體外診斷試劑分析性能評估系列指導(dǎo)原則

附件:〈〈體外診斷試劑分析性能評估系列指導(dǎo)原則（征求點(diǎn)見稿）？目錄.體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則一一編制說明.體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則一一檢測限.體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則一一線性范圍.體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則一一可報(bào)告范圍.體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則一一準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）.體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則一一準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對）.體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則精密度.體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則一一干擾實(shí)驗(yàn).體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則一一穩(wěn)定性附件1:體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則編制說明《體外診斷試劑注冊管理辦法(試行)》頒布后，體外診斷試劑產(chǎn)品的注冊過程中要求提供申報(bào)產(chǎn)品的分析性能評估資料，產(chǎn)品性能評估是產(chǎn)品研發(fā)、制定產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)等過程的重要技術(shù)支持研究過程，并可能對產(chǎn)品的質(zhì)H造成一定的影響。目前國際上對體外診斷試劑的性能評估通常是以美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化組織(ClinicalandLaboratoryStandardsInstitude以下稱為CLS)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)，也是美國FDA推薦采用的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，但我國還沒有相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)及指導(dǎo)原則的要求。為進(jìn)一步明確體外診斷試劑分析性能評估的技術(shù)要求,精品文檔為進(jìn)一步明確體外診斷試劑分析性能評估的技術(shù)要求,精品文檔確體外診斷試劑產(chǎn)我中心組織有關(guān)專家起草產(chǎn)品分析性能評估指導(dǎo)原則，以明確體外診斷試劑產(chǎn)品性能評估的技術(shù)要求。體外診斷試劑產(chǎn)品性能評估包括檢測限、線性范圍、可報(bào)告范圍、準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）、準(zhǔn)確度（方法學(xué)比較）、精密度、干擾實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性、參考區(qū)間共九個(gè)項(xiàng)目。起草的主要依據(jù)CLSI發(fā)布的以下標(biāo)準(zhǔn)：C28-A2:Howtodefineanddeterminereferenceintervalsintheclinicallaboratory;ApprovedGuideline-SecondEdition.EP5-A:Evaluationofprecisionperformanceofclinicalchemistrydevices;ApprovedGuideline.EP6-A:Evaluationofthelinearityofquantitativemeasurementprocedures;AStatisticalApproach;ApprovedGuideline.EP7-A:Interferencetestinginclinicalchemistry;ApprovedGuideline.EP9-A2:Methodcomparisonandbiasestimationusingpatientsamples;ApprovedGuideline-SecondEdition.每項(xiàng)性能的主要研究方法均采用以上標(biāo)準(zhǔn)和國內(nèi)實(shí)際采用的評價(jià)方法相結(jié)合的方法。我中心對于專家起草的指導(dǎo)原則的初稿進(jìn)行了適當(dāng)?shù)奈淖终{(diào)整，之后將分家的回復(fù)意見進(jìn)行了整理，對有些意見進(jìn)行了采納，有些意見暫時(shí)沒有采納。采納的意見，如：線性范圍中的“3.4計(jì)算公式”的描述采用專家意見將公式的書寫進(jìn)行了文字更改，與CLSI文件一致；“3.溫U除離群值”中的Y的均描述由Yave改為國；還有一些文字性錯(cuò)誤也進(jìn)行了修改。有一些專家意見因?yàn)閷σ恍└拍钸€存在分歧，因此暫時(shí)未采納，待經(jīng)過專家討論會(huì)后再進(jìn)行確定。如“檢測限評估”中的檢測方法“連續(xù)測定20次，計(jì)算均值加2SD的方法缺少依據(jù)，建議采用可報(bào)告范圍評估下限所提供的方法?！?；“建議將批內(nèi)/批間精密度”改為“分析內(nèi)/分析間精密度”；“精密度是用變異系數(shù)表示還是用置信區(qū)間表示”；參考值：“結(jié)果分析中應(yīng)首先驗(yàn)證是否為正態(tài)分布，對于正態(tài)分布，則應(yīng)根據(jù)臨床應(yīng)用目采用均值±2SD或均值土3SD,對于偏態(tài)分布則應(yīng)選擇單側(cè)95粉位數(shù)或雙側(cè)2.5%-97.5%分位數(shù)”。由于一些概念在學(xué)術(shù)界還存在分歧，因此我們會(huì)通過上網(wǎng)征求意見和專家會(huì)的形式進(jìn)行討論，找到最理想、最適合企業(yè)及我國國情又能保證產(chǎn)品質(zhì)量的評價(jià)方法。附件2體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則——檢測限（征求意見稿）檢測限(limitofdetection)是指檢測方法可檢測出的最低被測量濃度，也稱檢測低限(lowerlimitofdetection)或最小檢出濃度(minimumdetectableconcentration),有時(shí)也稱為分析靈敏度(analyticalsensitivity)。檢測限評估資料是評價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報(bào)資料之一。本指南基于國家食品藥品監(jiān)督管理局〈〈體外診斷試劑注冊管理辦法(試行)？(以下簡稱〈〈辦法》)的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對定量檢測方法檢測限的評估方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了要求。其目也為注冊管理部的是為生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行定量檢測方法檢測限評估提供原則性指導(dǎo),也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)參考。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行定量檢測方法檢測限評估。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對本指南進(jìn)行修訂。檢測限評估的基本原則.實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)熟悉檢測方法與儀器操作；.采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)；.用于實(shí)驗(yàn)的試劑應(yīng)為同一批號(hào)，且在有效期內(nèi)。檢測限的評估和數(shù)據(jù)處理方法.實(shí)驗(yàn)材料和基本要求空白樣本的制備：空白樣本應(yīng)不含被測物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測定常規(guī)樣本相同。如空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液。或根據(jù)測定項(xiàng)目選用相應(yīng)基質(zhì)的樣本，但應(yīng)注意將基質(zhì)效應(yīng)減至最小。.實(shí)驗(yàn)方法在一次運(yùn)行中將空白樣本重復(fù)測定20在一次運(yùn)行中將空白樣本重復(fù)測定20次.數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)記錄：將測定結(jié)果記錄于表格中。如果檢測系統(tǒng)對于低于零的結(jié)果報(bào)告為零，應(yīng)記錄初始響應(yīng)值，如吸光度值等。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：計(jì)算20次結(jié)果的均值風(fēng)與標(biāo)準(zhǔn)差SDo.結(jié)果報(bào)告：以空白均值加兩倍標(biāo)準(zhǔn)差報(bào)告方法的檢測限。（困+2SD）體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則——線性范圍（征求意見稿）線性范圍評估資料是評價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報(bào)資料之一。本指南基于國家食品藥品監(jiān)督管理局〈〈體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》、〈〈中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)---定量測定方法的線性評價(jià)》的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對定量檢測方法中線性范圍的評估方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行線性范圍評估及準(zhǔn)備線性范圍評估資料也為提供原則性指導(dǎo),也為同時(shí)，本注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)參考同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室建立定量測定方法的線性范圍或?qū)?biāo)稱的線性參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對本指南進(jìn)行修訂。二、線性范圍評估的基本原則(1)實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)熟悉方法原理與操作，能對樣本進(jìn)行正確處理，確保儀器工作狀態(tài)正常，采用適當(dāng)?shù)男?zhǔn)品對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。(2)儀器的各項(xiàng)性能指標(biāo)(如精密度)應(yīng)與標(biāo)稱值相符，不存在明顯的攜帶污染等。(3)應(yīng)使用同批號(hào)試劑及校準(zhǔn)品。三、線性范圍的評估及數(shù)據(jù)處理方法.實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求和制備方法基本要求(1)樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實(shí)驗(yàn)樣本相似，但不可采用含有對測定方法具有明確干擾作用物質(zhì)的樣本，如溶血、脂血、黃疸或含有某些特定藥物的樣本。進(jìn)行血清學(xué)標(biāo)志物檢測時(shí)，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清。(2)建立一種定量測定方法的線性范圍時(shí)，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇7-11個(gè)濃度水平。如將預(yù)期測定范圍加寬至130%,在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。(3)當(dāng)對標(biāo)稱線性參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證時(shí)，需在已知線性范圍內(nèi)選擇5-7個(gè)濃度水平。(4)無論是建立或驗(yàn)證線性范圍，所選用的濃度水平應(yīng)可覆蓋整個(gè)預(yù)期測定范圍并包括與臨床有關(guān)的重要評價(jià)濃度，如最小測定濃度或線性范圍的最低限、不同的醫(yī)學(xué)決定水平、最大測定濃度或線性范圍的周限等。制備方法(1)不同濃度水平的樣本可通過將高濃度樣本與低濃度樣本進(jìn)行倍比稀釋得到，注意在進(jìn)行液體吸取時(shí)應(yīng)選擇精密度與準(zhǔn)確性好的移液裝置。制備時(shí)應(yīng)將樣本完全混合并避免蒸發(fā)或其他使樣本變質(zhì)的情況。每份樣本的濃度與體積單位應(yīng)統(tǒng)一。(2)如果高/低濃度血清的值未知，可將每種血清編碼，用編碼代表每個(gè)血清的相對濃度。對于等濃度間隔樣本，可用連續(xù)整數(shù)(如1、2、3、4、5)代表連續(xù)樣本。進(jìn)行數(shù)據(jù)處理時(shí)可用樣本號(hào)代替X表1和表2中描述的樣本制備過程是按照等濃度間隔的設(shè)計(jì)進(jìn)行

的，每個(gè)濃度水平的樣本量為1.00ml。制備非等濃度間隔的樣本時(shí)應(yīng)明確各樣本間的濃度關(guān)系，測定時(shí)可以這些樣本間的相對濃度比值做為X值。表1:11個(gè)濃度水平的樣本制備樣本號(hào)123456低濃度血清（ml）1.000.900.800.700.600.50高濃度血清（ml）0.000.100.200.300.400.50樣本號(hào)7891011

低濃度血清（ml）0.400.300.200.100.00高濃度血清（ml）0.600.700.800.901.00表2:5個(gè)濃度水平的樣本制備樣本號(hào)12345低濃度血清（ml）1.000.750.500.250.00高濃度血清（ml）0.000.250.500.751.00（3）樣本的特殊處理：在無法得到適用的人血清時(shí)，需對樣本進(jìn)行一些特殊處理以滿足實(shí)驗(yàn)要求。這些處理過程包括稀釋、加入添加物或透析、熱處理等，無論進(jìn)行何種處理均應(yīng)以保持基質(zhì)恒定為基本原則。在評價(jià)報(bào)告中應(yīng)對所使用的稀釋液、添加物、溶劑等的材料來源加以注明。樣本稀釋液應(yīng)選用由廠家推薦或經(jīng)實(shí)驗(yàn)室證明可使用的產(chǎn)品，如可采用5%牛血清白蛋白或人白蛋白溶液。欲提高樣本濃度時(shí)可在樣本中添加分析物純品。在添加物為溶液狀態(tài)時(shí)，應(yīng)注意添加液體對樣本的稀釋作用（小于10%）并注明所用溶.實(shí)驗(yàn)過程建立線性范圍：需測定9-11個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測定3-4次。驗(yàn)證標(biāo)稱線性參數(shù)：需測定4-6個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測定3-4次。所有樣本應(yīng)在一次運(yùn)行中或幾次間隔很短的運(yùn)行中隨機(jī)測定，最好在一天之內(nèi)完成。.數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)記錄(1)可參考表3進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄。(2)可采用其它形式進(jìn)行記錄，但應(yīng)注意保留原始數(shù)據(jù)。表3:線性評價(jià)數(shù)據(jù)記錄表(11個(gè)濃度水平，重復(fù)測定4次)卜目：樣品：義器：試劑/批號(hào)：校準(zhǔn)品/批號(hào)操作者：審核者：測定口期：樣本號(hào)測定1測定2測定3測定4均值

2345678910113.2數(shù)據(jù)可用性檢查可通過繪制散點(diǎn)圖對測定數(shù)據(jù)的可用性進(jìn)行初步檢查。以樣本號(hào)或樣本濃度為X軸，以測定結(jié)果為Y軸做圖，在圖上標(biāo)出針對每個(gè)樣本的測定值及每個(gè)濃度水平的測定均值，手工或用計(jì)算機(jī)做圖將均值點(diǎn)相連，觀察數(shù)據(jù)點(diǎn)與直線間的偏差，如偏差過大，表明數(shù)據(jù)組存在明顯非線性，需要對測定過程進(jìn)行檢查，排除因操作錯(cuò)誤所至誤差，并對樣本進(jìn)行重新測定。如圖形與直線接近，表明可對數(shù)據(jù)組繼續(xù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。剔除離群值離群值可由散點(diǎn)圖初步判斷，標(biāo)準(zhǔn)中建議采用格拉布斯(GRUBBS)法進(jìn)行離群值檢驗(yàn)。檢驗(yàn)步驟如下每組數(shù)據(jù)中有4個(gè)測定結(jié)果，分別記為y1,y2,y3,y4。⑴將4個(gè)測定值按大小順序排列，最大值記為max,最小值記為min;(2)由4個(gè)測定值計(jì)算均值0和標(biāo)準(zhǔn)差S:;=田(心)1祖=(y1+y2+y3+y4)/4;LJ(3)根據(jù)可疑值max或min分別按下式計(jì)算統(tǒng)計(jì)量t:t1=(max-M)/S,t2=(min-階/S;(4)根據(jù)給定的顯著性水平a和重復(fù)測定次數(shù)查表得臨界值(5)如t值大于臨界值，則相應(yīng)的可疑值為離群值。Grubbs檢驗(yàn)臨界值(Ta)值表樣本數(shù)顯著性水平樣本數(shù)顯著性水平0.050.0250.010.0050.050.0250.010.00531.1531.1551.1551.15541.4631.4811.4921.496進(jìn)行多項(xiàng)回歸分析對數(shù)據(jù)組進(jìn)行多項(xiàng)回歸分析，得到一級、二級與三級多項(xiàng)式。一級多項(xiàng)式為直線，二級多項(xiàng)式表示上升曲線或下降曲線，三級多項(xiàng)式表示S形曲線（在測量范圍兩端具有明顯的非線性）。多項(xiàng)式方程如下：級數(shù)多項(xiàng)式回歸白由度（Rdf）TOC\o"1-5"\h\z一級Y=b0+biX2二級Y=b0+biX+b2X23三級Y=b0+biX+b2X2+b3X34對回歸方程進(jìn)行線性檢驗(yàn)多元回歸方程中以bi表示的系數(shù)為回歸系數(shù)。在二級與三級方程中，b2與b3為非線性系數(shù)。對回歸方程進(jìn)行線性檢驗(yàn)就是對每個(gè)非線性系數(shù)作t檢驗(yàn)，判斷回歸系數(shù)與零是否有顯著性差異。b0與bl不反映非線性，故不需對其進(jìn)行檢驗(yàn)。對b2與b3的檢驗(yàn)方法如下：計(jì)算統(tǒng)計(jì)量t,計(jì)算公式為：t=bi/SEi其中，SEi為每個(gè)非線性系數(shù)的斜率標(biāo)準(zhǔn)誤，計(jì)算公式為[y(x-X)(y-P)]2其中，Y為回歸方程預(yù)測值，區(qū)與竹為測定均值。由公式df=L*R-Rdf計(jì)算白由度，L為樣本數(shù)，R為每個(gè)樣本的測定次數(shù)，Rdf為回歸白由度，即回歸方程中系數(shù)（包括b0）的個(gè)數(shù)。如測定5樣本，每個(gè)樣本重復(fù)測定4次，則對測定數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析后其三級多項(xiàng)式中L=5,R=4,Rdf=4,df=5*4-4=16。在t值表中尋找t界值（雙邊檢驗(yàn)，a=0.05），將計(jì)算出的t值與界值比較，如p>0.05，表示非線性系數(shù)與零無顯著性差異，數(shù)據(jù)組被認(rèn)為具線性，此時(shí)可對數(shù)據(jù)組進(jìn)行精密度檢驗(yàn)，具體方法見后。當(dāng)精密度符合線性判斷要求時(shí)，數(shù)據(jù)分析可結(jié)束。如p<0.05,表示此非線性系數(shù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，數(shù)據(jù)組為非線性，此時(shí)應(yīng)進(jìn)行臨床標(biāo)準(zhǔn)的線性與非線性檢驗(yàn)。臨床標(biāo)準(zhǔn)的線性與非線性檢驗(yàn)上述多項(xiàng)式回歸分析主要是利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行線性判斷，統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)的線性可稱為一階線性，對數(shù)據(jù)組的要求很高。對于在臨床實(shí)驗(yàn)室中使用的測定方法，在其臨床應(yīng)用實(shí)踐中允許有一定的非線性誤差，此時(shí)通過對統(tǒng)計(jì)學(xué)可得到臨床標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)的非線性作程度判斷,可得到臨床標(biāo)準(zhǔn)的線性，即二階線性臨床標(biāo)準(zhǔn)的線性檢驗(yàn)中使用了兩個(gè)統(tǒng)計(jì)量，ADL(偏離直線平均差異averagedeviationfromlinearity)與PctBnd(百分區(qū)界percentbound),對于大多數(shù)分析物PctBnd取5%。如ADL小于所要求的臨界判斷值，則可認(rèn)為數(shù)據(jù)組具有臨床可接受的線性，所擬合出的最適非線性多項(xiàng)式無臨床意義。ADL值的計(jì)算：ADL表示最優(yōu)擬合曲線與直線的平均差異，其計(jì)算公式如下：[p(x)-(abx)]2|ADL='xxLx100%p(x)：最優(yōu)擬合二階或三階方程的擬合值a+bx:擬合一階方程的擬合值L：樣本數(shù)c：總平均濃度(全部測量數(shù)據(jù)的平均值)c=(yi+y2+y3++yn)/n+重聶胄是平期值一稅性1略.....景憂多項(xiàng)式3dz1,434**J,IS，稀瞿俏敝最的「恰曲線與直線的平均差異值(ADL)將ADL與臨界值比較一般設(shè)定ADL小于5%為臨床允許誤差，即取PctBnd為5%,通過查表(見附表A與B)得到ADL臨界值。如ADL小于臨界值，可認(rèn)為多項(xiàng)式具有臨床可接受的非線性，為二階線性。如ADL大于臨界值，則為臨床不可接受的非線性。對數(shù)據(jù)組進(jìn)行精密度檢驗(yàn)測量數(shù)據(jù)的精密度可直接影響多項(xiàng)式回歸分析的結(jié)果，為提高統(tǒng)計(jì)功效，需對數(shù)據(jù)組進(jìn)行精密度檢驗(yàn)。計(jì)算最優(yōu)擬合方程的回歸標(biāo)準(zhǔn)誤(o)=、成-p(x)]2yi:各個(gè)測量值p(xi):最優(yōu)擬合方程的擬合值n:樣本數(shù)乘以重復(fù)次數(shù)(LxR)d:最優(yōu)擬合方程的階數(shù)計(jì)算不精密度用最優(yōu)擬合方程的回歸標(biāo)準(zhǔn)誤((T)與總平均濃度(C)的百分比代表不精密度。數(shù)據(jù)組的不精密度檢驗(yàn)跟據(jù)以下公式進(jìn)行判斷：cLR一.PctBndc)C(T:最優(yōu)擬合方程的回歸標(biāo)準(zhǔn)誤c:總平均濃度L:樣本數(shù)R:重復(fù)測量的次數(shù)C:常數(shù)(附表C)PctBnd:取5%不精密度滿足判斷式時(shí)，說明數(shù)據(jù)的精密度好可作線性評價(jià)。反之則表示數(shù)據(jù)的精密度差，不能作線性評價(jià)。當(dāng)PctBnd取5%時(shí)，尚可通過查不精密度和臨界值表判斷數(shù)據(jù)是否精密(附表A和B),如此時(shí)不精密度對應(yīng)的臨界值顯示P,表明測量數(shù)據(jù)的精密度不符合作線性判斷的要求.結(jié)果報(bào)告線性范圍報(bào)告的具體格式不要求，但至少應(yīng)包括以下幾方面：(1)進(jìn)行線性評價(jià)的實(shí)驗(yàn)室或生產(chǎn)廠家名稱。(2)被評價(jià)的方法或試劑名稱，批號(hào)。(3)測定項(xiàng)目。(4)線性范圍(如為二階線性應(yīng)包括臨床允許誤差)。(5)如可能應(yīng)標(biāo)出測定項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平及在此水平處的臨床允許誤附錄：表A不精密度和ADL的臨界值(PctBnd=5%,d=1或2階)15.55.55.45.45.45.426.16.05.95.85.85.736.66.46.36.36.26.147.16.96.86.76.66.556.67.47.27.17.06.968.27.97.77.57.47.278.7(P)8.4(P)8.17.97.87.68PP8.6(P)8.3(P)8.18.09PPPP8.5(P)8.3(P)>9PPPPPPL*R:樣本數(shù)*重復(fù)測量的次數(shù)表B不精密度和ADL的臨界值（PctBnd=5%,d=3階）

15.55.55.45.45.45.426.16.05.95.95.85.836.76.56.46.36.26.247.27.06.96.86.76.657.87.67.47.27.17.068.48.17.97.77.57.479.0(P)8.7(P)8.48.28.07.88PP8.9(P)8.6(P)8.48.29PPPP8.9(P)8.7(P)>9PPPPPPL*R:樣本數(shù)*重復(fù)測量的次數(shù)表C不精密度界值的常數(shù)最優(yōu)擬合方程的階數(shù)精密度界值的常數(shù)（C）階或二階6.3三階6.5附件4體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則——可報(bào)告范圍（征求意見稿）一、概述定量分析方法的可報(bào)告范圍（reportablerange）是臨床實(shí)驗(yàn)室發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告的依據(jù)之一，可報(bào)告范圍包括可報(bào)告低限與可報(bào)告高限?？蓤?bào)告范圍評估資料是評價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報(bào)資料之一。本指南基于國家食品藥品監(jiān)督管理局〈〈體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）》的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對定量檢測方法中可報(bào)告范圍的評估方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行可報(bào)告范圍評估及準(zhǔn)備可報(bào)告范圍評估資料提供原則性指導(dǎo)，也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)參考。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室對定量分析方法的可報(bào)告范圍進(jìn)行驗(yàn)證。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對本指南進(jìn)行修訂。二、可報(bào)告范圍評估的基本原則.實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)熟悉測定方法與儀器操作。.采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。.用于評價(jià)實(shí)驗(yàn)的試劑應(yīng)為同一批號(hào)，并在有效期內(nèi)。三、可報(bào)告范圍的評估及數(shù)據(jù)處理方法.實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求和制備方法樣本要求最好選擇與測定樣本具有相同基質(zhì)的樣本。制備方法（1）低值樣本：將待測樣本（含被分析物）用混合人血清（含被分析物濃度水平較低）或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋，產(chǎn)生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為5個(gè)濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。（2）高值樣本：選取含被測物的高值樣本，必要時(shí)可添加被分析物的純品，并計(jì)算出理論值。使用混合血清或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液或測定方法要求的稀釋液對高值待測樣本進(jìn)行稀釋，使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi)，并記錄稀釋倍數(shù)。至少選用三個(gè)高濃度樣本，稀釋倍數(shù)應(yīng)為方法性能標(biāo)明的最大稀釋倍數(shù)、并適當(dāng)增加或減小稀釋比例。.實(shí)驗(yàn)過程在一次運(yùn)行中將低值樣本重復(fù)測定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測定3次。.數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)記錄：可根據(jù)附表進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：分別計(jì)算AVE（肉）、SD、CV值。對于可報(bào)告范圍高限還應(yīng)計(jì)算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對偏差。.結(jié)果報(bào)告可報(bào)告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平做為可報(bào)告范圍低限。可報(bào)告范圍高限：選取還原濃度與理論濃度的偏差（%等于或小于方法標(biāo)示CV值時(shí)的最大稀釋倍數(shù)為方法推薦的最大稀釋倍數(shù)，方法線性范圍的上限與最大稀釋倍數(shù)的乘積為該方法可報(bào)告范圍的高限。附表:可報(bào)告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV%可報(bào)告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄濃度1濃度2濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對偏差（％）附件5體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則——準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）（征求意見稿）一、概述準(zhǔn)確度評估資料是評價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報(bào)資料之一。定量檢測方法的回收實(shí)驗(yàn)是評估準(zhǔn)確度的方法之一，用于評估定量檢測方法準(zhǔn)確測定加入純分析物的能力，結(jié)果用回收率表示。本指南基于國家食品藥品監(jiān)督管理局〈〈體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）〉〉的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對采用回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行準(zhǔn)確度評估的實(shí)驗(yàn)方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)采用回收實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行準(zhǔn)確度評估并準(zhǔn)備準(zhǔn)確度評估資料提供原則性指導(dǎo)，也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)參考。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室采用回收實(shí)驗(yàn)方法對準(zhǔn)確度進(jìn)行評估。

由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對本指南進(jìn)行修訂。二、回收實(shí)驗(yàn)評估的基本原則1.實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)熟悉測定方法與儀器操作。2,采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。三、回收實(shí)驗(yàn)的評估及數(shù)據(jù)處理方法.實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求和制備方法選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的3-4份。在其中2-3份樣本中加入不同量的待測物標(biāo)準(zhǔn)，制成2-3個(gè)不同加入濃度的回收樣本，計(jì)算加入的待測物的濃度。在另一份樣本中加入同樣量的無被測物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。.實(shí)驗(yàn)過程用待評價(jià)方法對回收樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測定，通常對樣本進(jìn)行2-3次重復(fù)分析，取其均值進(jìn)行計(jì)算。.數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告計(jì)算回收率：回收率1收樣本濃度1-基礎(chǔ)樣本濃度收樣本濃度1-基礎(chǔ)樣本濃度x100%加入濃度1計(jì)算平均回收率（回收率1+收率2+回收率3）X100%平均回收率計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=100%-平均回收率可接受判斷：比例系統(tǒng)誤差不大于CLIA88允許總誤差的1/2。.注意事項(xiàng)：加入體積：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)；并且保證在加樣過程中的取樣準(zhǔn)確度加入待測物的濃度：在保證總濃度在方法分析測量范圍內(nèi)，盡量使加入標(biāo)準(zhǔn)液后樣本中的被測物濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)決定水平。標(biāo)準(zhǔn)物濃度：因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)物溶液加入體積不到10%,為保證得到不同濃度的回收樣本，標(biāo)準(zhǔn)物的濃度應(yīng)該足夠高。.范例一一某法測定血清葡萄糖回收率樣本制備：（1）基礎(chǔ)血清：血清1ml（濃度5.5mmol/L）+蒸館水0.1ml;（2）回收樣本1:血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液（濃度22mmol/L）;（3）回收樣本2:血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液（濃度55mmol/L）;采用待評價(jià)方法，按照從低到高的濃度順序，每個(gè)樣本測定3次，取平均值。填入下表:測定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率％基礎(chǔ)樣本5.00分析樣本17.062.002.06103分析樣本29.955.004.9599103+99X100%5.3計(jì)算平均回收率：平均回收率=2J=101%計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=|100%-101%|=1%1-TEa=5%可接受判斷：L>1%,該方法的回收試驗(yàn)（準(zhǔn)確度）試驗(yàn)可接受附件6:體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則——準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對）（征求意見稿）一、概述很多臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部，通常會(huì)有兩個(gè)以上的檢測系統(tǒng)，多個(gè)檢測系統(tǒng)之間應(yīng)該定期進(jìn)行比對。對于開放檢測系統(tǒng)，也應(yīng)該對系統(tǒng)進(jìn)行驗(yàn)證，其中最重要的一項(xiàng)便是準(zhǔn)確度的評價(jià)，準(zhǔn)確度評價(jià)可以通過方估是評估準(zhǔn)法學(xué)比對來實(shí)現(xiàn)，利用兩種方法的比對對非配套系統(tǒng)的準(zhǔn)確度進(jìn)行評估是評估準(zhǔn)確度的方法之一。準(zhǔn)確度評估資料是評價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報(bào)資料之一。本指南基于國家食品藥品監(jiān)督管理局〈〈體外診斷試劑注冊管理辦法(試行)》的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對采用方法學(xué)比對進(jìn)行準(zhǔn)確度評估的實(shí)驗(yàn)方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)采用方法學(xué)比對進(jìn)行準(zhǔn)確度評估并準(zhǔn)備準(zhǔn)確度評估資料提供原則性指導(dǎo)，也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)參考。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室采用方法學(xué)比對進(jìn)行準(zhǔn)確度評估。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對本指南進(jìn)行修訂。二、方法學(xué)比對的基本原則1.熟悉待評價(jià)系統(tǒng)。.編寫儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，其中包括校準(zhǔn)程序和室內(nèi)質(zhì)控程序。.比對方法的選擇：對于比較、對方法，采用符合生產(chǎn)廠家要求的實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)行方法，或采用公認(rèn)的參考方法。比對方法應(yīng)具有以下條件：(1)具有比實(shí)驗(yàn)樣品方法更好的精密度（2）沒有已知的干擾物（3）同實(shí)驗(yàn)樣品方法具有相同單位。比較方法應(yīng)該選擇正確性經(jīng)過驗(yàn)證的方法，根據(jù)實(shí)際條件，選擇的順序如下：參考方法、原裝系統(tǒng)、配套系統(tǒng)、經(jīng)過驗(yàn)證的非配套系統(tǒng)。4.待評價(jià)方法的處理：進(jìn)行方法學(xué)對比實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)該對系統(tǒng)進(jìn)行初步評價(jià)（可參考NCCLSEP-10）,并且對待評價(jià)方法進(jìn)行精密度評價(jià)（參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)），只有在以上評價(jià)完成并且達(dá)到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)后，才可進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn)。三、方法學(xué)比對的評估及數(shù)據(jù)處理方法.實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求按照實(shí)驗(yàn)對樣品的要求收集處理病人樣品，樣本貯存時(shí)間及條件由被測組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用貯存的樣品。樣品應(yīng)來白于許多病人，并且此病人的疾病對于被測組成的影響應(yīng)該是知道的，不要使用含有干擾此方法的組分或條件（如溶血）樣品。在具有臨床意義范圍內(nèi)即醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)，評價(jià)實(shí)驗(yàn)樣品方法，通?；緩牡陀趨⒖挤秶牡拖薜礁哂趨⒖挤秶母呦?。分析濃度盡可能在報(bào)告的濃度范圍內(nèi)均勻分布。商品質(zhì)控物或者校準(zhǔn)物可能存在基質(zhì)效應(yīng)，應(yīng)避免使用.實(shí)驗(yàn)過程每天選擇8個(gè)臨床病人樣本，按1到8的順序編號(hào)。用兩種方法同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，按照1,2,3,4,5,6,7,8,8,7,6,5,4,3,2,1的樣本順序進(jìn)行測定。以上實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)5天，即至少分析40個(gè)不同的臨床病人樣本。每天實(shí)驗(yàn)必須進(jìn)行校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控。只有在室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，當(dāng)天的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)才有效。.數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告記錄測定結(jié)果（Xii和Yjj）。計(jì)算每個(gè)樣本測定的均值（元和Y；）,樣本重復(fù)測定間差值的絕對值（DXi和DYi）及兩種方法測定結(jié)果間的差值（Y;-X；）。以祁對泌作散點(diǎn)圖。以（祁-元）對如做偏倚圖。以（Yjj-Xij）對元做偏倚圖。檢查批內(nèi)離群點(diǎn)：計(jì)算樣本重復(fù)測定間差值（DXi和DYi）的平均數(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果差值超出平均數(shù)4倍時(shí)，則判斷為離群點(diǎn)。檢查批間離群點(diǎn)：計(jì)算兩種方法測定結(jié)果間均值差值（"又）的平均數(shù)，超出該平均數(shù)4倍時(shí)，則判斷該樣本為離群點(diǎn)。相關(guān)系數(shù)計(jì)算：利用所有樣本雙份測定值進(jìn)行相關(guān)系數(shù)計(jì)算，如果r逋.975（或r2逋.95）,則認(rèn)為X范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。X的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給以適當(dāng)補(bǔ)償，并且簡單的線性回歸可以用來評價(jià)斜率和截距。如果r2<0.95,那么必須通過分析另外一些樣品以擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列。如果沒有超出范圍，采用分步偏差程序代替線性回歸，評價(jià)平均偏差?；貧w計(jì)算：利所有樣本雙份測定的有效數(shù)據(jù)，計(jì)算兩個(gè)方法間的線性回歸方程：Y=a+bX.偏差估計(jì)：在醫(yī)學(xué)決定水平，利用回歸方程計(jì)算預(yù)期偏差，預(yù)期偏差Bx=a+（b-1）X,相對偏差=Bx/X根據(jù)相關(guān)規(guī)定，判定預(yù)期偏差、相對偏差是否在規(guī)定范圍內(nèi)。附件7:體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則——精密度（征求意見稿）一、概述精密度是衡量體外診斷試劑批內(nèi)和批間變異的重要指標(biāo)，通常包括批內(nèi)和批間不精密度。精密度評估資料是評價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報(bào)資料之一。本指南基于國家食品藥品監(jiān)督管理局〈〈體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）?（以下簡稱〈〈辦法》）的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對定量檢測方法中精密度的評估和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行定量檢測方法中精密度的評估提供原則性指導(dǎo)，也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)參考。同時(shí)，本指南亦可指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行定量檢測方法的精密度評估。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對本指南進(jìn)行修訂。二、定義.批內(nèi)精密度是眾多種類精密度中最基本的一個(gè)，它是在嚴(yán)格的相似條件下，所得到的最佳的精密度。.批間精密度指在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號(hào)試劑，在一段時(shí)間內(nèi)（一般為一個(gè)月或20個(gè)工作日）對同一測試樣品（常用質(zhì)控品）測量結(jié)果的精密度。三、精密度評估的基本原則.操作者必須熟悉方法和/或儀器工作原理，了解并掌握儀器的操作步驟和各項(xiàng)注意事項(xiàng)，能在評估階段維持儀器的可靠和穩(wěn)定。.用于評估試驗(yàn)的樣品一般常采用臨床實(shí)驗(yàn)室收集的穩(wěn)定和冷凍貯存的血清(漿)庫；當(dāng)實(shí)驗(yàn)室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時(shí)，也可考慮使用穩(wěn)定的、以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的冏品物質(zhì)，如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品。.評估精密度時(shí)，應(yīng)至少評估二個(gè)濃度水平樣本的精密度。當(dāng)二個(gè)濃度的精密度有顯著差異時(shí)，建議增加為三個(gè)濃度。所選樣本濃度應(yīng)在測量范圍內(nèi)有醫(yī)學(xué)意義，即至少有一個(gè)濃度在醫(yī)學(xué)決定水平(medicaldecisionlevels)左右。不要為了得到較小的精密度，者B選用較高值的樣品，甚至超出測量范圍。也不應(yīng)選用靠近最低檢出限的樣品，此時(shí)所得的精密度往往偏大。相當(dāng)多的檢驗(yàn)項(xiàng)目低值常無實(shí)際臨床意義，但有少數(shù)檢驗(yàn)項(xiàng)目，其低值也有臨床價(jià)值，此時(shí)就需要評估有判斷價(jià)值的低值精密度，適用時(shí)，可進(jìn)行功能靈敏度的評估。如沒有醫(yī)學(xué)決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選一個(gè)濃度。此外，再根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的性質(zhì)在線性區(qū)間內(nèi)選擇另一個(gè)值。如與廠商或文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)的精密度進(jìn)行比較，所選濃度應(yīng)與被比較精密度的濃度相接近。否則，有可能得出不恰當(dāng)?shù)慕Y(jié)論。四、精密度評估的方法和數(shù)據(jù)處理.只評估批內(nèi)不精密度如可能,試劑和校準(zhǔn)品：應(yīng)使用同一種類、同一批號(hào)的試劑和校準(zhǔn)物如可能,驗(yàn)結(jié)果的變異程度只進(jìn)行一次校準(zhǔn)。使用不同批號(hào)試劑和多次校準(zhǔn)都會(huì)增加檢驗(yàn)結(jié)果的變異程度評估方法：在以上條件滿足的情況下，在一批內(nèi)對樣本進(jìn)行重復(fù)測定，至少進(jìn)行20次重復(fù)測定。質(zhì)量控制：檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)同時(shí)至少測一個(gè)質(zhì)控品。當(dāng)質(zhì)控品結(jié)果超出規(guī)定的失控限，不論實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否滿意都應(yīng)棄去不用，重新進(jìn)行試驗(yàn)以取得20個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。要保存所有的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)和失控處理記錄。數(shù)據(jù)收集：在進(jìn)行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無由于偶然差錯(cuò)引起的離群值(outliers),可用下述離群值的標(biāo)準(zhǔn)；從已收集的20數(shù)據(jù)計(jì)算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，任何結(jié)果和總均值的差值超過4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差時(shí)，可認(rèn)為是離群值。為了能收集到至少20個(gè)有效數(shù)據(jù)。除補(bǔ)充由于質(zhì)控失控而增加的測試外，還應(yīng)再增加由于離群值不用于精密度的計(jì)算所需增加的檢驗(yàn)次數(shù)。在進(jìn)行這種批內(nèi)精密度評估實(shí)驗(yàn)時(shí)，一次只能有一個(gè)離群值，當(dāng)離群值超過1個(gè)時(shí)，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時(shí)，應(yīng)不用此次試驗(yàn)數(shù)據(jù)。檢查問題和解決問題后重新開始新的評估實(shí)驗(yàn)。數(shù)據(jù)的記錄：將所收集到的數(shù)據(jù)記錄在表1:表1批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄序號(hào)測量值(均值-測量值)212......1920均值批內(nèi)精密度估計(jì)值的計(jì)算求出均值：x=EXi/n使用下列公式計(jì)算出批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差估計(jì)值的標(biāo)準(zhǔn)差S「=、'(x-xi)2/(n-1)批內(nèi)精密度估計(jì)值的95%可信限查統(tǒng)計(jì)表得出白由度20的上限公差因數(shù)為1.25,相應(yīng)下限公差因數(shù)為0.75,得出批內(nèi)精密度的95%可信區(qū)間為：(批內(nèi)精密度X0.75)-(批內(nèi)精密度X1.25)2.同時(shí)評價(jià)批內(nèi)和批間不精密度評估方法：每天做2個(gè)批次的測試，每批測試時(shí)，對同一樣品作雙份測量，共做20天。評估結(jié)束時(shí)共有40對，即80個(gè)測試結(jié)果。從40批次測量中雙份結(jié)果的差值求出批內(nèi)精密度。從所有80個(gè)數(shù)據(jù)計(jì)算出批間精密度。在實(shí)施此項(xiàng)評估工作時(shí)，必須由同一個(gè)或一組操作者在同一臺(tái)儀器上進(jìn)行，應(yīng)該使用相同的校準(zhǔn)品、相同種類和批號(hào)的試劑。所用時(shí)間不得少于20個(gè)工作日，這樣所測到的精密度能更好地反映出該臨床實(shí)驗(yàn)室定量測量方法在一段時(shí)間內(nèi)的理想或最適的穩(wěn)定性。數(shù)據(jù)能夠在每一批次測量中，必須同時(shí)測量質(zhì)控品，以保證結(jié)果是可靠的,數(shù)據(jù)能夠采用注：①也可以一日進(jìn)行一個(gè)批次測量，一個(gè)批次中對同一樣品重復(fù)測量4次，共測20個(gè)工作日，由80個(gè)數(shù)據(jù)求出批內(nèi)和批間精密度；②如果取得穩(wěn)定樣品有困難，也可改為測5日，每日2個(gè)批次，每個(gè)批次測一個(gè)樣本8次。仍有80個(gè)數(shù)據(jù)。從10個(gè)批次中每一樣品8次差異算出批內(nèi)精密度。從所有80個(gè)結(jié)果計(jì)算出批間精密度。數(shù)據(jù)的收集要收集到足夠有效數(shù)據(jù)(至少為80個(gè)數(shù)據(jù))。除補(bǔ)充由于質(zhì)控失控而增加的測試外，應(yīng)在進(jìn)行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無由于偶然差錯(cuò)弓I起的離群值(outlier),可用下述剔除值的7示準(zhǔn);從實(shí)施段已收集的40對均值的數(shù)據(jù)計(jì)算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，出現(xiàn)下列任何一種情況都可認(rèn)為是離群值:(1)任何一對均值和總均值的差超過4倍標(biāo)準(zhǔn)差(2)任何一對中二個(gè)結(jié)果的絕對差值超過4倍標(biāo)準(zhǔn)差離群值不用于精密度的計(jì)算。在剔除后應(yīng)再增加檢驗(yàn)次數(shù)，以保證至少有40批次,80個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算。注：任何一次實(shí)驗(yàn)的剔除值不能超過總測量數(shù)的2.5%。當(dāng)超過時(shí),應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時(shí)應(yīng)不用此次試驗(yàn)數(shù)據(jù)，重新開始新的試驗(yàn)。2.3數(shù)據(jù)的記錄將所收集到的數(shù)據(jù)記錄在表2序號(hào)日期批次1批次2結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值12表2精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄1920批內(nèi)精密度的計(jì)算按表3要求對數(shù)據(jù)進(jìn)行進(jìn)一步計(jì)算，將結(jié)果填入表3表3精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)計(jì)算日批次1批次2（結(jié)果1-結(jié)果2）2（結(jié)果1-結(jié)果2）2121920利用表4中的結(jié)果（3）、（4）可計(jì)算出批內(nèi)精密度Sr:Sr（Xi-X2）2/（4I）,其中I二檢驗(yàn)口數(shù)批間精密度估計(jì)值的計(jì)算將上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄在表4中表4:批間精密度實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)記錄i=r.勺日期第一批第二批結(jié)果1（均值-結(jié)果1）2結(jié)果2（均值-結(jié)果2）2結(jié)果1（均值-結(jié)果1）2結(jié)果2（均值-結(jié)果2）212…...1920合計(jì)(1)(5)(2)(6)(3)(7)(4)(8)求出均值，公式為：又X/n從上表得出：X=[(1)(2)(3)(4)]/n求出批間精密度，公式為：Srr=(均值-結(jié)果1)2+￡(均值-結(jié)果2)2】/(n-1)從上表得出Srr=[(5)—⑺一(6)—(8)]/(n匚1)式中門=檢驗(yàn)總數(shù)批間精密度估計(jì)值的置信區(qū)間由于檢驗(yàn)次數(shù)不可能無限增加，當(dāng)按規(guī)定方案，多次重復(fù)測量，就是在很好控制條件下，也很難得到相同的值，換言之，通過這樣實(shí)驗(yàn)的數(shù)值只是精密度的估計(jì)值，圍繞“真值”而變動(dòng)。變動(dòng)的范圍大小和檢驗(yàn)次數(shù)密切相關(guān)。人們往往在給出精密度值外，還給出其95%的置信區(qū)間。檢次數(shù)相關(guān)白由度的置信區(qū)間與所測次數(shù)相關(guān)，次數(shù)愈多，可信限愈小?？梢圆槌雠c檢次數(shù)相關(guān)白由度的0.95因數(shù)，乘以標(biāo)準(zhǔn)差值就可得出95%可信限的上、下值。實(shí)際工作中，可查出95%可信限的上值的公差因數(shù)（tolerancefactor）,由此計(jì)算出95%可信限。實(shí)驗(yàn)室在報(bào)告精密度同時(shí)，可給出95%置信區(qū)間。3.與其它來源的精密度的比較臨床實(shí)驗(yàn)室在測定方法的精密度后，應(yīng)評價(jià)得到的精密度是否滿意，最簡單辦法就是與生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）所提供的精密度進(jìn)行比較，判斷是否存在差異。如果臨床實(shí)驗(yàn)室所測的精密度小于生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）的精密度，說明臨床實(shí)驗(yàn)室所得到的精密度是合適的。如果臨床實(shí)驗(yàn)室測得的精密度大于生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）的值，可利用F-檢驗(yàn)法（F-test）,即方差比值檢驗(yàn)（varianceratiotest）對實(shí)驗(yàn)室測得的結(jié)果和生產(chǎn)企業(yè)提供的結(jié)果進(jìn)行比較計(jì)算。表5是為此工作設(shè)計(jì)的數(shù)據(jù)記錄和計(jì)算表格：表5與生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）聲明批間標(biāo)準(zhǔn)差的比較表實(shí)驗(yàn)濃度=聲明濃度=實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)差=Sr或Srr聲明標(biāo)準(zhǔn)差=頃或orr方差=Sr2或Srr2力差=0T2或（Trr2測量次數(shù)白由度=n-1聲明測量次數(shù)白由度=n-1注：標(biāo)準(zhǔn)差大小常與濃度有關(guān)，比較時(shí)，必須檢查二者濃度是否接近一致，如差異較大不應(yīng)進(jìn)行比較。如接近一致，按下列公式計(jì)算出F值，以批間精密度為例：F=Srr2/命2將計(jì)算出的F值和根據(jù)二組白由度從表6中查到的F值(p=0.05)進(jìn)行比較，如計(jì)算F值小于查表得出F值，雖然實(shí)驗(yàn)室得到的標(biāo)準(zhǔn)差大于聲稱值，但在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異。反之，說明實(shí)驗(yàn)室得到的標(biāo)準(zhǔn)差沒有達(dá)到方法應(yīng)達(dá)到的水平。此時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該進(jìn)一步改善條件，例如培訓(xùn)操作人員，修改操作程序或者維修儀器等再次進(jìn)行測定。仍然達(dá)不到時(shí)，應(yīng)與生產(chǎn)企業(yè)討論和取得協(xié)助。表6F分布臨界值表(p=0.05)分子自由度5105101420405.054.744.644.564.464.4420084.362.542.071.841.621.511.391.281.321.25分母自由度05101520304060100120TOC\o"1-5"\h\z3.332.982.902.542.712.352.532.162.452.082.371.992.311.932.292.862.772.422.332.222.122.041.931.951.841.861.751.791.681.911.782.662.642.202.181.991.971.791.761.691.661.591.561.52