第3章消毒與滅菌4

第三章消毒與滅菌disinfectionandsterilization1、何謂消毒、滅菌、無菌、無菌操作2、常用的消毒、滅菌方法有哪些？3、主要的化學消毒劑有哪些？問題基本概念

消毒(disinfection)：殺死物體上病原微生物的方法，但不一定能殺死細菌芽胞和非病原微生物。滅菌(sterilization)：殺死物體上所有微生物的方法（包括芽胞）。消毒劑用于消毒的化學藥品消毒劑常用消毒劑酒精滲入菌體，使菌體蛋白質變性凝固75％消毒效果最好用途：主要用于皮膚的消毒和體溫計等的浸泡.常用消毒劑碘伏（碘）使菌體蛋白質氧化變性與聚乙烯吡酪烷酮形成絡合物菌譜廣，即時殺菌，緩慢釋放，無腐蝕性臨床引起輸液反應

mi異丙嗪25mg，vi地塞米松5mg勿與紅藥水合用常用消毒劑次氯酸菌譜廣，價格低，廣泛使用氯化作用，破壞酶活性，干擾代謝新生態(tài)氧作用，氧化菌體蛋白質氯氣中毒，引起胸悶、咳嗽用途：地面、廁所與排泄物消毒常用消毒劑過氧乙酸產生新生態(tài)氧，氧化菌體蛋白濃度0.2~0.5％有刺激性氣味，腐蝕性大易氧化分解，現(xiàn)配現(xiàn)用用途：塑料、玻璃、人造纖維消毒，皮膚消毒。作用機制：使菌體蛋白和核酸的烷基化濃度：2%戊二醛用途：精密儀器、內窺鏡等消毒缺點：對人體有一定的毒性，且有的有致癌作用戊二醛常用消毒劑新潔爾滅季銨鹽類消毒劑陽離子表面活性劑，吸附陰電細菌破壞細胞膜，細胞破裂自溶使蛋白質變性抑制酶活性0.01%~0.05%用于黏膜消毒0.1%~0.2%用于皮膚消毒0.1%~0.2%用于浸泡金屬器械常用消毒劑紫外線使DNA鏈上相鄰兩個胸腺嘧啶共價結合240～280nm具有殺菌作用265～266nm符合DNA吸收光譜穿透力弱對皮膚和眼睛有損傷常用消毒劑甲醛菌體蛋白變性，酶活性消失殺菌譜廣，殺菌效果好腐蝕性強，穿透力差，對人刺激強，潛在癌性鄰苯二甲醛（OPA），性能穩(wěn)定，濃度低，無刺激和不良氣味環(huán)氧乙烷作用機制：使菌體蛋白和核酸的烷基化濃度：2%戊二醛及作用：物品表面，空氣消毒，精密儀器缺點：對人體有一定的毒性常用消毒劑（1）2%來蘇用地面、器具表面和皮膚的消毒（2）2%紅汞用于皮膚、粘膜和小創(chuàng)傷的消毒（3）1%硝酸銀新生兒滴眼，預防淋球菌感染（4）0.1%高錳酸鉀，皮膚、尿道、水果消毒（5）3%過氧化氫，創(chuàng)傷、皮膚粘膜消毒（6）0.2ppm-0.5ppm氯，飲水和游泳池消毒其他新型消毒劑臭氧O3（O3==O2+O）綠色消毒劑新生態(tài)氧，破壞膜結構及膜內脂蛋白、脂多糖，直接破壞病毒DNA和RNA瞬間殺毒，殺菌能力是氯的600～3000倍應用廣泛國內外公認的臭氧滅菌試驗數(shù)據臭氧投加濃度時間病毒、病原體種類殺滅效率10mg/m320分鐘乙型肝炎表面抗原（HbsAg）99.99%0.5ppm5分鐘甲型流感病毒99%0.13mg/L30秒脊髓灰質炎病毒I型（PVI）100%40μg/L20秒大腸桿菌噬菌體ms298%0.25mg/L1分鐘猿輪狀病毒SA-H和人輪狀病毒2型99.60%4mg/L3分鐘艾滋病毒（HIV）100%8mg/m310分鐘支原體（Mycoplasma）、衣原體（Chlamydia）等病原體99.85%基本概念抑菌（bacteriostasis):抑制體外細菌繁殖防腐(antisepsis)：防止或抑制微生物生長繁殖的方法?；靖拍顭o菌(asepsis)：不含活的微生物.無菌操作：防止微生物進入機體或物品的操作技術。進行微生物實驗、外科手術及醫(yī)療技術操作等過程，均需進行嚴格的無菌操作。消毒滅菌的方法物理方法化學方法生物方法噬菌體抗生素細菌素中草藥第一節(jié)物理消毒滅菌法熱力、紫外線、電離輻射、超聲、過濾一、熱力滅菌法干熱滅菌法焚燒燒灼干烤濕熱滅菌法煮沸法、巴氏消毒法、高壓蒸氣滅菌法、流動蒸汽消毒法、間歇蒸氣滅菌法1.焚燒：是一種徹底的滅菌方法，但僅適用于廢棄物品或尸體等。2.燒灼：直接用火焰滅菌，適用于微生物學實驗室的接種環(huán)、試管口等的滅菌。（一）干熱滅菌法3.干烤：用烤箱滅菌。一般加熱至160℃～170℃經2小時。適用于高溫下不變質、不蒸發(fā)的物品，如安培、玻璃瓶、吸管、培養(yǎng)皿等玻璃器皿和瓷器等。1.煮沸法：1個大氣壓下，煮沸的水溫為100℃一般細菌繁殖體煮沸5分鐘即被殺死。細菌芽胞常需煮沸1～２小時，才被殺死。（二）濕熱滅菌法煮沸法在水中加入2%碳酸氫鈉，既可提高沸點達105℃，促進細菌芽胞的殺滅，又可防止金屬器皿生銹。

（pasteurization）不影響消毒物品的營養(yǎng)成分及香味的消毒方法。61.1～62.8℃半小時71.7℃15～30秒。2.巴氏消毒法

100℃加熱15～30分鐘，連續(xù)三次將所有細菌繁殖體和芽胞全部殺死。3.流通蒸汽滅菌法和間歇滅菌法是在高壓蒸汽滅菌器內進行。通常在1.05kg/cm2的壓力下（15磅），溫度達121.3℃,

15～30min可殺死包括細菌芽胞在內的所有微生物。此法適用于耐高溫和不怕潮濕物品的滅菌。4.高壓蒸汽滅菌法

同一溫度下，濕熱效力比干熱大濕熱中菌體蛋白質較易凝固濕熱的穿透力強、傳導快濕熱的蒸氣有潛熱高速電子、X射線和γ射線等在足夠劑量時，對各種細菌均有致死作用。其機制在于產生游離基，破壞細菌DNA。電離輻射常用于大量一次性醫(yī)用塑料制品的消毒。

二、輻射殺菌法1.電離輻射2.紫外線與射線滅菌法使DNA鏈上相鄰兩個胸腺嘧啶共價結合265-266nm穿透力弱對皮膚、眼睛有損傷三、濾過除菌濾過除菌是用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去，以達到無菌的目的。所用的器具是濾菌器（filter）。

濾過除菌主要用于一些不耐高溫滅菌的血清、細菌毒素、抗生素、基因工程的蛋白產品以及空氣等的除菌。濾菌器的種類很多，目前常用的有濾膜濾菌器、玻璃濾菌器、石棉濾菌器（亦稱Seitz濾菌器）等。超聲波殺菌干燥低溫

殺菌機制菌體蛋白質凝固變性－酚、醇干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝－氧化劑損傷菌細胞膜結構破壞核酸結構第二節(jié)化學消毒滅菌法影響消毒滅菌的因素消毒劑的性質、濃度和作用時間微生物的種類與數(shù)量溫度與酸堿度有機物

要點

1.掌握消毒、滅菌及無菌操作等定義。2.掌握熱力滅菌常用方法和應用、射線滅菌法的原理和應用。3.熟悉常用化學消毒劑。生物因素對細菌的影響噬菌體（見第4章）抗生素（見第2章）細菌素（見第2章）第四章噬菌體Bacteriophage/phage問題1、什么是噬菌體、毒性噬菌體、溫和噬菌體？2、噬菌體與細菌、病毒是什么關系？3、噬菌體有哪些用途？§1概述噬菌體（phage）是廣泛寄生于細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的一類病毒。具有病毒的一般特性：個體微小～～沒有完整的細胞結構～～專性細胞內寄生～～§1、1噬菌體的形態(tài)與結構

大?。阂詎m衡量，必須用電鏡觀察。形態(tài)：蝌蚪形多數(shù)、球形、細桿形\絲形。組成：核酸和蛋白質蝌蚪形噬菌體結構模式圖§1、2噬菌體的生物學性狀抵抗力：對理化因素及多數(shù)化學消毒劑的抵抗力比一般細菌的繁殖體強，75℃30min滅活。噬菌體能耐受低溫和冰凍，但對紫外線和X射線敏感?！?

噬菌體與細菌的相互關系能在敏感細菌中增殖并使之裂解的噬菌體叫毒性噬菌體（virulencephage）。某些噬菌體感染細菌后不增殖，噬菌體DNA整合到細菌核質DNA上，隨細菌的增殖而傳代，細菌不發(fā)生裂解，這種噬菌體叫溫和噬菌體（temperatephage）\溶原性噬菌體。從噬菌體吸附到細菌裂解釋放出子代噬菌體的過程稱為噬菌體復制周期\溶菌周期\裂解周期。1、吸附adsorption2、穿入penetration3、生物合成biosynthesis4、成熟與釋放assemblyandrelease§2、1毒性噬菌體1、毒性噬菌體噬菌體增殖過程：①吸附吸附1、毒性噬菌體噬菌體增殖過程：②穿入

1、毒性噬菌體噬菌體增殖過程：③生物合成1、毒性噬菌體噬菌體增殖過程：④成熟與釋放1、毒性噬菌體的增殖和噬菌溶菌空斑/噬斑噬斑熒光假單胞菌§2、2溫和噬菌體溫和噬菌體基本概念整合在細菌DNA上的噬菌體基因稱前噬菌體（prophage）。帶有前噬菌體的細菌稱溶原性細菌（lysogenicbacteria）。溶原性細菌能表達噬菌體基因控制的某些生物學性狀，稱為溶原性，這種現(xiàn)象稱為溶原狀態(tài)。前噬菌體存在于細菌內，導致細菌基因和性狀發(fā)生改變，這種現(xiàn)象稱溶原性轉換。溫和噬菌體有溶原性周期和裂解周期。毒性噬菌體只有裂解周期。2、溫和噬菌體的特點

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