新藥臨床前藥理學(xué)評(píng)價(jià)評(píng)價(jià)

新藥臨床前藥理學(xué)評(píng)價(jià)評(píng)價(jià)

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新藥評(píng)價(jià)新藥評(píng)價(jià)是指新藥從發(fā)現(xiàn)到批準(zhǔn)投產(chǎn)上市，從藥學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)等各方面的系統(tǒng)評(píng)價(jià)過(guò)程。上市后藥品應(yīng)用的管理監(jiān)督追蹤也是新藥評(píng)價(jià)過(guò)程的延續(xù)。所以，新藥評(píng)價(jià)的全過(guò)程是一項(xiàng)多學(xué)科、多部門協(xié)作才能完成的復(fù)雜的系統(tǒng)工程。新藥評(píng)價(jià)的內(nèi)容：尋找并發(fā)現(xiàn)新藥后，就要根據(jù)新藥評(píng)價(jià)的內(nèi)容逐一進(jìn)行研究。根據(jù)我國(guó)《藥品注冊(cè)管理辦法》確定該完成哪些內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)研究。新藥評(píng)價(jià)的內(nèi)容可按學(xué)科來(lái)分和藥品注冊(cè)管理辦法的具體要求來(lái)分。一.按評(píng)價(jià)學(xué)科分1.

藥學(xué)評(píng)價(jià)：2.

臨床前藥理學(xué)評(píng)價(jià)：3.

臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)：4.

臨床藥理學(xué)評(píng)價(jià)：1.

藥學(xué)評(píng)價(jià)主要內(nèi)容名稱、結(jié)構(gòu)、分子式、理化性質(zhì)、合成路線和工藝、制劑處方和制作工藝、定性鑒別、含量測(cè)定、穩(wěn)定性試驗(yàn)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、起草說(shuō)明等。2.

臨床前藥理學(xué)評(píng)價(jià)主要內(nèi)容1)

有主要藥效學(xué)，一般要求有兩種動(dòng)物、兩種以上方法、兩個(gè)途徑（至少一種是臨床給藥途徑）、三個(gè)劑量、空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照和模型對(duì)照等；2)

一般藥理學(xué)，一般要求2~3個(gè)有效劑量、臨床給藥途徑、至少觀察對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響；3)藥代動(dòng)力學(xué)，一般要求3個(gè)劑量，提供常規(guī)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)、摸室類型和分布排泄試驗(yàn)。3.

臨床前毒理學(xué)評(píng)價(jià)主要內(nèi)容有急性毒性、長(zhǎng)期毒性、特殊毒性、局部用藥毒性、過(guò)敏試驗(yàn)、刺激性試驗(yàn)、藥物依賴性試驗(yàn)。4.

臨床藥理學(xué)評(píng)價(jià)：臨床試驗(yàn)分為I、II、III、IV期。I期臨床試驗(yàn)：初步的臨床藥理學(xué)及人體安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)。觀察人體對(duì)于新藥的耐受程度和藥代動(dòng)力學(xué)，為制定給藥方案提供依據(jù)。II期臨床試驗(yàn)：治療作用初步評(píng)價(jià)階段。其目的是初步評(píng)價(jià)藥物對(duì)目標(biāo)適應(yīng)癥患者的治療作用和安全性，也包括為III期臨床試驗(yàn)研究設(shè)計(jì)和給藥劑量方案的確定提供依據(jù)。此階段的研究設(shè)計(jì)可以根據(jù)具體的研究目的，采用多種形式，包括隨機(jī)盲法對(duì)照臨床試驗(yàn)。III期臨床試驗(yàn)：治療作用確證階段。其目的是進(jìn)一步驗(yàn)證藥物對(duì)目標(biāo)適應(yīng)癥患者的治療作用和安全性，評(píng)價(jià)利益與風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系，最終為藥物注冊(cè)申請(qǐng)的審查提供充分的依據(jù)。試驗(yàn)一般應(yīng)為具有足夠樣本量的隨機(jī)盲法對(duì)照試驗(yàn)。IV期臨床試驗(yàn)：新藥上市后應(yīng)用研究階段。其目的是考察在廣泛使用條件下的藥物的療效和不良反應(yīng)，評(píng)價(jià)在普通或者特殊人群中使用的利益與風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系以及改進(jìn)給藥劑量等。二.按新藥注冊(cè)申請(qǐng)進(jìn)行申報(bào)

藥品注冊(cè)申請(qǐng)包括:1.新藥申請(qǐng)、

2.仿制藥申請(qǐng)、

3.

進(jìn)口藥品申請(qǐng)

4.

補(bǔ)充申請(qǐng)

5.

再注冊(cè)申請(qǐng)1.新藥申請(qǐng)是指未曾在中國(guó)境內(nèi)上市銷售的藥品的注冊(cè)申請(qǐng)。對(duì)已上市藥品改變劑型、改變給藥途徑、增加新適應(yīng)癥的藥品注冊(cè)按照新藥申請(qǐng)的程序申報(bào)。2.仿制藥申請(qǐng)是指生產(chǎn)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局已批準(zhǔn)上市的已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品的注冊(cè)申請(qǐng)；但是生物制品按照新藥申請(qǐng)的程序申報(bào)。3.

進(jìn)口藥品申請(qǐng)是指境外生產(chǎn)的藥品在中國(guó)境內(nèi)上市銷售的注冊(cè)申請(qǐng)。4.

補(bǔ)充申請(qǐng)是指新藥申請(qǐng)、仿制藥申請(qǐng)或者進(jìn)口藥品申請(qǐng)經(jīng)批準(zhǔn)后，改變、增加或者取消原批準(zhǔn)事項(xiàng)或者內(nèi)容的注冊(cè)申請(qǐng)。5.

再注冊(cè)申請(qǐng)是指藥品批準(zhǔn)證明文件有效期滿后申請(qǐng)人擬繼續(xù)生產(chǎn)或者進(jìn)口該藥品的注冊(cè)申請(qǐng)。Thedrugdiscoverypipeline

Discovery

IND

Phase1

Phase2

Phase3

NDA

Phase4PreclinicalpharmacologyPreclinicalsafetyclinicalpharmacology&safety

臨床前藥理學(xué)評(píng)價(jià)是新藥評(píng)價(jià)的核心內(nèi)容。一個(gè)化合物在結(jié)構(gòu)確定、合成路線基本固定、也有一定穩(wěn)定性和相當(dāng)數(shù)量的基礎(chǔ)上就要開(kāi)始臨床前藥理學(xué)的系統(tǒng)評(píng)價(jià)。內(nèi)容有主要藥效學(xué)、一般藥理學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)和藥理作用機(jī)制研究。臨床前藥理學(xué)研究的目的確證一個(gè)化合物是否有防治或診斷疾病的作用，即是否有效，有效程度如何，有效范圍多大，和目前臨床應(yīng)用公認(rèn)的已知藥相比有何特色；在有效劑量范圍內(nèi)對(duì)機(jī)體的其他系統(tǒng)，如心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)等有何影響；藥物在體內(nèi)的高峰濃度多大，達(dá)峰時(shí)間多長(zhǎng)，作用持續(xù)時(shí)間多久，半衰期和生物利用度又如何；其作用機(jī)制是否和老藥一樣還是另有特點(diǎn)等等均需通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明?？傊?，為新藥申報(bào)臨床提供可靠的實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)資料，為臨床應(yīng)用范圍提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。第一節(jié)臨床前藥理學(xué)評(píng)價(jià)

的意義和要求

一.臨床前藥理學(xué)評(píng)價(jià)的意義1.

新藥評(píng)價(jià)就是要為臨床提供有效、安全、優(yōu)質(zhì)而穩(wěn)定的新藥。2.

臨床前藥理評(píng)價(jià)還為尋找新藥和開(kāi)發(fā)新藥提供重要線索。

只有通過(guò)臨床前的系統(tǒng)藥理評(píng)價(jià)才有可能申報(bào)臨床研究。通過(guò)臨床前藥理學(xué)評(píng)價(jià)，就了解了該藥的作用強(qiáng)度、用量大小、可能的毒副作用以及對(duì)機(jī)體系統(tǒng)可能會(huì)帶來(lái)什么影響；通過(guò)藥動(dòng)學(xué)資料可了解該藥在機(jī)體的分布情況，哪個(gè)器官或組織含量最高，在體內(nèi)是如何代謝、轉(zhuǎn)化和排泄的，半衰期多長(zhǎng)，作用起始及高峰時(shí)間、維持多久；這將為臨床用藥方案的設(shè)計(jì)，用藥個(gè)體化提供重要的參考依據(jù)。上述這些都是臨床大夫極想了解和必須知道的信息，否則就很難安全有效用于病人。

如通過(guò)藥理學(xué)評(píng)價(jià)就知道該藥在作用相同藥物中的地位，有何特色，是否有進(jìn)一步進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造的價(jià)值；藥理學(xué)評(píng)價(jià)就可以了解該藥在體內(nèi)是原型起作用，還是代謝物起作用，若是后者則可考慮進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，研究更好的化合物，還可進(jìn)行劑型改革的研究，這也是新藥之一種；一般藥理學(xué)研究就有可能發(fā)現(xiàn)該藥新的作用，從而開(kāi)發(fā)該藥應(yīng)用的新領(lǐng)域，藥理作用機(jī)制的研究則有可能發(fā)現(xiàn)新作用類型的藥物，從而合成系列化合物，這比發(fā)現(xiàn)一個(gè)老作用類型的藥物還有意義。臨床前藥理評(píng)價(jià)的基本要求1.課題負(fù)責(zé)人必須是有扎實(shí)的基礎(chǔ)理論知識(shí)、有相當(dāng)知識(shí)面的、有豐富實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的藥理毒理學(xué)家，并熟悉新藥審批辦法的有關(guān)規(guī)定，尤其是臨床前藥理、毒理學(xué)的有關(guān)規(guī)定。研究人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)，技術(shù)熟練，操作準(zhǔn)確，觀察仔細(xì)，作風(fēng)踏實(shí)，這樣結(jié)果才能可靠。試驗(yàn)者應(yīng)在完整整潔實(shí)驗(yàn)記錄上簽字，以供課題負(fù)責(zé)人或單位主管領(lǐng)導(dǎo)的檢查。必要時(shí)還應(yīng)接受藥政部門的抽查。臨床前藥理評(píng)價(jià)的基本要求2.受試藥物結(jié)構(gòu)確定、制備工藝基本穩(wěn)定，藥物或制劑基本穩(wěn)定，并符合臨床研究用藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，最好能提供與臨床前其他基礎(chǔ)研究質(zhì)量同一的藥品。所用試劑應(yīng)表明批號(hào)、廠家和規(guī)格要求。臨床前藥理評(píng)價(jià)的基本要求3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)符合國(guó)家科委規(guī)定的等級(jí)動(dòng)物要求。一般用正常成年動(dòng)物，必要時(shí)可用特定年齡、性別的動(dòng)物和特定的模型動(dòng)物。臨床前藥理評(píng)價(jià)的基本要求4.實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備應(yīng)符合要求，寫(xiě)明廠家、規(guī)格。要能保持正常工作，并有專人定期校驗(yàn)，誤差在允許范圍之內(nèi)。5.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循科學(xué)研究的基本規(guī)律，按隨機(jī)、對(duì)照和重復(fù)的原則進(jìn)行設(shè)計(jì)。臨床前藥理評(píng)價(jià)的基本要求6.實(shí)驗(yàn)記錄要盡量采用客觀的儀器記錄，做到表格化。觀察指標(biāo)、記錄時(shí)間、評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)等均應(yīng)通過(guò)預(yù)試事先制訂。多人參加記錄時(shí)，應(yīng)事先訓(xùn)練，統(tǒng)一掌握標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)未預(yù)見(jiàn)的現(xiàn)象時(shí)，應(yīng)及時(shí)記錄。實(shí)驗(yàn)中的誤差應(yīng)及時(shí)發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)差錯(cuò)后應(yīng)立即在記錄中說(shuō)明情況。原始記錄至少應(yīng)保存到藥品上市后二年。7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)合客觀實(shí)際恰當(dāng)下結(jié)論。第二節(jié)主要藥效學(xué)研究

一個(gè)化合物首先必需有效才有可能成為藥物。所以，藥效評(píng)價(jià)是新藥評(píng)價(jià)中重要而且必須及早完成的工作。藥效評(píng)價(jià)一方面是發(fā)現(xiàn)新藥，另一方面是評(píng)選新藥。

發(fā)現(xiàn)新藥就是用各種方法將原來(lái)作用不明的化合物的有效藥理作用暴露出來(lái)；評(píng)選新藥就是通過(guò)系列嚴(yán)密的科學(xué)設(shè)計(jì)將已發(fā)現(xiàn)有效的藥物的優(yōu)缺點(diǎn)弄清楚，從而決定棄取。發(fā)現(xiàn)的重點(diǎn)是暴露有效藥，評(píng)選的重點(diǎn)是擇優(yōu)錄用。不使療效可疑或沒(méi)有突出優(yōu)點(diǎn)的藥物濫竽充數(shù)，魚(yú)目混珠，以免造成上市新藥泛濫，管理混亂的惡果。

評(píng)選新藥主要是評(píng)價(jià)它的主要藥效作用，即從它預(yù)期用于臨床預(yù)防、診斷和治療目的藥理作用，這就是主要藥效學(xué)研究的任務(wù)。如嗎啡類化合物評(píng)價(jià)其鎮(zhèn)痛作用，抗菌素評(píng)價(jià)其殺菌作用，降壓藥評(píng)價(jià)其抗高血壓作用等。通過(guò)評(píng)價(jià)，明確受試化合物的作用強(qiáng)度和特點(diǎn)，與已知藥相比，有何特點(diǎn)，從而決定是否需要進(jìn)一步的評(píng)價(jià)。在評(píng)價(jià)藥效的同時(shí)，如有可能，還應(yīng)努力闡明藥物的作用靶器官和作用機(jī)制。一、總的要求(一)方法1.新藥的主要藥效作用應(yīng)當(dāng)用體內(nèi)體外兩種以上試驗(yàn)方法獲得證明，其中一種必須是整體的正常動(dòng)物或模型動(dòng)物。2.實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ捅仨毮芊从乘幚碜饔玫谋举|(zhì)。如果有些新藥確實(shí)無(wú)法滿足上述動(dòng)物和模型要求，應(yīng)予以充分說(shuō)明理由，改用其它模型。(二)指標(biāo)應(yīng)能反映主要藥效作用的藥理本質(zhì)。應(yīng)客觀，能定量或半定量。一、總的要求(三)劑量應(yīng)做出量效關(guān)系，盡量求出ED50或有效劑量范圍。量效關(guān)系不明確的藥物應(yīng)說(shuō)明原因。(四)給藥方法應(yīng)采用擬推薦臨床應(yīng)用的給藥方法。如該法在動(dòng)物上無(wú)法實(shí)施時(shí)，應(yīng)予說(shuō)明，改用他法。(五)對(duì)照應(yīng)有空白對(duì)照和已知標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性藥物或治療措施對(duì)照。二、有關(guān)問(wèn)題(一)動(dòng)物選擇(二)模型的建立(三)檢測(cè)指標(biāo)(四)測(cè)試方法(五)劑量要求(六)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(七)統(tǒng)計(jì)處理(八)給藥途徑(九)客觀總結(jié)(一)動(dòng)物選擇一般來(lái)說(shuō)，主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)所選擇的動(dòng)物應(yīng)是品系清楚、成年健康、雌雄各半、符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理要求、且對(duì)藥效學(xué)反映敏感的動(dòng)物。但抗肝癌或胃癌等藥效學(xué)試驗(yàn)時(shí)就用有免疫缺陷的動(dòng)物，如裸鼠。藥效學(xué)試驗(yàn)是在動(dòng)物身上進(jìn)行的，因此動(dòng)物的質(zhì)量與藥效關(guān)系密切，動(dòng)物的種類、品系、年齡、性別和飼養(yǎng)管理等都有影響。1.動(dòng)物的預(yù)篩大部分動(dòng)物只要選用符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理要求的動(dòng)物就行。但有些藥理實(shí)驗(yàn)還必須首先將這些動(dòng)物進(jìn)行過(guò)篩，即預(yù)篩。選擇在一定藥理反應(yīng)指標(biāo)內(nèi)的動(dòng)物，以免因個(gè)體差異太大而影響結(jié)果的評(píng)判，然后進(jìn)行隨機(jī)分組試驗(yàn)。如觀察藥物對(duì)小鼠游泳、學(xué)習(xí)記憶和抗癲癇藥的轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)等，都應(yīng)先進(jìn)行預(yù)篩。類似的還有鎮(zhèn)痛試驗(yàn)用小鼠；鎮(zhèn)咳試驗(yàn)用豚鼠進(jìn)行電刺激嗽時(shí)約有5％的豚鼠可對(duì)刺激無(wú)反應(yīng)或不能發(fā)生復(fù)制反應(yīng)，這些動(dòng)物也應(yīng)棄去；利尿藥與抗慢性腎衰藥試驗(yàn)用大鼠也需預(yù)篩，測(cè)定無(wú)蛋白尿者方可入選使用。2.年齡的選擇一般選用成年動(dòng)物。但有些實(shí)驗(yàn)要選用年齡不同的動(dòng)物。如觀察藥物對(duì)生長(zhǎng)、發(fā)育、內(nèi)分泌等作用時(shí)，以幼年動(dòng)物為好；而觀察抗衰老作用時(shí)，則宜用老年動(dòng)物或衰老過(guò)程較快的模型動(dòng)物。病毒性心肌炎體外模型的心肌細(xì)胞需用新生3～4天SD大鼠的心臟所得的細(xì)胞懸液，病毒性心肌炎在體模型宜用3～4周齡BABL／C

雄性小鼠，ip柯薩奇B3病毒感染而成；豚鼠致喘不僅要用純種，而且體重宜小于200g的豚鼠引喘較敏感；抗腫瘤的藥物中細(xì)胞毒類藥物藥敏試驗(yàn)用大鼠宜用3～4周齡，約50～70g較宜；鴨乙型肝炎病毒試驗(yàn)需用1日齡北京雛鴨；減肥藥試驗(yàn)用剛斷乳的SD大鼠，約50g，用于營(yíng)養(yǎng)性肥胖模型。若是下丘腦性肥胖模型則用新生乳鼠，自出生頭一天起scl5％谷氨酸鈉造模。3.性別的選擇臨床前藥效學(xué)試驗(yàn)通常用雌雄各半動(dòng)物。但不少藥效學(xué)試驗(yàn)需用雄性動(dòng)物:如抗癲癇藥的癲癇模型動(dòng)物；抗動(dòng)脈粥樣硬化藥和調(diào)血脂藥的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；精神藥藥效試驗(yàn)的動(dòng)物；抗血小板聚集藥常用雄性兔和大鼠，以避免雌性動(dòng)物的性周期對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響；抗凝血藥最好用雄性動(dòng)物；中毒性心肌炎在體模型用Wistar雄性大鼠；3.性別的選擇觀察藥物對(duì)呼吸道分泌的影響一般用雄性小鼠；利尿藥及抗利尿藥實(shí)驗(yàn)用大鼠；抗腎病藥造模用雄性大鼠、兔或犬；抗結(jié)石藥、抗前列腺增生藥和腎上腺皮質(zhì)激素類藥物的有關(guān)代謝試驗(yàn)等均用雄性動(dòng)物；抗痛風(fēng)關(guān)節(jié)藥動(dòng)物模型用雄性大鼠和兔；抗風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥和抗炎免疫藥的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)也用雄性動(dòng)物；抗梅毒螺旋體藥用新西蘭含兔；抗神經(jīng)毒藥藥效學(xué)試驗(yàn)一般也用雄性動(dòng)物。3.性別的選擇有些藥效學(xué)試驗(yàn)宜用雌性動(dòng)物。如藥物對(duì)雌性動(dòng)物內(nèi)分泌及生殖系統(tǒng)的作用當(dāng)然用雌性動(dòng)物。此外，鎮(zhèn)痛藥試驗(yàn)的熱板法和足跖刺激法，由于陰囊部位對(duì)熱較敏感，不用雄鼠而用雌性鼠。4.

種屬異同性動(dòng)物和人、不同動(dòng)物之間、同一動(dòng)物不同品系之間對(duì)藥物的反應(yīng)均有相似性的一面和差異性的另一面。正確認(rèn)識(shí)這種異同性，對(duì)正確評(píng)估藥效學(xué)評(píng)價(jià)的結(jié)果意義重大。既不因相似性而一味迷信實(shí)驗(yàn)藥效學(xué)結(jié)果好壞就決定臨床療效的優(yōu)劣；也不因差異性就忽視認(rèn)真完成藥效學(xué)試驗(yàn)，錯(cuò)誤地強(qiáng)調(diào)最終的判斷；豈不知，一般來(lái)講，動(dòng)物身上做不出藥效學(xué)結(jié)果是不能批準(zhǔn)上臨床的。新藥評(píng)價(jià)發(fā)展到今天，臨床前評(píng)價(jià)是上臨床的基礎(chǔ)和依據(jù)，必須嚴(yán)肅認(rèn)真去完成。(1)人與動(dòng)物的差異回顧新藥評(píng)價(jià)歷史，就發(fā)現(xiàn)不少藥物在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)無(wú)效，而臨床應(yīng)用不差。如環(huán)絲氨酸對(duì)動(dòng)物感染結(jié)核無(wú)效，但對(duì)結(jié)核病人卻肯定有效；保泰松在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中未見(jiàn)有消炎作用，但對(duì)人卻有肯定療效。當(dāng)然也有相反的例子，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)有效，臨床應(yīng)用無(wú)效。如芐基青霉素對(duì)動(dòng)物感染有效，對(duì)人卻很差。還有對(duì)動(dòng)物療效較差，而對(duì)人卻較好。如丁二醇二甲烷磺酸酯(馬利蘭、白消安)對(duì)動(dòng)物白血病療效較差，但對(duì)人的慢性髓性白血病的療效卻較好。魯卡因局部應(yīng)用，對(duì)人是局麻作用，對(duì)馬卻是中樞興奮作用；肌松劑琥珀酰膽堿和十烴季銨對(duì)人呈去極化型阻斷作用，而對(duì)大鼠、兔和豚鼠卻表現(xiàn)為雙相阻斷作用；腎上腺素能誘導(dǎo)人的血小板聚集，但對(duì)大鼠無(wú)此作用；丙咪嗪對(duì)人有抗抑郁作用，對(duì)小鼠和兔無(wú)此作用；杜冷丁對(duì)人比嗎啡安全，但動(dòng)物卻不如嗎啡安全；人注射組胺引起血壓升高，而大鼠和貓則血壓下降；人對(duì)催吐藥敏感，但鼠類和兔不引起嘔吐；抗5-HT藥溴麥角酰胺對(duì)大鼠的足趾浮腫有抗炎消腫作用，但對(duì)人卻無(wú)此作用；別嘌呤醇治療人的痛風(fēng)、高尿酸血癥效果很好，因它能抑制黃嘌呤氧化酶，但在批準(zhǔn)上臨床時(shí)費(fèi)了很長(zhǎng)時(shí)間，因?qū)?dòng)物無(wú)效，究其原因是人對(duì)嘌呤代謝的最終產(chǎn)物排泄的是尿酸，而其它哺乳動(dòng)物是將嘌呤分解成尿囊素后排泄。

(2)動(dòng)物之間的差異嗎啡對(duì)狗和猴引起抑制，但對(duì)老虎和貓卻引起興奮；嚙齒類動(dòng)物(大鼠、家兔、豚鼠和小鼠)不引起嘔吐，但鴿子、狗和貓則對(duì)嘔吐敏感；家兔注射組織胺后引起血壓升高，而貓和大鼠則血壓降低；貓對(duì)司可林和十烴季銨呈去極化型阻斷作用，而兔、豚鼠和大白鼠則常表現(xiàn)為雙相阻斷作用；治療心功能不全的藥物不宜用大鼠作藥效學(xué)試驗(yàn)，因?yàn)樗鼘?duì)強(qiáng)心甙和磷酸二酯酶抑制的強(qiáng)心反應(yīng)不敏感，而二者又常作為陽(yáng)性對(duì)照藥，前者如地高辛，后者如甲腈吡啶，此外，有些新藥本身也可能屬于這二類；(2)動(dòng)物之間的差異腎上腺素能誘導(dǎo)兔血小板聚集但不能誘導(dǎo)大鼠血小板聚集，因?yàn)榇笫笱“鍩o(wú)PAF受體；狗無(wú)論清醒或麻醉狀態(tài)，對(duì)各種刺激(化學(xué)、機(jī)械、電、迷走神經(jīng))均敏感，可引起咳嗽反應(yīng)，而豚鼠僅對(duì)化學(xué)和機(jī)械刺激敏感，大、小鼠則因變異太大而不宜采用；利尿藥和抗利尿藥實(shí)驗(yàn)宜選擇大鼠或犬，不宜用小鼠或兔；抗血吸蟲(chóng)藥常用小鼠、兔或犬，不宜用大鼠；解熱藥實(shí)驗(yàn)宜首選兔等等。正是由于動(dòng)物種屬差異性很大，因而目前趨向于采用反應(yīng)比較特異的多種所謂“專家式”動(dòng)物，而不是用一兩種“全能”動(dòng)物。如豚鼠常用作過(guò)敏試驗(yàn)及維生素C缺乏癥試驗(yàn)；家兔用于皮膚及眼的刺激試驗(yàn)；鴨用于引起白內(nèi)障的藥物及病毒性肝炎治療的模型。(3)品系之間的差異不同種屬動(dòng)物對(duì)藥物反應(yīng)有差異性，就是同一種動(dòng)物的不同品系有時(shí)也有藥物反應(yīng)的不同。這種反應(yīng)的差異是由遺傳因素決定的。如黑色家兔多數(shù)都有抗阿托品作用，白色家兔無(wú)此作用，因前者有控制阿托品酯酶的基因；KL系小白鼠對(duì)胰島素的耐藥性比其它系列的小白鼠高l0倍；大鼠Sprague-Dawley、Wistar、Holtzman和Long-Evans等系列，研究發(fā)現(xiàn)酶誘導(dǎo)劑苯巴比妥的作用在Long-Evans大鼠中最強(qiáng)；而丙咪嗪的抗利血平作用則以Long-Evans最低。(3)品系之間的差異克服動(dòng)物品系差異的辦法是采用同一品系的動(dòng)物?，F(xiàn)在國(guó)際上公認(rèn)的小鼠近交系約有252個(gè)品系，大鼠也有200多個(gè)品系，豚鼠和家兔也有10多個(gè)品系。如有些動(dòng)物有自發(fā)疾病，這種疾病與人體疾病也有某些相同之處，可以用這些自發(fā)疾病的模型動(dòng)物來(lái)評(píng)價(jià)藥物。如有多種特殊疾病的小鼠，如高癌鼠、低癌鼠、糖尿鼠、自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、先天性肌萎縮病鼠等，可進(jìn)行特殊藥效學(xué)評(píng)價(jià)。時(shí)辰藥理學(xué)此外，還應(yīng)注意藥物效應(yīng)在動(dòng)物身上的晝夜變化。時(shí)辰藥理學(xué)(Chronopharmacology)就是研究生物體的晝夜節(jié)律對(duì)藥物作用或體內(nèi)過(guò)程的影響的藥理學(xué)分支。由于機(jī)體有晝夜節(jié)律的變化，因此在晝夜節(jié)律的不同時(shí)間，給某一藥物以后，在生物利用度、排泄、血藥濃度等方面，常呈現(xiàn)一種周期性改變，因而反映在藥效和毒性上也會(huì)有節(jié)律性的變化。當(dāng)然對(duì)臨床前和臨床藥理學(xué)評(píng)價(jià)帶來(lái)影響。許多藥物，如麻醉藥、鎮(zhèn)靜藥、安眠藥、安定藥、抗驚藥、中樞興奮藥、解熱消炎藥、降壓藥、強(qiáng)心藥、抗腫瘤藥、抗菌素和激素等都在藥效反應(yīng)上受到晝夜節(jié)律的影響。(二)模型的建立主要藥效學(xué)的評(píng)價(jià)要建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的病理模型，本世紀(jì)以來(lái)，新藥研究開(kāi)發(fā)較快的原因之一就是成功地建立了許多動(dòng)物病理模型，從而開(kāi)辟了實(shí)驗(yàn)治療學(xué)的廣闊前景。藥效學(xué)試驗(yàn)要選用合適的動(dòng)物模型，所謂合適就是指能反映臨床疾病的病理生理過(guò)程，能反應(yīng)藥理作用的本質(zhì)。模型動(dòng)物一般要選用與人體解剖、生理反應(yīng)和機(jī)能類似的動(dòng)物，不同動(dòng)物模型選擇不同的動(dòng)物。藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型(一)動(dòng)物模型的治療結(jié)果與人體試用結(jié)果基本相同。這占大多數(shù)，否則也就失去了制造動(dòng)物模型的意義了。如抗感染動(dòng)物模型(家兔的梅毒病和結(jié)核性腦膜炎，豚鼠的真菌感染模型等)；可移植性腫瘤動(dòng)物模型(B16黑色素瘤，Lewis肺癌等)；小鼠鎮(zhèn)痛模型(熱板法和扭體法等)；豚鼠過(guò)敏性氣喘模型；大鼠高血壓模型(SHR自發(fā)性高血壓大鼠、腎動(dòng)脈結(jié)扎型模型和Doca模型等)；寄生蟲(chóng)感染模型(鼠瘧原蟲(chóng)及猴瘧原蟲(chóng)模型)；各種心律失常模型；糖尿病模型和胃潰瘍模型；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型等等。藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型(二)無(wú)合適的模型或不大好建立，前者如銀屑病、禿發(fā)、頸椎病、骨質(zhì)增生、痔瘡、紅斑性狼瘡和視網(wǎng)膜炎等，可采用一些間接指標(biāo)，如改善皮膚微循環(huán)，測(cè)量毛發(fā)生長(zhǎng)速度、數(shù)量與彈性，測(cè)定皮膚膠原蛋白含量及觀察眼結(jié)膜的微循環(huán)等；后者如冠心病、癲癇、慢性萎縮性胃炎等，雖然也評(píng)選了一些藥物，但與人體相比，在病原及病理上總還有相當(dāng)差距，更要經(jīng)過(guò)多種方法驗(yàn)證，特別是臨床驗(yàn)證后才能肯定。藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型(三)第三種情況是有些疾病在動(dòng)物迄今無(wú)法建立，如神經(jīng)官能癥、精神病、眩暈癥、四肢麻木、夜尿和幻覺(jué)等?？傊畬?duì)藥理作用要具體分析，大量查閱文獻(xiàn)，結(jié)合客觀實(shí)際進(jìn)行藥效學(xué)動(dòng)物模型的試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

藥效學(xué)動(dòng)物模型，一般來(lái)說(shuō)，以整體動(dòng)物為好，我國(guó)藥效學(xué)指導(dǎo)原則也指出，至少有一種整體動(dòng)物模型。但也并非不能用離體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，只要特異性好，能反映藥理作用的本質(zhì)就行。如青蛙坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本可用作橫紋肌松弛藥的藥效學(xué)評(píng)選；離體器官可以作為藥效學(xué)評(píng)選模型，在試管內(nèi)也可評(píng)選藥物的藥理作用。如抗寄生蟲(chóng)藥和抗微生物藥物大部分先在試管內(nèi)看藥效。很多作用于酶的藥物(單胺氧化酶抑制劑、碳酸酐酶抑制劑、膽堿酯酶抑制劑及其重活化劑)都可先在試管內(nèi)觀察它們對(duì)酶的作用強(qiáng)度和形式。

要注意整體動(dòng)物模型和各種體外模型的藥理反應(yīng)之間的差別。如很多簡(jiǎn)單的酚化物和芳香胺在體外百分之幾的濃度就能抑制結(jié)核桿菌的生長(zhǎng)，而在體內(nèi)無(wú)效。如果Domark不是及早在感染小鼠上做實(shí)驗(yàn)，那么磺胺藥也不會(huì)被他發(fā)現(xiàn)，因后者在體外作用極弱。瘧原蟲(chóng)雖有體外(惡性瘧原蟲(chóng)體外培養(yǎng)成功)和體內(nèi)二種方法，但主要是靠體內(nèi)；對(duì)病毒，體外過(guò)篩有效藥很多，而體內(nèi)無(wú)效。體外試驗(yàn)受pH、滲透壓等因素的影響較多較大。

為此藥理工作者對(duì)模型本身必須進(jìn)行認(rèn)真的研究，應(yīng)選擇與人體反應(yīng)比較接近的動(dòng)物模型。建立模型應(yīng)根據(jù)人體發(fā)病機(jī)制來(lái)建立。如果模型本身成問(wèn)題，然后對(duì)著這個(gè)錯(cuò)誤的靶子去用藥，當(dāng)然得不出正確的結(jié)果來(lái)。一般來(lái)講，更強(qiáng)調(diào)整體模型。在利用體外模型評(píng)選時(shí)，需反復(fù)探討模型本身的基礎(chǔ)。一定要在體內(nèi)和體外，動(dòng)物和人體的各方面效應(yīng)之間不斷驗(yàn)證。發(fā)現(xiàn)矛盾時(shí)再深入分析原因，從中找出比較能代表人體反應(yīng)情況的模型進(jìn)行試驗(yàn)。所以，一個(gè)藥效評(píng)價(jià)往往需要用幾個(gè)模型，而且在評(píng)價(jià)工作的不同階段反復(fù)進(jìn)行。切忌單憑個(gè)別動(dòng)物指標(biāo)就作出是與否的結(jié)論。要知道無(wú)效藥物用于臨床同樣是害人害己，浪費(fèi)有限的資金。在模型建立過(guò)程中要注意問(wèn)題

1.致模劑大部分病理動(dòng)物模型都要用致模劑。不同模型、不同動(dòng)物用致模劑可以不同；同一模型、不同動(dòng)物，或同一實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀⑼粍?dòng)物也可用不同致模劑。致模劑的選擇主要根據(jù)藥理作用、作用機(jī)制、動(dòng)物的敏感性，甚至給藥途徑等綜合因素考慮。常見(jiàn)的致模劑有化學(xué)品、藥品、菌液、病毒、瘤細(xì)胞、寄生蟲(chóng)、各種理化刺激(光、電、熱、冷、機(jī)械等)，手術(shù)結(jié)扎或器官摘除等。

藥效學(xué)試驗(yàn)具體的致模劑選擇參見(jiàn)新藥臨床前藥效學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)原則和藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法及有關(guān)文獻(xiàn)。如發(fā)熱動(dòng)物模型的致熱劑有感染性和非感染性兩種，前者有不同死菌培養(yǎng)液和內(nèi)毒素，后者如松節(jié)油和蛋白胨等；引起心律失常的致模劑有電刺激、結(jié)扎冠脈前降支和不同藥物(腎上腺素、氯化鋇、烏頭堿、強(qiáng)心苷、乙酰膽堿等)。

致模劑，尤其是化學(xué)品和藥物等，和藥物作用有量效關(guān)系一樣，模型成功與否，程度大小都與致模劑有關(guān)。有時(shí)致模劑用量過(guò)大，雖是有效藥物也未必能抗得住，如前列腺增生動(dòng)物模型用丙酸睪丸素用量就要適當(dāng)，否則連陽(yáng)性對(duì)照藥雌二醇也做不出陽(yáng)性結(jié)果；

有的模型也不是致模劑用量越大，模型程度就越高，如致熱劑死菌培養(yǎng)液或內(nèi)毒素，用量適中，溫度升高大于1℃就稱致模成功，若致模劑用量過(guò)大，有時(shí)不僅不再升溫，甚至有的兔反而降溫，糖尿病鼠模型用四氧嘧啶用量不當(dāng)也有造成血糖下降的?？傊?，致模劑用量選擇要參考文獻(xiàn)，但更主要的是通過(guò)預(yù)試驗(yàn)來(lái)決定。2.

模型動(dòng)物用麻醉劑的選擇

一些藥效學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物模型的建立常常需要麻醉，而麻醉藥有可能對(duì)藥效學(xué)有影響，因此需盡量選擇影響小或無(wú)影響的麻醉劑。如心肌缺血實(shí)驗(yàn)常常需麻醉，而麻醉本身對(duì)藥效學(xué)有影響，需用清醒動(dòng)物作比較；給貓電刺激喉上神經(jīng)引咳時(shí)，麻醉藥選用氯醛糖較好，對(duì)咳嗽反射幾無(wú)影響。

巴比妥類麻醉藥因其麻醉深淺不一，變異較大，刺激閾測(cè)定值不一致，不宜連續(xù)觀察藥物的作用，麻醉過(guò)深則明顯抑制咳嗽反射，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；瀉藥與止瀉藥藥效學(xué)試驗(yàn)用在體腸管運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度描記法時(shí)需麻醉動(dòng)物，麻醉藥宜選用烏拉坦，不宜用巴比妥類麻醉劑，因后者對(duì)消化道運(yùn)動(dòng)有抑制作用，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。3.

藥物作用機(jī)制不同選用

不同動(dòng)物模型

一種疾病往往有多種病因，也往往有多種不同藥理作用機(jī)制的藥物治療。因此雖然治療同一疾病，但不同作用機(jī)制的藥物，其藥效學(xué)試驗(yàn)需用不同模型來(lái)評(píng)選。如抗心律失常的許多藥物，其作用機(jī)制不同，需選用合適的動(dòng)物模型才能顯示療效。如β-受體阻滯劑對(duì)腎上腺素所致的心律失常更敏感，鈉通道阻滯劑則對(duì)烏頭堿所致的心律失常更敏感；甾體類和非甾體類抗炎藥的炎癥動(dòng)物模型也不完全相同；抗腫瘤藥、抗菌藥、抗真菌藥和抗寄生蟲(chóng)藥也不例外，根據(jù)作用瘤譜、抗菌譜和殺蟲(chóng)類別而選用不同動(dòng)物模型；抗高血壓藥的作用機(jī)制有多種，選擇動(dòng)物模型就要區(qū)別對(duì)待。4.

影響致模的其它因素動(dòng)物模型制作成功與否受多種因素影響，如致模劑的選擇、劑量的大小、給藥途徑及時(shí)間的確定、手術(shù)方案等往往比較重要。這里要指出的是一些易忽略的因素，如周圍環(huán)境及溫、濕度等.

如用大鼠尾動(dòng)脈間接測(cè)壓法測(cè)定大鼠血壓時(shí)常需加溫，要注明加溫的溫度和時(shí)間，因溫度高低和加溫時(shí)間的長(zhǎng)短，甚至室溫高低均對(duì)血壓有影響；抗感染藥物實(shí)驗(yàn)時(shí)，細(xì)菌、真菌或病毒等致模劑在培養(yǎng)基上長(zhǎng)期傳代，其毒力下降，一般傳4-5代就要換代，有類似道理的是一些遺傳疾病動(dòng)物，自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、糖尿病和高癌鼠等也不能總是近親繁殖下去，否則就漸漸面目全非，不是原來(lái)的模型動(dòng)物了。還有些藥物的治療作用和預(yù)防作用也選不同的動(dòng)物模型，如狗冠脈結(jié)扎和大鼠iv烏頭堿所致心律失常比較穩(wěn)定和持久，可供實(shí)驗(yàn)治療用，其它心律失常多用作預(yù)防作用實(shí)驗(yàn)。(三)檢測(cè)指標(biāo)動(dòng)物模型確立后就要確定觀察指標(biāo)。指標(biāo)應(yīng)能反映主要藥效作用的藥理本質(zhì)。應(yīng)客觀，能定量或半定量，且要靈敏。1.

指標(biāo)應(yīng)反映主要藥效學(xué)作用的

藥理本質(zhì)

一種藥理作用可以由多種原因引起。如抗休克藥，不僅引起休克的原因不同，休克的臨床癥狀也非完全一致，治療休克的不同藥物作用也各異，這方面指標(biāo)的選擇更是重要。如果是腎上腺素類抗休克，則主要是心源性休克，則心血管系統(tǒng)指標(biāo)很重要；如果是末梢血管擴(kuò)張劑則主要體現(xiàn)在改善微循環(huán)，糾正休克癥狀；如果是大量出血引起休克，則通過(guò)補(bǔ)充血容量或提高血壓來(lái)糾正休克；如果是血液系統(tǒng)障礙引起則主要是通過(guò)抗凝系統(tǒng)或纖溶系統(tǒng)活性提高來(lái)糾正；如果是感染中毒性休克，則主要是通過(guò)抗感染糾正休克。上述種種休克治療藥當(dāng)然要針對(duì)性地選擇反映抗休克藥理作用的指標(biāo)才能真正得出正確的結(jié)論來(lái)。

不反映本質(zhì)的指標(biāo)盡量不用。相反有些指標(biāo)對(duì)藥效確實(shí)有作用的還應(yīng)增加。如抗腫瘤藥物，雖然腫瘤的大小和體重，荷瘤動(dòng)物的存活率和存活期是主要指標(biāo)，必須要觀測(cè)。但是少數(shù)藥物，特別是一些基因工程藥品和中藥抗癌藥，它們不僅有直接殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，而且通過(guò)調(diào)節(jié)或增強(qiáng)機(jī)體的防御功能，如免疫功能，來(lái)達(dá)到防治腫瘤的作用。確切說(shuō)，這些屬于生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑或腫瘤輔助用藥。所以應(yīng)增加免疫指標(biāo)的觀測(cè)，尤其是細(xì)胞免疫指標(biāo)的檢測(cè)，如巨噬細(xì)胞試驗(yàn)，自然殺傷細(xì)胞NK測(cè)定，LAK細(xì)胞活性測(cè)定，誘生IL-1試驗(yàn)，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)和細(xì)胞激活因子等。抗艾滋病毒藥物也不僅要有體內(nèi)外殺病毒試驗(yàn)，也應(yīng)增加免疫指標(biāo)的檢測(cè)。2.指標(biāo)要客觀動(dòng)物的藥效反應(yīng)指標(biāo)分二種，一種是客觀可定量或半定量的，如計(jì)數(shù)指標(biāo)，儀器檢測(cè)有具體數(shù)字顯示，這種指標(biāo)可以計(jì)數(shù)，可進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，比較可信。不少指標(biāo)有時(shí)很難反映反應(yīng)的程度，如紅斑水腫或光毒反應(yīng)，還有一些神經(jīng)癥狀，屬于主觀判定不可計(jì)數(shù)的資料，不能進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，此時(shí)盡量采用分級(jí)打分評(píng)定的方法，轉(zhuǎn)化成計(jì)數(shù)資料，再進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。總之，指標(biāo)選擇盡量采用客觀的可定量的指標(biāo)，實(shí)在無(wú)法時(shí)也想法轉(zhuǎn)化成可定量的指標(biāo)。3.指標(biāo)要靈敏指標(biāo)靈敏度要適當(dāng)，以免造成“假陽(yáng)性”或“假陰性”。測(cè)試指標(biāo)的方法過(guò)分靈敏，不該測(cè)出的也測(cè)出了，這就是“假陽(yáng)性”；如果方法靈敏度太低，該測(cè)出的也測(cè)不出，這就是“假陰性”?！凹訇?yáng)性”的結(jié)果增加了不該入選的藥物，增加了系統(tǒng)評(píng)價(jià)的負(fù)擔(dān)；“假陰性”的結(jié)果是漏掉該入選的有效藥物，非?？上АＬ貏e是有些還沒(méi)有有效藥物的疾病，損失就更難估量了?？朔凹訇?yáng)性”和“假陰性”的方法是在正式確定指標(biāo)及靈敏度以前做一些預(yù)試，篩選部分藥物，用已知陽(yáng)性藥及陰性藥做對(duì)照，驗(yàn)證方法是否可靠，指標(biāo)是否合適，靈敏度是否恰當(dāng)。4.

指標(biāo)限度不同藥物藥效學(xué)指標(biāo)的要求也不應(yīng)完全一致，如抗菌素的藥效學(xué)指標(biāo)要訂高些，因現(xiàn)有不少抗菌素可用，至少不應(yīng)低于現(xiàn)有抗菌素的水平；抗艾滋病毒藥物，指標(biāo)就應(yīng)低些，原則上只要有效就行，因現(xiàn)還很少有有效的抗艾滋病藥。常見(jiàn)病、多發(fā)病，且已有很多藥物可用的，原則上訂高些，如心血管藥、保肝藥、胃藥等；相反，罕見(jiàn)病、疑難病，幾乎很少有有效藥用的，可訂低些。如抗腫瘤藥、牛皮癬等。評(píng)價(jià)老的結(jié)構(gòu)類型和作用方式的藥，指標(biāo)就應(yīng)訂得高些，反之，評(píng)價(jià)完全新的結(jié)構(gòu)或新的作用方式的藥，就應(yīng)低些。因?yàn)樾陆Y(jié)構(gòu)、新作用方式是剛發(fā)現(xiàn)的一個(gè)，還不一定是該類化合物中最佳的，深入研究可能還有潛力可挖掘。

指標(biāo)的靈敏度會(huì)受各種對(duì)照因素的影響。為了減少對(duì)照因素的影響，就必須盡量控制實(shí)驗(yàn)條件，如動(dòng)物的品系控制，試劑的質(zhì)量規(guī)格控制，實(shí)驗(yàn)儀器和方法的操作規(guī)程控制和實(shí)驗(yàn)室溫度、濕度、光線、時(shí)間等各種條件控制等。最好制訂標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，即SOP

(四)測(cè)試方法主要藥效學(xué)的評(píng)價(jià)不是通過(guò)一種方法或一種模型，而是要多種方法及多種模型，這樣的結(jié)果才更有預(yù)測(cè)臨床療效的作用。主要藥效學(xué)試驗(yàn)應(yīng)當(dāng)用體內(nèi)、外兩種以上試驗(yàn)方法獲得證明，其中一種必須是整體的正常動(dòng)物或動(dòng)物病理模型。這就是說(shuō)至少要有三種方法，即一種體內(nèi)，二種體外；或二種體內(nèi)，一種體外或三種體內(nèi)。而且I類新藥還必須有兩種動(dòng)物以上試驗(yàn)方法來(lái)確證其藥效。即最好有二種動(dòng)物的同一模型或二種動(dòng)物不同模型。系列化指標(biāo)用儀器檢測(cè)時(shí)要固定操作人員和儀器。(五)劑量要求藥物的療效評(píng)價(jià)離不開(kāi)劑量概念。嚴(yán)格地講，藥效最終都是指在人體所能接受的劑量下藥物所產(chǎn)生的作用。如無(wú)劑量限制，尤其是在離體實(shí)驗(yàn)中，如果劑量和濃度不受限制，那么藥物可產(chǎn)生多種特殊的作用，而這些作用事實(shí)上是沒(méi)有意義的。(五)劑量要求主要藥效學(xué)的評(píng)價(jià)，重要的是在整體條件下，在接近治療劑量時(shí)所出現(xiàn)的藥效，一切分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，無(wú)論是在什么水平、什么層次上的觀察，都必須要能在整體條件下得到反映才有意義。否則往往會(huì)得出很片面的結(jié)論，這是需要時(shí)刻注意的。

藥效學(xué)的劑量限度有時(shí)要區(qū)別對(duì)待，對(duì)于一些沒(méi)有或很少有防治藥物的疾?。喝缒[瘤和艾滋病等，對(duì)藥效學(xué)劑量要慎重考慮，如果實(shí)驗(yàn)藥效學(xué)確實(shí)有效，但劑量偏高可能產(chǎn)生毒副作用。這時(shí)應(yīng)綜合考慮，是否利大于弊，臨床療效可能性等等，不要僅僅因動(dòng)物藥效學(xué)劑量偏高而將其舍去。因?yàn)閷?duì)上述兩種疾病，產(chǎn)生一些毒副反應(yīng)只要確有臨床療效也是值得的。如腫瘤壞死因子的藥效學(xué)最佳劑量接近1/3LD50但臨床確實(shí)有效，就不宜簡(jiǎn)單否定掉。(六)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)這里是指狹意上的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，主要指藥效學(xué)試驗(yàn)中的設(shè)計(jì)要符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求的三原則，即隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù)。這也是科研設(shè)計(jì)的總體三原則，否則結(jié)果就失去了科學(xué)性、可信性和可靠性。盡管目的明確、指標(biāo)客觀、劑量合適、動(dòng)物健康、模型可靠，但還得重新進(jìn)行。1.隨機(jī)即機(jī)會(huì)均等，防止抽樣誤差?？捎秒S機(jī)數(shù)表等將動(dòng)物按性別分別隨機(jī)分組，而不是隨意或有意分組，應(yīng)防止將健壯靈活的動(dòng)物分在一組，體質(zhì)稍差或不太靈活的分在另一組，尤其是在抗腫瘤和抗瘧藥等的研究中，這樣就可出現(xiàn)因抽樣誤差造成的結(jié)果不準(zhǔn)確。小鼠急性毒性LD50測(cè)定時(shí)也容易造成抽樣誤差。2.對(duì)照即可比性，有鑒別才能比較。任何實(shí)驗(yàn)，都離不開(kāi)對(duì)照。沒(méi)有對(duì)照，很多實(shí)驗(yàn)的結(jié)果都無(wú)法判斷。現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)科學(xué)的顯著特點(diǎn)之一是有嚴(yán)密的對(duì)照設(shè)計(jì)，新的科學(xué)結(jié)論都必須在與嚴(yán)格的對(duì)照作比較后才能得出。

主要藥效學(xué)試驗(yàn)必須有以下幾種對(duì)照：陽(yáng)性藥對(duì)照，陰性藥對(duì)照(空白對(duì)照)，模型對(duì)照，正常對(duì)照。受試藥至少三個(gè)劑量組，加上對(duì)照組，一般來(lái)講，主要藥效學(xué)試驗(yàn)要6-7個(gè)組，陽(yáng)性藥的劑量按臨床劑量或毒性劑量折算宜和受試藥中劑量組相當(dāng)為宜。陽(yáng)性藥的選擇應(yīng)選用公認(rèn)的，已批準(zhǔn)上市或藥典上記載的，藥理作用機(jī)制相同的藥物。否則就失去比較的意義。

如抗血小板聚集藥，若受試藥作用機(jī)制是環(huán)氧化酶抑制劑，則用阿司匹林作陽(yáng)性藥對(duì)照；若受試藥作用機(jī)制是抑制TXB2合成酶，則選用咪唑；若作用機(jī)制是激活腺苷酸環(huán)化酶，則選用前列腺素E1。有時(shí)給藥途徑不同也需選用不同陽(yáng)性對(duì)照藥，如抗凝血藥是注射劑，則選用肝素作陽(yáng)性對(duì)照，若是口服劑則選用雙香豆素類藥物。3.

重復(fù)即可靠性，防止偶然性。沒(méi)有重復(fù)的藥效學(xué)結(jié)果是不可靠的，經(jīng)不住別人在相同條件下的重復(fù)也是不可靠的。體外試驗(yàn)和整體試驗(yàn)均要重復(fù)，最好有三次的重復(fù)結(jié)果，這才有把握。只有某些特殊情況，在特定條件下，有相當(dāng)?shù)倪B續(xù)動(dòng)態(tài)結(jié)果才可考慮不重復(fù)。(七)統(tǒng)計(jì)處理新藥藥效學(xué)研究的統(tǒng)計(jì)工作包括實(shí)驗(yàn)前的設(shè)計(jì)及資料處理兩方面。良好的試驗(yàn)設(shè)計(jì)能夠使試驗(yàn)結(jié)果比較明確地回答所提出的問(wèn)題，能夠使試驗(yàn)在更少的人力、物力和時(shí)間條件下，得到精確的結(jié)果。不僅工作效率提高，也使試驗(yàn)的精確性和科學(xué)性加強(qiáng)。如我國(guó)陳克恢早就有效地采用12×12拉丁方的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，在12天里比較12種強(qiáng)心藥，同時(shí)又算出上下午的差別和三位實(shí)驗(yàn)者之間的誤差。這種統(tǒng)計(jì)學(xué)的運(yùn)用非常值得我們學(xué)習(xí)。

要注意的是有些藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果用常規(guī)指標(biāo)判斷時(shí)無(wú)統(tǒng)計(jì)意義，若改變指標(biāo)則就有統(tǒng)計(jì)意義。如發(fā)熱動(dòng)物模型既要發(fā)熱，又不能發(fā)熱過(guò)高而死亡，且致熱劑也未必多用就升溫加大。一般發(fā)熱動(dòng)物體溫升高>1℃就稱造模成功，用藥溫度下降>1℃，則應(yīng)為有效，但統(tǒng)計(jì)處理則P>0.05，除非將n大大增加。此時(shí)若用最大降溫幅度或降溫起效時(shí)間或降溫維持時(shí)間長(zhǎng)短來(lái)比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，則就可能有效。統(tǒng)計(jì)處理中還要注意，如結(jié)果不符合正態(tài)分布時(shí)，不宜用t檢驗(yàn)，應(yīng)考慮用秩和檢驗(yàn)，尤其是一些實(shí)驗(yàn)結(jié)果個(gè)體差異太大時(shí)易發(fā)生這種情況。

應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)P值還應(yīng)注意的一個(gè)問(wèn)題是統(tǒng)計(jì)上P值的意義是指兩組數(shù)據(jù)之間的差異有否顯著性，而這顯著性在臨床或藥理、生理學(xué)中是否有實(shí)際意義則要具體分析。如白細(xì)胞、血小板降低幾千，甚至上萬(wàn)，完全有統(tǒng)計(jì)意義，但其正常值范圍就較大，仍在正常范圍內(nèi)則無(wú)病理意義。尿量改變也是如此。這在長(zhǎng)毒試驗(yàn)中更會(huì)碰到，此時(shí)關(guān)鍵要看其動(dòng)態(tài)結(jié)果及重復(fù)結(jié)果如何才能決定。相反，有時(shí)雖無(wú)統(tǒng)計(jì)意義，但確有實(shí)際價(jià)值，如解熱藥的降溫試驗(yàn)，如總是可以降2度左右，則很有意義，但統(tǒng)計(jì)上不顯示顯著差異。(八)給藥途徑

一般來(lái)說(shuō)，主要藥效學(xué)的給藥途徑宜和推薦臨床用藥途徑一致。這樣才能更好地反映藥效的價(jià)值和意義。但有時(shí)，臨床給藥途徑可以辦到，但動(dòng)物上很難或根本辦不到時(shí)，應(yīng)說(shuō)明理由，可以考慮采用他法。

如麻醉動(dòng)物降壓試驗(yàn)或腦血流量測(cè)定等，受試藥口服給予有困難，也可用細(xì)塑料管插入十二指腸或胃中，然后關(guān)閉腹腔，等血壓穩(wěn)定后再通過(guò)塑料管加藥或直接注入十二指腸；小鼠鎮(zhèn)咳藥試驗(yàn)不宜ip給藥，因可干擾小鼠咳嗽反應(yīng)；抗癌藥中腹水瘤小鼠或大鼠，受試藥也不能以ip代替iv(當(dāng)臨床是iv給藥時(shí))；抗真菌藥腹腔感染，也不宜ip給藥治療；一些內(nèi)病外治法，小兒止瀉貼劑貼于肚臍眼上，動(dòng)物根本沒(méi)有肚臍眼，可考慮外貼皮膚代替；類似的還有穴位給藥、離子導(dǎo)入、氣霧吸入、某些腔道給藥(鼻腔、膽囊和陰道等)，均有探討的必要。(九)客觀總結(jié)主要藥效學(xué)試驗(yàn)完成后就要對(duì)其的有效性、作用強(qiáng)度、與臨床擬用量的關(guān)系、與陽(yáng)性藥作用效果的比較、可能的毒副作用等作出明確的回答。要科學(xué)地客觀地實(shí)事求是地總結(jié)。

有的研究人員總擔(dān)心藥效上不明顯好于陽(yáng)性對(duì)照藥時(shí)不好辦，特別是申報(bào)新藥時(shí)，其實(shí)不然，評(píng)價(jià)一個(gè)新藥是全過(guò)程評(píng)價(jià)，藥效是重要方面之一，但不是唯一決定因素，其他如工藝合成、制劑配制、穩(wěn)定性、劑量用法、毒副反應(yīng)、價(jià)格銷路等綜合因素影響。陽(yáng)性藥一般是經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間考驗(yàn)，大家公認(rèn)的，超過(guò)它當(dāng)然好，但結(jié)論要慎重，有的試驗(yàn)者不愿寫(xiě)毒副反應(yīng)，生怕影響新藥的價(jià)值，但如果真有毒副反應(yīng)，一定要如實(shí)寫(xiě)出來(lái)，為臨床監(jiān)控藥物的毒副反應(yīng)提供依據(jù)。(十)關(guān)于復(fù)方研究復(fù)方是指由二個(gè)以上藥物組成的制劑。復(fù)方不同于聯(lián)合用藥。復(fù)方應(yīng)在增強(qiáng)藥效、減少毒副反應(yīng)、降低用量、改善有效時(shí)間或其他某一方面比各單藥有確切的優(yōu)點(diǎn)。起矯味、調(diào)色、改善穩(wěn)定性等作用的藥物屬賦形劑，按賦形劑要求進(jìn)行。

組成復(fù)方的各單藥必須是已批準(zhǔn)生產(chǎn)的成藥。未批準(zhǔn)生產(chǎn)的新藥應(yīng)先進(jìn)行該單藥的申報(bào)，通過(guò)審批，獲得新藥證書(shū)后才可組于復(fù)方中。復(fù)方藥理學(xué)研究的主要要求是通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)確定復(fù)方組成的依據(jù)和合理性，明確復(fù)方組成藥物在藥理作用上的相互關(guān)系。評(píng)價(jià)復(fù)方藥理各項(xiàng)要求應(yīng)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，證明所下結(jié)論可靠。復(fù)方制劑應(yīng)回答下列問(wèn)題：1.藥物優(yōu)選所選藥物在同類藥物中的優(yōu)點(diǎn)必須闡明，并提供實(shí)驗(yàn)或文獻(xiàn)依據(jù)。2.最佳配比首先要說(shuō)明組方理由(即用主要藥效學(xué)研究的要求選定模型及指標(biāo))，說(shuō)明所選比例的依據(jù)，優(yōu)勢(shì)在哪里，這不僅要有理論根據(jù)，還要有臨床伍用依據(jù)及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，要用等概率和曲線與Q50或其他方法說(shuō)明此配比為最佳配比。3.量-效關(guān)系最佳配比確定后也需做出量-效關(guān)系來(lái)，并確定最佳劑量，為毒性、藥動(dòng)學(xué)及臨床研究提供依據(jù)。

4.拆方分析用實(shí)驗(yàn)說(shuō)明每一種藥存在的必要性，或是增加療效、或是減少毒副反應(yīng)、或是減少用量、或是其他特殊優(yōu)點(diǎn)等。5.時(shí)效關(guān)系組成復(fù)方后與單藥相比，在藥物作用起效時(shí)間、達(dá)峰時(shí)間、持續(xù)時(shí)間上有何特長(zhǎng)，應(yīng)有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)證明。6.藥代影響復(fù)方和單藥相比，在藥代動(dòng)力學(xué)系列參數(shù)及在吸收、分布、排泄和血漿蛋白結(jié)合率等藥動(dòng)學(xué)方面顯示什么優(yōu)點(diǎn)，如減少代謝還是加速排泄等等。

7.毒性影響復(fù)方比單方在毒副反應(yīng)方面有協(xié)同；相加、無(wú)相互作用或拮抗作用，這往往是復(fù)方的立題依據(jù)之一，要有實(shí)驗(yàn)或文獻(xiàn)依據(jù)。8.藥學(xué)影響指復(fù)方藥物組成有否配伍禁忌，對(duì)理化性質(zhì)和穩(wěn)定性有否影響，也應(yīng)說(shuō)明。9.綜合定方在上述各種條件研究清楚后，全面衡量，分析利弊，說(shuō)明優(yōu)特點(diǎn)，最后綜合定方。第三節(jié)一般藥理學(xué)研究新藥臨床前藥理評(píng)價(jià)工作在完成主要藥效學(xué)研究的同時(shí)應(yīng)完成一般藥理學(xué)研究，也叫系統(tǒng)藥理學(xué)研究或一般藥效學(xué)研究。一、目的意義一般藥理學(xué)研究是指新藥主要藥效作用以外廣泛藥理作用的研究，尤其是對(duì)心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的影響，為臨床提供更多的信息。通過(guò)一般藥理研究可以了解新藥的全面藥理作用，尤其是對(duì)三大系統(tǒng)生理指標(biāo)的功能性變化；補(bǔ)充一般毒性觀察的不足，為全面開(kāi)展毒理研究作準(zhǔn)備，從這個(gè)意義上講，一般藥理研究也是全面毒理評(píng)價(jià)的重要組成部分；有助于發(fā)現(xiàn)新用途；也有助于探索作用機(jī)制。(一)了解新藥的全面藥理作用藥物應(yīng)用到人體，隨著血液循環(huán)分布到體內(nèi)各器官組織。因此在應(yīng)用一個(gè)新化合物之前理應(yīng)對(duì)它的全面作用有基本認(rèn)識(shí)。否則對(duì)主要藥效作用的評(píng)價(jià)也可能有片面性。如嗎啡類鎮(zhèn)痛藥的評(píng)價(jià)若僅限于評(píng)價(jià)其鎮(zhèn)痛作用，局限于分析鎮(zhèn)痛作用的量-效關(guān)系，時(shí)效關(guān)系等就不可能作出正確的選定。因?yàn)殒?zhèn)痛藥的優(yōu)劣，不只是決定于它的作用強(qiáng)度和時(shí)間，還決定于它的呼吸抑制作用、成癮性等副作用的強(qiáng)弱和安全系數(shù)的大小。只有對(duì)它的全面藥理作用有了基本了解才能對(duì)主要藥效學(xué)作用作出正確的評(píng)價(jià)。(二)有助于探索新藥的作用機(jī)制