版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
【聲明】:根據(jù)老師的說(shuō)法,掌握這些知識(shí)僅是不至于掛紅燈;想要取得好成績(jī),還要多看書,并注意上課時(shí)強(qiáng)調(diào)的內(nèi)容。檢驗(yàn)核醫(yī)學(xué):是將實(shí)驗(yàn)核醫(yī)學(xué)的相關(guān)核技術(shù)應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的一門重要的交叉學(xué)科?;蛘撸菏菍?shí)驗(yàn)核醫(yī)學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的有關(guān)技術(shù)結(jié)合應(yīng)用于臨床診斷的一門邊緣性學(xué)科。元素:指具有相同質(zhì)子數(shù)的一類原子核。核素:凡是原子核內(nèi)的質(zhì)子數(shù)相同(Z相同),中子數(shù)不同(即質(zhì)子數(shù)之和與中子數(shù)之和不相等,A不相同)所處能態(tài)也也一致的一類原子核。比如氫、氘、氤都是氫元素的核素。同質(zhì)異能素:指原子核內(nèi)質(zhì)子數(shù)相等,中子數(shù)相同,但所處能態(tài)不一致的核素間的相互關(guān)系的稱謂。同位素:質(zhì)子數(shù)相同而種子數(shù)不相同的核素互稱同位素。放射性:一種核素能自發(fā)的發(fā)生核的結(jié)構(gòu)或/和能態(tài)的變化,釋放出離子和/或光子,生成另一種核素的性質(zhì),這種變化過(guò)程稱為放射性衰變。那么具有放射性的核素稱為放射性核素,反之稱為穩(wěn)定性核素。核衰變包括三大類:a衰變,p衰變,y躍遷和內(nèi)轉(zhuǎn)換。Ia衰變:;XTY+;He+Q母核子核衰變能邛-衰變:*Xr+:Y+?e+v+Q母核子核8-反中微子衰變能18+衰變:;X^^;Y++;e+v+Q母核子核B+中微子衰變能I電子俘獲EC:放射性核素的原子核衰變時(shí),從核外俘獲一個(gè)軌道電子而變成另一種原子核的放射性轉(zhuǎn)變過(guò)程,稱為電子俘獲。見下圖:;X+—+V+Q母核子核中微子衰變能IY躍遷的本質(zhì):原子核由激發(fā)態(tài)轉(zhuǎn)為基態(tài),并釋放丫射線。Y射線是波長(zhǎng)極短的電磁波,不帶電,質(zhì)量為零,或稱為光子流。見下圖:戮一牧+Y激發(fā)態(tài)Y射線I核衰變規(guī)律:放射性核素的衰變按時(shí)間的指數(shù)規(guī)律衰減。見下圖:物理半衰期:在單一的放射性衰變過(guò)程中,放射性核素衰變掉一半所需的時(shí)間,簡(jiǎn)稱半衰期,
記為T或者T(1/2)T=0.693/入,這表明半衰期與衰變常數(shù)成反比,核素的衰變常數(shù)越大,其半衰期越短。核醫(yī)學(xué)中常用的放射性核素,如131I的半衰期為T(1/2)=8.04天,125I的半衰期T(1/2)為60.2天。I用半衰期表征衰變規(guī)律,有:N=N0(l/2)VT生物半衰期:非放射性藥物因生物代謝在體內(nèi)存留量減少一半所需的時(shí)間。又稱為生物半減期。放射性核素進(jìn)入人體后,一方面由于物理衰變而減少,另一方面由于生物代謝而被排出,故有1/Teff=1/T+1/Tb或Teff=(T*Tb)/(T+Tb)有效半衰期:指生物體內(nèi)的放射性核素在生物代謝排出和物理衰變兩個(gè)因素的作用下,體內(nèi)存留量減少一半所需的時(shí)間。I再根據(jù)N=N0/2=NO*#』T,可將放射性核素在人體內(nèi)的負(fù)指數(shù)衰減規(guī)律寫成:N=NoeN=NoeT=l.44T放射性活度:?jiǎn)挝粫r(shí)間內(nèi)放射性原子核衰變的核數(shù)。是常用的反映放射性強(qiáng)弱的物理量。用A表示,公式:A=XNoe-AT=Aoe-XT或A=A0(i/2)t/T放射性比活度:當(dāng)放射性活度與放射性物質(zhì)的化學(xué)量相聯(lián)系時(shí),即單位化學(xué)質(zhì)量的放射性物質(zhì)所具有的放射性活度,稱為?。一般用S表示。放射性濃度:當(dāng)放射性活度與放射性物質(zhì)的體積相聯(lián)系時(shí),即單位體積的放射性物質(zhì)所含有的放射性活度,稱為?。一般用C表示。放射性活度單位:國(guó)際單位制(SI)單位為貝克勒爾,簡(jiǎn)稱貝可。定義:1Bq等于每秒發(fā)生1次核衰變。平時(shí)工作中仍有習(xí)慣于使用1975年前的放射性活度專用單位:居里(Ci),定義:1Ci等于3.7X10A10/so兩種單位的換算:1Ci=3.7X10A10Bq,1Bq=2.703X10A-11Ci帶電粒子與物質(zhì)的相互作用:激發(fā)與電離、散射、韌致輻射、契倫科夫輻射、吸收。Y射線與物質(zhì)的相互作用:光電效應(yīng)、康普頓-吳有訓(xùn)效應(yīng)、電子對(duì)生成、Y射線的吸收。照射量:X、Y射線對(duì)空氣電離能力的量,用于度量輻射場(chǎng)強(qiáng)度。它的國(guó)際單位制單位是庫(kù)/千克(C/kg),以前習(xí)慣使用的單位是倫琴(R),1R=2.58X10FC/kg。吸收劑量:指受照射物質(zhì)吸收任何電離輻射能量的物理量,它是從能量角度來(lái)反應(yīng)照射量的。劑量當(dāng)量:反映各種射線或粒子被吸收后引起的生物效應(yīng)強(qiáng)弱的電離輻射量。輻射防護(hù)的基本原則:①放射實(shí)踐的正當(dāng)性;②放射防護(hù)最優(yōu)化;③個(gè)人劑量限值。外照射防護(hù)措施:①用量防護(hù);②時(shí)間防護(hù);③屏蔽防護(hù);④距離防護(hù)內(nèi)照射防護(hù)措施:①阻塞通道;②藥物防護(hù);③加速排除。核探測(cè)器主要由射線探測(cè)器和后續(xù)電子學(xué)線路組成。閃爍型探測(cè)器主要由閃爍體、光導(dǎo)、光電倍增管、相關(guān)電子學(xué)線路和外周屏蔽層組成?;驹恚寒?dāng)射線通過(guò)閃爍體時(shí),閃爍體被射線電離、激發(fā),并發(fā)出一定波長(zhǎng)的光,這些光子射到光電倍增管的光陰極上發(fā)生光電效應(yīng)而釋放出電子,電子流經(jīng)光電倍增管多級(jí)陰極線路逐級(jí)放大后形成電脈沖輸入電子學(xué)線路部分,而后由定標(biāo)器記錄下來(lái)?,F(xiàn)代閃爍型探測(cè)器大多配備有計(jì)算機(jī)系統(tǒng)來(lái)處理測(cè)量結(jié)果。常用閃爍體包括固體閃爍體和液體閃爍體。NaI晶體閃爍體常用于測(cè)量Y射線,液體閃爍體主要用來(lái)測(cè)量低能8射線,也可測(cè)量低能Y射線。絕對(duì)測(cè)量:不借助中間手段直接測(cè)得放射性活度的方法,是對(duì)樣品的實(shí)有放射性強(qiáng)度作測(cè)量,求出樣品中標(biāo)記同位素的實(shí)際衰變率。多用于標(biāo)準(zhǔn)源或校正源的測(cè)量。相對(duì)測(cè)量:需借助中間手段,間接反映放射性活度的測(cè)量方法。即以常用測(cè)量?jī)x器所測(cè)得的脈沖計(jì)數(shù)多少來(lái)反映放射性活度的大小,只是在某個(gè)固定的探測(cè)儀器上做放射性強(qiáng)度的相對(duì)測(cè)量,不追求它的實(shí)際衰變率。適用于常規(guī)多樣品的測(cè)量,是核醫(yī)學(xué)中最常用的測(cè)量方法。本底:在沒有放射性樣品的情況下,儀器所測(cè)得的計(jì)數(shù),稱為?。放射性測(cè)量統(tǒng)計(jì)誤差的控制:一、提高計(jì)數(shù)N延長(zhǎng)測(cè)量時(shí)間;②適當(dāng)增加測(cè)量次數(shù)(但不超過(guò)3次);③減少測(cè)量系統(tǒng)的影響因素。二、控制本底計(jì)數(shù)的影響樣品最小可測(cè)量控制;②合理分配測(cè)量樣品和本底的時(shí)間穩(wěn)定同位素:是指元素中不發(fā)生或極不易發(fā)生放射性衰變(半衰期>10人15的放射性核素)的核素。元素的同位素組成常用同位素豐度表示,同位素豐度:是指一種元素的同位素混合物中,某特定同位素的原子數(shù)與該元素的總原子數(shù)之比。同位素失蹤技術(shù):是利用放射性核素或穩(wěn)定核素作為示蹤劑對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行標(biāo)記的微量分析方法。原理:利用放射性核素或穩(wěn)定核素及其標(biāo)記化合物與自然界中相對(duì)應(yīng)的同位素具有相同的化學(xué)性質(zhì)和不同的物理性質(zhì),其基礎(chǔ)包括兩方面:一、放射性核酸或穩(wěn)定核素及其標(biāo)記化合物,與自然界中存在的相對(duì)應(yīng)的同位素具有相同的化學(xué)性質(zhì)和生物特性。進(jìn)入機(jī)體后,在體內(nèi)所發(fā)生的化學(xué)變化及生物學(xué)過(guò)程與被示蹤的物質(zhì)完全相同。二、放射性核素能自發(fā)的發(fā)生核衰變,并發(fā)射出射線,利用高靈敏度儀器的測(cè)量,可對(duì)標(biāo)記物進(jìn)行精確的定性、定量或定位研究;穩(wěn)定核素由于質(zhì)量不同于相應(yīng)的同位素,也可借助質(zhì)量分析儀進(jìn)行定量測(cè)量。放射性核素標(biāo)記化合物:是用放射性核素原子取代化合物分子結(jié)構(gòu)中某一原子或某些原子后的化合物。該過(guò)程稱為標(biāo)記。、同位素標(biāo)記:化合物中某元素的穩(wěn)定同位素原子被同一元素的放射性同位素或穩(wěn)定同位素原子取代。、非同位素標(biāo)記:是指標(biāo)記化合物是用化學(xué)性質(zhì)相似或根本不同的放射性核素取代原化合物中所含的某元素的穩(wěn)定核素原子。碘元素的放射性同位素種類繁多,其中125I、131I、123I等因半衰期和射線能量適合于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)應(yīng)用,可作為蛋白質(zhì)、多肽、活性物質(zhì)及藥物等的標(biāo)記核素。特別是125I、131I廉價(jià)易得。蛋白質(zhì)與多肽的放射性碘標(biāo)記方法&基本原理在有機(jī)化合物的碘標(biāo)記中,苯環(huán)比直鏈更容易標(biāo)記,而且標(biāo)記芳香環(huán)上的碘原子也相對(duì)穩(wěn)定。用于標(biāo)記的放射性碘的化學(xué)式為Na*I,I-必須氧化成高價(jià)的氧化態(tài)*I2或者*I+才能標(biāo)記到有機(jī)化合物分子上去。一、直接標(biāo)記法:以Na*I形式提供的I-必須首先在氧化劑的作用下氧化成中間活性形式*12或者*1+,然后再被標(biāo)記到蛋白質(zhì)分子的酪氨酸殘基的苯環(huán)上(酚羥基的鄰位)。二、間接標(biāo)記法:又稱聯(lián)接標(biāo)記法,是先將放射性碘聯(lián)接到一個(gè)小分子載體上,再將這個(gè)小分子物質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合。氯胺T法這是一種溫和的氧化劑,在水溶液中產(chǎn)生次氯酸使*1-氧化。由于簡(jiǎn)便、快速、試劑易得,標(biāo)記效率高,而且重復(fù)性較好,至今仍是使用最為廣泛的碘標(biāo)記技術(shù)。通過(guò)選擇反應(yīng)物濃度、反應(yīng)液體積、控制反應(yīng)溫度和時(shí)間,可以非常有效地控制碘化反應(yīng),加入過(guò)量還原劑即可終止反應(yīng),常用的還原劑是偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5,又稱焦亞硫酸鈉)標(biāo)記過(guò)程的注意事項(xiàng):氯胺T溶液和用量:因其在空氣中不穩(wěn)定,溶液應(yīng)新鮮配制1;氯胺T用量要嚴(yán)格控制,應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。用量過(guò)大會(huì)損傷標(biāo)記蛋白質(zhì)的生物活性和免疫活性;用量不足又會(huì)降低標(biāo)記效率。反應(yīng)pH:應(yīng)根據(jù)不同的蛋白質(zhì)來(lái)確定最適pH,一般為7.4?7.8.為保證有足夠大的緩沖容量,碘化反應(yīng)應(yīng)在0.2?0.5mol/L的磷酸緩沖液中進(jìn)行。反應(yīng)體積:盡量減少反應(yīng)體積,以提高碘化效率反應(yīng)時(shí)間:一般10s至3min之間,隨標(biāo)記時(shí)間增加,標(biāo)記率的提高不明顯,而蛋白質(zhì)、多肽的損傷卻加重。反應(yīng)溫度:反應(yīng)一般于室溫下或冰浴中在小試管中進(jìn)行。低溫反應(yīng)時(shí),則可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,被標(biāo)記物的損傷可隨溫度升高而增加。中止反應(yīng)還原劑:偏重亞硫酸鈉也應(yīng)新鮮配制1,用量一般為氯胺T用量的1.5?2倍。放射性核純度:指一種放射性核素標(biāo)記化合物中,特定化學(xué)結(jié)構(gòu)的物質(zhì)的放射性占總放射性的百分?jǐn)?shù)。放射性比活度:?jiǎn)挝毁|(zhì)量的物質(zhì)所含的放射性活度,用MBq/mmol或GBp/mmol。標(biāo)記化合物的輻射分解:初級(jí)內(nèi)分解、初級(jí)外分解、次級(jí)分解標(biāo)記化合物的貯存原則:降低標(biāo)記物比活度。固體純品貯存輻射自分解最嚴(yán)重,以液態(tài)貯存較好。稀釋。在貯存高純度的標(biāo)記化合物時(shí)常用非標(biāo)記的化合物稀釋。選擇稀釋劑時(shí),主要采用不易產(chǎn)生自由基的溶液作稀釋劑,如苯。惰性氣體,以防止標(biāo)記物氧化。低溫保存。以低溫度但不結(jié)冰的條件下(2?4°C)避光貯存標(biāo)記化合物為好。對(duì)3H的標(biāo)記化合物,也可采用深凍(-140C)保存。體外放射分析:在體外條件下,以放射性核素標(biāo)記的配體為示蹤劑,以免疫結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ),以放射性測(cè)量為定量手段,對(duì)微量物質(zhì)進(jìn)行定量分析的一類分析方法的總稱。包括競(jìng)爭(zhēng)性分析法(RIA)和非競(jìng)爭(zhēng)性分析法(IRMA)。特點(diǎn):特異性強(qiáng)、精密度高(重復(fù)性好X靈敏度高(檢出限可達(dá)10A-9?10A-10g)、準(zhǔn)確度高、應(yīng)用廣泛。常用標(biāo)記物半衰期:碘131為8天,碘125為60天,锝為6小時(shí)。放射免疫分析(RIA):是利用放射性核素標(biāo)記抗原與非標(biāo)記抗原(待測(cè)/標(biāo)準(zhǔn)抗原)同時(shí)和限量特異性抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng),通過(guò)測(cè)定放射性核素標(biāo)記抗原與抗體復(fù)合物的放射性活度,經(jīng)相應(yīng)的數(shù)學(xué)函數(shù)關(guān)系推算待測(cè)抗原的含量。(基本原理:競(jìng)爭(zhēng)抑制反應(yīng)?;驹噭簶?biāo)準(zhǔn)抗原、抗血清和標(biāo)記抗原?;静僮鳎杭訕觙孵育f分離f測(cè)量f數(shù)據(jù)處理。)*Ag+Ab二*Ag—Ab+*AgAg-Ab+Ag一、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作標(biāo)準(zhǔn)曲線是定量依據(jù):在RIA分析工作中,對(duì)被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定的同時(shí),設(shè)置一組標(biāo)準(zhǔn)抗原進(jìn)行測(cè)定,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在這組反應(yīng)系統(tǒng)的各反應(yīng)管內(nèi)分別加入已知遞增量的與被測(cè)抗原生物學(xué)活性相同的標(biāo)準(zhǔn)品、等量的抗體和標(biāo)記抗原,在一定條件下進(jìn)行反應(yīng),待反應(yīng)達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡后,分離出結(jié)合的部分和游離的部分并測(cè)其放射性,計(jì)算反應(yīng)參數(shù),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再用被測(cè)物反應(yīng)管的反應(yīng)參數(shù)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出被測(cè)抗原的量。具體步驟:、分別向不同反應(yīng)管中加入已知濃度的一系列標(biāo)準(zhǔn)抗原以及已知的固定量的*Ag、Ab;、經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的溫育,進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng);、待競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)平衡后,分離結(jié)合部分和游離部分;、利用放射性探測(cè)器測(cè)定*Ag-Ab復(fù)合物或游離*Ag的放射性B或F;、計(jì)算出結(jié)合率B%[B/(B+F)X100%],或B/B0%;、以B/T%或B/B0%為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)抗原濃度為橫坐標(biāo),繪制出B/T%或B/B0%隨Ag量變化的曲線,即標(biāo)準(zhǔn)曲線B/T%或B/B0%有時(shí)可取其對(duì)數(shù),或者其logit值;、在相同條件下,測(cè)定被測(cè)樣品的B/T%或B/B0%與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照,即可查出被測(cè)Ag的濃度;或者利用計(jì)算機(jī)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)抗原的濃度值與其相對(duì)應(yīng)的B/T%或B/B0%值建立方程,再根據(jù)B/T%或B/B0%值計(jì)算待測(cè)樣品的抗原濃度。二、放免分析的方法學(xué)放免分析的基本試劑包括:標(biāo)準(zhǔn)抗原、抗血清(抗體)、標(biāo)記抗原1.標(biāo)準(zhǔn)抗原:指具有已知真實(shí)含量的標(biāo)準(zhǔn)品,是RIA定量測(cè)定的依據(jù)。其主要用途有:①利用它免疫動(dòng)物來(lái)制備抗體;②用它通過(guò)化學(xué)方法制備出放射性核素標(biāo)記的抗原;③用它參與RIA反應(yīng),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的要求:①化學(xué)結(jié)構(gòu)上的要求:標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)該與待測(cè)物具有相同的化學(xué)結(jié)構(gòu)。有時(shí)結(jié)構(gòu)完全相同的標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)源困難,可用結(jié)構(gòu)類似且與特異性抗體親和力類似的物質(zhì)來(lái)替代;②化學(xué)純度上的要求:用化學(xué)合成法制得的小分子化合物應(yīng)是化學(xué)純度很高的純品,有些蛋白質(zhì)或多肽類物質(zhì)不易制得足夠量的高純度標(biāo)準(zhǔn)品,要求其所含雜質(zhì)對(duì)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)無(wú)干擾;③對(duì)含量標(biāo)定值的要求:標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)有準(zhǔn)確的含量。小分子化合物可通過(guò)各自特有的化學(xué)或物理特性進(jìn)行標(biāo)定,蛋白質(zhì)或多肽類物質(zhì)可用精度較高的蛋白定量法進(jìn)行標(biāo)定;④運(yùn)輸和保存的要求:放免分析的標(biāo)準(zhǔn)品大多為生物活性物質(zhì),易受環(huán)境變化的影響而變質(zhì),應(yīng)注意有效期。不同的標(biāo)準(zhǔn)品有不同的最佳保存條件,應(yīng)在建立方法時(shí)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定??寡澹菏侵负锌贵w的血清RIA法的特異性、靈敏度在很大程度上取決于抗體的質(zhì)量??蓱?yīng)用于RIA的抗體必須具有以下基本條件:①與待測(cè)抗原(包括其標(biāo)準(zhǔn)品)的親和力:親和力是免疫反應(yīng)中Ag和Ab之間相互作用的結(jié)合能力的強(qiáng)度,表示Ag和Ab結(jié)合的能力,親和力高,Ag和Ab易結(jié)合且不易解離,可用親和常數(shù)K來(lái)衡量,一般要求大于10人10?10人12L/mmol。②抗體的特異性:是指抗體分別于相應(yīng)抗原和抗原結(jié)構(gòu)類似物質(zhì)的結(jié)合能力的比較,如果抗體特異性不高,則抗原類似物質(zhì)也能與抗體結(jié)合,干擾、影響分析結(jié)果。③抗血清滴度:是以免疫反應(yīng)中所需抗血清稀釋度的倒數(shù)來(lái)表示。稀釋倍數(shù)越高,滴度也就越高,表示抗體的效價(jià)越高。通常以30%?50%B0%抗體稀釋度為佳。標(biāo)記抗原:既是RIA競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)的基本試劑之一,又是放免分析示蹤劑,是RIA放射性測(cè)量的放射性來(lái)源,要求具有高純度,要盡可能提純和純化。其常用的放射性核素為125I和3H。臨床上125I多用于標(biāo)記多肽類激素及蛋白質(zhì),而3H則多用來(lái)標(biāo)記小分子化合物。最常用的是氯胺T標(biāo)記法。對(duì)標(biāo)記抗原的要求:①高比活度:標(biāo)記化合物的所用化學(xué)量越少,分析的靈敏度越高。但同時(shí)還需要每一反應(yīng)管有一定的放射性比活度以控制測(cè)量誤差,這就要求標(biāo)記物的比活度較高,一般要求3.768?血&??谏锘钚耘c免疫活性:標(biāo)記.物的?要與標(biāo)記.前一致。③放射化學(xué)純度:標(biāo)記物的?應(yīng)在95%以上。④穩(wěn)定性:標(biāo)記物要有良好的穩(wěn)定性。免疫放射分析(IRMA)是利用放射性標(biāo)記的抗體來(lái)測(cè)定樣品中抗原的方法,所用的標(biāo)記抗體是過(guò)量的,抗原全部是非標(biāo)記的。待測(cè)抗原與過(guò)量標(biāo)記抗體結(jié)合反應(yīng)形成標(biāo)記抗體-抗原復(fù)合物及游離的標(biāo)記抗體,測(cè)定的是標(biāo)記抗體-抗原復(fù)合物的量。原理:將放射性核素標(biāo)記在抗體上(*Ab),待測(cè)抗原與過(guò)量的*Ab進(jìn)行非競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng),形成標(biāo)記抗體抗原復(fù)合物及游離的標(biāo)記抗體(Ag-*Ab+*Ab)。測(cè)定的對(duì)象是標(biāo)記抗體抗原復(fù)合物。待測(cè)抗原的濃度與抗體抗原復(fù)合物的量(Ag-*Ab)正相關(guān)。Ag+*Ab—Ag—*Ab+*AbIRMA最典型的方法是夾心法,即待測(cè)抗原的一個(gè)抗體(Ab1)先與固體支持物結(jié)合(例如結(jié)合在試管壁上),加入待測(cè)物溶液(含抗原),充分反應(yīng),使待測(cè)物(抗原)結(jié)合在固相抗體上,洗滌三次去掉未結(jié)合部分,再加入標(biāo)記抗體(*Ab2),在合適的條件下給予一定的反應(yīng)時(shí)間,洗去未結(jié)合標(biāo)記抗體,測(cè)定固體支持無(wú)的放射性,即為抗原抗體復(fù)合物的放射性(兩抗體為不同亞型,結(jié)合于兩個(gè)抗原決定簇),如下圖:Ab](固相)+Ag+*Ab?一Abi~Ag~^Ab2+^Ab2免放分析的特點(diǎn):反應(yīng)動(dòng)力學(xué):在抗原抗體的反應(yīng)中,反應(yīng)速度與反應(yīng)濃度旱正比,IRMA標(biāo)記的單克隆抗體是過(guò)量的,且反應(yīng)是非競(jìng)爭(zhēng)性的全量免疫結(jié)合反應(yīng),故比RIA反應(yīng)速度快,一般2?3h即達(dá)到平衡。靈敏度:IRMA的零劑量的反應(yīng)值是非特異性結(jié)合,如果有接近零水平的抗原與固相結(jié)合,標(biāo)記抗體就應(yīng)與其結(jié)合形成復(fù)合物,只要標(biāo)記復(fù)合物的放射性測(cè)量值超過(guò)非特異性反應(yīng),就應(yīng)被檢出。因此,只要將非特異性反應(yīng)控制在最小值,IRMA的靈敏度就會(huì)明顯比RIA高(10~100倍)。特異性:IRMA法所用的固相載體和標(biāo)記抗體分別是針對(duì)抗原不用的表位的單克隆抗體,不易發(fā)生一般的交叉反應(yīng),所以特異性較強(qiáng)。穩(wěn)定性:在免疫反應(yīng)中,有些抗原康泰間的親和常數(shù)K值有明顯的溫度依賴性,降低溫度有利于K值的提高,從而增加靈敏度。但當(dāng)有過(guò)量抗體時(shí),由溫度帶來(lái)的K值的變化對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響較小。另外,IRMA法中待測(cè)物先與固相抗體結(jié)合,洗滌后再加標(biāo)記抗體,這樣去除了樣品中大部分雜質(zhì)對(duì)反應(yīng)系統(tǒng)的干擾,所以穩(wěn)定性好。標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作范圍:IRMA的工作范圍較寬,在一般情況下,待測(cè)物含量低者不必濃縮,高者不必稀釋,也就避免了由此帶來(lái)的誤差。缺點(diǎn):IRMA對(duì)蛋白質(zhì)和多肽抗原的檢測(cè)是優(yōu)越的,但需要抗原至少具備兩個(gè)表位,這就限制了它對(duì)短肽及其他半抗原活性物的應(yīng)用。放射免疫分析(RIA)免疫放射分析(IRMA)標(biāo)記物抗原抗體抗體用量限量過(guò)量反應(yīng)模式競(jìng)爭(zhēng)性分析非競(jìng)爭(zhēng)性分析反應(yīng)時(shí)間較慢較快分離技術(shù)PEG-雙抗體法固相吸附法測(cè)量范圍較窄較寬應(yīng)用范圍常用于小分子半抗原常用于大分子Ag/Ab靈敏度較低較高
質(zhì)量控制指標(biāo)精密度:是指一定條件下,用同一實(shí)驗(yàn)方法多次檢測(cè)同一樣品所得結(jié)果的一致程度和重復(fù)性,是評(píng)價(jià)隨機(jī)誤差的指標(biāo)。在醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)中,一般用標(biāo)準(zhǔn)差(SD)、變異系數(shù)(CV)、效應(yīng)誤差關(guān)系和精密度圖來(lái)表示測(cè)定方法的精密度。準(zhǔn)確度:指測(cè)定值與真值的符合程度,其偏離真值的誤差叫偏差。下圖是準(zhǔn)確度、精密度、質(zhì)量控制樣品:即出廠時(shí),將已經(jīng)標(biāo)定好的已知量的待測(cè)樣品分發(fā)于試劑盒中。用實(shí)際測(cè)量出的結(jié)果與廠家樣品實(shí)際含量的偏差來(lái)衡量該批測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確度。一般采用可測(cè)范圍的高、中、低劑量分別質(zhì)控,并得出質(zhì)控圖。WHO要求在一次實(shí)驗(yàn)中,有下列情況之一者,其結(jié)果應(yīng)予舍棄:①三種QCS有一個(gè)測(cè)定值>3SD;②三種QCS中在同一方向上有兩種>2SD;③三種QCS均在同一方向上>1SD。核醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)是用的主要儀器是Y免疫計(jì)數(shù)器。鈣磷調(diào)節(jié)在正常人體內(nèi),鈣磷調(diào)節(jié)是通過(guò)甲狀旁腺素、降鈣素和維生素D的代謝產(chǎn)物1,25-二羥基維生素D3[1,25-(OH)2D3]的相互制約/協(xié)調(diào),以適應(yīng)內(nèi)環(huán)境變化,保持鈣磷濃度的相對(duì)恒定,見圖(一)甲狀旁腺素(PTH)是由甲狀旁腺分泌的,調(diào)節(jié)血鈣水平的主要內(nèi)分泌激素。當(dāng)切除甲狀旁腺后,血鈣很快下降。血鈣水平對(duì)甲狀旁腺素的分泌起到負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用。(簡(jiǎn)單概括為:升血鈣降血磷,促進(jìn)破骨細(xì)胞的活性)【臨床意義】甲狀旁腺功能亢進(jìn)的輔助診斷;甲狀旁腺功能減退癥的輔助診斷;代謝性骨病的輔助診斷(二)降鈣素(CT)是由甲狀腺的濾泡旁細(xì)胞(C細(xì)胞)分泌的一種可降低血鈣水平的激素。降鈣素的生理作用是降低血鈣與血磷的水平,還能抑制破骨細(xì)胞的活性。【臨床意義】甲狀腺髓樣癌:血中CT水平增高;肺燕麥細(xì)胞癌、前列腺癌、胰腺癌、支氣管癌、上頜竇癌等均可引起CT升高。能力性腎功能不全時(shí)CT升高。(三)維生素D(VD)1,25-(OH)2D3的生物學(xué)作用:促進(jìn)小腸對(duì)鈣磷的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)、溶骨和破骨的雙重作用(鈣磷供應(yīng)充足時(shí)促進(jìn)成骨,血鈣降彳&腸道鈣吸收不足時(shí)促進(jìn)溶骨)、促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞對(duì)鈣磷的重吸收?!九R床意義】1,25-(OH)2D3含量增多:抗維生素D性佝僂病、甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)1,25-(OH)2D3含量減少:維生素D過(guò)多癥、低血磷抗維生素D性佝僂病、營(yíng)養(yǎng)性維生素D缺乏癥、維生素D依賴性佝僂病、腎性骨營(yíng)養(yǎng)不良、甲狀旁腺機(jī)能減退。腫瘤標(biāo)志物:是指在腫瘤發(fā)生和增殖的過(guò)程中,由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的,標(biāo)志腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)。主要包括蛋白質(zhì)、激素、酶(同工酶)、多胺和癌基因產(chǎn)物等。按來(lái)源可分兩類:一是腫瘤組織產(chǎn)生的標(biāo)志物;二是腫瘤與宿主相互作用產(chǎn)生的標(biāo)志物臨床上期望腫瘤標(biāo)志物的特性:特異性好,靈敏度高,定位性好,反映病情狀況,監(jiān)測(cè)腫瘤的療效,監(jiān)測(cè)腫瘤的復(fù)發(fā),預(yù)測(cè)腫瘤的預(yù)后。正確應(yīng)用腫瘤標(biāo)志物(其中部分內(nèi)容可理解為,?濃度偏高但未及診斷標(biāo)準(zhǔn)時(shí),應(yīng)該如何去做):聯(lián)合診斷:一般以兩種或兩種以上的標(biāo)志物同時(shí)檢測(cè),或應(yīng)用影像學(xué)檢查加實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)標(biāo)志物的方法;動(dòng)態(tài)檢查和觀察:因?在體液中有自身的消長(zhǎng)特點(diǎn)且影響檢測(cè)方法的因素較多,故需進(jìn)行多次、連續(xù)的動(dòng)態(tài)檢查,避免只靠一次的檢驗(yàn)結(jié)果,帶來(lái)錯(cuò)誤;綜合分析:對(duì)?的檢測(cè)結(jié)果,應(yīng)結(jié)合臨床有關(guān)資料,進(jìn)行綜合分析判斷,減少盲目性和主觀性;正常參考值的確定:正常參考值是分析判斷?監(jiān)測(cè)結(jié)果意義的重要依據(jù),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須建立本實(shí)驗(yàn)室的?正常參考值范圍。對(duì)于假陰性:①和腫瘤自身的因素有關(guān);②客觀因素,尤其鉤狀效應(yīng)(Ag濃度過(guò)高,這里是腫瘤標(biāo)志物濃度過(guò)高,反應(yīng)后滯)對(duì)于假陽(yáng)性:①
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2025石材長(zhǎng)期采購(gòu)合同
- 2025年度國(guó)防科技產(chǎn)業(yè)核心秘密保護(hù)合同3篇
- 2025年度遠(yuǎn)程教育兼職教師聘任合同3篇
- 2025年度農(nóng)村房屋買賣合同協(xié)議書(含農(nóng)村電商合作)2篇
- 2025年度公司公務(wù)車借用及維修保養(yǎng)協(xié)議范本3篇
- 二零二五年度企業(yè)核心高管聘用合同:企業(yè)戰(zhàn)略轉(zhuǎn)型升級(jí)合作協(xié)議3篇
- 2025農(nóng)村宅基地置換項(xiàng)目宅基地置換補(bǔ)償評(píng)估協(xié)議
- 2025年度婚姻財(cái)產(chǎn)保全與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估協(xié)議3篇
- 二零二五年度老舊小區(qū)電梯加裝工程合同3篇
- 二零二五年度特色農(nóng)業(yè)機(jī)械租賃合作框架協(xié)議2篇
- 國(guó)家開放大學(xué)2023年7月期末統(tǒng)一試《11124流行病學(xué)》試題及答案-開放本科
- 貨運(yùn)安全生產(chǎn)管理制度
- 施工圖審查招標(biāo)文件范文
- 幼兒園中班體育《我們愛運(yùn)動(dòng)》+課件
- 郭錫良《古代漢語(yǔ)》課件
- 外研版四年級(jí)英語(yǔ)下冊(cè)(一年級(jí)起點(diǎn))全冊(cè)完整課件
- 防止電力生產(chǎn)事故的-二十五項(xiàng)重點(diǎn)要求(2023版)
- 教研室主任崗位申請(qǐng)書
- 職業(yè)培訓(xùn)師的8堂私房課:修訂升級(jí)版
- 改擴(kuò)建工程施工圖設(shè)計(jì)說(shuō)明
- 壯族文化的靈魂廣西花山巖畫
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論