化妝品中游離甲醛的檢測方法

附件2化妝品中游離甲醛的檢測方法Determinationoffreeformaldehydein

cosmetics1范圍本方法規(guī)定了柱后衍生-高效液相色譜法測定化妝品中游離甲醛含量。本方法適用于水劑、膏霜乳液、凝膠類化妝品中游離甲醛含量的測定。2方法提要樣品中的游離甲醛經(jīng)高效液相色譜分離，柱后衍生，在420nm波長下檢測，根據(jù)保留時(shí)間定性，峰面積定量，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。取0.2g樣品時(shí)，本方法對游離甲醛的檢出濃度為0.003%,最低定量濃度為0.005%。3試劑和材料除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。甲醛標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液，使用前按附錄A方法進(jìn)行標(biāo)定。磷酸，分析純。乙酸銨，色譜純。冰乙酸,分析純。乙酰丙酮，分析純。二氯甲烷，分析純。磷酸溶液：取磷酸（3.2）2mL,緩緩加入到998mL水中，混勻。柱后衍生溶液：稱取62.5g乙酸銨（3.3）,加7.5mL冰乙酸（3.4）,5mL乙酰丙酮（3.5）,加水至1000mL，搖勻。該溶液可有效使用3天。甲醛系列標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密量取甲醛標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液（3.1）適量，用磷酸溶液（3.7）稀釋成1仙g/mL、26g/mL、56g/mL、10.0Ng/mL、20.0Ng/mL、50.0^g/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。臨用現(xiàn)配。4儀器和設(shè)備高效液相色譜儀，具有二極管陣列檢測器。柱后衍生儀。天平。離心機(jī)。渦旋振蕩器。5分析步驟樣品處理稱取樣品0.2g（精確至0.001g）于10mL具塞比色管中，加磷酸溶液（3.7）至刻度，渦旋處理1分鐘，5000rpm離心5min，取上清液經(jīng)0.45^m微孔濾膜（水相）過濾，濾液作為待測溶液，并盡快測定。必要時(shí)，可以取上清液加入10mL二氯甲烷（3.6）,振搖，靜置分層后取上層溶液經(jīng)0.45^m微孔濾膜（水相）過濾，濾液作為待測溶液。色譜參考條件色譜柱：C18色譜柱（250x4.6mmx5^m），或等效色譜柱；流動(dòng)相：磷酸溶液（3.7）；流速：1.0mL/min；柱溫：20℃；檢測波長：420nm；進(jìn)樣體積：10匹；柱后衍生溶液流速：0.5mL/min；衍生溫度：100℃。測定在“5.2”項(xiàng)色譜條件下，取“3.9”項(xiàng)下的甲醛系列標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)樣，進(jìn)行液相色譜分析，以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，甲醛衍生物的峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。取“5.1”項(xiàng)下處理得到的待測溶液進(jìn)樣10匹，進(jìn)行色譜分析，根據(jù)保留時(shí)間和光譜圖定性，測得甲醛衍生物的峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測溶液中游離甲醛的質(zhì)量濃度。按“6”計(jì)算樣品中游離甲醛的含量。6分析結(jié)果的表述6.1計(jì)算3（游離甲醛）;pXvx100

mx106式中：3（游離甲醛）—-化妝品中游離甲醛的含量，%；m——樣品取樣量，g；P——代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的樣品中甲醛的質(zhì)量濃度，口g/mL；V——定容體積，mL。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。6.2回收率和精密度回收率為95.3%?112.5%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%。7圖譜圖1甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖甲酉荃（4.542min）附錄A（規(guī)范性附錄）甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定A.1試劑和材料除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。A.1.1硫酸，優(yōu)級純。A.1.2氫氧化鈉溶液：稱取氫氧化鈉4g，用少量水溶解，再加水至100mL，混勻。A.1.3硫酸溶液I：取硫酸（A.1.1）3mL,緩慢加入到97mL水中，混勻。A.1.4硫酸溶液口：取硫酸（A.1.1）10mL，緩慢加入到90mL水中，混勻。A.1.5淀粉溶液稱取可溶性淀粉1g，用水5mL調(diào)成溶液后，加入沸水95mL，煮沸，加水楊酸0.1g或氯化鋅0.4g防腐。A.1.6碘標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取碘13.0g和碘化鉀35g，加水100mL,溶解后加入鹽酸3滴，用水稀釋至1L，過濾后轉(zhuǎn)移至棕色瓶中。A.1.7重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液［c（1/6K2Cr2O7）=0.1mol/L］：準(zhǔn)確稱取于120℃±2℃干燥至恒重的重鉻酸鉀基準(zhǔn)物質(zhì)4.9031g，溶于水轉(zhuǎn)移至1L容量瓶中，定容到刻度，搖勻。A.1.8硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取硫代硫酸鈉（Na2s2O3.5H2O）268或無水硫代硫酸鈉16g溶于1L新煮沸放冷的水中，加入氫氧化鈉0旌或無水碳酸鈉0.2g，搖勻，儲(chǔ)存于棕色玻璃瓶內(nèi)，放置兩周后過濾，并按如下方法標(biāo)定濃度：準(zhǔn)確量取重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(A.1.7)25.00mL于500mL碘量瓶中，加碘化鉀2.0g和硫酸溶液口(A.1.4)20mL，立即密塞，搖勻，于暗處放置10min。加水150mL，用硫代硫酸鈉溶液(A.1.8)滴定至溶液顯淺黃色時(shí)，加入淀粉溶液(A.1.5)2mL，繼續(xù)滴定至溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)榱辆G色。同時(shí)做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算硫代硫酸鈉溶液的濃度：N_c(K2Cr2O7)X25.00、223，7；(vi-vo)式中：c(Na2s2O3)——?硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L；c(K2Cr2O7)——重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度[c(1/6K2Cr2O7)],mol/L；V1——滴定重鉻酸鉀消耗硫代硫酸鈉溶液的體積，mL；V0——滴定空白消耗硫代硫酸鈉溶液的體積，mL。A.2標(biāo)定準(zhǔn)確量取甲醛標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液適量(相當(dāng)于甲醛10?20mg)于250mL碘量瓶中，加入碘標(biāo)準(zhǔn)溶液(A.1.6)50.00mL，氫氧化鈉溶液(A.1.2)15mL，加塞搖勻放置15min，加硫酸溶液I(A.1.3)20mL，立即塞緊，混勻，于暗處放置15min，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(A.1.8)滴定至溶液顯淡黃色時(shí)，加入淀粉溶液(A.1.5)2mL,繼續(xù)滴定至溶液的藍(lán)色剛好褪去，記錄消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。同時(shí)做空白試驗(yàn)。并按下式計(jì)算甲醛的濃度：(v-v)xcx15x1000P(HCHO)=」v式中：p(HCHO)——甲醛溶液的濃度分?jǐn)?shù)，mg/L；V——甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液取樣體積，mL；V0——滴定空白溶液消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL；V1——滴定甲醛溶液消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL；c——硫代硫酸鈉溶液的摩爾濃度，mol/L；15——甲醛(1/2HCHO)摩爾質(zhì)量，g/mol。附錄B（規(guī)范性附錄）液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜參考方法當(dāng)樣品中游離甲醛含量大于0.05%時(shí)，可采用液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜進(jìn)行確證。樣品處理稱取樣品0.2g（精確至0.001g）于10mL具塞比色管中，加五氟苯肼溶液（稱取五氟苯肼1.0g,置1000mL容量瓶中，用磷酸溶液（3.7）溶解并定容，搖勻，即得）至刻度，渦旋處理1分鐘，5000rpm離心5min，取上清液經(jīng)0.22^m微孔濾膜過濾，濾液作為待測溶液，立即測定。另取甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液適量（與樣品中游離甲醛的量相當(dāng)）于10mL具塞比色管中，同法處理。液相色譜-質(zhì)譜法參考條件色譜參考條件：色譜柱：C18柱（2.1mmx150mmx3.5pm）,或等效色譜柱；流動(dòng)相A：水；流動(dòng)相B：乙睛；流動(dòng)相梯度洗脫程序見下表：時(shí)間/minV（流動(dòng)相A）/%V（流動(dòng)相B）/%1.090103.040606.001008.001008.19010表1流動(dòng)相梯度洗脫程序流速：0.3mL/min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：5匹。質(zhì)譜參考條件：離子源：電噴霧離子源（ESI源）；監(jiān)測模式：負(fù)離子多反應(yīng)監(jiān)測模式；氣流溫度：160℃；鞘氣溫度：350℃；霧化氣壓力：30psi；毛細(xì)管電壓：1500V；碰撞氣：氮?dú)?；其他質(zhì)譜條件參見下表：表2監(jiān)測離子對及相關(guān)電壓參數(shù)設(shè)定表物質(zhì)名稱母離子（m/z）子離子（m/z）CE（V）甲醛與五氟苯肼衍生物20918951716717B.3定性分別取B.1項(xiàng)下甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品溶液5匹，在相同試驗(yàn)條件下，樣品中各離子對的保留時(shí)間應(yīng)與標(biāo)