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4/4抗核抗體的檢測及醫(yī)學(xué)意義抗核抗體(antinuclearantibody,ANA)是一組將自身真核細胞的各種細胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱。ANA的性質(zhì)主要是IgG,也有IgM、IgA和IgD,其無器官和種屬特異性,故該類抗體可與所有動物的細胞核發(fā)生反應(yīng)。迄今已有二十余種抗核內(nèi)不同成分的抗核抗體被相繼發(fā)現(xiàn)。ANA主要存在于血清中,也可存在于胸水、關(guān)節(jié)滑膜液和尿液中。ANA在未治療的SLE患者中的滴度較高,在大多數(shù)自身免疫性疾病中均可呈陽性,如SLE、RA、混合性結(jié)締組織?。∕CTD)、干燥綜合征(SS)、硬皮病、慢性活動性肝炎,正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA陽性并不一定患有自身免疫性疾病。由于細胞核成分的復(fù)雜性,不同成分的抗原性不同,因此可產(chǎn)生多種類型的ANA,在其眾多類型中,作為針對某一特定核成分的個別抗體,只在某一疾病中出現(xiàn),成為診斷該疾病的血清標志性抗體。各種ANA在不同的自身免疫性疾病中出現(xiàn)不同組合,可形成各種疾病或疾病亞群的特征性抗體譜。因此,總的ANA檢測在臨床診斷與鑒別診斷中是一個極為重要的篩選試驗,ANA陽性者進一步檢測各亞類ANA抗體對明確診斷、臨床分型、病情觀察、預(yù)后及治療評價都具有重要意義。目前按細胞內(nèi)分子理化特性與抗原分布部位將ANA分為四大類,即抗DNA抗體;抗組蛋白抗體;抗非組蛋白抗體和抗核仁抗體,每一大類又因不同的抗原特性再分為許多亞類。在臨床檢測中ANA的命名通常按以下三種方式進行:1.根據(jù)抗原的化學(xué)名稱命名如抗dsDNA、抗RNP、抗DNP抗體。2.以第一位檢出該抗體的患者命名如抗Sm、抗Ro、抗La抗體。3.以相關(guān)疾病命名如抗SSA、抗SSB抗體。常見的ANA熒光圖形及臨床意義1.均質(zhì)性(homogeneous,H)細胞核均勻著染熒光,有些核仁部位不著色,分裂期細胞染色體可被染色出現(xiàn)熒光。與均質(zhì)型相關(guān)的自身抗體主要有抗不溶性DNP,抗組蛋白抗體,抗dsDNA抗體也可產(chǎn)生均質(zhì)性。高滴度均質(zhì)型主要見于SLE患者,低滴度均質(zhì)型可見于RA、慢性肝臟疾病、傳染性單核細胞增多癥或藥物誘發(fā)的狼瘡患者。2.斑點型(speckled,S)細胞核內(nèi)出現(xiàn)顆粒狀熒光,分裂期細胞染色體無熒光顯色。與斑點型相關(guān)的自身抗體涉及抗核糖體核蛋白顆??贵w,如抗Sm、抗Ru1RNP、抗SSB/La等抗體。高滴度的斑點型常見于MCTD,同時也見于SLE、硬皮病、SS等自身免疫性疾病。3.核膜型(membranous,M)又稱周邊型(rim),熒光著色主要顯示在細胞核的周邊形成熒光環(huán),或在均一的熒光背景上核周邊熒光增強;分裂期細胞染色體區(qū)出現(xiàn)熒光著色。相關(guān)抗體主要是抗dsDNA抗體。高滴度的周邊型幾乎僅見于SLE,特別是活動期SLE,其他自身免疫疾病很少見周邊型,因此周邊型對SLE的診斷價值極大,且提示病情活動。4.核仁型(nucheolar,N)熒光著色主要在核仁區(qū),分裂期細胞染色體無熒光著色。相關(guān)抗體是抗核仁特異的低分子量RNA,抗RNA聚合酶-1、抗U3RNP、抗PM-Scl。核仁型在硬皮病中出現(xiàn)率最高,尤其是高滴度核仁型對診斷硬皮病具有一定特異性,但核仁型也見于雷諾現(xiàn)象者,偶爾也出現(xiàn)于SLE。未經(jīng)治療的SLE或MCTD患者幾乎95%以上都有抗核抗體,且滴度較高,一般1∶100以上具有臨床診斷價值。抗核抗體陰性對排除SLE的陰性預(yù)告值較高,所以抗核抗體檢測是SLE的最佳篩查試驗。抗核抗體滴度與自身免疫性疾病的臨床活動性無相關(guān)關(guān)系??购丝贵w在其他自身免疫病中也可出現(xiàn)陽性,但滴度較低,其各自的陽性檢出率見下表。常見自身免疫性疾病的ANA陽性檢出率
熒光抗體檢查判定結(jié)果時,各實驗室須在自己的實驗條件下進行一定數(shù)量的正常人調(diào)查,定出正常人血清ANA水平的上限。如為測定ANA效價,則可將陽性血清再自正常上限開始作雙倍連續(xù)稀釋。判定陽性或陰性時,首先用低倍鏡觀察,并與相應(yīng)對照比較。判定染色圖像時,物鏡選用40X或60X,也有人用100X,但應(yīng)固定使用一個放大倍數(shù)。待測血清只在陽性上限以下稀釋。染色圖像只有相對的參考意義,必要時應(yīng)進一步作特異性
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