液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)器2021完整版課件

液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)器液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)器1內(nèi)容大氣壓離子化質(zhì)譜法ESI離子源的結(jié)構(gòu)、原理ESI的適用范圍質(zhì)譜圖譜解析內(nèi)容大氣壓離子化質(zhì)譜法2大氣壓電離質(zhì)譜（API–MS）API-MS是在大氣壓條件下的質(zhì)譜離子化技術(shù)的總稱：對(duì)引入系統(tǒng)的樣品進(jìn)行電離并繼續(xù)質(zhì)量分析的過程。API-MS可以用下面的模式操作： (1) 電噴霧離子化(ESI)

(2) 氣動(dòng)輔助電噴霧（也叫離子噴霧） (3) 大氣壓化學(xué)電離（APCI）

(4) 大氣壓光致電離（APPI）大氣壓電離質(zhì)譜（API–MS）API-MS是在大氣壓條件3API-MS操作的四種模式的主要特征電噴霧： 使用電場(chǎng)產(chǎn)生帶電液滴繼爾通過離子蒸發(fā)分析離子的電離過程。氣動(dòng)輔助電噴霧： 與電噴霧（上面）相同，除了最初的液滴形成是由于氣動(dòng)噴霧的結(jié)果。大氣壓化學(xué)電離(APCI)

： 氣相化學(xué)電離(CI)過程中溶劑相當(dāng)于CI反應(yīng)氣來使樣品電離。大氣壓光致電離(APPI):

Krypton氪燈產(chǎn)生的紫外光電離氣相樣品或參加隨后的氣相反應(yīng)。API-MS操作的四種模式的主要特征電噴霧：4LC/MS技術(shù)的相對(duì)適用性LC/MS技術(shù)的相對(duì)適用性5液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的相對(duì)適用范圍分子量分析物的極性電噴霧(ESI)GC/MS大氣壓化學(xué)電離源(APCI)1000100,00010,000非極性極性液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的相對(duì)適用范圍分子量分析物的極性電噴霧(ESI)6API-MS是一個(gè)針對(duì)液相樣品(HPLC,FIA,Infusion)的檢測(cè)方法。樣品經(jīng)去溶劑、離子化，按質(zhì)荷比被分析和檢測(cè)。適用于一個(gè)寬的化合物范圍fg-pg靈敏度定性信息大氣壓電離質(zhì)譜儀(API-MS)API-MS是一個(gè)針對(duì)液相樣品(HPLC,FIA,Inf7APCIESIEI儀器結(jié)構(gòu)APCI儀器結(jié)構(gòu)8大氣壓電離-電噴霧電離源API-ElectrosprayIonSource大氣壓電離-電噴霧電離源API-Electrospray9大氣壓電離-電噴霧電離(API-ElectrosprayIonization)大氣壓電離-電噴霧電離(API-Electrospray10電噴霧電離－離子形成的必要步驟現(xiàn)代儀器上的氣動(dòng)噴霧和干燥，減小了這些參數(shù)的影響。步驟1 溶液中的電離樣品的pKa

溶液的pH步驟2 噴霧表面張力和粘度氣動(dòng)輔助步驟3去溶劑干燥氣溫度和流速步驟4 離子從溶液中解吸溶解能步驟5 氣相中的離子反應(yīng)電噴霧電離－離子形成的必要步驟現(xiàn)代儀器上的氣動(dòng)噴霧和干燥，減11步驟1－在如溶液中何產(chǎn)生離子？酸/堿化學(xué)性質(zhì)M-NH2+酸?[M-NH3]++酸-M-COOH+堿?[MCOO]-+堿+締合（對(duì)類似糖的中性物質(zhì)）M°+Na+

?[M-Na]+

（堿金屬，如20mM乙酸鈉）衍生化形成離子或酸/堿產(chǎn)物步驟1－在如溶液中何產(chǎn)生離子？酸/堿化學(xué)性質(zhì)12步驟2－氣動(dòng)輔助電噴霧－產(chǎn)生帶電液滴含有約100,000電荷、直徑2m的帶電溶劑液滴由于溶劑組成或流速，氣動(dòng)噴霧減小了液滴的大小對(duì)粘度和表面張力的偏離噴霧柱體、端板和毛細(xì)管上的場(chǎng)使液滴帶電步驟2－氣動(dòng)輔助電噴霧－產(chǎn)生帶電液滴含有約100,000電13步驟3－帶電液滴的去溶劑加熱的氮?dú)庹舭l(fā)了液滴，增加了電荷/體積比。Rayleigh極限是帶電液滴能夠存在的最大電荷/體積比。當(dāng)電荷超過這個(gè)極限時(shí)，發(fā)生庫侖破裂。熱干燥氣體步驟3－帶電液滴的去溶劑加熱的氮?dú)庹舭l(fā)了液滴，增加了電荷/14步驟4－從溶液中解吸離子當(dāng)液滴的場(chǎng)強(qiáng)超過分析物在溶液中的溶解能時(shí)，離子解吸進(jìn)入氣相。帶電殘余物離子蒸發(fā)步驟4－從溶液中解吸離子當(dāng)液滴的場(chǎng)強(qiáng)超過分析物在溶液中的溶15步驟5－氣相中的離子反應(yīng)通過離子傳輸區(qū)域時(shí)從大氣壓噴霧室的反應(yīng)中會(huì)發(fā)生質(zhì)子轉(zhuǎn)移和電荷交換反應(yīng)。這個(gè)高壓區(qū)允許發(fā)生1000次離子/分子反應(yīng)。

質(zhì)子轉(zhuǎn)移與HPLC添加劑相比，如：氨、三乙胺（質(zhì)子親合力分別為206和232kcal/mole），樣品具有較低質(zhì)子親合力的會(huì)丟失一個(gè)質(zhì)子，變成中性或形成加合離子，如[M+NH4]+步驟5－氣相中的離子反應(yīng)通過離子傳輸區(qū)域時(shí)從大氣壓噴霧室的16帽電壓裂解區(qū)霧化氣壓力干燥氣溫度和流速霧化氣壓力<200L/min10-20psig200-400L/min20-30psig400-800L/min30-50psig>800L/min50-70psig干燥氣流速(6-12L/Min)含水高需更高的流速如果太底，液滴會(huì)導(dǎo)致譜圖中的尖峰干燥氣溫度蒸汽壓越低的溶劑溫度越高開始為300-350C帽電壓用FIA優(yōu)化(2000-5000)

開始3000V

在負(fù)離子模式，注意高的室電流或蘭色光輝（電暈針顯示）：當(dāng)這現(xiàn)象發(fā)生時(shí)須降低帽電壓電噴霧噴霧室設(shè)置帽電壓裂解區(qū)霧化氣壓力干燥氣霧化氣壓力電噴霧噴霧室設(shè)置17

由于液滴不完全干燥導(dǎo)致的尖峰在ES中干燥氣設(shè)置的作用

由于液滴不完全干燥導(dǎo)致的18

液滴產(chǎn)生噪音更大的譜圖在ES中干燥氣設(shè)置的作用液滴產(chǎn)生噪音更大的譜圖在ES中干燥氣設(shè)置的作19液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)器2021完整版課件20含雜原子的樣品通過引入可接受一個(gè)電荷的化合物在溶液中是多電荷的樣品在溶液中是離子的化合物

適用于熱噴霧的樣品

當(dāng)不能引入電荷時(shí)避免極其非極性的樣品適合電噴霧的樣品含雜原子的樣品適合電噴霧的樣品21樣品在溶液中為離子態(tài):兒茶酚胺、硫酸酯共軛物、丁基胺有可誘導(dǎo)電離的化合物：甲醇含雜原子的化合物：氨基甲酸酯類，苯并二氮雜草類溶液中帶多電荷：蛋白質(zhì)、多肽、低聚核甘酸溶液化學(xué)參數(shù)流速樣品的pK,溶液pH溶液導(dǎo)電性

應(yīng)避免的樣品尤其非極性的樣品：PAHs,PCBs電噴霧需考慮的樣品電噴霧需考慮的22ESI的電離模式的選擇原則ESI(+)：

-適應(yīng)于堿性樣品，含有仲氨或叔氨基時(shí)可優(yōu)先考慮-適合酸性系統(tǒng)：容易加合質(zhì)子

ESI(-)：-適應(yīng)于酸性樣品，含氯、含溴和多個(gè)羥基時(shí)可嘗試使用-在堿性系統(tǒng)中：易失去質(zhì)子對(duì)于本身離子流較弱的樣品建議

-

在酸性系統(tǒng)中做ESI(+)

ESI的電離模式的選擇原則23質(zhì)譜常用術(shù)語

1、分子離子(molecularion)自由基（radical）離子M?+。很活潑，易碎裂而產(chǎn)生廣義的碎片離子2、準(zhǔn)分子離子(quasi-moleculanrion)由軟電離技術(shù)產(chǎn)生的質(zhì)子或其他陽離子加合離子以及去質(zhì)子化或其他陰離子加合離子。3、碎片離子(fragmention)電離后具有過剩內(nèi)能的分子離子能以多種方式裂解生成碎片離子。4、多電荷離子(multiply-chargedion)5、同位素離子(isotopicion)質(zhì)譜常用術(shù)語

1、分子離子(molecularion)24ESI正、負(fù)離子模式常見離子:

正離子模式：

［M+H］+

［M+1］+

［M+Na］+

［M+23］+

［M+K］+［M+39］+

［M+NH4］+［2M+18］+

［2M+H］+［2M+1］+

［2M+Na］+［2M+23］+

負(fù)離子模式：

［M-H］-

M-1

ESI正、負(fù)離子模式常見離子:25ES模式下的單電荷離子

ES模式下的單電荷離子

26Chemstation得到的質(zhì)譜圖

Chemstation得到的質(zhì)譜圖

27常見的A+2同位素峰值

常見的A+2同位素峰值

28質(zhì)譜圖相關(guān)概念

總離子色譜圖(TIC)---分析時(shí)間內(nèi)所有掃描獲得的離子流強(qiáng)度對(duì)時(shí)間作圖所得的色譜圖提取離子色譜圖(EIC)—根據(jù)監(jiān)測(cè)化合物分子量提取其產(chǎn)生的離子流強(qiáng)度對(duì)時(shí)間作圖所得的色譜圖.質(zhì)譜棒狀圖---不同質(zhì)量的離子質(zhì)荷比與其相對(duì)的離子強(qiáng)度所形成的譜圖質(zhì)譜圖相關(guān)概念

總離子色譜圖(TIC)---分析時(shí)間內(nèi)所有掃29Thanks!Thanks!304.時(shí)間總是來見證愛情，卻也總是經(jīng)不住時(shí)間的誘惑。19、任何的限制，都是從自己的內(nèi)心開始的。19.學(xué)會(huì)寬容，意味著成長(zhǎng)，秀木出木可吸納更多的日月風(fēng)華，舒展茁壯而更具成熟的力量。15.人只能按照自己的條件去尋找終生伴侶。3.母愛是一縷陽光，讓你的心靈即便在寒冷的冬天也能感受到溫暖如春;母愛是一泓清泉，讓你的情感即使蒙上歲月的風(fēng)塵仍然清澈澄凈。20.人生最痛苦的事情是，人死了，錢沒花完。2.即使沒有月亮，心中也是一片皎潔。6.只要再堅(jiān)持一下下，我們就能到幸福的彼岸。18.如同磁鐵吸引四周的鐵粉，熱情也能吸引周圍的人，改變周圍的情況。7.當(dāng)一個(gè)小小的心念變成成為行為時(shí)，便能成了習(xí)慣;從而形成性格，而性格就決定你一生的成敗。4、忍別人所不能忍的痛，吃別人所不能吃的苦，是為了收獲得不到的收獲。14、人都是在跌倒與爬起之間學(xué)會(huì)堅(jiān)強(qiáng)，都是在風(fēng)雨與陽光之間走過成長(zhǎng)的路。失敗所能帶給你的只應(yīng)是一些教訓(xùn)，一些冷靜的思考，而不該有絕望、頹廢、不知所措。8.你人的善良，你的決心，你的項(xiàng)目都可以，但是把這些看得太大，走的越大，想的越大，掉得越快。11.人的品格可能在重要時(shí)刻才表現(xiàn)出來，但絕對(duì)是在無關(guān)緊要時(shí)形成的。12.從容不迫的舉止，比起咄咄逼人的態(tài)度，更能令人心折。2.沒有什么事情有象熱忱這般具有傳染性，它能感動(dòng)頑石，它是真誠(chéng)的精髓。18.敢于浪費(fèi)自己生命當(dāng)中一小時(shí)的人，尚未發(fā)現(xiàn)生命的價(jià)值。4.時(shí)間總是來見證愛情，卻也總是經(jīng)不住時(shí)間的誘惑。31液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)器液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)器32內(nèi)容大氣壓離子化質(zhì)譜法ESI離子源的結(jié)構(gòu)、原理ESI的適用范圍質(zhì)譜圖譜解析內(nèi)容大氣壓離子化質(zhì)譜法33大氣壓電離質(zhì)譜（API–MS）API-MS是在大氣壓條件下的質(zhì)譜離子化技術(shù)的總稱：對(duì)引入系統(tǒng)的樣品進(jìn)行電離并繼續(xù)質(zhì)量分析的過程。API-MS可以用下面的模式操作： (1) 電噴霧離子化(ESI)

(2) 氣動(dòng)輔助電噴霧（也叫離子噴霧） (3) 大氣壓化學(xué)電離（APCI）

(4) 大氣壓光致電離（APPI）大氣壓電離質(zhì)譜（API–MS）API-MS是在大氣壓條件34API-MS操作的四種模式的主要特征電噴霧： 使用電場(chǎng)產(chǎn)生帶電液滴繼爾通過離子蒸發(fā)分析離子的電離過程。氣動(dòng)輔助電噴霧： 與電噴霧（上面）相同，除了最初的液滴形成是由于氣動(dòng)噴霧的結(jié)果。大氣壓化學(xué)電離(APCI)

： 氣相化學(xué)電離(CI)過程中溶劑相當(dāng)于CI反應(yīng)氣來使樣品電離。大氣壓光致電離(APPI):

Krypton氪燈產(chǎn)生的紫外光電離氣相樣品或參加隨后的氣相反應(yīng)。API-MS操作的四種模式的主要特征電噴霧：35LC/MS技術(shù)的相對(duì)適用性LC/MS技術(shù)的相對(duì)適用性36液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的相對(duì)適用范圍分子量分析物的極性電噴霧(ESI)GC/MS大氣壓化學(xué)電離源(APCI)1000100,00010,000非極性極性液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的相對(duì)適用范圍分子量分析物的極性電噴霧(ESI)37API-MS是一個(gè)針對(duì)液相樣品(HPLC,FIA,Infusion)的檢測(cè)方法。樣品經(jīng)去溶劑、離子化，按質(zhì)荷比被分析和檢測(cè)。適用于一個(gè)寬的化合物范圍fg-pg靈敏度定性信息大氣壓電離質(zhì)譜儀(API-MS)API-MS是一個(gè)針對(duì)液相樣品(HPLC,FIA,Inf38APCIESIEI儀器結(jié)構(gòu)APCI儀器結(jié)構(gòu)39大氣壓電離-電噴霧電離源API-ElectrosprayIonSource大氣壓電離-電噴霧電離源API-Electrospray40大氣壓電離-電噴霧電離(API-ElectrosprayIonization)大氣壓電離-電噴霧電離(API-Electrospray41電噴霧電離－離子形成的必要步驟現(xiàn)代儀器上的氣動(dòng)噴霧和干燥，減小了這些參數(shù)的影響。步驟1 溶液中的電離樣品的pKa

溶液的pH步驟2 噴霧表面張力和粘度氣動(dòng)輔助步驟3去溶劑干燥氣溫度和流速步驟4 離子從溶液中解吸溶解能步驟5 氣相中的離子反應(yīng)電噴霧電離－離子形成的必要步驟現(xiàn)代儀器上的氣動(dòng)噴霧和干燥，減42步驟1－在如溶液中何產(chǎn)生離子？酸/堿化學(xué)性質(zhì)M-NH2+酸?[M-NH3]++酸-M-COOH+堿?[MCOO]-+堿+締合（對(duì)類似糖的中性物質(zhì)）M°+Na+

?[M-Na]+

（堿金屬，如20mM乙酸鈉）衍生化形成離子或酸/堿產(chǎn)物步驟1－在如溶液中何產(chǎn)生離子？酸/堿化學(xué)性質(zhì)43步驟2－氣動(dòng)輔助電噴霧－產(chǎn)生帶電液滴含有約100,000電荷、直徑2m的帶電溶劑液滴由于溶劑組成或流速，氣動(dòng)噴霧減小了液滴的大小對(duì)粘度和表面張力的偏離噴霧柱體、端板和毛細(xì)管上的場(chǎng)使液滴帶電步驟2－氣動(dòng)輔助電噴霧－產(chǎn)生帶電液滴含有約100,000電44步驟3－帶電液滴的去溶劑加熱的氮?dú)庹舭l(fā)了液滴，增加了電荷/體積比。Rayleigh極限是帶電液滴能夠存在的最大電荷/體積比。當(dāng)電荷超過這個(gè)極限時(shí)，發(fā)生庫侖破裂。熱干燥氣體步驟3－帶電液滴的去溶劑加熱的氮?dú)庹舭l(fā)了液滴，增加了電荷/45步驟4－從溶液中解吸離子當(dāng)液滴的場(chǎng)強(qiáng)超過分析物在溶液中的溶解能時(shí)，離子解吸進(jìn)入氣相。帶電殘余物離子蒸發(fā)步驟4－從溶液中解吸離子當(dāng)液滴的場(chǎng)強(qiáng)超過分析物在溶液中的溶46步驟5－氣相中的離子反應(yīng)通過離子傳輸區(qū)域時(shí)從大氣壓噴霧室的反應(yīng)中會(huì)發(fā)生質(zhì)子轉(zhuǎn)移和電荷交換反應(yīng)。這個(gè)高壓區(qū)允許發(fā)生1000次離子/分子反應(yīng)。

質(zhì)子轉(zhuǎn)移與HPLC添加劑相比，如：氨、三乙胺（質(zhì)子親合力分別為206和232kcal/mole），樣品具有較低質(zhì)子親合力的會(huì)丟失一個(gè)質(zhì)子，變成中性或形成加合離子，如[M+NH4]+步驟5－氣相中的離子反應(yīng)通過離子傳輸區(qū)域時(shí)從大氣壓噴霧室的47帽電壓裂解區(qū)霧化氣壓力干燥氣溫度和流速霧化氣壓力<200L/min10-20psig200-400L/min20-30psig400-800L/min30-50psig>800L/min50-70psig干燥氣流速(6-12L/Min)含水高需更高的流速如果太底，液滴會(huì)導(dǎo)致譜圖中的尖峰干燥氣溫度蒸汽壓越低的溶劑溫度越高開始為300-350C帽電壓用FIA優(yōu)化(2000-5000)

開始3000V

在負(fù)離子模式，注意高的室電流或蘭色光輝（電暈針顯示）：當(dāng)這現(xiàn)象發(fā)生時(shí)須降低帽電壓電噴霧噴霧室設(shè)置帽電壓裂解區(qū)霧化氣壓力干燥氣霧化氣壓力電噴霧噴霧室設(shè)置48

由于液滴不完全干燥導(dǎo)致的尖峰在ES中干燥氣設(shè)置的作用

由于液滴不完全干燥導(dǎo)致的49

液滴產(chǎn)生噪音更大的譜圖在ES中干燥氣設(shè)置的作用液滴產(chǎn)生噪音更大的譜圖在ES中干燥氣設(shè)置的作50液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)器2021完整版課件51含雜原子的樣品通過引入可接受一個(gè)電荷的化合物在溶液中是多電荷的樣品在溶液中是離子的化合物

適用于熱噴霧的樣品

當(dāng)不能引入電荷時(shí)避免極其非極性的樣品適合電噴霧的樣品含雜原子的樣品適合電噴霧的樣品52樣品在溶液中為離子態(tài):兒茶酚胺、硫酸酯共軛物、丁基胺有可誘導(dǎo)電離的化合物：甲醇含雜原子的化合物：氨基甲酸酯類，苯并二氮雜草類溶液中帶多電荷：蛋白質(zhì)、多肽、低聚核甘酸溶液化學(xué)參數(shù)流速樣品的pK,溶液pH溶液導(dǎo)電性

應(yīng)避免的樣品尤其非極性的樣品：PAHs,PCBs電噴霧需考慮的樣品電噴霧需考慮的53ESI的電離模式的選擇原則ESI(+)：

-適應(yīng)于堿性樣品，含有仲氨或叔氨基時(shí)可優(yōu)先考慮-適合酸性系統(tǒng)：容易加合質(zhì)子

ESI(-)：-適應(yīng)于酸性樣品，含氯、含溴和多個(gè)羥基時(shí)可嘗試使用-在堿性系統(tǒng)中：易失去質(zhì)子對(duì)于本身離子流較弱的樣品建議

-

在酸性系統(tǒng)中做ESI(+)

ESI的電離模式的選擇原則54質(zhì)譜常用術(shù)語

1、分子離子(molecularion)自由基（radical）離子M?+。很活潑，易碎裂而產(chǎn)生廣義的碎片離子2、準(zhǔn)分子離子(quasi-moleculanrion)由軟電離技術(shù)產(chǎn)生的質(zhì)子或其他陽離子加合離子以及去質(zhì)子化或其他陰離子加合離子。3、碎片離子(fragmention)電離后具有過剩內(nèi)能的分子離子能以多種方式裂解生成碎片離子。4、多電荷離子(multiply-chargedion)5、同位素離子(isotopicion)質(zhì)譜常用術(shù)語

1、分子離子(molecularion)55ESI正、負(fù)離子模式常見離子:

正離子模式：

［M+H］+

［M+1］+

［M+Na］+

［M+23］+

［M+K］+［M+39］+

［M+NH4］+［2M+18］+

［2M+H］+［2M+1］+

［2M+Na］+［2M+23］+

負(fù)離子模式：

［M-H］-

M-1

ESI正、負(fù)離子模式常見離子:56ES