總大腸桿菌檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書

總大腸桿菌檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書總大腸桿菌檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書總大腸桿菌檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書總大腸桿菌檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書培育基1.1乳糖蛋白胨培育液；1.2三倍乳糖蛋白胨培育液；1.3品紅亞硫酸鈉培育基；1.4伊紅美藍(lán)培育基。2．步驟2.1生活飲用水2.1.1初發(fā)酵試驗(yàn)：在二個(gè)裝有已滅菌的50ml三倍濃縮乳糖蛋白胨培育液的大試管或燒瓶中，以無(wú)菌操作各加入已充分混勻的水樣100ml；在10支裝有已滅菌的5ml三倍濃縮乳糖蛋白胨培育液的試管中（內(nèi)有倒管），以無(wú)菌操作加入充分混勻的水樣10ml，混勻后置于37℃恒溫箱培育24h。2.1.2平板分別：經(jīng)初發(fā)酵試驗(yàn)培育24h后，發(fā)酵試管鹽酸變黃為產(chǎn)酸，小玻璃倒管內(nèi)有氣泡為產(chǎn)氣，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸發(fā)酵管，分別用接種環(huán)劃線接種于品紅亞硫酸鈉培育基上，置于37℃中培育18~24h，精選符合以下特點(diǎn)的菌落，取菌落的一小部分進(jìn)行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。2.1.3復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)：上述涂片鏡檢的菌落如為革蘭氏陰性無(wú)芽孢的桿菌，則精選該菌落的另一部分接種于一般濃度乳糖蛋白胨培育液中，每管可接種分別自同一初發(fā)酵管的最典型菌落1~3個(gè)，報(bào)告每升水樣中的大腸菌群數(shù)。2.2水源水2.2.1將水樣作1:10稀釋；2.2.2于各裝有5ml三倍濃縮乳糖蛋白胨培育液的五個(gè)試管中，各加10ml水樣；于各裝有10ml乳糖蛋白胨培育液的五個(gè)試管中，各加1ml水樣；于各裝有10ml乳糖蛋白胨培育液的五個(gè)試管中，各加入1ml1:10稀釋的水樣。合計(jì)15管，三個(gè)稀釋度，將各管充分混勻，置于37℃恒溫箱培育24h。2.2.3平板分別：經(jīng)初發(fā)酵試驗(yàn)培育24h后，發(fā)酵試管鹽酸變黃為產(chǎn)酸，小玻璃倒管內(nèi)有氣泡為產(chǎn)氣，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸發(fā)酵管，分別用接種環(huán)劃線接種于品紅亞硫酸鈉培育基上，置于37℃中培育18~24h，精選符合以下特點(diǎn)的菌落，取菌落的一小部分進(jìn)行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。2.2.4復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)：上述涂片鏡檢的菌落如為革蘭氏陰性無(wú)芽孢的桿菌，則精選該菌落的另一部分接種于一般濃度乳糖蛋白胨培育液中，每管可接種分別自同一初發(fā)酵管的最典型菌落1~3個(gè)，報(bào)告每升水樣中的大腸菌群數(shù)。2.2.5依據(jù)證明總大腸菌群存在的陽(yáng)性管數(shù)查表即求得每100ml水樣中存在的總大腸菌群數(shù)。內(nèi)容總結(jié)

（1）總大腸桿菌檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書

培育基

1.1乳糖蛋白胨培育液

（2）1.4伊紅美藍(lán)培育基

（3）2．步驟

2.1生活飲用水

2.1.1初發(fā)酵試驗(yàn)：在二個(gè)裝有