2023年小腸平滑肌實驗報告

實驗十二消化實驗家兔離體小腸平滑肌生理特性［目的規(guī)定］1、學習離體腸段平滑肌的實驗方法。2、了解腸段平滑肌的生理特性。［基本原理］哺乳動物消化管平滑肌與肌肉組織共有的特性，如興奮性、傳導性和收縮性等。但消化管平滑肌又有其特點，即興奮性較低，收縮緩慢，富有伸展性，具有緊張性、自動節(jié)律性，對化學、溫度和機械牽張刺激較敏感等。這些特性可維持消化管內(nèi)一定壓力，保持胃腸等一定的形態(tài)和位置,適合于消化管內(nèi)容物的理化變化，在體內(nèi)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調(diào)節(jié)。將離體組織潛官置于摸擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中，可在一定期間內(nèi)保持其功能。本實驗以臺式液作灌流液，在體外觀測及記錄哺乳動物離體腸段的一般生理特性。［動物與器材］兔、恒溫平滑肌槽、支架、燒杯、20ml注射器、張力傳感器、生物機能實驗系統(tǒng)、溫度計、臺式液、腎上腺素（1：10000）、乙酰膽堿（1：10000）、阿托品針劑（1支）。［方法與環(huán)節(jié)］1、裝好實驗裝置，平滑肌槽恒溫調(diào)至37℃。2、制備離體兔腸段用木槌猛擊兔后頭延髓部,致其聲迷后立即剖開腹腔,找到胃幽門與十二指腸交界處。在十二指腸起始端扎一線，取出十二指腸、空腸、放入冷臺式液內(nèi)。先用20nli注射器沖洗內(nèi)容物，沖洗干凈后剪成若干約1.5cm長的小腸段（每一實驗小組一段）在其兩端結(jié)扎，一端做一短線環(huán)固定在通氣的浴川1內(nèi)，另一端扎線與張力傳感器相連。將腸段完全浸浴在調(diào)好溫度的平滑肌槽中，并調(diào)整好臺式液充氣量（小氣泡接連不斷）。3、啟動生物機能實驗系統(tǒng)，接通與張力傳感器相連的通道。固定管并調(diào)節(jié)扎線與張力傳感器，使腸段運動自如又能牽動傳感器（注意：扎線不可貼壁或過緊過松）。調(diào)節(jié)增益與掃描速度，使腸段的運動曲線清楚地顯示在顯示器上并記錄腸段活動曲線。4、實驗觀測（1）記錄對照腸段運動曲線后，停止供氣1分鐘并記錄曲線變化，同時觀測腸段緊張度變化。當出現(xiàn)明顯變化后，立即恢復供氣。用新鮮37C臺式液沖洗,待恢復正常（注意作好標記）。（2）記錄對照腸段運動曲線后，加入25C臺式液，并記錄曲線變化，同時觀測腸段緊張度變化。同法，當出現(xiàn)明顯變化后,立即用37℃臺式液沖洗，待恢復正常。（3）同法加入45℃臺式液并記錄曲線變化，同時觀測腸段緊張度變化。當出現(xiàn)明顯變化后，立即用新鮮37℃臺式液沖洗并待恢復。由于以上流出液中未加入藥物,可以回收使用。以下加入藥物的流出也不可再用。(4)同法，加入2滴腎上腺素(1：10000),觀測并記錄曲線變化。(5)同法加入1?2滴乙酰膽堿(1:10000),觀測并記錄曲線變化。(6)加入3滴阿托品后立即加入于(5)同樣劑量的乙酰膽堿，記錄并觀測曲線變化。同(5)比較曲線有何不同。注意：1加藥前必須準備好更換用的37c臺式液。上述藥物劑量只是參考，效果不明顯可補加,每次加藥出現(xiàn)效果后，必須立即更換浴槽內(nèi)的臺式液并沖洗3次，待腸肌恢復正常后在觀測下一項目。浴槽內(nèi)臺式液要保持一定溫度。2游離及取出腸段時,動作要快,取兔腸及兔腸穿線時盡也許不用金屬及手指觸及。為保持離體腸段的活性,可先預冷充氧的營養(yǎng)液,游離腸段及穿線在預冷的營養(yǎng)液中進行。實驗中始終通氣。［思考題］1、本實驗是否可用麻醉動物的腸段？為什么？麻醉狀態(tài)影響腸段細胞的反映性以及對藥物的敏感度2、進行哺乳動物離體組織器官實驗時，需控制哪些條件？溫度:本實驗控制恒定溫度37度濕度:要時刻記住用相應的潤濕液潤濕，本次實驗用哺乳動物的臺氏液WH：要與哺乳動物體液相似避免不必要的刺激:不要用手或者是金屬觸碰4離子成分與濃度:要與相關的動物體液相似，本實驗是臺氏液43、為什么加入各種藥物會引起離體腸段活動的變化？其機理是什么？dr對其是克制作用?可見離體腸管活動減弱，描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變慢，幅度減小以及基線下移???ach是促進作用，??可見離體腸管活動增強，?描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變快，幅度增長。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機理，與消化道平滑肌細胞產(chǎn)生動作電位的離子基礎是Ca2+的內(nèi)流有關。阿托品是ach的阻斷劑。所以兩者加入個觀測到曲線無明顯變化。阻斷乙酰膽堿與肌膜上的M受體結(jié)合。HCL離體腸管活動減弱，描記曲線出現(xiàn)收縮幅度減少，頻率變慢。???H+升高能干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程：H+能與Ca2+競爭鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位點而使肌球蛋白ATP酶活性減少;使肌原纖維對Ca2+的敏感性和Ca2+從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放量減少。加了NAOH腸管活動增強。?-?中和了H離子??改變了細胞外液的PH值?-?所以恢復正常??4、加入阿托品后再加入乙酰膽堿，腸段活動受到克制，為什么？這兩種藥對腸道平滑肌的作用正好相反，乙酰膽堿能促進腸道平滑肌蠕動，阿托品是膽堿能神經(jīng)阻斷劑，能克制腸道平滑肌蠕動。兩藥同時使用，阿托品阻斷了乙酰膽堿的作用，所以表現(xiàn)出腸道活動受到克制。5、根據(jù)實驗結(jié)果，說明平滑肌的生理特性消化管平滑肌又有其特點，即興奮性較低，收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性、自動節(jié)律性，對化學、溫度和機