安捷倫液質(zhì)聯(lián)用

第第④碰撞能：5eV(2)運(yùn)行：Apply；startQualitiveAnalysis（根據(jù)查找的資料確定母離子）母離子：268（5）運(yùn)行完畢后，在DA位置點(diǎn)擊ViewDate查看數(shù)據(jù)，進(jìn)入QualitiveAnalysis離線軟件界面。在QualitiveAnalysis離線軟件中自動(dòng)跳出TIC總離子流圖如下圖所示選擇雙向箭頭圖標(biāo)，選取最高峰前后（任何位置出現(xiàn)的子離子均相同，只是響應(yīng)強(qiáng)度不一）的一段范圍，雙擊左鍵，在離子流圖底下彈出豐度-質(zhì)荷比圖。查看是否出現(xiàn)文獻(xiàn)中所示母離子，若有進(jìn)行下一步，若沒有再查找其他文獻(xiàn)。C子離子的確定關(guān)閉QualitiveAnalysis離線軟件，回到MethodEditor中的QQQ界面(1)設(shè)置質(zhì)譜參數(shù)：scantype:Production，加壓：200，母離子：268（5），掃描范圍：100~350(根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)確定范圍，需注意，子離子掃描范圍應(yīng)將母離子包括在內(nèi))，掃描時(shí)間：100ms，碰撞能：5,10,15,20（有必要時(shí)，可增加至25，30，35……）(2)運(yùn)行：Apply；Start(3)QualitiveAnalysis：左鍵：選擇譜圖上的一段；雙擊，找子離子[56(10)，113（10）]總離子流圖注：查看是否出現(xiàn)文獻(xiàn)中所示子離子時(shí)，若有記錄子離子與響應(yīng)程度最高時(shí)的碰撞能。若無可自行選取核實(shí)的m/z作為子離子，根據(jù)響應(yīng)程度選擇合適的碰撞能，最終記錄相關(guān)信息。確定子離子的依據(jù)：首先在各質(zhì)譜圖中找出響應(yīng)較高（豐度比大）的離子，在對比不同碰撞能條件下的各離子的響應(yīng)程度。D.將質(zhì)譜參數(shù)添加至方法中在MethodEditor中新建一方法在QQQ選項(xiàng)中設(shè)置質(zhì)譜參數(shù)：離子源（Ionsource）:ESI；Timesegment:StarttimeScanTypeDivValveDeltaEmv(+)0MRMtoMRM400ScanSegments：CompoundNamePrecursorIonMISResProductIonCollisionEnergyS07265Unit15615注：調(diào)整Dell使得Cycle/s≥1，選擇Unit模式，點(diǎn)擊ApplySource:實(shí)際值與默認(rèn)值要一致保存：路徑：LSY-20150125pest-testE色譜參數(shù)的確定梯度洗脫程序的設(shè)定(1)在MethodEditor中的BinaryPump選項(xiàng)中進(jìn)行編輯a.選擇合適的流動(dòng)相及流速b.編輯洗脫程序Timetable(x/100events)Time(min)A(%)B(%)Flow(mL/min)MaxPressureLimit0.0090.0010.000.2505502.009010--10.008515--12.008515--16.007525--24.002080--26.002080--30.009010--c.設(shè)置流動(dòng)相參數(shù)Flow(改流速)mL/minA1,2Solvent（設(shè)置參數(shù)時(shí)要選定參數(shù)）B1,2Min:0.00barPressureLimitMax:550bar保存，修改Stoptime:30min(與梯度洗脫程序時(shí)間一致)Postime:off(2)在MethodEditor中的HipSample選項(xiàng)中進(jìn)行進(jìn)樣針的吸取速度、注射速度、吸取深度與平衡時(shí)間等的編輯如：DrawFlow：200μL/min；其他不變(3)在Properties中填寫儲存路徑，保存方法F運(yùn)行方法Worklist：新建工作表SamplenameSamplepositionMethodDataFileS07P1-F9LSY/20150125PEST×××-P1-F9NoInjectionWASH-Script:（添加一個(gè)事件，讓儀器終止、穩(wěn)定)保存abcabcdF實(shí)際操作(洗脫程序的優(yōu)化)a:4~5min，b:5.5~6.5min，c:7.8~9min，d:19~20min由于10~18min無峰，則需進(jìn)行優(yōu)化，縮短梯度洗脫的時(shí)間優(yōu)化1:Time(min)A(%)B(%)Flow(mL/min)MaxPressureLimit0.0090100.255502.009010--10.008515--16.002080--18.002080--20.009010--Stoptime：20min優(yōu)化2（4~6min出現(xiàn)兩個(gè)峰比較相近，因此進(jìn)行優(yōu)化）Time(min)A(%)B(%)Flow(mL/min)MaxPressureLimit0.0090100.255502.009010--11.008515--13.002080--15.002080--17.009010--Stoptime：17.00min優(yōu)化后出峰時(shí)間：a:4~5.6min，b:5.7~6.5min，c:7.8~9min，d:14~14.7min優(yōu)化3（進(jìn)一步縮短c.d兩個(gè)峰的間距）Time(min)A(%)B(%)Flow(mL/min)MaxPressureLimit0.0090100.255502.009010--10.008515--11.002080--13.002080--15.009010--Stoptime：15min優(yōu)化后出峰時(shí)間:a:4~5.5min，b:5.7~6.5min，c:7.8~9min，d:12.8~13.2min測定結(jié)果：b(s12)→c(s07)→a(s13)→d(s15)注：梯度洗脫的目的是使各物質(zhì)盡可能分離，分離時(shí)間有足夠家具，且保證峰型尚佳LC-MSMS的方法建立完成。四、LC-MSMS的關(guān)機(jī)順序A(A1-103)在worklist界面(加圖)：（1）關(guān)閉所有程序（進(jìn)樣針、泵等）（2）在QQQ空白處右擊：vent→ok在Methodeditor界面：等待Tubo1speed和Tubo2speed的值均降至10%以下關(guān)閉色譜系統(tǒng)和質(zhì)譜系統(tǒng)的開關(guān)關(guān)閉記錄系統(tǒng)（即電腦中打開的軟件）關(guān)閉主機(jī)開關(guān)B（A1-102）關(guān)閉氮?dú)獍l(fā)生器前閥門開關(guān)和氮?dú)廨敵銮暗拈y門開關(guān)以及氮?dú)馄靠傞y門；關(guān)閉氮?dú)獍l(fā)生器控制面板上的“”按鈕關(guān)閉電壓控制器開關(guān)；關(guān)閉氮?dú)獍l(fā)生器后面的開關(guān)；關(guān)閉總