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文檔簡介
6-2酶反應(yīng)器
(enzymereactor)
1、植物細(xì)胞培養(yǎng)裝置主要有哪些類型2、常見的酶反應(yīng)器有哪些類型1一、培養(yǎng)中植物細(xì)胞(plantcell)的特性1、結(jié)團(tuán):細(xì)胞較大,通常是一團(tuán)細(xì)胞的非均相集合體2、細(xì)胞成團(tuán)的兩種產(chǎn)生方式細(xì)胞分裂后沒有進(jìn)行細(xì)胞分離(主要)間歇培養(yǎng)中細(xì)胞處于對數(shù)生長后期,開始分泌粘多糖、蛋白質(zhì)等,或以其他形式產(chǎn)生粘性表面,從而形成細(xì)胞團(tuán)。2一、培養(yǎng)中植物細(xì)胞(plantcell)的特性3、當(dāng)細(xì)胞密度高,粘性大,易產(chǎn)生混合、循環(huán)不良問題4、抗剪切力弱:纖維素細(xì)胞壁使得其外骨架相當(dāng)脆,抗剪切力相當(dāng)弱5、
保持無菌:培養(yǎng)基營養(yǎng)成分豐富、復(fù)雜,適合真菌生長,其生長速度比植物細(xì)胞快的多3培養(yǎng)中植物細(xì)胞的特性
6、設(shè)備要求高:植物細(xì)胞生長速度慢,操作周期長,要求設(shè)備有良好的質(zhì)量和高度穩(wěn)定性。7、保持較低的溶氧水平:
植物細(xì)胞好氣,需通氧,且對氧的變化非常敏感,太高或太差均有不良影響。4培養(yǎng)中植物細(xì)胞的特性8、pH值為5-7:進(jìn)氣時加入一定量的CO29、控制泡沫:植物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,產(chǎn)生的氣泡大且粘性大(覆蓋有粘多糖、蛋白質(zhì)),細(xì)胞極易被包埋在泡沫中,而從循環(huán)的營養(yǎng)液中帶出,需用化學(xué)方法或機(jī)械方法控制。10、表面粘附:在植物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞往往會粘附于培養(yǎng)表面以上的器壁上、電極或擋板表面上。培養(yǎng)表面以上的細(xì)胞層用機(jī)械法除去,在培養(yǎng)容器的表面和電極上涂上硅油,可減少粘附5植物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器1、操作方式:間歇培養(yǎng)(batchonly)2、反應(yīng)器:搖瓶(shakeflask)、通用式發(fā)酵罐、鼓泡式、氣升式、旋轉(zhuǎn)圓筒式6植物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器3、空氣提升式的優(yōu)點(diǎn)(1)剪切力小(2)無軸封,滅菌方便(3)能耗、操作費(fèi)用低(4)可用通氣速率來控制細(xì)胞的生長速率789酶反應(yīng)器enzymereactor2分類幾何形狀進(jìn)料和出料的方式結(jié)構(gòu)功能罐型、管型、膜或片型分批式、半分批式、連續(xù)反應(yīng)器膜反應(yīng)器液-固反應(yīng)器氣-液-固三相反應(yīng)器1、酶反應(yīng)器:以酶作為催化劑進(jìn)行反應(yīng)所需的設(shè)備。103、催化劑:游離酶、固定化酶、固定化細(xì)胞4、在低溫、低壓下操做,耗能、產(chǎn)能都少5、不表現(xiàn)自催化方式(細(xì)胞的連續(xù)再生)11游離酶反應(yīng)器1、反應(yīng):S+EPS為粘性或不溶于水的顆粒E為價廉、不純的催化大分子化合物水解的酶類122、溶液酶的缺點(diǎn):(1)游離的溶液酶,在反應(yīng)過程中會隨著產(chǎn)品一起流失,不僅造成酶的損失,增加了生產(chǎn)費(fèi)用,而且隨產(chǎn)品流出的酶,又會影響產(chǎn)品的質(zhì)量。(2)溶液酶在反應(yīng)后,分離困難,無法重復(fù)使用。(3)溶液酶十分脆弱,會因機(jī)械力、流體流動產(chǎn)生的剪切力和流體的表面張力等,使酶的活性降低,往往使用不久便變性和失去活力。131、攪拌罐式反應(yīng)器⑴組成容器、攪拌器(擋板)、保溫裝置(2)分類分批式半分批式將酶和底物一次裝入反應(yīng)器,在適當(dāng)溫度下開始反應(yīng),反應(yīng)達(dá)一定時間后,將全部反應(yīng)物取出將底物緩緩加入反應(yīng)器中進(jìn)行反應(yīng),到一定時間后,將全部反應(yīng)物取出。(底物抑制)141、攪拌罐式反應(yīng)器⑶優(yōu)點(diǎn):反應(yīng)器結(jié)構(gòu)簡單,不需特殊設(shè)備,適于小規(guī)模生產(chǎn)⑷缺點(diǎn)不能進(jìn)行酶的回收152、超濾膜式反應(yīng)器利用膜(membrane)的選擇透過性:小分子產(chǎn)物透過,酶被截留回收重新使用,可節(jié)省用酶。(1)原理(2)優(yōu)點(diǎn)①酶被截留重新使用,節(jié)省用酶②產(chǎn)物抑制時,宜采用此裝置(3)缺點(diǎn)酶的長期操作穩(wěn)定性差,酶易在超濾膜上吸附損失,或在膜表面濃縮極化16(4)操作分批操作連續(xù)操作將酶和底物一次裝入反應(yīng)器,在適當(dāng)溫度下開始反應(yīng),反應(yīng)達(dá)一定時間后,將全部反應(yīng)物取出一邊連續(xù)的將底物加到反應(yīng)器中,一邊連續(xù)的排出生成物。2、超濾膜式反應(yīng)器(5)膜種類--超濾膜和透析膜形狀--平板狀、管狀、螺旋狀、中空纖維狀1718固定化酶反應(yīng)器酶固定后,酶活會降低1、結(jié)構(gòu)、空間因素酶分子結(jié)構(gòu)改變和屏蔽效應(yīng)2、酶周圍濃度的不均一性分隔效應(yīng)和擴(kuò)散阻力192021(1)分類分批反應(yīng)器(BSTR)連續(xù)流動攪拌罐式反應(yīng)器(CSTR)1、攪拌罐式反應(yīng)器內(nèi)容物的混合是充分均勻的(2)特點(diǎn)(3)優(yōu)點(diǎn)結(jié)構(gòu)簡單,T和pH容易控制,適用于底物受抑制的反應(yīng),傳質(zhì)阻力低,能處理膠狀和水不溶性底物,固定化酶易更換(4)缺點(diǎn)反應(yīng)效率低,載體易被剪切損壞,攪拌動力消耗大22固定或回收酶的方法BSTR離心或過濾(易造成酶的失效損失)CSTR1、出口裝濾器2、用尼龍網(wǎng)罩住,安裝在攪拌軸上3、磁性固定,借磁吸方法滯留4、酶固定在容器壁上或攪拌軸上(金屬網(wǎng)筐)(1為回收,2-4為固定)2324催化劑顆粒靜止不動,接近于PFR(活塞流反應(yīng)器)(1)特點(diǎn)(2)優(yōu)點(diǎn)
①可使用高濃度的催化劑②可減少產(chǎn)物的抑制(3)缺點(diǎn)①T和PH難以控制(傳質(zhì)傳熱系數(shù)低)②底物和產(chǎn)物會產(chǎn)生軸向濃度分布③清洗和更換酶麻煩,底物需加壓才能進(jìn)入④反應(yīng)液內(nèi)含有固體顆粒時不宜采用(易堵塞)2、填充床反應(yīng)器(PBR)25(1)特點(diǎn)底物以一定速度向上通過,酶為懸浮狀態(tài),混合程度介于CSTR(全混流)和PFR(活塞流)之間3、流化床反應(yīng)器(FBR)①具有良好的傳質(zhì)傳熱性能②不易堵塞,適于處理黏度大的液體能處理粉末狀底物③壓力降不很高(2)優(yōu)點(diǎn)26(3)缺點(diǎn)①需保持一定的流速,成本高,難于放大②酶的濃度不高(空隙體積大)③降低了轉(zhuǎn)化率(底物高速流動使酶沖出)(4)提高轉(zhuǎn)化率的方法①使酶進(jìn)行循環(huán)②使用幾個流化床組成的反應(yīng)器組或錐形流化床3、流化床反應(yīng)器(FBR)2728294、膜反應(yīng)器1、用膜狀或板狀固定化酶組裝的反應(yīng)器2、類型:平板型、螺旋卷型、轉(zhuǎn)盤型、空心酶管、中空纖維膜30315、鼓泡塔反應(yīng)器底物和氣體從底部通入,氣體經(jīng)氣體分散板分散均勻323334二、酶反應(yīng)器的選擇影響選擇的因素1、
固定化酶的形狀2、
底物的理化性質(zhì)
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