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關于痰標本痰標本中需要檢測的主要致病菌:肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌(可引起原發(fā)性肺炎)、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌(各種器官的化膿性感染,呼吸道的有氣管炎、肺炎膿胸等)、銅綠假單胞菌(條件致病菌,院感主要病原菌之一,在人體抵抗力低下時可引起呼吸道感染等感染,該菌引起的慢性肺部感染占有較大比例)。非病原菌:酵母菌、草綠色鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌。省醫(yī)院對痰標本的處理過程:1)每個接收的痰標本進行痰涂片(老師稱之為痰質控片),鏡下觀察痰標本是否合格。合格的痰標本標準為WBC>25/LP,EPC<10/LP或二者比值大于2.5。由于種種原因,不合格的痰標本是不會退回的。痰質控片記錄的相關信息包括:每低倍鏡下的WBC數(shù)和EPC數(shù),若查見細菌,報告細菌的種類(如G+C、G-b)、排列方式、數(shù)量(幾個+)。還要記錄真菌和孢子的鏡檢結果。不合格的痰標本依然會接種(若申請單上有培養(yǎng))。痰質控片的作用:在篩查標本接種出來的平板時根據(jù)痰質控片的結果進行相關分析。2)痰標本接種:接種三種平板,分別是血平板、麥康凱平板、巧克力平板(安圖篩選嗜血桿菌的平板,名稱為CAH)。3)孵育和接種平板篩選:接收的痰標本均要兩夜的孵育。第一夜過夜孵育后取出進行平板篩選,做好相關記錄。第二次過夜孵育后取出再篩選一次,和前一天的記錄相比較,記錄或改正相關篩選結果。孵育兩夜的意義在于防止某些生長緩慢的致病菌被漏檢。關于如何篩選需要進行下一步檢驗的標本1)數(shù)量標準手工接種:血平板上第四區(qū)有5個菌落,表示有105,已經(jīng)達到治病的數(shù)量??梢岳^續(xù)往下做鑒定和/或藥敏。儀器接種:因使用消化液,計數(shù)需有107(痰標本使用消化液,使很多胞內菌釋放,上機前都是加過生理鹽水的,經(jīng)過這兩步那么這個判斷治病的數(shù)量級是如何得出的,經(jīng)驗,實驗結果?)。2)其他在微生物室的老師經(jīng)過一定時間的經(jīng)驗積累,對于常見的致病菌,根據(jù)其菌落形態(tài)就可以將其鑒別出來。比如通常情況下在血平板上G+菌的菌落較小,圓形,光滑,而G-菌的菌落較大,扁平,粗糙。而痰標本接種后的血平板上哪些細菌需要進行下一步試驗不僅需要相應的理論知識作基礎還需要經(jīng)驗積累。在血平板上達到量的細菌,還要看是否是優(yōu)勢生長和純量生長。但是優(yōu)勢生長的細菌并不一定是致病菌,如培養(yǎng)出來的全是口腔的正常菌群,相對來說,必定有優(yōu)勢生長得細菌。所以優(yōu)勢生長得細菌要是相關的致病菌。在引起呼吸道感染的G-b有肺炎克雷伯桿菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌等。是否痰標本培養(yǎng)出G-b就一定是致病菌?答案是痰中出現(xiàn)革蘭陰性菌不一定就是致病菌。因為某些病人,如ICU病人,在呼吸道插管存在的情況下,呼吸道是與外界相通的,這時就會定植很多細菌,如銅綠假單胞菌,這些細菌只是定植但不會引起感染。如果一個病人來自ICU,且是第二次或者多次做痰培養(yǎng)的時候,培養(yǎng)出大量純量的銅綠假單胞菌或者鮑曼不動桿菌(這兩種菌常從ICU病人分離到)就需要考慮是定植菌。省醫(yī)院遇到這樣的情況只會報一個該細菌的量,而不是進行鑒定和/或藥敏。判斷一株細菌是不是致病菌,單獨在實驗室很難做到,必須與臨床聯(lián)系。有的時候,即使從痰標本中只分離到根本不占優(yōu)勢幾個菌落的革蘭陰性或陽性菌,這種細菌也可能是真正引起感染的致病菌。痰標本的培養(yǎng)、鑒定和藥敏結果通常情況下對臨床醫(yī)生只是起到一個輔助的作用,如果病人有癥狀,也分離到相應的致病菌,那么可以幫助臨床醫(yī)生肯定診斷。如果培養(yǎng)結果和臨床癥狀不相符合,臨床醫(yī)生會從多方面考慮原因(送檢標本不合格,某種細菌實驗室檢出能力低)并且經(jīng)驗性用藥(病人有明確的感染癥狀)。總之,致病菌的篩選不僅需要檢驗工作者的豐富經(jīng)驗還需要多和臨床溝通,多了解
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