優(yōu)課課件-單克隆抗體的制備

單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備1優(yōu)課課件-單克隆抗體的制備2缺點(diǎn)：產(chǎn)量低，純度低，特異性差。獲得抗體的傳統(tǒng)方法

把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需的抗體。缺點(diǎn)：產(chǎn)量低，純度低，特異性差。獲得抗體的傳統(tǒng)方法

把某種抗3溫故知新1、抗體是如何產(chǎn)生的？由哪種細(xì)胞產(chǎn)生？

2、該細(xì)胞能不能無限增殖？3、我們學(xué)過的什么細(xì)胞有無限增殖的能力？4、用什么方法可以讓B淋巴細(xì)胞也具備無限增殖的能力？抗原→B淋巴細(xì)胞→增殖分化成漿細(xì)胞→抗體不能癌細(xì)胞細(xì)胞融合溫故知新1、抗體是如何產(chǎn)生的？由哪種細(xì)胞產(chǎn)生？抗原→B淋巴細(xì)41、閱讀53頁內(nèi)容,歸納單克隆抗體的概念：關(guān)鍵詞：每一個(gè)B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體獲得單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行（無性繁殖）克隆，得到的基因型相同的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。1、閱讀53頁內(nèi)容,歸納單克隆抗體的概念：關(guān)鍵詞：用單個(gè)B淋5一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，但不能增殖骨髓瘤細(xì)胞（癌細(xì)胞）能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)2、實(shí)驗(yàn)原理：動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，但不能增殖雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)6

3、單克隆抗體制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群細(xì)胞融合單克隆抗體體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔13.幻燈片3、單克隆抗體制備過程注射B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞篩選雜交瘤7材料：磁扣模擬操作1：細(xì)胞融合過程不同顏色的磁扣代表哪種類型的細(xì)胞？是否一定成功融合？體系中有幾種類型的細(xì)胞？哪種細(xì)胞是我們所需要的？材料：磁扣模擬操作1：細(xì)胞融合過程不同顏色的磁扣代表哪種類型8模擬操作2：雜交瘤細(xì)胞的篩選誘導(dǎo)融合后，在培養(yǎng)基中能增殖的細(xì)胞有哪些類型？如何從中篩選出雜交瘤細(xì)胞？骨髓瘤細(xì)胞，兩兩融合的骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞模擬操作2：雜交瘤細(xì)胞的篩選誘導(dǎo)融合后，在培養(yǎng)基中能增殖的細(xì)9如何篩選雜交瘤細(xì)胞？請根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中篩選雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。簡述方法和原理。培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖如何篩選雜交瘤細(xì)胞？請根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)方法（不考慮機(jī)械方法10模擬操作3：產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選把篩選得到的雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移到多孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)，每個(gè)孔內(nèi)放一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。如何篩選？用特定的抗原檢測每個(gè)培養(yǎng)孔內(nèi)的產(chǎn)物，最終得到產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞。7.幻燈7.幻燈片7片7多孔細(xì)胞培養(yǎng)板模擬操作3：產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選把篩選得到的雜交11篩選雜交瘤細(xì)胞篩選產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選雜交瘤細(xì)胞篩選產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞12科學(xué)家從某些能無限增殖的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖的調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。合作探究-分組討論請利用所學(xué)基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)技術(shù)，設(shè)計(jì)生產(chǎn)單克隆抗體的方法。計(jì)時(shí)：3分鐘科學(xué)家從某些能無限增殖的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖的調(diào)控基因(p13放飛思維

能否利用制備單克隆抗體的方法來生產(chǎn)單克隆干擾素？如果可以，請說明理由。放飛思維能否利用制備單克隆抗體的方法來生產(chǎn)單克隆干擾素？144、單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用（1）作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用

準(zhǔn)確、高效、簡易、快速

同位素標(biāo)記單克隆抗體，利用抗體和抗原特異性結(jié)合的特點(diǎn)可診斷腫瘤、心血管畸形等。特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備4、單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用（1）作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用15（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物

制成生物導(dǎo)彈，將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，在原位殺死癌細(xì)胞，療效高、副作用小。（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物16課堂小結(jié)單克隆抗體的制備技術(shù)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合原理：過程：特點(diǎn)：應(yīng)用：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備作為體外診斷試劑治療疾病和運(yùn)載藥物經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合篩選雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)篩選產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)課堂小結(jié)單克隆抗體的制備技術(shù)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合原17謝謝大家！謝謝大家！18單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備19優(yōu)課課件-單克隆抗體的制備20缺點(diǎn)：產(chǎn)量低，純度低，特異性差。獲得抗體的傳統(tǒng)方法

把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需的抗體。缺點(diǎn)：產(chǎn)量低，純度低，特異性差。獲得抗體的傳統(tǒng)方法

把某種抗21溫故知新1、抗體是如何產(chǎn)生的？由哪種細(xì)胞產(chǎn)生？

2、該細(xì)胞能不能無限增殖？3、我們學(xué)過的什么細(xì)胞有無限增殖的能力？4、用什么方法可以讓B淋巴細(xì)胞也具備無限增殖的能力？抗原→B淋巴細(xì)胞→增殖分化成漿細(xì)胞→抗體不能癌細(xì)胞細(xì)胞融合溫故知新1、抗體是如何產(chǎn)生的？由哪種細(xì)胞產(chǎn)生？抗原→B淋巴細(xì)221、閱讀53頁內(nèi)容,歸納單克隆抗體的概念：關(guān)鍵詞：每一個(gè)B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體獲得單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行（無性繁殖）克隆，得到的基因型相同的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。1、閱讀53頁內(nèi)容,歸納單克隆抗體的概念：關(guān)鍵詞：用單個(gè)B淋23一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，但不能增殖骨髓瘤細(xì)胞（癌細(xì)胞）能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)2、實(shí)驗(yàn)原理：動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，但不能增殖雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)24

3、單克隆抗體制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群細(xì)胞融合單克隆抗體體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔13.幻燈片3、單克隆抗體制備過程注射B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞篩選雜交瘤25材料：磁扣模擬操作1：細(xì)胞融合過程不同顏色的磁扣代表哪種類型的細(xì)胞？是否一定成功融合？體系中有幾種類型的細(xì)胞？哪種細(xì)胞是我們所需要的？材料：磁扣模擬操作1：細(xì)胞融合過程不同顏色的磁扣代表哪種類型26模擬操作2：雜交瘤細(xì)胞的篩選誘導(dǎo)融合后，在培養(yǎng)基中能增殖的細(xì)胞有哪些類型？如何從中篩選出雜交瘤細(xì)胞？骨髓瘤細(xì)胞，兩兩融合的骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞模擬操作2：雜交瘤細(xì)胞的篩選誘導(dǎo)融合后，在培養(yǎng)基中能增殖的細(xì)27如何篩選雜交瘤細(xì)胞？請根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中篩選雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。簡述方法和原理。培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖如何篩選雜交瘤細(xì)胞？請根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)方法（不考慮機(jī)械方法28模擬操作3：產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選把篩選得到的雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移到多孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)，每個(gè)孔內(nèi)放一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。如何篩選？用特定的抗原檢測每個(gè)培養(yǎng)孔內(nèi)的產(chǎn)物，最終得到產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞。7.幻燈7.幻燈片7片7多孔細(xì)胞培養(yǎng)板模擬操作3：產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選把篩選得到的雜交29篩選雜交瘤細(xì)胞篩選產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選雜交瘤細(xì)胞篩選產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞30科學(xué)家從某些能無限增殖的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖的調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。合作探究-分組討論請利用所學(xué)基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)技術(shù)，設(shè)計(jì)生產(chǎn)單克隆抗體的方法。計(jì)時(shí)：3分鐘科學(xué)家從某些能無限增殖的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖的調(diào)控基因(p31放飛思維

能否利用制備單克隆抗體的方法來生產(chǎn)單克隆干擾素？如果可以，請說明理由。放飛思維能否利用制備單克隆抗體的方法來生產(chǎn)單克隆干擾素？324、單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用（1）作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用

準(zhǔn)確、高效、簡易、快速

同位素標(biāo)記單克隆抗體，利用抗體和抗原特異性結(jié)合的特點(diǎn)可診斷腫瘤、心血管畸形等。特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備4、單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用（1）作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用33（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物

制成生物導(dǎo)彈，將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，在原位殺死癌細(xì)胞，療效高、副作用小。（2）用于治療疾病和運(yùn)載