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第一節(jié)血紅蛋白測定血紅蛋白的分子結(jié)構(gòu)二、血紅蛋白測定卟啉環(huán)包著一個亞鐵離子組成一個亞鐵血紅素,每條多肽鏈含一個亞鐵血紅素,每個血紅蛋白分子有四個珠蛋白肽鏈血紅蛋白(hemoglobin,Hb或HGB)是紅細胞的主要成分,由珠蛋白和亞鐵血紅素組成,每個Hb分子有4條珠蛋白肽鏈,分子量為64458。二、血紅蛋白測定Hb有多種形式及衍生物HbO2
HbredHb
MHb(Hi)HbCO
SHb二、血紅蛋白測定正常人Hb種類及含量種類多肽鏈組成比例HbAα2β2大于90%HbA2α2δ2約2-3%HbFα2γ2小于1%二、血紅蛋白測定1.原理(一)HiCN測定法RBCHbHiHiCN
OD值
Hb(g/L)=KAλ=540nm溶血氧化結(jié)合計算直接計算結(jié)果此處K值為理論值,在實際應(yīng)用中更多采用標準品參照,測定未知樣品血紅蛋白濃度HiCN法測定血紅蛋白標準曲線制作標準曲線求得樣品Hb濃度?A:0.332,Hb=?(二)其他測定方法十二烷基硫酸鈉法(sodiumdodecylsulfatehemoglobin,SDS-Hb)堿羥血紅蛋白法(alkalinehaematindetergent,AHD575)疊氮高鐵血紅蛋白法(HiN3)溴代十六烷基三甲胺法(cetyltrimethyl
ammonynmbromide,CTAB)目前,自動血液分析儀已多使用不含氰化鉀的血紅蛋白測定方法(三)質(zhì)量保證1.合格的標本2.主要器材
分光光度計的波長、光柵、比色杯3.HiCN轉(zhuǎn)化液
的質(zhì)量要求4.HiCN參考液定標
5.開展室內(nèi)質(zhì)控(四)方法學(xué)評價測定方法優(yōu)點缺點HiCN測定法參考方法,操作簡單,反應(yīng)速度快,可檢測SHb之外的所有Hb,HiCN參考品可長期保存,便于質(zhì)控KCN試劑有劇毒,高白細胞、高球蛋白血癥標本可致渾濁,對HbCO的反應(yīng)慢,不能測定SHbSDS-Hb測定法次選方法,操作簡單,呈色穩(wěn)定,試劑無毒,結(jié)果準確,重復(fù)性好SDS質(zhì)量差異大,消光系數(shù)未定,SDS易破壞白細胞,不適于同時進行白細胞計數(shù)的血液分析儀AHD575測定法試劑簡易,無毒,呈色穩(wěn)定,準確性與精密度較高;可用氰化血紅素作校準品575nm波長比色,不便于自動檢測,HbF不能轉(zhuǎn)化HiN3測定法反應(yīng)迅速,呈色穩(wěn)定,準確度、精密度較高試劑有毒性(為HiCN的1/7),HbCO轉(zhuǎn)化慢(20分鐘)CTAB測定法溶血性強且不破壞白細胞,適于血液分析儀檢測精密度、準確度略低成年男性:130~175g/L
成年女性:115~150g/L
新
生
兒:170~200g/L。(五)參考區(qū)間(六)臨床意義極重度重度中度輕度正常<30g/L(31-60)g/L(61-90)g/L(91-120)g/L>120g/L
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