與干燥綜合征（SS）的相關(guān)性原發(fā)性干燥綜合征中的自身抗體抗原陽性率SS-A（Ro）40-95%SS-B（La）40-95%單鏈DNA（ss-DNA）13%RANA70%唾液腺分泌管40-60%類風(fēng)濕因子60-80%ANAs與干燥綜合征（SS）的相關(guān)性原發(fā)性干燥綜合征中的自身多發(fā)性肌炎（PM）及皮肌炎（DM）皮膚與肌肉受累的自身免疫疾病癥狀:-肌肉疼痛/肌無力(如：肩膀/骨盆)皮膚癥狀:膝蓋/手指關(guān)節(jié)處皮膚異變紅斑皮膚褪色多發(fā)性肌炎（PM）及皮肌炎（DM）皮膚與肌肉受累的自身免疫疾ANAs與多發(fā)性肌炎（PM）及皮肌炎（DM）的相關(guān)性多肌炎和皮肌炎抗原陽性率PM-Scl（PM-1）50-70%Jo-1（組氨酰-tRNA合成酶）25-35%Mi-110%Mi-25%Ku50%單鏈AND（ss-DNA）40-50%PL-7（蘇氨酰-tRNA合成酶）4%PL-12（丙氨酰-tRNA合成酶）3%ANAs與多發(fā)性肌炎（PM）及皮肌炎（DM）的相關(guān)性多肌炎和進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（SSc）指端硬化，爪型手面具臉毛細(xì)血管擴張

皮膚鈣質(zhì)沉著血管與結(jié)締組織受累的自身免疫疾病癥狀: -指端硬化(thin,scleroticfingers) -爪型手

-面具臉(嘴周邊出現(xiàn)皺紋,嘴唇變薄) -毛細(xì)血管擴張(表面血管永久性擴張) -表皮鈣質(zhì)沉著(血管壁與皮膚鈣化)進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（SSc）指端硬化，爪型手面具臉毛細(xì)血管擴ANAs與進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（SSc）的相關(guān)性彌漫性進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（DSSC）抗原陽性率原纖維蛋白5-10%PM-Scl（PM-1）50-70%Scl-7025-75%RNA多聚酶Ⅰ4%7-2-RNP（To）罕見NOR-90（核仁形成區(qū)）罕見局限性進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（LSSC）抗原陽性率著絲點80-95%ANAs與進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（SSc）的相關(guān)性彌漫性進(jìn)行性系抗核抗體譜的檢測及意義第三章抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的臨床意義抗核抗體譜的檢測及意義3抗核抗體譜的檢測及意義第三章抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的檢測采用免疫印跡法（ImmunoblottingTest,IBT）,用于定性檢測人血清中抗核抗體譜共15中抗體。條膜上平行包被了經(jīng)純化的抗核抗體譜中要檢測的抗原及質(zhì)控帶。第一次孵育時，已稀釋的病人樣本與膜條上的抗原反應(yīng)。如果樣本陽性，特異性的IgG抗體將與相應(yīng)的抗原結(jié)合。為檢測已結(jié)合的抗體，在加入酶標(biāo)羊抗人IgG（堿性磷酸酶結(jié)合物）第二次孵育，然后加入底物液以產(chǎn)生藍(lán)紫色顏色反應(yīng)?？购丝贵w譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的檢測采用免疫印跡法（I抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗U1-nRNP與Sm抗體靶抗原：位于細(xì)胞核內(nèi)的一組含尿嘧啶豐富的核糖核蛋白，Sm和U1RNP是同一分子復(fù)合物中的不同位點。Sm含有u1、u2和u4-u6，而nRNP(u1RNP)僅含u1RNA。也即抗Sm抗體陽性均伴有抗u1RNP抗體，而抗u1RNP抗體可以單獨存在?？筓1-nRNP與Sm抗體靶抗原：位于細(xì)胞核內(nèi)的一組含尿嘧啶抗U1-nRNP與Sm抗體

抗Sm：SLE的標(biāo)記性抗體，是前瞻性及回顧性診斷的指標(biāo)。陽性率低：SLE（30%）抗U1RNP：多種CTD均可出現(xiàn)，與手指腫脹、雷諾現(xiàn)象、肌炎、指端硬化等相關(guān)，但腎炎發(fā)生率低。陽性率：40-60%，其中SLE(30-40%),SSc(14%),pSS(12%),PM/DM(15%)高滴度抗U1RNP+抗Sm-MCTD抗U1RNP+抗Sm+SLE抗U1RNP-抗Sm+實驗室誤差?U1RNP丟失?抗U1-nRNP與Sm抗體抗Sm：SLE的標(biāo)記性抗體抗SS-A/Ro-52抗體RNA+SS-A(60kDa)hY-RNAhY-RNARNA+SS-A(60kDa)+Ro-52Boireetal.,1995:-Ro-52抗體不與SS-A抗原結(jié)合-純化的SS-A抗原不包含Ro-52抗SS-A/Ro-52抗體RNA+SS-A(60kD抗SS-A/Ro-52抗體抗SS-A(60kDa)和抗Ro-52總是分開檢測!WHY？抗SS-A/Ro-52抗體抗SS-A(60kDa)和抗R抗SS-A/Ro-52抗體-天然SS-A=RNA+SS-A60kDa蛋白質(zhì)–無需Ro-52。

-Ro-52并非SLE或SS患者診斷所需抗體。-SS-A60和Ro-52抗原的混合包被會降低SSA抗體的疾病特異性。-歐蒙產(chǎn)品始終分別檢測SS-A60和Ro-52?？筍S-A/Ro-52抗體-天然SS-A=RNA+抗SS-A/Ro-52抗體抗Ro-52抗體:不同組別中均可出現(xiàn)抗SS-A/Ro-52抗體抗Ro-52抗體:不同組別中均可出抗SS-B抗體在原發(fā)性SS病人中，抗SSA/Ro和抗SSB/La陽性率分別為60%和40%，它們是診斷干燥綜合征的血清學(xué)標(biāo)志。抗SSB抗體較抗SSA抗體診斷干燥綜合征更為特異。免疫擴散法與免疫印跡法（WesternBlot）得出的結(jié)果常常不一致。SSA和抗SSB抗體陽性可造成新生兒狼瘡及嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯等先天性心臟病?？筍SA和抗SSB抗體常與血管炎、淋巴結(jié)腫大、白細(xì)胞減少、光過敏、皮損、紫癜等臨床癥狀相關(guān)。抗SS-B抗體在原發(fā)性SS病人中，抗SSA/Ro和抗SSB抗SS-A抗體and抗SS-B抗體SS-A

(Ro-60),

Ro-52

and

SS-B功能:RNA聚合酶III輔助蛋白抗SS-B抗體干燥綜合癥:SLE:新生兒狼瘡:40-95%10-20%

78%功能:調(diào)控RNA翻譯X抗SS-A

(60

kDa)抗體干燥綜合癥:SLE:新生兒狼瘡:40-95%20-60%

96%抗Ro-52

(52

kDa)抗體

非特異抗SS-A抗體and抗SS-B抗體SS-A(Ro-60抗Scl-70抗體靶抗原：DNA拓樸異構(gòu)酶I的降解產(chǎn)物主要存在核仁中。SSc的標(biāo)記抗體，陽性率20-30%。多見于DSSc（彌漫型系統(tǒng)性硬化癥），病情進(jìn)展快，提示預(yù)后不良。與ILD

（肺動脈高壓）、彌漫性皮膚硬化有關(guān)，而PAH（間質(zhì)性肺?。┥僖??？筍cl-70抗體靶抗原：DNA拓樸異構(gòu)酶I的降解產(chǎn)物主要存抗PM-Scl抗體常見于多肌炎與硬化癥的重疊癥狀中，在重疊癥狀中的陽性率為50%；也可以僅出現(xiàn)于多肌炎患者中，陽性率為8%,彌散性硬化癥中的陽性率為2%-5%?？筆M-Scl抗體常見于多肌炎與硬化癥的重疊癥狀中，在重疊癥抗Jo-1抗體靶抗原：組氨酸t(yī)RNA合成酶胞漿中的磷酸蛋白抗Jo-1抗體靶抗原：組氨酸t(yī)RNA合成酶抗Jo-1抗體PM/DM的標(biāo)記抗體，陽性率20-30%抗體效價與疾病活動性相關(guān)抗Jo-1抗體綜合征：急性發(fā)熱,對稱性關(guān)節(jié)炎,技工手,雷諾現(xiàn)象,肌炎（相對輕）,肺間質(zhì)病變其他抗合成酶抗體：抗PL-7、抗PL-12、抗OJ、抗EJ面具臉毛細(xì)血管擴張

皮膚鈣質(zhì)沉著抗Jo-1抗體PM/DM的標(biāo)記抗體，陽性率20-30%面具臉抗CENP-B抗體主要靶抗原：著絲點蛋白-B多見于LSSc，病程緩慢，提示預(yù)后較好。CREST綜合征：軟組織鈣化（C）,雷諾現(xiàn)象（R）,食道功能障礙（E）,指端硬化（S）,毛細(xì)血管擴張（T），但并非標(biāo)記抗體，也見于孤立性雷諾現(xiàn)象、SS、PBC、AIH等。國外文獻(xiàn)：與PAH相關(guān)，而ILD少見中國人群：未發(fā)現(xiàn)與PAH（肺動脈高壓）相關(guān)，但I(xiàn)LD（間質(zhì)性肺疾?。┥僖姲滓聊龋踹w等.中國系統(tǒng)性硬化癥患者硬皮病相關(guān)自身抗體的檢測及其臨床意義.中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志.2011（5）:452-455.抗CENP-B抗體主要靶抗原：著絲點蛋白-B白伊娜，王遷等.抗PCNA抗體抗增殖細(xì)胞核抗原抗體（PCNA）抗核糖體P蛋白抗體為SLE的高特異性指標(biāo)，陽性率在10-40%。SLE患者伴有狼瘡性腦病時，此抗體陽性率可達(dá)56-90%。SLE患者出現(xiàn)核糖體P蛋白抗體與中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟或腎臟受累有關(guān)。在抗核抗體陰性的SLE患者，抗核糖體抗體陽性有重要診斷價值。抗PCNA抗體抗增殖細(xì)胞核抗原抗體（PCNA）抗核糖體P蛋白抗ds-DNA抗體SLE的血清特異性抗體。多有致病性（IgG型），與親和力（高）有關(guān)。與LN與SLE疾病活動性相關(guān)，活動期達(dá)90％。可用于SLE疾病活動期判斷＆藥物療效觀察。與SLE急性皮疹、血管炎、漿膜腔炎、白細(xì)胞減少等有關(guān)?？筪s-DNA抗體SLE的血清特異性抗體?？购诵◇w抗體（ANuA）核小體是真核細(xì)胞染色質(zhì)的基本復(fù)制單位，含組蛋白二聚體H2A-H2B和H3-H4，其外面為146個堿基對組成的雙鏈DNA。參與SLE發(fā)病機制：多克隆B細(xì)胞活化劑產(chǎn)生ANuA，先于其他ANA促進(jìn)抗dsDNA與AHA形成參與LN的發(fā)生?？购诵◇w抗體（ANuA）核小體是真核細(xì)胞染色質(zhì)的基本復(fù)制單抗核小體抗體（ANuA）

核小體抗體是SLE的診斷標(biāo)記，其診斷靈敏度為70-90%。在SLE的活性期，此抗體的檢出率幾乎為100%，在非活動期的SLE中為62%（相應(yīng)的dsDNA抗體檢出率僅為3.3%）。核小體抗體對SLE的診斷靈敏度高于dsDNA抗體，抗核小體抗體甚至可在dsDNA抗體陰性的病人中檢測到。它們是SLE惡化的早期標(biāo)記，因為它們比dsDNA抗體更早出現(xiàn)?？购诵◇w抗體（ANuA）核小體抗體抗組蛋白抗體可出現(xiàn)于多種結(jié)締組織病，不具有診斷特異性。SLE：50%活動期SLE可達(dá)90.2%與LN（狼瘡性腎炎）相關(guān)，與SLE疾病活動性存在一定意義的相關(guān)性。藥物性狼瘡（DIL）：>90%如：異煙肼、苯妥因鈉、青霉胺、雌激素等，僅有AHA而無其他ANA，強烈支持DIL。其他結(jié)締組織病：23-30%

如：RA、PBC、SSc等抗組蛋白抗體可出現(xiàn)于多種結(jié)締組織病，不具有診斷特異性?？箁RNP抗體（抗核糖體P抗體）靶抗原：胞漿中60S核糖體大亞基上的磷酸化蛋白?？箁RNP抗體（抗核糖體P抗體）靶抗原：胞漿中60S核糖體大抗rRNP抗體SLE的高度特異性抗體，與狼瘡腦病相關(guān)。常在SLE活動期存在,但不會隨病情的緩解立。即消失,可持續(xù)1-2年后才轉(zhuǎn)陰。陽性率：24%可出現(xiàn)在SLE早期（ANA及抗dsDNA陰性）?？箁RNP抗體SLE的高度特異性抗體，與狼瘡腦病相關(guān)。抗AMA-M2抗體主要見于原發(fā)性膽汁性肝硬化陽性率為95%?？笰MA-M2量值的高低對疾病的預(yù)后意義明確，也是原發(fā)性膽汁性肝硬化和肝外膽道阻塞性肝硬化的鑒別診斷依據(jù)?？咕€粒體抗體M2型（AMA-M2）抗AMA-M2抗體主要見于原發(fā)性膽汁性肝硬化陽性率為95%。謝謝！謝謝！抗核抗體譜檢測及其臨床意義抗核抗體譜檢測及其臨床意義課程章節(jié)單擊添加文本……抗核抗體譜的定義1單擊添加文本……自身免疫性疾病與ANAs的相關(guān)性2抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的臨床意義抗核抗體譜的檢測及意義3課程單擊添加文本……抗核抗體譜的定義1單擊添加文本…抗核抗體譜的定義第一章單擊添加文本……抗核抗體譜的定義1抗核抗體譜的定義第一章單擊添加文本……抗核抗體譜的定義1抗核抗體譜的定義傳統(tǒng)定義：針對細(xì)胞核成分的自身抗體的總稱。多核苷酸：dsDNA，ssDNA，RNA組蛋白：H1,H2A,H2B,H3,H4,H2A-H2B復(fù)合體核漿中的核糖核蛋白（ENA）：Sm,nRNP,SSA/Ro,SSB/La核仁抗原：U3-nRNP/Fibrillaria，PM-Scl/PM-1，7-2-RNP/To，4-6-S-RNA著絲點：著絲點蛋白其他蛋白：Scl-70,PCNA，核點,Mi-1,Mi-2,Ku，板層素，NOR-90根據(jù)細(xì)胞核內(nèi)靶抗原分子理化特性和分布部位分類：抗核抗體譜的定義傳統(tǒng)定義：多核苷酸：dsDNA，ssDNA抗核抗體譜的定義廣義定義：指抗細(xì)胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體的總稱。對ANA的理解已不再局限于核成分，而是指抗核酸（nucleicacid）和核蛋白（nucleoprotein）抗體的總稱。整個細(xì)胞，包括細(xì)胞核、細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架、細(xì)胞分裂周期蛋白等。抗核抗體譜的定義廣義定義：指抗細(xì)胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體的自身免疫性疾病與ANAs的相關(guān)性第二章單擊添加文本……自身免疫性疾病與ANAs的相關(guān)性2自身免疫性疾病與ANAs的相關(guān)性第二章單擊添加文本……自慢性炎癥性結(jié)締組織病干燥綜合征(SS)SS-AandSS-B慢性炎癥性結(jié)締組織病(CICTD)夏普綜合征(MCTD)nRNP系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)dsDNA慢性炎癥性結(jié)締組織病(CICTD)系統(tǒng)性硬化癥(SSc)Scl-70andCenpB多肌炎/皮肌炎(PM/DM)MyositisProfileANCA相關(guān)性血管炎慢性炎癥性結(jié)締組織病干燥綜合征(SS)SS-Aand系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種多發(fā)于青年女性的累及多臟器的自身免疫性炎癥性結(jié)締組織病，早期、輕型和不典型的病例日漸增多。有些重癥患者（除患者有彌漫性增生性腎小球腎炎者外），有時亦可自行緩解。有些患者呈“一過性”發(fā)作，經(jīng)過數(shù)月的短暫病程后疾病可完全消失。系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）關(guān)節(jié)炎(至少2個關(guān)節(jié)以上受累;96%)血液系統(tǒng)受累(貧血等;

60%)狼瘡腎炎(51%)漿膜炎(胸膜炎,心包炎;

77%)神經(jīng)系統(tǒng)受累(30%)皮膚(蝴蝶狀皮疹,盤狀狼瘡;

74%)SLE在臨床上各器官受累的表現(xiàn)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）關(guān)節(jié)炎(至少2個關(guān)節(jié)以上血液系統(tǒng)受ANAs與系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的相關(guān)性系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）中的自身抗體抗原陽性率雙鏈DNA60-90%單鏈DNA70-95%RNA50%組蛋白95%U1-nRNP15-40%Sm5-40%SS-A（Ro）20-60%SS-B（La）10-20%細(xì)胞周期蛋白（PCNA）3%Ku10%核糖體P蛋白（rRNP）10%熱休克蛋白90kDA：Hsp-9050%心磷脂40-60%ANAs與系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的相關(guān)性系統(tǒng)性紅斑狼瘡（S類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種病因未明的慢性、以炎性滑膜炎為主的系統(tǒng)性疾病。其特征是手、足小關(guān)節(jié)的多關(guān)節(jié)、對稱性、侵襲性關(guān)節(jié)炎癥，經(jīng)常伴有關(guān)節(jié)外器官受累及血清類風(fēng)濕因子陽性，可以導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形及功能喪失。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是ANAs與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）的相關(guān)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的抗核抗體抗原陽性率組蛋白15-50%單鏈DNA（ssDNA）8%U1-nRNP3%RANA90-95%ANAs與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）的相關(guān)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的抗核抗干燥綜合征（SS）腮腺腫脹口腔干燥外分泌腺受累的自身免疫疾病癥狀:-口腔干燥

-唾液及眼淚減少

-腮腺腫脹

-胰腺外分泌腺分泌不足干燥綜合征（SS）腮腺腫脹口腔干燥外分泌腺受累的自身免疫疾病ANAs與干燥綜合征（SS）的相關(guān)性原發(fā)性干燥綜合征中的自身抗體抗原陽性率SS-A（Ro）40-95%SS-B（La）40-95%單鏈DNA（ss-DNA）13%RANA70%唾液腺分泌管40-60%類風(fēng)濕因子60-80%ANAs與干燥綜合征（SS）的相關(guān)性原發(fā)性干燥綜合征中的自身多發(fā)性肌炎（PM）及皮肌炎（DM）皮膚與肌肉受累的自身免疫疾病癥狀:-肌肉疼痛/肌無力(如：肩膀/骨盆)皮膚癥狀:膝蓋/手指關(guān)節(jié)處皮膚異變紅斑皮膚褪色多發(fā)性肌炎（PM）及皮肌炎（DM）皮膚與肌肉受累的自身免疫疾ANAs與多發(fā)性肌炎（PM）及皮肌炎（DM）的相關(guān)性多肌炎和皮肌炎抗原陽性率PM-Scl（PM-1）50-70%Jo-1（組氨酰-tRNA合成酶）25-35%Mi-110%Mi-25%Ku50%單鏈AND（ss-DNA）40-50%PL-7（蘇氨酰-tRNA合成酶）4%PL-12（丙氨酰-tRNA合成酶）3%ANAs與多發(fā)性肌炎（PM）及皮肌炎（DM）的相關(guān)性多肌炎和進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（SSc）指端硬化，爪型手面具臉毛細(xì)血管擴張

皮膚鈣質(zhì)沉著血管與結(jié)締組織受累的自身免疫疾病癥狀: -指端硬化(thin,scleroticfingers) -爪型手

-面具臉(嘴周邊出現(xiàn)皺紋,嘴唇變薄) -毛細(xì)血管擴張(表面血管永久性擴張) -表皮鈣質(zhì)沉著(血管壁與皮膚鈣化)進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（SSc）指端硬化，爪型手面具臉毛細(xì)血管擴ANAs與進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（SSc）的相關(guān)性彌漫性進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（DSSC）抗原陽性率原纖維蛋白5-10%PM-Scl（PM-1）50-70%Scl-7025-75%RNA多聚酶Ⅰ4%7-2-RNP（To）罕見NOR-90（核仁形成區(qū)）罕見局限性進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（LSSC）抗原陽性率著絲點80-95%ANAs與進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（SSc）的相關(guān)性彌漫性進(jìn)行性系抗核抗體譜的檢測及意義第三章抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的臨床意義抗核抗體譜的檢測及意義3抗核抗體譜的檢測及意義第三章抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的檢測采用免疫印跡法（ImmunoblottingTest,IBT）,用于定性檢測人血清中抗核抗體譜共15中抗體。條膜上平行包被了經(jīng)純化的抗核抗體譜中要檢測的抗原及質(zhì)控帶。第一次孵育時，已稀釋的病人樣本與膜條上的抗原反應(yīng)。如果樣本陽性，特異性的IgG抗體將與相應(yīng)的抗原結(jié)合。為檢測已結(jié)合的抗體，在加入酶標(biāo)羊抗人IgG（堿性磷酸酶結(jié)合物）第二次孵育，然后加入底物液以產(chǎn)生藍(lán)紫色顏色反應(yīng)。抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的檢測采用免疫印跡法（I抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗核抗體譜的免疫印跡法原理抗U1-nRNP與Sm抗體靶抗原：位于細(xì)胞核內(nèi)的一組含尿嘧啶豐富的核糖核蛋白，Sm和U1RNP是同一分子復(fù)合物中的不同位點。Sm含有u1、u2和u4-u6，而nRNP(u1RNP)僅含u1RNA。也即抗Sm抗體陽性均伴有抗u1RNP抗體，而抗u1RNP抗體可以單獨存在?？筓1-nRNP與Sm抗體靶抗原：位于細(xì)胞核內(nèi)的一組含尿嘧啶抗U1-nRNP與Sm抗體

抗Sm：SLE的標(biāo)記性抗體，是前瞻性及回顧性診斷的指標(biāo)。陽性率低：SLE（30%）抗U1RNP：多種CTD均可出現(xiàn)，與手指腫脹、雷諾現(xiàn)象、肌炎、指端硬化等相關(guān)，但腎炎發(fā)生率低。陽性率：40-60%，其中SLE(30-40%),SSc(14%),pSS(12%),PM/DM(15%)高滴度抗U1RNP+抗Sm-MCTD抗U1RNP+抗Sm+SLE抗U1RNP-抗Sm+實驗室誤差?U1RNP丟失?抗U1-nRNP與Sm抗體抗Sm：SLE的標(biāo)記性抗體抗SS-A/Ro-52抗體RNA+SS-A(60kDa)hY-RNAhY-RNARNA+SS-A(60kDa)+Ro-52Boireetal.,1995:-Ro-52抗體不與SS-A抗原結(jié)合-純化的SS-A抗原不包含Ro-52抗SS-A/Ro-52抗體RNA+SS-A(60kD抗SS-A/Ro-52抗體抗SS-A(60kDa)和抗Ro-52總是分開檢測!WHY？抗SS-A/Ro-52抗體抗SS-A(60kDa)和抗R抗SS-A/Ro-52抗體-天然SS-A=RNA+SS-A60kDa蛋白質(zhì)–無需Ro-52。

-Ro-52并非SLE或SS患者診斷所需抗體。-SS-A60和Ro-52抗原的混合包被會降低SSA抗體的疾病特異性。-歐蒙產(chǎn)品始終分別檢測SS-A60和Ro-52?？筍S-A/Ro-52抗體-天然SS-A=RNA+抗SS-A/Ro-52抗體抗Ro-52抗體:不同組別中均可出現(xiàn)抗SS-A/Ro-52抗體抗Ro-52抗體:不同組別中均可出抗SS-B抗體在原發(fā)性SS病人中，抗SSA/Ro和抗SSB/La陽性率分別為60%和40%，它們是診斷干燥綜合征的血清學(xué)標(biāo)志?？筍SB抗體較抗SSA抗體診斷干燥綜合征更為特異。免疫擴散法與免疫印跡法（WesternBlot）得出的結(jié)果常常不一致。SSA和抗SSB抗體陽性可造成新生兒狼瘡及嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯等先天性心臟病。抗SSA和抗SSB抗體常與血管炎、淋巴結(jié)腫大、白細(xì)胞減少、光過敏、皮損、紫癜等臨床癥狀相關(guān)?？筍S-B抗體在原發(fā)性SS病人中，抗SSA/Ro和抗SSB抗SS-A抗體and抗SS-B抗體SS-A

(Ro-60),

Ro-52

and

SS-B功能:RNA聚合酶III輔助蛋白抗SS-B抗體干燥綜合癥:SLE:新生兒狼瘡:40-95%10-20%

78%功能:調(diào)控RNA翻譯X抗SS-A

(60

kDa)抗體干燥綜合癥:SLE:新生兒狼瘡:40-95%20-60%

96%抗Ro-52

(52

kDa)抗體

非特異抗SS-A抗體and抗SS-B抗體SS-A(Ro-60抗Scl-70抗體靶抗原：DNA拓樸異構(gòu)酶I的降解產(chǎn)物主要存在核仁中。SSc的標(biāo)記抗體，陽性率20-30%。多見于DSSc（彌漫型系統(tǒng)性硬化癥），病情進(jìn)展快，提示預(yù)后不良。與ILD

（肺動脈高壓）、彌漫性皮膚硬化有關(guān)，而PAH（間質(zhì)性肺?。┥僖??？筍cl-70抗體靶抗原：DNA拓樸異構(gòu)酶I的降解產(chǎn)物主要存抗PM-Scl抗體常見于多肌炎與硬化癥的重疊癥狀中，在重疊癥狀中的陽性率為50%；也可以僅出現(xiàn)于多肌炎患者中，陽性率為8%,彌散性硬化癥中的陽性率為2%-5%?？筆M-Scl抗體常見于多肌炎與硬化癥的重疊癥狀中，在重疊癥抗Jo-1抗體靶抗原：組氨酸t(yī)RNA合成酶胞漿中的磷酸蛋白抗Jo-1抗體靶抗原：組氨酸t(yī)RNA合成酶抗Jo-1抗體PM/DM的標(biāo)記抗體，陽性率20-30%抗體效價與疾病活動性相關(guān)抗Jo-1抗體綜合征：急性發(fā)熱,對稱性關(guān)節(jié)炎,技工手,雷諾現(xiàn)象,肌炎（相對輕）,肺間質(zhì)病變其他抗合成酶抗體：抗PL-7、抗PL-12、抗OJ、抗EJ面具臉毛細(xì)血管擴張

皮膚鈣質(zhì)沉著抗Jo-1抗體PM/DM的標(biāo)記抗體，陽性率20-30%面具臉抗CENP-B抗體主要靶抗原：著絲點蛋白-B多見于LSSc，病程緩慢，提示預(yù)后較好。CREST綜合征：軟組織鈣化（C）,雷諾現(xiàn)象（R）,食道功能障礙（E）,指端硬化（S）,毛細(xì)血管擴張（T），但并非標(biāo)記抗體，也見于孤立性雷諾現(xiàn)象、SS、PBC、AIH等。國外文獻(xiàn)：與PAH相關(guān)，而ILD少見中國人群：未發(fā)現(xiàn)與PAH（肺動脈高壓）相關(guān)，但I(xiàn)LD（間質(zhì)性肺疾?。┥僖姲滓聊?，王遷等.中國系統(tǒng)性硬化癥患者硬皮病相關(guān)自身抗體的檢測及其臨床意義.中華